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文檔簡介
1、1、核酸的增色效應(yīng);核酸變性后,增加了A260的光吸收稱為增色效應(yīng)。變性后DNA溶液的紫外線吸收具有增強(qiáng)的效應(yīng),變性DNA的雙鏈解開,堿基中電子的相互作用有利于紫外線吸收,故而產(chǎn)生增色效應(yīng)。一般以260nm下的紫外線吸收光度作為此效應(yīng)的指標(biāo),DNA變性后260nm處的吸收光度通常有明顯增加,但不同來源DNA的變化不一。核酸的減色效應(yīng);雙螺旋結(jié)構(gòu)和3,5-磷酸二酯鍵的形成都會減弱堿基對紫外光的吸收,這種效應(yīng)稱減色效應(yīng)DNA復(fù)性后,其溶液的A260減小,最多可減小至變性前的A260,這現(xiàn)象稱減色效應(yīng)。2、 核酸的 Tm 值;通常將DNA的變性達(dá)到50%時,即增色效應(yīng)達(dá)到一半時的溫度稱為DNA的解鏈
2、溫度(Tm),Tm也稱熔解溫度或DNA的熔點(diǎn)。DNA的Tm值一般在70-85之間。加熱可以使DNA變性,DNA熱變性是在很狹的溫度范圍內(nèi)突發(fā)的躍變過程,很像結(jié)晶達(dá)到熔點(diǎn)時的融化現(xiàn)象,故名熔解溫度,用Tm表示。Tm定義中包含了使被測DNA50的雙螺旋結(jié)構(gòu)遭到破壞,即增色效應(yīng)達(dá)到一半的溫度作為Tm的含義,不同來源的DNATm值一般為7085。3、 DNA 雙螺旋;DNA分子由兩條反向平行的多核苷酸鏈構(gòu)成雙螺旋結(jié)構(gòu)。兩條鏈圍繞同一個“中心軸”形成右手螺旋,在螺旋中形成大溝和小溝 兩條反向平行的多聚核苷酸鏈沿一個假設(shè)的中心軸右旋相互盤繞而形成,形成一個大溝和小溝,大溝位于相毗鄰的雙股之間,而小溝位于雙
3、螺旋的互補(bǔ)鏈之間。磷酸和脫氧核糖單位作為不變的骨架組成位于外側(cè),作為可變成分的堿基位于內(nèi)側(cè),鏈間堿基按A-T,G-C配對,堿基對以氫鍵維系,配對的堿基處于同一個平面上,與螺旋軸垂直。4、 核酸分子雜交;把不同的DNA或RNA鏈放在同一溶液中作變性處理,然后復(fù)性,不同來源的DNA或RNA單鏈之間就按堿基配對原則可能形成局部的雙鏈,這一過程稱為分子雜交。根據(jù)變性和復(fù)性的原理,將不同來源的DNA變性,若這些異源DNA之間在某些區(qū)域有相同的序列,則退火條件下能形成DNA-DNA異源雙鏈,或?qū)⒆冃缘膯捂淒NA與RNA經(jīng)復(fù)性處理形成DNA-RNA雜合雙鏈,這種過程稱為分子雜交5、 核小體;真核生物染色質(zhì)的
4、基本結(jié)構(gòu)單位,是DNA繞組蛋白核心盤旋所形成的串珠結(jié)構(gòu)是染色體形成的基本結(jié)構(gòu)單位,是由組蛋白形成的寡聚蛋白體核心和盤繞在其上的DNA組成6、 退火;熱變性DNA在緩慢冷卻時,可以復(fù)性,這種復(fù)性成為退火7、 核酸變性;核酸雙螺旋區(qū)的H鍵斷裂,變成單鏈,沒有共價鍵的斷裂。變性的條件:物理的、化學(xué)的。如熱變性、堿變性等,甲醇、乙醇、尿素、甲醛常用做變性劑。在一定條件下,DNA雙螺旋可以徹底的解鏈,分離成兩條互補(bǔ)的單鏈,稱為DNA的變性。確切的就是維持雙螺旋穩(wěn)定性的氫鍵和疏水鍵的斷裂,但并不涉及共價鍵的斷裂核酸復(fù)性:指本來是雙鏈而分開的兩股單鏈的重新組合。在一定條件下,變性DNA 單鏈間堿基重新配對恢
5、復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu),伴有A260減小(減色效應(yīng)),DNA的功能恢復(fù)變性DNA在適當(dāng)條件下,兩條互補(bǔ)連具有全部或部分恢復(fù)到天然雙螺旋結(jié)構(gòu)的現(xiàn)象,它是變性的一種逆轉(zhuǎn)錄過程,稱為復(fù)性1、 必需氨基酸:人類自身不能合成或不能足量合成,必須依賴食物供給是指人體需要,但自己不能合成,或者合成量不能滿足機(jī)體需要的氨基酸,它們必須由食物蛋白供給。2、 氨基酸的等電點(diǎn):使氨基酸凈電荷為零時溶液的pH值,用 pI 表示。此時,aa 以兩性離子形式存在,也有少量的數(shù)目基本相同的正、負(fù)離子存在,還有極少量的中性分子。pI 是氨基酸的特征常數(shù)氨基酸的帶電狀況與溶液的pH有關(guān),改變pH可以使氨基酸帶上正電荷或負(fù)電荷,也可以使它
6、處于正負(fù)電荷相等,即凈電荷為零的兼性離子狀態(tài),氨基酸凈電荷為零時溶液的pH,稱為氨基酸的等電點(diǎn),用pI表示。3、 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu); 一級結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序以及二硫鍵的位置。即多肽鏈內(nèi)氨基酸殘基從N-末端到C-末端的排列順序,或稱氨基酸序列,是蛋白質(zhì)最基本的結(jié)構(gòu)。一級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。蛋白質(zhì)共價結(jié)構(gòu)也稱蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu),實(shí)質(zhì)是指多肽鏈中氨基酸的排列順序,包括二硫鍵的位置。這是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ),包含了決定蛋白質(zhì)分子所有高級結(jié)構(gòu)層次構(gòu)象和生物功能的全部信息蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu);蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)是指它的多肽主鏈折疊的有規(guī)則重復(fù)的構(gòu)象,但不涉及側(cè)鏈上的原子在空間的排列指多肽主鏈骨架上所含的
7、羰基和亞氨基,在主鏈骨架盤繞折疊時可以形成氫鍵,通過這些氫鍵的維持固定,多肽鏈主鏈骨架上的若干肽段可以形成有規(guī)律的空間排布,作為蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)的構(gòu)象單元。蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu); 蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)是指一條多肽鏈中所有原子和基團(tuán)的總的三維結(jié)構(gòu)。在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步盤旋、折疊,從而生成特定的空間結(jié)構(gòu)。包括主鏈和側(cè)鏈的所有原子的空間排布。指球狀蛋白質(zhì)的多肽鏈在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上相互配置而形成特定的構(gòu)象,螺旋、折疊、轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲等二級結(jié)構(gòu)通過側(cè)鏈基團(tuán)的相互作用進(jìn)一步卷曲、折疊,借助次級鍵的維系形成三級結(jié)構(gòu),三級結(jié)構(gòu)的形成使肽鏈中所有的原子都達(dá)到空間上的重新排布,它是建立在二級結(jié)構(gòu)、超二級結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)域基
8、礎(chǔ)上的球狀蛋白質(zhì)的高級空間結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu);由兩條或兩條以上具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈聚合而成,有特定三維結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)構(gòu)象由數(shù)條具有獨(dú)立的三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈彼此通過非共價鍵相互作用而成的聚合體結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的超二級結(jié)構(gòu);在蛋白質(zhì)分子中,由若干相鄰的二級結(jié)構(gòu)單元組合在一起,彼此相互作用,形成有規(guī)則的、在空間上能辨認(rèn)的二級結(jié)構(gòu)組合體,即兩個或兩個以上的二級結(jié)構(gòu)單元由鏈接多肽鏈接,組合成具有特殊幾何排列的局部空間結(jié)構(gòu),稱為超二級結(jié)構(gòu),又稱為模體。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域;對于較大的蛋白質(zhì)分子或亞基,一條多肽鏈往往在二級結(jié)構(gòu)或超二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上折疊形成幾個緊密的球形構(gòu)象,這種球形構(gòu)象就稱結(jié)構(gòu)域。介
9、于二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)的一種層次結(jié)構(gòu)。在較大的球狀蛋白質(zhì)分子中,多肽鏈往往形成幾個緊密的球狀構(gòu)象,彼此分開,以松散的肽鏈相連,此球狀構(gòu)象就是結(jié)構(gòu)域。通常是幾個超二級結(jié)構(gòu)的組合,對于較小的蛋白質(zhì)分子,結(jié)構(gòu)域與三級結(jié)構(gòu)等同,即這些蛋白為單結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)。4、 同源蛋白質(zhì);不同物種中具有相同或相似功能的蛋白質(zhì)或具有明顯序列同源性的蛋白質(zhì)是那些在進(jìn)化上相關(guān)聯(lián)的蛋白質(zhì),他們在不同物種之中執(zhí)行相同的功能5、 鹽析;向蛋白質(zhì)溶液中加入大量的中性鹽類,使蛋白質(zhì)脫去水化層而聚集沉淀。鹽析沉淀一般不引起蛋白質(zhì)的變性。向蛋白質(zhì)溶液中加入大量的中性鹽類,如硫酸銨、氯化鈉等,使蛋白質(zhì)的溶解度逐漸下降,致其從溶液中沉淀的現(xiàn)象
10、稱為鹽析 鹽溶;球蛋白溶于稀得中性鹽溶液,其溶解度隨稀鹽溶液濃度增加而增大的現(xiàn)象在鹽析初期,溶液離子強(qiáng)度降低,隨著中性鹽濃度提高,蛋白質(zhì)溶液吸附鹽離子后,帶電表層使他們彼此排斥,而蛋白質(zhì)分子與水分子的相互作用卻加強(qiáng)了,因而溶解度提高,這種現(xiàn)象稱鹽溶6、 蛋白質(zhì)變性;當(dāng)天然Pr受到某些物理or化學(xué)因素的影響,使其分子內(nèi)部原有的高級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變時,Pr的理化性質(zhì)和生物學(xué)功能都隨之改變或喪失,但并未導(dǎo)致Pr一級結(jié)構(gòu)的變化,這種現(xiàn)象叫變性作用,變性后的Pr稱為變性Pr。蛋白質(zhì)因受某些物理的或化學(xué)的因素的影響,分子三維結(jié)構(gòu)被破壞,從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)、生物學(xué)活性改變的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用蛋白質(zhì)復(fù)性;當(dāng)
11、除去這些使其分子內(nèi)部原有的高級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變因素后,可根據(jù)熱力學(xué)原理緩慢地重新自發(fā)折疊恢復(fù)原來的構(gòu)象,稱作復(fù)性某些蛋白質(zhì)變性后可以在一定的條件下恢復(fù)原有的三維結(jié)構(gòu),使生物活性恢復(fù),這個過程稱為蛋白質(zhì)的復(fù)性1、 輔酶;與酶蛋白結(jié)合較松弛,用透析法能夠除去的小分子有機(jī)物大多是耐熱的有機(jī)小分子,結(jié)構(gòu)上常與維生素和核苷酸有關(guān),有十幾種,與酶蛋白結(jié)合不緊,容易經(jīng)透析除去 輔基;與酶蛋白結(jié)合較緊密,常以共價鍵結(jié)合,透析不能除去的小分子有機(jī)物及金屬離子大多是耐熱的有機(jī)小分子,結(jié)構(gòu)上常與維生素和核苷酸有關(guān),有十幾種,通常與酶蛋白共價相連,透析不能除去2、 酶活力;又稱為酶活性,一般把酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力稱為
12、酶活力,通常以在一定條件下酶所催化的化學(xué)反應(yīng)速度來表示。指在一定條件下,酶所催化的化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行的速度,反應(yīng)速度越大,意味著沒活力越高,酶活力代表了一個酶催化化學(xué)反應(yīng)的能力,是對酶進(jìn)行定量分析的指標(biāo)之一3、 酶的活性中心;酶分子中直接和底物結(jié)合,并和酶催化作用直接有關(guān)的區(qū)域叫作酶的活性中心。 與催化活性相關(guān)的氨基酸殘基,在空間上構(gòu)成酶分子中一個特定的結(jié)構(gòu)區(qū)域,即為酶的活性中心,酶的活性中心是指酶分子中能與底物結(jié)合,并催化反應(yīng)產(chǎn)生的局部區(qū)域4、 Km 值(米氏常數(shù));酶促反應(yīng)速度達(dá)最大速度一半時的底物濃度。是指酶促反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時的底物濃度,單位是mol/L,米氏常數(shù)是酶的特征性常數(shù)之
13、一,與酶的性質(zhì)有關(guān),與酶濃度無關(guān)。5、 激活劑; 凡能提高酶活性的物質(zhì),都稱為激活劑,包括無機(jī)離子、小分子有機(jī)化合物以及一些大分子的有機(jī)化合物等 抑制劑;能使酶分子的必需基團(tuán)或酶中心部位基團(tuán)的化學(xué)性質(zhì)發(fā)生變化,從而引起酶活力下降甚至喪失,致使酶反應(yīng)速度降低,起抑制作用的物質(zhì)凡能使酶的催化活性下降但不引起酶蛋白變性的物質(zhì)稱為酶的抑制劑6、 不可逆抑制;這類抑制劑通常以比較牢固的共價鍵與酶蛋白中的基團(tuán)結(jié)合,而使酶失活,不能用透析、超濾等物理方法除去抑制劑而恢復(fù)酶活性。有機(jī)磷的?;?、有機(jī)汞、有機(jī)砷化合物、重金屬、烷化物、氰化物、硫化物、CO、青霉素抑制劑以共價鍵與酶活性中心的必需基團(tuán)相結(jié)合,使酶失
14、去活性,抑制后,不能用透析、超濾等物理方法除去抑制劑使酶恢復(fù)活性的抑制類型稱為不可逆抑制 可逆抑制;類抑制劑與酶蛋白的結(jié)合是可逆的,可用透析法除去抑制劑,恢復(fù)酶的活性,可逆抑制作用分為三種類型:競爭性抑制作用、非競爭性抑制作用、反競爭性抑制作用是指抑制劑以非共價鍵與酶或酶-底物復(fù)合物可逆性結(jié)合,使酶的活性降低或喪失;這種抑制作用可以通過透析、超濾等方法除去抑制劑,而使酶恢復(fù)活性7、 單體酶;指酶蛋白分子只有一條多肽鏈組成,相對分子質(zhì)量為1300035000,如胰蛋白酶、溶菌酶和胃蛋白酶等,單體酶一般多為水解酶 寡聚酶:是由幾個甚至幾十個亞基組成,相對分子質(zhì)量為35000至幾百萬,各亞基之間為非
15、共價鍵的結(jié)合,彼此容易分開,亞基可以相同,也可以不同,如己糖激酶、3-磷酸甘油醛脫氫酶、乳酸脫氫酶等,乳酸脫氫酶由4個亞基組成 多酶復(fù)合體:由幾個酶有組織的聚集在一起,功能上相互配合,第一個E的產(chǎn)物是第二個E的底物。如,丙酮酸脫氫酶復(fù)合體、脂肪酸合成酶復(fù)合體。又稱多酶體系,是由幾種功能相關(guān)的酶彼此嵌合而形成的復(fù)合物,相對分子質(zhì)量很大,一般在幾百萬,各個酶有機(jī)地組合在一起,精巧的鑲嵌成一定的結(jié)構(gòu)。8、 同工酶;指催化相同的化學(xué)反應(yīng),但其蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和免疫功能等方面不同的一組酶,稱為同工酶。具有不同形式的同工酶之所以能催化相同的化學(xué)反應(yīng)是因?yàn)樗鼈兊幕钚圆课辉诮Y(jié)構(gòu)上相同或者非常相似。是
16、指催化相同的化學(xué)反應(yīng),而酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)、酶學(xué)性質(zhì)、Km值、電泳行為、免疫學(xué)性質(zhì)等均不同的一組酶9、 別構(gòu)酶;別構(gòu)酶是一類重要的調(diào)節(jié)酶,能夠調(diào)節(jié)酶促反應(yīng)速度。通過調(diào)節(jié)因子作用酶產(chǎn)生別構(gòu)效應(yīng)的調(diào)節(jié)酶類,是代謝過程中的關(guān)鍵酶,它的催化活性受其三維結(jié)構(gòu)中的構(gòu)象變化的調(diào)節(jié)。受別構(gòu)調(diào)節(jié)的酶,多是寡聚酶,通過酶分子構(gòu)象的變化來改變酶活性10、 酶原激活;使酶原轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂谢钚缘拿傅淖饔梅Q為酶原的激活或活化作用。11、 誘導(dǎo)契合;當(dāng)?shù)孜锱c酶相遇時,可誘導(dǎo)酶蛋白構(gòu)象發(fā)生相應(yīng)的變化,使酶活性中心上有關(guān)的各個基團(tuán)達(dá)到正確的排列和定向,因而使底物和酶能完全契合而形成中間產(chǎn)物,并引起底物發(fā)生反應(yīng)。當(dāng)反應(yīng)結(jié)束產(chǎn)
17、物從酶分子上脫落下來后,酶的活性中心又恢復(fù)成原來的構(gòu)象酶分子活性中心的結(jié)構(gòu)是柔性的,并非剛性,當(dāng)酶蛋白分子與底物分子接近時,酶蛋白受底物分子的誘導(dǎo),其構(gòu)象發(fā)生有利于底物分子結(jié)合的變化,酶與底物在此基礎(chǔ)上互補(bǔ)契合,進(jìn)行反應(yīng)1、 糖酵解;糖酵解指葡萄糖通過一系列步驟,降解成三碳化合物(丙酮酸),并釋放能量的過程。糖酵解途徑又稱 EMP途徑,EMP是一切生物分解葡萄糖的共同途徑。EMP在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行。是指細(xì)胞內(nèi)在酶的催化下葡萄糖降解生成丙酮酸,并釋放少量能量。反應(yīng)在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行,不需要氧參與(有氧和無氧條件下都能進(jìn)行),是一切有機(jī)體中葡萄糖分解產(chǎn)生能量的共同代謝途徑,又稱EMP途徑2、 底物水平
18、磷酸化;產(chǎn)生ATP高能分子的方式。底物氧化過程中,形成某些高能中間代謝物,再通過酶促磷酸轉(zhuǎn)移反應(yīng),直接偶聯(lián)ATP的形成是指物質(zhì)在脫氫或脫水過程中,產(chǎn)生高能代謝物并直接將高能代謝物中能量轉(zhuǎn)移到ADP(GDP)生成 ATP(GTP)的過程。3、 回補(bǔ)反應(yīng);生物體中存在著及時補(bǔ)充中間物(草酰乙酸)的反應(yīng),稱為回補(bǔ)反應(yīng)。能對TCA中間產(chǎn)物有補(bǔ)充作用的反應(yīng)統(tǒng)稱為回補(bǔ)反應(yīng)4、 激酶;從高能供體分子轉(zhuǎn)移到特定靶分子的酶。催化將ATP上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到受體上的酶。激 酶都需要Mg2+作為輔助因子。5、 糖的異生作用;由丙酮酸轉(zhuǎn)化為葡萄糖的過程是糖異生作用,由非糖化合物,如乳酸、甘油、丙酮酸、生糖氨基酸等,轉(zhuǎn)變
19、為葡萄糖或糖原,這一過程稱為糖異生作用1、 呼吸鏈(電子傳遞鏈);電子由NADH或FADH2到O2的傳遞途徑,由一系列電子載體按對電子親和力逐漸升高的順序組成的電子傳遞系統(tǒng)(electron transfer chain),因?yàn)槠涔δ芎秃粑饔弥苯酉嚓P(guān),亦稱為呼吸鏈。 呼吸鏈又叫電子傳遞鏈,是由位于線粒體內(nèi)膜(真核)中的一系列電子傳遞體按標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位,由低到高順序排列組成的一種能量轉(zhuǎn)換體系 2、 氧化磷酸化;NADH或FADH2將電子傳遞給O2的過程與ADP的磷酸化相偶聯(lián),使電子傳遞過程中釋放出的能量用于ATP的生成。氧化磷酸化的過程需要氧氣作為最終的電子受體,它是需氧生物合成ATP的主要
20、途徑。 電子從NADH和FADH2經(jīng)過電子傳遞鏈傳遞給氧形成水,同時偶聯(lián)ADP磷酸化為ATP,稱為電子傳遞體系磷酸化或氧化磷酸化3、 生物氧化;有機(jī)物質(zhì)(糖、脂肪和蛋白質(zhì))在生物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行氧化分解而生成CO2和H2O并釋放出能量的過程稱為生物氧化biological oxidative。生物氧化通常需要消耗氧,所以又稱為呼吸作用respiration。是指生物細(xì)胞將糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)等有機(jī)物質(zhì)氧化分解,最終生成CO2和H2O,同時釋放出能量的過程。ATP+0.5ADP4、 能荷;是在總的腺苷酸庫(ATP、ADP、AMP的濃度之和)中ATP的比例,即細(xì)胞中高能磷酸狀態(tài)一種數(shù)量上的衡量,它的大小可
21、用下式表示:ATP+ADP+AMP能荷= 在總的腺苷酸系統(tǒng)中(即ATP、ADP和AMP總和)所負(fù)荷的高能磷酸基數(shù)量5、 底物水平磷酸化;代謝物通過氧化形成的高能磷酸化合物直接將磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移給ADP,使之磷酸化生成ATP。(不需要O的參與)在底物被氧化過程中形成的某些高能中間代謝物,通過酶促反應(yīng),可使磷酸集團(tuán)轉(zhuǎn)移給ADP而生成ATP(或GDP生成GTP),稱為底物水平磷酸化6、 磷氧比(P/O 比);在生物氧化過程中,伴隨ADP磷酸化所消耗的無機(jī)磷酸的磷原子數(shù)與消耗的分子氧的氧原子數(shù)之比。即每消耗1個氧原子所產(chǎn)生的ATP的分子數(shù)。氧化磷酸化的效率可以通過測定P/O值來確定。P/O值是指電子傳遞過
22、程中,每消耗1mol氧原子所消耗無機(jī)磷酸的物質(zhì)的量。磷氧比也可以看成一對電子經(jīng)呼吸鏈傳至O2所偶聯(lián)產(chǎn)生的ATP分子個數(shù)。7、 解偶聯(lián)劑;解偶聯(lián)劑(uncoupler)是指那些不阻斷呼吸鏈的電子傳遞,但能抑制ADP通過磷酸化作用轉(zhuǎn)化為ATP的化合物。它們也被稱為氧化磷酸化解偶聯(lián)劑。使電子傳遞和ADP磷酸化兩個過程分離,但它只抑制ATP的合成而不抑制電子傳遞,其結(jié)果則導(dǎo)致氧和燃料底物消耗增加,同時使由電子傳遞產(chǎn)生的自由能以熱的形式散失,能量得不到存儲,此類抑制劑即為解偶聯(lián)劑8、 高能磷酸化合物;分子中含有磷酸基團(tuán),被水解下來時釋放出大量的自由能,這類高能化合物稱高能磷酸化合物9、 電子傳遞抑制劑;
23、凡是能夠阻斷電子傳遞鏈中某部位電子傳遞的物質(zhì)稱為電子傳遞抑制劑,凡能夠阻斷呼吸鏈中某一組分的電子傳遞功能的物質(zhì),統(tǒng)稱為呼吸鏈電子傳遞抑制劑1、 必需脂肪酸;由于動物不能合成亞油酸和亞麻酸,但對維持其生長十分重要,所以必須從食物中獲得,這些脂肪酸對人類和哺乳動物是必需脂肪酸。人和哺乳動物體內(nèi)不能合成亞油酸和亞麻酸,而這些脂肪酸對他們的生長發(fā)育十分重要,必須從植物中獲得這些必要的營養(yǎng)物質(zhì),所以亞油酸和亞麻酸被稱為必須脂肪酸2、 -氧化;是指脂肪酸在氧化分解時,-碳原子和b -碳原子之間鍵發(fā)生斷裂,分解出一個二碳片段,每進(jìn)行一次b-氧化作用,生成較原來少兩個碳原子的脂肪酸。 脂肪酸的碳原子和碳原子間
24、發(fā)生鍵斷裂,產(chǎn)生一分子乙酰COA和少兩個碳原子的脂肪酸,由于這一氧化方式是發(fā)生在碳原子上,因此稱為氧化作用3、 -氧化;肪酸在一些酶的催化下,在a-碳原子上發(fā)生氧化作用,分解出一個一碳單位CO2,生成縮短了一個碳原子的脂肪酸。這種氧化作用稱為脂肪酸的a-氧化作用。以游離脂肪酸作為底物,反應(yīng)中涉及分子氧,每次從脂肪酸羧基端氧化去掉一個碳原子,產(chǎn)生CO2和少一個碳原子的脂肪酸,由于這種氧化作用發(fā)生在游離脂肪酸的碳原子上,故稱為氧化作用4、 -氧化;是指脂肪酸的末端(w-端)甲基發(fā)生氧化,先轉(zhuǎn)變成羥甲基,繼而再氧化成羧基,從而形成, w-二羧酸的過程。通過細(xì)胞內(nèi)單氧化酶催化,在脂肪酸的碳(末端碳)加
25、上-OH,然后經(jīng)醇脫氫酶和醛脫氫酶依次催化,生成兩端都帶有羧基的二羧酸,此二羧酸可從兩頭同時按照常規(guī)的氧化進(jìn)行分解5、 酮體;由脂肪酸的b-氧化及其它代謝所產(chǎn)生的乙酰CoA,在一般的細(xì)胞中可進(jìn)入三羧酸循環(huán)進(jìn)行氧化分解;但在動物的肝臟、腎臟、腦等組織中,尤其在饑餓、禁食、糖尿病等情形下,乙酰CoA還有另一條代謝去路,最終生成乙酰乙酸、 b-羥丁酸和丙酮,這三種產(chǎn)物統(tǒng)稱為酮體在哺乳動物中,脂肪酸氧化產(chǎn)生的乙酰COA大部分進(jìn)入檸檬酸循環(huán),另一部分乙酰COA則在肝臟線粒體中經(jīng)生酮作用轉(zhuǎn)化為羥丁酸、乙酰乙酸和丙酮,這3種化合物統(tǒng)稱為酮體。1、 生物固氮;指某些微生物利用自身的固氮酶系,在常溫常壓下將分子
26、氮轉(zhuǎn)變成NH3的過程固氮微生物把大氣中的氮?dú)膺€原成氨的過程稱為生物固氮2、 氨的同化;把生物固氮和硝酸鹽還原形成的無機(jī)態(tài)NH3,進(jìn)一步同化轉(zhuǎn)變成含氮有機(jī)物的過程由生物固氮和硝酸還原作用產(chǎn)生的氨,進(jìn)入生物體后被轉(zhuǎn)變?yōu)楹袡C(jī)化合物的過程。3、 聯(lián)合脫氨基作用;轉(zhuǎn)氨基作用和氧化脫氨基作用聯(lián)合進(jìn)行的脫氨基作用方式。生物體大多數(shù)氨基酸脫氨是通過轉(zhuǎn)氨作用和氧化脫氨作用聯(lián)合起來實(shí)現(xiàn)的,被稱為聯(lián)合脫氨基作用。4、 生糖氨基酸;一些氨基酸C架在代謝過程中生成丙酮酸和TCA循環(huán)的有機(jī)酸,可以通過糖異生作用轉(zhuǎn)化為糖,故稱為生糖AA是指被降解為丙酮酸、酮戊二酸、草酰乙酸、琥珀酰COA、延胡索酸等中間產(chǎn)物的氨基酸,因
27、為這些氨基酸可作為生成葡萄糖的前體,所有非必需氨基酸都是生糖氨基酸 生酮氨基酸;一些AA的代謝終產(chǎn)物為乙酰CoA或乙酰乙酰CoA,在饑餓、糖尿病等情況下,動物體內(nèi)可轉(zhuǎn)變?yōu)橥w(乙酰乙酸、-羥丁酸、丙酮)。這些AA稱生酮AA(Leu 、 Lys )是指被降解為乙酰COA或乙酰乙酸的氨基酸,這兩種降解產(chǎn)物可轉(zhuǎn)化為脂肪酸或酮體,如賴氨酸、亮氨酸。5、 一碳單位;在代謝過程中,某些化合物(如氨基酸)可以分解產(chǎn)生具有一個碳原子的活性基團(tuán)(不包括CO2),稱為一碳基團(tuán)。生物體合成嘌呤、嘧啶等化合物時,需要氨基酸提供含有一個碳原子的基團(tuán),在生物化學(xué)里,將這種具有一個碳原子的基團(tuán)稱為一碳基團(tuán)。1、 復(fù)制;以親
28、代DNA分子的雙鏈為模板,按照堿基配對原則,合成出與親代DNA分子相同的兩個雙鏈DNA分子的過程。以親代DNA分子為模板,按照堿基配對的原則,合成出與親代DNA分子相同的雙鏈DNA分子的過程 轉(zhuǎn)錄;以DNA分子中的一條鏈為模板,按照堿基配對原則,合成出一條與模板DNA鏈互補(bǔ)的RNA分子的過程。在DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶的催化下,按照堿基配對的原則,以4種核苷酸為原料合成一條與模板DNA互補(bǔ)的RNA的過程 翻譯;在mRNA指令下,按照三個連續(xù)的核苷酸決定一個氨基酸的原則,把mRNA上的遺傳信息轉(zhuǎn)換成蛋白質(zhì)中特定的氨基酸序列的過程。在RNA的指導(dǎo)下,按照每三個核苷酸決定一個氨基酸的三聯(lián)體密碼規(guī)則,
29、編碼出具有特定氨基酸排列順序的蛋白質(zhì)多肽鏈的過程。2、 半保留復(fù)制;從親代的一個雙螺旋DNA分子形成了兩個與原先的堿基序列完全相同的兩個子代DNA分子。每個子代DNA分子中有一條鏈來自親代,另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?,這種的復(fù)制方式稱為半保留復(fù)制。每一個子代DNA中的一條鏈來自親代DNA,另一條鏈則是新合成的,這種復(fù)制方式稱為半保留復(fù)制,新生成的兩個DNA分子與原來DNA分子的堿基序列完全相同3、 Klenow 片段;保留53聚合酶和35外切酶活力的片段兼具53DNA聚合酶活性和35外切酶活性的C端區(qū)域(相對分子質(zhì)量為68000)稱為Klenow 片段(大片段)。4、 復(fù)制子;獨(dú)立復(fù)制的單位叫復(fù)制子D
30、NA復(fù)制從一個特定位點(diǎn)起始,到另一個位點(diǎn)結(jié)束,像這樣能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位稱為復(fù)制子5、 前導(dǎo)鏈;一條鏈延伸的方向與復(fù)制叉前進(jìn)的方向一致,它的合成能連續(xù)進(jìn)行,稱為前導(dǎo)鏈(領(lǐng)頭鏈)DNA合成時,延伸方向與DNA聚合酶移動方向相同的一條互補(bǔ)連可連續(xù)合成,稱為前導(dǎo)鏈。 滯后鏈;一條鏈延伸的方向與復(fù)制叉前進(jìn)的方向相反,它顯然不能被連續(xù)合成,需要復(fù)制叉推進(jìn)了一定的長度,有了一段DNA單鏈后,才能以此為模板合成一個片段。因此這條新鏈的合成是不連續(xù)的,而且總晚于前導(dǎo)鏈,所以稱為滯后鏈。延伸方向由于DNA聚合酶移動方向相反而造成了合成難題,這一矛盾是通過模板鏈的回折和新生鏈的分段合成來解決的,這條不連續(xù)合成的鏈
31、稱為滯后鏈6、 半不連續(xù)復(fù)制;前導(dǎo)鏈連續(xù)合成,滯后鏈斷續(xù)合成的方式,稱為半不連續(xù)復(fù)制7、 岡崎片段;滯后鏈中合成的多個DNA片段,稱為岡崎片段。岡崎片段的長度原核細(xì)胞中約10002000個核苷酸,真核細(xì)胞中約100200個核苷酸。滯后鏈合成過程中的片段稱為岡崎片段。原生生物中岡崎片段長度為10002000個核苷酸,真核生物中長度為100200個核苷酸。8、 逆轉(zhuǎn)錄;以RNA為模板合成DNA,這與通常轉(zhuǎn)錄過程中遺傳信息從DNA到RNA的方向相反,故稱為逆轉(zhuǎn)錄作用。以RNA為模板合成DNA的過程,即RNA指導(dǎo)下的DNA的合成,稱為反轉(zhuǎn)錄或逆轉(zhuǎn)錄,需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化9、 轉(zhuǎn)化;一個嘌呤堿基被另一個嘌
32、呤堿基置換或一個嘧啶堿基被另一個嘧啶堿基基置換同類堿基之間的置換,即一種嘧啶被另一種嘧啶置換,或一種嘌呤被另一種嘌呤置換,稱為轉(zhuǎn)換 顛換;一個嘌呤堿基被嘧啶堿基置換或一個嘧啶堿基被嘌呤堿基置換異類堿基之間的置換,即一種嘧啶被另一種嘌呤置換,或一種嘌呤被另一種嘧啶置換,稱為顛換10、 啟動子;DNA上存在著轉(zhuǎn)錄的起始信號,它是特殊的核苷酸序列,稱為啟動子(promoter)。又稱啟動因子,是DNA上結(jié)合RNA聚合酶、開始轉(zhuǎn)錄的區(qū)域,只能被RNA聚合酶識別、結(jié)合并啟動基因轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列,一般位于基因5端的調(diào)控區(qū)域,能與RNA聚合酶結(jié)合,從而起始轉(zhuǎn)錄11、 終止子;DNA分子上有終止轉(zhuǎn)錄的特殊
33、信號,也是特定的核苷酸序列,稱為終止子。決定轉(zhuǎn)錄的終止,是DNA上控制轉(zhuǎn)錄終止的部位,提供轉(zhuǎn)錄停止信號的DNA序列,是協(xié)助RNA聚合酶識別終止信號的輔助因子(蛋白質(zhì))12、 基因工程;基因工程亦稱遺傳工程,即利用DNA重組技術(shù)的方法,把DNA作為組件,在細(xì)胞外將一種外源DNA(目的基因)和載體DNA重新組合連接(重組),最后將重組體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞,使外源基因DNA在宿主細(xì)胞中,隨細(xì)胞的繁殖而增殖(cloning,克?。?,或最后得到表達(dá),最終獲得基因表達(dá)產(chǎn)物或改變生物原有的遺傳性狀。1、 遺傳密碼;DNA(或mRNA)中的核苷酸序列與蛋白質(zhì)中氨基酸序列之間的對應(yīng)關(guān)系稱為遺傳密碼。2、 密碼子;mR
34、NA上每3個相鄰的核苷酸編碼蛋白質(zhì)多肽鏈中的一個氨基酸,這三個核苷酸就稱為一個密碼子或三聯(lián)體密碼。3、 簡并性;一個氨基酸可以有幾個不同的密碼子的特性。幾種密碼子編碼同一種氨基酸的現(xiàn)象稱為密碼子的簡并性4、 同義密碼子;編碼同一個氨基酸的一組密碼子。編碼同一個氨基酸的密碼子之間互稱同義密碼子5、 多核糖體;在一條mRNA鏈上,可以有多個核糖體同時進(jìn)行翻譯,每個核糖體上都附著一條正在延長的多肽鏈,越靠近mRNA的3端的核糖體上的肽鏈越長。這種結(jié)構(gòu)叫做多核糖體。在同一條mRNA鏈上結(jié)合著多個核糖體的結(jié)構(gòu)形式,外形酷似一串念珠,在多聚核糖體上,相鄰兩個核糖分子間有一段暴露的mRNA分子,每一個核糖體
35、都可獨(dú)立沿mRNA移動合成蛋白肽鏈。6、 氨基酸活化;氨基酸與tRNA相連,形成氨酰-tRNA的過程氨基酸與特異的tRNA結(jié)合形成氨酰tRNA復(fù)合物的過程7、 SD 序列;在原核生物中距起始密碼子AUG上游(5端一側(cè))約10個核苷酸處往往有一段富含嘌呤的序列稱為SD序列原核生物mRNA起始密碼子上游813個堿基處存在一段一致性序列,可與小亞基16S-rRNA的3端互補(bǔ)序列配對結(jié)合,起始密碼準(zhǔn)確定位于翻譯起始點(diǎn),稱SD序列8、 信號肽;新合成多肽鏈用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)移(定位)的N-末端的氨基酸序列信號肽假說認(rèn)為,編碼分泌蛋白的mRNA在翻譯時首先合成的是N 末端帶有疏水氨基酸殘基的信號肽,它被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的受體識別并與之相結(jié)合。信號肽經(jīng)由膜中蛋白質(zhì)形成的孔道到達(dá)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)腔,隨即被位于腔表面的信號肽酶水解,由于它的引導(dǎo),新生的多肽就能夠通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜進(jìn)入腔內(nèi),最終被分泌到胞外。翻譯結(jié)束后,核糖體亞基解聚、孔道消失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜又恢復(fù)原先的脂雙層結(jié)構(gòu)。1、 關(guān)鍵酶(標(biāo)兵酶);在系列反應(yīng)過程中催化限速步驟的酶稱為限速酶或“標(biāo)兵酶”。標(biāo)兵酶是一種調(diào)節(jié)酶,常常也是
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