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文檔簡介
1、2.2.2動物細(xì)胞融合與單克隆抗體1動物細(xì)胞融合的目的中,最重要的是()A克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B制備單克隆抗體C培育新物種D生產(chǎn)雜交細(xì)胞解析:選B。植物體細(xì)胞雜交,主要是為了克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,以培育新品種。另外,植物體細(xì)胞雜交還應(yīng)用了植物細(xì)胞的全能性。動物細(xì)胞作為整體,它的全能性受到限制,目前只見到高度分化的細(xì)胞核在去核卵細(xì)胞中表現(xiàn)全能性,還未見到融合細(xì)胞核表現(xiàn)出全能性的例子,因此動物細(xì)胞融合不能用來培育新的物種。生產(chǎn)雜交細(xì)胞,也不是細(xì)胞融合的主要目的。2動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的比較中,正確的是()A誘導(dǎo)融合的方法完全相同B所用的技術(shù)手段基本相同C培養(yǎng)基成分相同D都能形成
2、雜種細(xì)胞解析:選D。動物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交這兩項(xiàng)細(xì)胞工程技術(shù)中,都包含有細(xì)胞融合的過程,都能形成雜種細(xì)胞。對于誘導(dǎo)方法來說,除動物細(xì)胞的融合還可用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑外,其他的基本相同。植物體細(xì)胞雜交前需先去掉細(xì)胞壁,在完成細(xì)胞融合后,還要將雜種細(xì)胞培育成植株,所以,它們所應(yīng)用的技術(shù)手段是有差別的。植物細(xì)胞培養(yǎng)用的是固體培養(yǎng)基,動物細(xì)胞培養(yǎng)用的是液體培養(yǎng)基,其成分中還有動物血清,培養(yǎng)基成分有一定的差別。3(2011年高考江蘇卷)關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述,錯(cuò)誤的是()A蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體C植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D
3、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育解析:選B。蛋白質(zhì)工程與基因工程不同,基因工程產(chǎn)生的是自然界中原有的蛋白質(zhì),而蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì),A項(xiàng)正確。體細(xì)胞雜交技術(shù)是植物細(xì)胞工程中培養(yǎng)雜種植株的一項(xiàng)技術(shù),動物細(xì)胞工程中克隆動物常利用細(xì)胞核移植技術(shù),而制備單克隆抗體常利用動物細(xì)胞融合技術(shù),B項(xiàng)錯(cuò)誤。用莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗,因?yàn)榍o尖的細(xì)胞剛分裂產(chǎn)生還未被病毒感染,C項(xiàng)正確。動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可為動物的轉(zhuǎn)基因技術(shù)提供受體細(xì)胞等,D項(xiàng)正確。4(2011年南京市高二檢測)下圖是單克隆抗體制備過程示意圖,其中1過程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱分別為()A抗體、T淋巴細(xì)胞 B抗原、T淋
4、巴細(xì)胞 C抗體、B淋巴細(xì)胞 D抗原、B淋巴細(xì)胞解析:選D。1過程注射的是抗原,使小鼠產(chǎn)生經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞A。5單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述,錯(cuò)誤的是 ()A特異性強(qiáng)、靈敏度高B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量分泌單克隆抗體D由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌解析:選C??贵w是由B淋巴細(xì)胞分泌的,每一種B淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體。要想獲得大量單一抗體,需要將某一種B淋巴細(xì)胞大量克隆,但是在體外培養(yǎng)的條件下,B淋巴細(xì)胞不能無限增殖。由效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞,能在體外培養(yǎng)的條件
5、下大量增殖,并分泌單克隆抗體。單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,特異性強(qiáng)、靈敏度高,與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”,直接作用于癌細(xì)胞。6.右圖示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程,據(jù)圖回答:(1)從A和B細(xì)胞到C細(xì)胞的過程中,必須用_處理。(2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞,那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉了細(xì)胞壁,這種酶可能是_,由此生成的A和B細(xì)胞稱為_。由A、B到C的過程中,常用的物理方法有_。融合完成的標(biāo)志是_,形成D細(xì)胞還要應(yīng)用_技術(shù),把其培養(yǎng)成植株。(3)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞,B為淋巴細(xì)胞,那么D細(xì)胞稱為_,由D細(xì)胞連續(xù)分裂產(chǎn)生大量細(xì)胞的過程,稱為_,這種細(xì)胞既能無限繁殖,又能產(chǎn)生_。(4)若A為人細(xì)胞,B
6、為鼠細(xì)胞,并分別用紅、綠熒光染料標(biāo)記細(xì)胞上的蛋白質(zhì),在C細(xì)胞階段,細(xì)胞一半發(fā)紅色熒光,一半發(fā)綠色熒光,到D細(xì)胞階段,兩種顏色的熒光均勻分布,原因是_。(5)若A、B細(xì)胞為動物細(xì)胞,一般取自_,然后用_將其分散開。由A、B到C的過程中,采用的不同于植物細(xì)胞融合的手段是_。(6)若該過程為制備單克隆抗體,A和B融合后形成的C有幾種?_。解析:此題是對植物體細(xì)胞雜交、動物細(xì)胞融合,以及細(xì)胞膜的特性等比較全面的考查。植物體細(xì)胞雜交前需先去掉細(xì)胞壁,因?yàn)榧?xì)胞壁由纖維素和果膠組成,應(yīng)用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。第二步就是讓不同的原生質(zhì)體融合,融合必須采用一定的技術(shù)手段,進(jìn)行人工誘導(dǎo)。在完成細(xì)胞融合后,還
7、要將雜種細(xì)胞培育成植株。動物在免疫反應(yīng)的過程中,每一種B淋巴細(xì)胞能分泌一種特異性抗體,要想獲得大量的特異性抗體,必須使能分泌該單一抗體的B淋巴細(xì)胞大量增殖。B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力,但不能在體外增殖;骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞,它能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體。然后將B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞同時(shí)培養(yǎng),在滅活的病毒(或聚乙二醇)的誘導(dǎo)下,促使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。它兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性既能大量增殖,又能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。最后考查了細(xì)胞膜的特性。細(xì)胞膜中的磷脂分子和蛋白質(zhì)分子大都是可以運(yùn)動的,即具有一定的流動性。答案:(1)誘導(dǎo)因素(2)纖維素酶和果
8、膠酶原生質(zhì)體電激、振動產(chǎn)生細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)(3)雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)單一抗體(4)構(gòu)成細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)和磷脂分子具有一定的流動性(5)動物胚胎或出生不久的幼齡動物的組織或器官胰蛋白酶用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合(6)3種(緊扣教材,思考感悟)【思考與探究】1植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動物細(xì)胞融合技術(shù)有什么不同?(教材P55)答案:植物體細(xì)胞雜交技術(shù)與動物細(xì)胞融合技術(shù)基本相同,不同的是植物體細(xì)胞融合前需去掉細(xì)胞壁,然后再融合;動物細(xì)胞融合是兩個(gè)體細(xì)胞直接融合。2制備單克隆抗體時(shí),為什么要選用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞?(教材P55)答案:哺乳動物感染抗原后,其體內(nèi)會形成相應(yīng)的效應(yīng)B淋巴細(xì)胞,效
9、應(yīng)B淋巴細(xì)胞能分泌相應(yīng)的抗體凝聚或殺死這些抗原。動物在免疫反應(yīng)的過程中,每一種效應(yīng)B淋巴細(xì)胞能分泌一種特異性抗體,要想獲得大量的特異性抗體,必須使能分泌該單一抗體的效應(yīng)B淋巴細(xì)胞大量增殖。效應(yīng)B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生單一抗體的能力,但不能在體外大量增殖;骨髓瘤細(xì)胞是一種癌細(xì)胞,它能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體。因此,把一種效應(yīng)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞,它會兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖,同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。1下列不是細(xì)胞融合常用方法的是()A細(xì)胞培養(yǎng)B滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)C電刺激 D聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑解析:選A。誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有病毒
10、誘導(dǎo)融合,聚乙二醇誘導(dǎo)融合,電激誘導(dǎo)融合。細(xì)胞培養(yǎng)不能使細(xì)胞融合。2下列過程中,沒有發(fā)生膜融合的是()A植物體細(xì)胞雜交B受精過程 C氧進(jìn)入細(xì)胞中的線粒體D效應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體解析:選C。氧氣進(jìn)入細(xì)胞中的線粒體是跨膜運(yùn)輸?shù)淖杂蓴U(kuò)散,沒有膜的融合。3(2011年陜西咸陽高二檢測)關(guān)于動物細(xì)胞融合的說法不正確的是()A動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程B動物細(xì)胞融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)動物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞C常用的誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的手段有:聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射D細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能解析:選C
11、。紫外線照射常用于人工誘變育種,可誘發(fā)基因突變,而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。4要想獲得大量的單克隆抗體就必須用單個(gè)的B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖,形成細(xì)胞群。其原因是()A在體外培養(yǎng)條件下,B淋巴細(xì)胞可以無限增殖B在動物體內(nèi)B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的抗體C每一個(gè)B淋巴細(xì)胞都參與特異性免疫反應(yīng)D每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體解析:選D。此題結(jié)合單克隆抗體的制備,考查了有關(guān)B淋巴細(xì)胞的免疫學(xué)知識。C選項(xiàng)的敘述有誤,一是因?yàn)锽淋巴細(xì)胞壽命短,它能夠參與特異性免疫,但不一定都參與;二是B淋巴細(xì)胞的免疫具有特異性,即每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種與特定抗原結(jié)合的抗體。5單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋
12、巴細(xì)胞融合后,要用特定的培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是()B淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞ABC D解析:選A。單克隆抗體的制備過程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合時(shí),發(fā)生了以下三種情況:未發(fā)生融合的細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞);自身融合的細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞,小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞);骨髓瘤細(xì)胞與單個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞是制備單克隆抗體必需的,因此在特定的培養(yǎng)基上只有雜交瘤細(xì)胞才能存活增殖。6用a表示骨髓瘤細(xì)胞,b表示效應(yīng)B細(xì)胞,則細(xì)胞融合過程中兩次篩選的目的分別為()Aa、aa、
13、ab、bb、ba、aa、abab培養(yǎng)Ba、aa、ab、bb、bab、bb、bab培養(yǎng)Ca、aa、ab、bb、bab產(chǎn)生特定抗體的ab培養(yǎng)Da、aa、ab、bb、baa能無限增殖的aa培養(yǎng)答案:C7(2011年合肥高二檢測)科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是()A經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 答案:A8關(guān)于單克隆抗體,下列敘述不正確的是()A可以制成診斷盒,用于疾病的診斷B可以與藥物結(jié)合,用于病變細(xì)胞的定向治療C可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)D可以在生物體內(nèi)生產(chǎn),不能體外
14、生產(chǎn)答案:D9用動物細(xì)胞工程獲得單克隆抗體,下列實(shí)驗(yàn)步驟錯(cuò)誤的是()A將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑,使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交瘤細(xì)胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體解析:選B。單克隆抗體的制備過程是:將一種抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞,然后將B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞同時(shí)培養(yǎng),在聚乙二醇的誘導(dǎo)下,促使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞。從中選出能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞群,即可得到單克隆抗體。因?yàn)閯游锛?xì)胞無細(xì)胞壁,所以用不到纖維素酶。 10將小鼠骨髓
15、瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合,可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體,下列有關(guān)此項(xiàng)技術(shù)的說法中不正確的是()A動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)B實(shí)驗(yàn)中雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖的方式是主動運(yùn)輸CB淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞直接放入培養(yǎng)液中就能融合為雜交瘤細(xì)胞D按照培養(yǎng)基的用途分類,實(shí)驗(yàn)中篩選雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基解析:選C。B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞放入培養(yǎng)液中,必須在誘導(dǎo)因素(如滅活的病毒等)的作用下,才能促進(jìn)其細(xì)胞融合,從中可篩選出雜交瘤細(xì)胞。11運(yùn)用動物體細(xì)胞雜交技術(shù)可實(shí)現(xiàn)基因定位。研究發(fā)現(xiàn):用人的細(xì)胞與小鼠體細(xì)胞進(jìn)行雜交得到的雜種細(xì)胞含有雙方的染色體。雜種細(xì)胞在持續(xù)分裂
16、過程中僅保留鼠的染色體而人類染色體則逐漸丟失,只剩一條或幾條。下圖是人的缺乏HGPRT酶突變細(xì)胞株(HGPRT)和小鼠的缺乏TK酶細(xì)胞株(TK)融合后并在HAT培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程,結(jié)果表明最終人的染色體在融合細(xì)胞中僅存有3號染色體或17號染色體或兩者都有。已知只有同時(shí)具有HGPRT酶和TK酶的融合細(xì)胞才可在HAT培養(yǎng)液中長期存活與繁殖。(1)體細(xì)胞雜交克服了_,過程常用的生物方法是_。(2)從培養(yǎng)過程看HAT培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料,還起_作用。(3)從圖示結(jié)果看,可以確定人的_基因位于_號染色體上;該方法可以對鼠基因定位嗎?_。(4)干擾素是效應(yīng)T細(xì)胞分泌的一種淋巴因子,利用動物細(xì)胞融合技術(shù),將
17、效應(yīng)T細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合并篩選得到雜交瘤細(xì)胞。該細(xì)胞應(yīng)該具有_特點(diǎn)。解析:體細(xì)胞雜交可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和,甚至可以實(shí)現(xiàn)動物和植物之間的細(xì)胞融合。在培養(yǎng)液中添加抗生素是防止細(xì)菌污染的措施之一。第(4)題,應(yīng)該類比單克隆抗體,由效應(yīng)T細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交并篩選得到的細(xì)胞應(yīng)該有兩個(gè)特點(diǎn):大量增殖,分泌干擾素。答案:(1)遠(yuǎn)緣雜交不親和(或生殖隔離)用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等誘導(dǎo)(2)選擇(篩選)(3)TK酶17不能(4)既能大量繁殖,又能分泌干擾素12(2011年南充高二檢測)近年來,我國死于狂犬病的人數(shù)有上升之勢。狂犬病病毒的核酸是RNA,機(jī)體感染病毒后產(chǎn)生的特異性IgG抗體,能消除狂犬病
18、病毒,這是接觸狂犬病病毒后及時(shí)注射疫苗和特異性抗體的重要依據(jù)。我國利用地鼠的腎細(xì)胞培養(yǎng)狂犬病疫苗,已取得良好效果。請根據(jù)上述材料,回答下列問題:(1)狂犬病病毒的毒力可發(fā)生變異。從自然感染動物體內(nèi)分離的病毒株稱為野毒株,其致病力強(qiáng)。將野毒株在家兔腦_內(nèi)連續(xù)傳50代后,變成固定毒株。固定毒株使人及動物致病。(2)特異性抗體獲取的方法可用單克隆抗體制備法。在制備單克隆抗體的過程中,應(yīng)用的動物細(xì)胞工程技術(shù)是_。(3)如圖是單克隆抗體制備過程示意圖,請據(jù)圖回答:圖中A過程,從小鼠的脾臟中取得的“小鼠細(xì)胞”是_細(xì)胞,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_。從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前,應(yīng)給小鼠注射的特定的物質(zhì)是_。圖中B過程
19、是細(xì)胞融合,該過程需要用滅活的_、聚乙二醇或電激等誘導(dǎo)。 特異性抗體的獲取方法也可以采用向動物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動物產(chǎn)生抗體,然后從動物血清中分離所需抗體。與這種方法制備的抗體相比,單克隆抗體具有_等特點(diǎn)。(4)動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的環(huán)境條件有_。(5)單克隆抗體技術(shù)還有哪些用途?_。解析:病毒是營寄生生活的,所以在體外只能用活細(xì)胞來培養(yǎng)。B淋巴細(xì)胞受到抗原刺激后可分化成B淋巴細(xì)胞,并產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。動物細(xì)胞培養(yǎng)最大的用途就是制備單克隆抗體,單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用要熟練、準(zhǔn)確地掌握。答案:(1)活細(xì)胞(2)動物細(xì)胞融合技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(3)B淋巴抗體抗原(或狂犬病病毒)病毒(或仙臺病毒)特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可以大量制備(4)無菌、無毒,適宜的溫度和pH,氣
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