國家藥品標(biāo)準(zhǔn)(三部)正文編寫細(xì)則

1、附件2 ： 一、國家藥品標(biāo)準(zhǔn)（三部）正文編寫細(xì)則（四） 血液制品類制品正文編寫細(xì)則1 制造 1.1 應(yīng)包括如下基本內(nèi)容：（1）原料血漿（或免疫血漿）（2）原液制備；（3）半成品制備；（4）成品制備。1.2 原料血漿 血漿的采集和質(zhì)量應(yīng)符合現(xiàn)行版藥典三部“血液制品原料血漿規(guī)程”要求，并說明對血漿的特殊要求。例1 低溫冰凍的血漿保存期不應(yīng)超過2年。每批投產(chǎn)血漿的合并人份應(yīng)不低于1000份。 （人免疫球蛋白）1.3免疫血漿 包括以下內(nèi)容：（1）免疫抗原 說明抗原種類及對抗原的要求。例 免疫用抗原為人胸腺細(xì)胞，或符合“血液制品原料血漿規(guī)程”規(guī)定的供血漿者選擇標(biāo)準(zhǔn)的健康人血液分離的人淋巴細(xì)胞，胸腺供體為

2、HBsAg、HCV抗體、HIV-1/HIV-2抗體和梅毒血清學(xué)檢查陰性。分離后T淋巴細(xì)胞數(shù)應(yīng)不低于總細(xì)胞數(shù)的90%,紅細(xì)胞數(shù)應(yīng)不高于總細(xì)胞數(shù)的5%。 （注射用抗人T淋巴細(xì)胞兔免疫球蛋白）（2）免疫動物 說明所用動物的種類和要求。例 免疫用兔（或其他動物）應(yīng)符合清潔級試驗動物的要求，體重為20002500克，檢疫合格者方可使用。 （注射用抗人T淋巴細(xì)胞兔免疫球蛋白）（3）免疫方法（4）采血及分離血漿。1.4原液制備 說明原液制備的過程及特殊要求。1.5原液檢定 不寫具體內(nèi)容，書寫格式為“按XX項進(jìn)行”。1.6半成品制備 同預(yù)防類制品。1.7成品制備 同預(yù)防類制品。2 檢定2.1 原液檢定 根據(jù)制

3、品種類不同，可包括以下檢定項目：（1）蛋白質(zhì)含量（2）純度（3）pH值（4）熱原檢查（5）活性測定（6）效價測定（7）人紅細(xì)胞抗體（8）人血小板抗體（9）人血漿蛋白抗體等。按相應(yīng)的附錄方法進(jìn)行檢定。2.2 半成品檢定 應(yīng)進(jìn)行無菌檢查，根據(jù)制品種類不同，還應(yīng)包括蛋白質(zhì)含量和熱原檢查。按相應(yīng)的附錄方法進(jìn)行。2.3成品檢定 根據(jù)制品種類不同，可包括以下檢定項目：（1）鑒別試驗（2）物理檢查（3）化學(xué)檢查（4）無菌檢查（5）異常毒性（6）熱原檢查（7）人紅細(xì)胞抗體（8）人血小板抗體（9）人血漿蛋白抗體（10）效價測定（11）外源病毒污染檢查等。按相應(yīng)的附錄方法進(jìn)行檢定。3 保存運(yùn)輸及有效期說明保存、運(yùn)

4、輸?shù)臏囟群推渌?，以及有效期。（六?附錄編寫細(xì)則藥典三部附錄中收載的方法為法定方法，生物制品應(yīng)按此方法進(jìn)行檢定?？刹捎闷渌阎哂邢嗤_度的方法，當(dāng)產(chǎn)生爭議時，仍以藥典規(guī)定的方法為準(zhǔn)。標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的各種純度和限度數(shù)值以及制劑的重（裝）量差異，系包括上限和下限兩個數(shù)據(jù)本身和中間數(shù)值。規(guī)定的這些數(shù)值不論是百分?jǐn)?shù)還是絕對數(shù)字，其最后一位數(shù)值都是有效位。試驗得到的結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的數(shù)值比較，以判斷是否符合規(guī)定的限度。試驗結(jié)果在運(yùn)算過程中，可比規(guī)定的有效數(shù)字多保留一位數(shù)，計算所得最后數(shù)值或測定讀數(shù)值均可按修約規(guī)則進(jìn)舍至規(guī)定的有效位，取此數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的數(shù)值比較，以判斷是否符合規(guī)定的限度。標(biāo)準(zhǔn)品及參

5、考品、對照品、標(biāo)準(zhǔn)品溶液、參考品溶液、對照品溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液是在附錄編寫中經(jīng)常應(yīng)用的名詞。（1）國家生物標(biāo)準(zhǔn)品系指用國際標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定的，或我國自行研制的(尚無國際生物標(biāo)準(zhǔn)品者)用于定量測定某一制品效價或毒性的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其生物活性以國際單位（IU）或以單位（U）表示。（2）國家生物參考品系指用國際參考品標(biāo)定的，或我國自行研制的(尚無國際參考品者)用于微生物(或其產(chǎn)物)的定性鑒定或疾病診斷的生物試劑、生物材料或特異性抗血清；或指用于定量檢測某些制品的生物效價的參考物質(zhì)，如用于麻疹活疫苗滴度或類毒素絮狀單位測定的參考品，其效價以特定活性單位表示，不以國際單位（IU）表示。國家生物標(biāo)準(zhǔn)品及生物參考品的制備

6、與標(biāo)定應(yīng)符合現(xiàn)行版藥典三部“生物制品國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備和標(biāo)定規(guī)程”要求，并由國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門指定的機(jī)構(gòu)分發(fā)。（3）標(biāo)準(zhǔn)品溶液、參考品溶液是指由國家標(biāo)準(zhǔn)品、參考品配制而成的溶液。（4）對照品指用于生物制品理化等方面測定的特定物質(zhì)，對照品須由國家藥品檢定機(jī)構(gòu)認(rèn)可。（5）對照品溶液是指由對照品配制而成的溶液。（6）標(biāo)準(zhǔn)溶液是指由精密稱定的恒重的物質(zhì)配制成的溶液，用于制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，以測定供試品的含量或效價。附錄編寫細(xì)則如下：一 . 分光光度法、電泳法、滴定法、分子生物學(xué)檢測法、酶聯(lián)免疫法、凝固時間法等1. 題目附錄的題目為XXX測定法或檢查法，除特殊情況外，定性試驗稱為檢查法，定量試驗稱為測定法。

7、如：唾液酸測定法、重組乙型肝炎疫苗（酵母）體外相對效力檢查法2. 試驗原理、目的（不列明標(biāo)題）描述本附錄的用途及檢測原理。如： 本法系用酸水解方法將結(jié)合狀態(tài)的唾液酸變成游離狀態(tài)，游離狀態(tài)的唾液酸與間苯二酚反應(yīng)生成有色化合物，再用有機(jī)酸萃取后，測定唾液酸含量。3 試劑 （1）描述本附錄中所使用試劑的配制方法。（2）對于配制方法簡單的溶液，也可在檢測方法中描述。（3）試劑濃度用質(zhì)量百分比表示的, 不再描述其配制方法。此外, 在相應(yīng)試劑盒使用說明書中有描述的試劑,也不再重復(fù)描述。4 標(biāo)準(zhǔn)品溶液、標(biāo)準(zhǔn)溶液或?qū)φ掌啡芤旱呐渲朴糜诿枋鰳?biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌啡芤旱呐渲品椒?。如：?biāo)準(zhǔn)品溶液的制備按標(biāo)準(zhǔn)品說明書，將EP

8、O標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶，用稀釋液將EPO標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成高、中、低3個劑量EPO標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)汞溶液的配制 取置硫酸干燥器中干燥至恒重的氯化高汞約0.135g，精密稱定，置100ml量瓶中，加0.5mol/L硫酸溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液適量，置100ml量瓶中，加0.5mol/L硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻,作為每1ml相當(dāng)于50g Hg的標(biāo)準(zhǔn)汞溶液。磷酸組胺對照品溶液的配制取磷酸組胺對照品7mg，精密稱定，置25ml量瓶中,用0.1mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為磷酸組胺貯備液，-20貯存?zhèn)溆?。試驗?dāng)天準(zhǔn)確量取磷酸組胺貯備液0.1ml，置100ml量瓶中，用0.

9、1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，作為磷酸組胺對照品溶液。5 供試品溶液的配制用于描述供試品溶液的配制方法。如：供試品溶液的配制 取供試品適量，用TNB稀釋10倍。6測定法（或檢查法）用于描述供試品的檢測方法，試驗操作過程，結(jié)果計算方法。如:測定法分別精密量取供試品溶液與蛋白質(zhì)對照品溶液各0.05ml置玻璃試管中，分別加雙縮脲試劑4.0ml，混勻，置37水浴中30分鐘，照紫外-可見分光光度法（附錄II A），在波長540nm處測定吸光度。另精密量取水0.05ml，自加雙縮脲試劑起，同法操作，作為空白對照。按下式計算：蛋白質(zhì)含量（mg/ml）= (A1/A2 )×C×n式中 A

10、1 為供試品溶液的吸光度；A2 為標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液的吸光度；C 為標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液的濃度，mg/ml；n 為供試品稀釋倍數(shù)。7注意事項用于描述試驗過程中應(yīng)注意的操作、試驗條件等。如：注意事項 （1）電泳時應(yīng)有冷卻系統(tǒng)，否則瓊脂糖會出現(xiàn)干裂。（2）用生理氯化鈉溶液浸泡應(yīng)充分，否則背景不清晰。8. 附注對試驗過程、操作步驟進(jìn)行附加描述。如聚乙二醇?xì)埩袅繙y定法中：（1）整個比色過程應(yīng)在試劑加入后的1545分鐘內(nèi)完成，否則將要影響結(jié)果；（2）本法的靈敏度隨被測聚乙二醇的分子量的增加而提高。（3）1%的蛋白質(zhì)溶液系用不含聚乙二醇的蛋白質(zhì)溶液配制。二 色譜法1. 附錄的題目為XXX測定法如：人血白蛋白多聚體含

11、量測定法 辛酸鈉測定法2 原理及目的（標(biāo)題不列出）描述本附錄的用途及檢測原理。如：本法系用分子排阻色譜法測定人血白蛋白多聚體含量。照分子排阻色譜法（附錄 III D）測定。3. 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用于描述色譜條件，如：色譜柱類別、色譜柱長、色譜柱直徑、粒度、柱溫、氣化室溫度，流動相、流速、洗脫梯度、載氣流速，檢測器、檢測器溫度，上樣體積；以及系統(tǒng)適用性試驗參數(shù)，如：分離度、拖尾因子等。如：人免疫球蛋白類制品IgG單體加二聚體含量測定法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用親水硅膠高效體積排阻色譜柱（SEC，排阻極限300 kD，粒度10m或13m），柱直徑7.5mm,長30cm 或60cm；以含1

12、異丙醇的pH7.0 0.2mol/L磷酸鹽緩沖液取0.5mol/L磷酸二氫鈉（NaH2PO4 ·2H2O）200ml、0.5mol/L磷酸氫二鈉（Na2HPO4 ·12H2O）420ml、異丙醇15.5ml及水914.5ml，混勻。為流動相；檢測波長為280nm ；流速為每分鐘0.6ml。取每ml含蛋白質(zhì)為4mg 的白蛋白溶液20l，注入色譜柱，記錄色譜圖， 白蛋白單體峰與二聚體峰間的分離度應(yīng)大于1.5，拖尾因子按白蛋白單體峰計算應(yīng)為0.951.40。4. 內(nèi)標(biāo)溶液的配制用于描述內(nèi)標(biāo)溶液的配制方法， 如: 取庚酸，加三氯甲烷制成每1ml中含10mg的溶液，即得。5. 對照品

13、溶液的配制用于描述對照品溶液的配制方法，如: 麥芽糖對照品溶液分別取經(jīng)減壓干燥至恒重的麥芽糖對照品1.0、2.0、3.0g，精密稱定，各置100ml量瓶中，分別加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。6. 供試品溶液的制備用于描述供試品溶液的配制方法，如: 精密量取供試品1ml，加1.5%磺基水楊酸4.0ml，混勻，室溫放置至少2小時，以每分鐘3000 轉(zhuǎn)離心10分鐘，取上清液，即得。7. 測定法用于描述供試品的檢測方法，試驗操作過程，結(jié)果計算方法，如辛酸鈉測定法： 測定法：精密量取供試品3ml，置具塞玻璃離心管中，精密加內(nèi)標(biāo)溶液50l與1.5mol/L高氯酸溶液0.75ml，振蕩1分鐘，置37水浴

14、保溫10分鐘后，再加正己烷4ml，振蕩2分鐘，以每分鐘2000轉(zhuǎn)離心20分鐘，除去乳化。小心吸取上層正己烷，用空氣流將其濃縮至約0.2ml（不能加熱），精密量取0.1l注入氣相色譜儀。另取磷酸三丁酯對照品適量，精密稱定，加正己烷溶解并定量稀釋制成每1ml中約含600g的溶液； 精密量取該溶液10、20、40、60、80l，分別置已精密加水3ml的具塞玻璃離心管中，再向各對照品管精密加內(nèi)標(biāo)溶液50l，自振蕩1分鐘起，同法操作。以各磷酸三丁酯對照品峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比，對磷酸三丁酯對照品溶液濃度作直線回歸，求得回歸方程。計算出供試品溶液中磷酸三丁酯含量(g/ml)。8附注對試驗過程、操作步驟進(jìn)行附

15、加描述，如辛酸鈉測定法: 附注：（1）1mmol辛酸相當(dāng)于1mmol辛酸鈉。（2）對照品溶液與供試品溶液的溶劑揮發(fā)的速度應(yīng)盡量保持一致。（3）直線回歸相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.99。三 . 其他（包括：微生物、細(xì)胞、動物檢測方法等）1 題目附錄的題目為XXX測定法或檢查法，除特殊情況外，定性試驗稱為檢查法，定量試驗稱為測定法。2 試驗原理、目的（不列出標(biāo)題）描述本附錄的用途及檢測原理。如：無菌檢查法系用于確定要求無菌的生物制品、醫(yī)療器具、原料、輔料及要求無菌的其他品種是否無菌的一種方法。若供試品符合無菌檢查法的規(guī)定,僅表明供試品在該檢驗條件下未發(fā)現(xiàn)微生物污染。3 試驗中所需試劑、培養(yǎng)基、細(xì)胞等、供試

16、品的制備及試驗前的準(zhǔn)備描述本附錄中所用的試劑、培養(yǎng)基、細(xì)胞等的制備方法，如：培養(yǎng)基及其制備方法培養(yǎng)基應(yīng)適合需氧菌、厭氧菌或真菌的生長，可按以下處方制備，亦可使用按該處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基。 如: 培養(yǎng)基及指示細(xì)胞（1）DMEM完全培養(yǎng)基（2）DMEM無抗生素培養(yǎng)基（3）指示細(xì)胞（已證明無支原體污染的Vero細(xì)胞或其他傳代細(xì)胞）取培養(yǎng)的Vero細(xì)胞經(jīng)消化后，制成1 x105個/ml的細(xì)胞懸液，以每孔0.5ml接種6孔細(xì)胞培養(yǎng)板或其他容器，每孔再加無抗生素培養(yǎng)基3 ml，于5% 二氧化碳孵箱 36±1 培養(yǎng)過夜，備用。4 檢查法或測定法用于描述供試品的檢測方法，試驗操作過程，結(jié)果

17、計算方法，如：測定法于制備好的指示細(xì)胞培養(yǎng)板中加入供試品（細(xì)胞培養(yǎng)上清液）2ml（毒種或其他供試品至少1ml），置5% 二氧化碳孵箱36±1培養(yǎng)35天。指示細(xì)胞培養(yǎng)物至少傳代1次，末次傳代培養(yǎng)用含蓋玻片的6孔培養(yǎng)板培養(yǎng)35天后，吸出培養(yǎng)孔中的培養(yǎng)液，加入固定液5ml，放置5分鐘，吸出固定液，再加5ml固定液固定10分鐘，吸出固定液，使蓋玻片在空氣中干燥，加二苯甲酰胺熒光染料（或其他DNA染料）工作液5ml，加蓋，室溫下放置30分鐘，吸出染液，每孔用水5 ml洗3次，吸出水，蓋玻片于空氣中干燥，取潔凈載玻片加封片液一滴，分別將蓋玻片面向下蓋在封片液上制成封片。用熒光顯微鏡觀察。用無抗生素培養(yǎng)基2ml替代供試品，同法操作，作為