骨橋蛋白與肝炎的研究進(jìn)展

1、骨橋蛋白與肝炎的研究進(jìn)展         11-04-12 14:41:00     作者：王文平,鄭偉強(qiáng)    編輯：studa20【關(guān)鍵詞】  骨橋蛋白 ;肝炎 ;發(fā)病機(jī)制 ;細(xì)胞免疫 ;綜述骨橋蛋白是Senger 于1979年首次發(fā)現(xiàn)的一種磷酸化糖蛋白，由多種組織細(xì)胞合成與分泌，廣泛的分布于多種組織和細(xì)胞，參與多種生理和病理過(guò)程。肝炎是全球范圍內(nèi)的嚴(yán)重公共衛(wèi)生問(wèn)題，近年的研究發(fā)現(xiàn)骨橋蛋白與肝炎的發(fā)病關(guān)系密切，可通過(guò)多種細(xì)

2、胞免疫途徑介導(dǎo)肝炎的發(fā)生，本文對(duì)骨橋蛋白與肝炎關(guān)系的相關(guān)研究作一綜述。1 骨橋蛋白與肝炎的關(guān)系骨橋蛋白與肝炎的關(guān)系的研究主要來(lái)自中毒性肝炎、丙型肝炎、自身免役性肝炎、酒精性肝炎，乙型肝炎的研究較少。骨橋蛋白在肝炎發(fā)病過(guò)程中的作用，大部分研究提示是促進(jìn)肝炎的發(fā)生和加重。早期就是在四氯化碳引起的急性肝炎模型中發(fā)現(xiàn)骨橋蛋白表達(dá)增高。Apte 等1研究發(fā)現(xiàn)酒精性肝炎的小鼠血漿及肝組織骨橋蛋白水平增高。Sahai A等2對(duì)非酒精性脂肪性肝炎小鼠模型(通過(guò)喂養(yǎng)缺乏甲硫氨酸和膽堿的飲食)的骨橋蛋白測(cè)定，發(fā)現(xiàn)該小鼠骨橋蛋白蛋白水平和mRNA水平均增高。Mochida3等對(duì)176例慢性丙型肝炎患者的臨床研究發(fā)現(xiàn)

3、：骨橋蛋白增強(qiáng)子序列-433位基因多態(tài)性與患者血清中ALT水平有關(guān)，可能是反映慢性丙型肝炎炎癥活動(dòng)的一個(gè)有用指標(biāo)。Matsui A4對(duì)暴發(fā)型肝炎患者的骨橋蛋白水平明顯高于急、慢性肝炎及健康人，II期肝性腦病及病程10天內(nèi)出現(xiàn)典型肝壞死者，骨橋蛋白水平升高更明顯。Arai M等5對(duì)暴發(fā)性肝衰竭和自限性肝炎患者血漿骨橋蛋白水平測(cè)定，發(fā)現(xiàn)前者明顯高于后者。這些均提示在炎癥性肝病中骨橋蛋白表達(dá)增高，且與炎癥的嚴(yán)重程度有關(guān)。但也有相反的結(jié)果，Koh HS6等在對(duì)血清淀粉樣P組分控制表達(dá)骨橋蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠研究發(fā)現(xiàn)，這些小鼠在12周時(shí)單核細(xì)胞浸潤(rùn)，隨著年齡增長(zhǎng)更廣泛，這些浸潤(rùn)是原發(fā)的細(xì)胞毒細(xì)胞，表達(dá)CD8

4、和HLA-DR為特征。四氯化碳處理該小鼠，壞死程度和細(xì)胞浸潤(rùn)均較野生鼠小，因此推測(cè)過(guò)度表達(dá)骨橋蛋白可能是一保護(hù)角色。2 骨橋蛋白致肝炎的發(fā)病機(jī)制細(xì)胞介導(dǎo)的免疫損傷是炎癥性肝病的主要機(jī)制。微生物進(jìn)入血循環(huán)后大部被巨噬細(xì)胞清除，少部分激活巨噬細(xì)胞產(chǎn)生炎癥反應(yīng)致炎癥細(xì)胞如中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞浸潤(rùn)到肝，最終致肝損害。骨橋蛋白通過(guò)細(xì)胞免疫介導(dǎo)肝炎的機(jī)制主要有以下幾個(gè)方面。2. 1 Th1和Th2免疫平衡失調(diào) Mimura S等7對(duì)唯一過(guò)度表達(dá)骨橋蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠的研究中，給予Con-A處理轉(zhuǎn)基因小鼠和野生小鼠，轉(zhuǎn)基因小鼠骨橋蛋白的增高幅度較野生鼠明顯升高，得出結(jié)論為骨橋蛋白啟動(dòng)

5、Th1反應(yīng)，Th1/Th2平衡紊亂，Th1占優(yōu)勢(shì)，從而導(dǎo)致大片肝壞死。骨橋蛋白如何啟動(dòng)Th1反應(yīng)在之前的研究已經(jīng)有報(bào)道，骨橋蛋白通過(guò)氨基端與整合素受體結(jié)合使IL-12升高，通過(guò)磷酸化與CD44結(jié)合使IL-10下降，從而啟動(dòng)Th1反應(yīng)8。2. 2 骨橋蛋白促進(jìn)NKT細(xì)胞活化，活化的NKT細(xì)胞觸發(fā)中性粒細(xì)胞聚集9 用Con-A處理野生小鼠和骨橋蛋白缺乏小鼠，骨橋蛋白表達(dá)缺乏的小鼠的肝損害明顯低于野生小鼠，血漿轉(zhuǎn)氨酶水平和高生存率可反映該區(qū)別。具體機(jī)制是Con-A注射于小鼠后，肝內(nèi)固有的NKT細(xì)胞分泌骨橋蛋白,骨橋蛋白促進(jìn)NKT細(xì)胞活化和觸發(fā)中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)與活化，致肝炎加重。更為詳細(xì)的過(guò)程是，NKT

6、細(xì)胞表達(dá)9和4抗原與凝血酶剪切的骨橋蛋白結(jié)合后，進(jìn)一步激活NKT細(xì)胞，NKT細(xì)胞產(chǎn)生巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-2(MIP-2，一種中性粒細(xì)胞趨化因子)，從而使中性粒細(xì)胞聚集于肝臟致肝損害。但具體MIP-2致中性粒細(xì)胞聚集的過(guò)程仍不清楚。2. 3 骨橋蛋白調(diào)節(jié)iNKT細(xì)胞的功能10 該研究對(duì)骨橋蛋白缺乏小鼠與野生小鼠iNKT細(xì)胞功能變化來(lái)間接說(shuō)明骨橋蛋白對(duì)iNKT細(xì)胞成熟和功能的調(diào)節(jié)作用。研究中骨橋蛋白缺乏小鼠與野生小鼠相比，胸腺iNKT細(xì)胞數(shù)相同，但外周血iNKT細(xì)胞數(shù)明顯減少。而且iNKT細(xì)胞的功能也不足，表現(xiàn)在以下三點(diǎn)：第一，下調(diào)iNKT細(xì)胞受體不足;第二，IL-4表達(dá)下調(diào)，INF-表達(dá)沒(méi)有改變;

7、第三，F(xiàn)asL表達(dá)減少，導(dǎo)致對(duì)肝細(xì)胞的依賴Fas/FasL的細(xì)胞毒反應(yīng)下降。2. 4 骨橋蛋白基因多態(tài)性與肝炎病毒的清除有關(guān) Shin HD等 11對(duì)1069名乙肝患者骨橋蛋白五種基因型與患者病程的關(guān)系進(jìn)行前瞻性研究，發(fā)現(xiàn)最普遍的以單元型SPP1-ht2 T-T-C-T-A為支架的基因型在乙肝病毒攜帶者比自愈患者表達(dá)要高，而且以后肝癌發(fā)生年齡早。該研究提示骨橋蛋白基因多態(tài)性與乙肝病毒的清除有關(guān)，但具體的機(jī)制仍需進(jìn)一步的研究。2. 5 骨橋蛋白調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的活化遷移導(dǎo)致肝損傷 骨橋蛋白最早在活化的T細(xì)胞被稱為早期T淋巴細(xì)胞活化蛋白-1(ETA-1)，提純的該蛋白與巨噬細(xì)胞結(jié)合表現(xiàn)出飽和現(xiàn)象，皮下

8、注射該蛋白的老鼠出現(xiàn)富含巨噬細(xì)胞的炎癥浸潤(rùn)。另一實(shí)驗(yàn)中，用化學(xué)趨化肽亮氨酰苯丙氨酸注射于小鼠同樣可產(chǎn)生富含巨噬細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，灌注骨橋蛋白的中和抗體，則該巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)減少60%.另外內(nèi)源性骨橋蛋白還與巨噬細(xì)胞的分化有關(guān)。12RAW264. 7巨噬細(xì)胞應(yīng)用骨橋蛋白siRNA使骨橋蛋白表達(dá)減少，則該巨噬細(xì)胞的遷移功能受損和凋亡率增加，同時(shí)細(xì)胞的顯型發(fā)生變化，外源性的骨橋蛋白不能逆轉(zhuǎn)該改變，表明內(nèi)源性骨橋蛋白的減少影響了巨噬細(xì)胞的分化成熟。2. 6 骨橋蛋白與中性粒細(xì)胞 Apte4等研究發(fā)現(xiàn)酒精性肝炎的小鼠血漿和肝組織骨橋蛋白水平增高，且高中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死和肝損傷與血漿和肝內(nèi)骨橋蛋白的水平相關(guān)。

9、進(jìn)一步研究13骨橋蛋白與中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)的因果關(guān)系，在另一腹膜內(nèi)注射骨橋蛋白制造腹膜炎的小鼠模型，腹膜液內(nèi)的中性粒細(xì)胞明顯增加，但當(dāng)應(yīng)用骨橋蛋白的中和抗體來(lái)控制骨橋蛋白的功能時(shí)，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)減少幾乎50%。更為詳細(xì)的機(jī)制14可能為骨橋蛋白氨基末端整聯(lián)蛋白序列通過(guò)抗原抗體反應(yīng)吸引中性粒細(xì)胞聚集。3 臨床價(jià)值骨橋蛋白在肝炎活動(dòng)時(shí)升高，有加重肝炎病理?yè)p害的作用，是否能通過(guò)調(diào)節(jié)骨橋蛋白的水平來(lái)減輕肝炎病理?yè)p害，從而治療肝炎，其研究主要有以下幾個(gè)方面。3. 1 骨橋蛋白特異性小干擾性RNA(siRNA)的潛在治療價(jià)值 骨橋蛋白siRNA是體外化學(xué)合成骨橋蛋白序列特異性雙鏈RNA，能有效使內(nèi)源性和外源性骨橋蛋白基因沉默，從而使骨橋蛋白表達(dá)下降。Saito Y等15對(duì)Con-A導(dǎo)致暴發(fā)性肝炎的小鼠模型研究發(fā)現(xiàn)，骨橋蛋白siRNA注射后肝中骨橋蛋白水平明顯下降，反映肝組織損害的血清ALT水平明顯下降，肝組織病理幾乎正常，從而表明肝組織損害明顯改善。3. 2 多配體蛋白聚糖-4的應(yīng)用有望抵御骨橋蛋白介導(dǎo)的急性肝損傷16 骨橋蛋白通過(guò)凝血