惡性腫瘤患者循環(huán)血DNA的研究進展 醫(yī)學論文

1、    惡性腫瘤患者循環(huán)血DNA的研究進展 醫(yī)學論文              本文由中國論文范文收集整理。 【關鍵詞】   循環(huán)DNA 腫瘤 腫瘤標志物 綜述    循環(huán)DNA是一種無細胞狀態(tài)的胞外DNA，存在于血液（血清或血漿）、滑膜液和腦脊液等體液中，其主要是由單鏈或雙鏈DNA以及單鏈與雙鏈DNA的混合物組成，以DNA?蛋白質復合物或游離DNA兩種形式存在。早在1947年Mandel和Met

2、ais就發(fā)現(xiàn)了循環(huán)核酸；30年后Leon等人的 研究 表明腫瘤患者外周血清DNA水平大大高于正常人；1989年Stroun等發(fā)現(xiàn)血液游離DNA具有腫瘤細胞DNA的一些特征；5年后研究者在腫瘤患者的血漿和血清中檢測到了癌基因突變，并且與原發(fā)腫瘤相一致。隨著腫瘤分子生物學研究的進展，循環(huán)血游離DNA的檢測及其生物學指標的研究，將有可能為臨床腫瘤的早期診斷、預后判斷及跟蹤隨訪等提供一系列方便、快捷、特異、無創(chuàng)或微創(chuàng)和分子生物學檢測手段。    1  惡性腫瘤循環(huán)血DNA的來源     正常人循環(huán)血中存在少量游離DNA，主要來源于細

3、胞核DNA和線粒體DNA，常小于10 ng·ml-1；腫瘤患者循環(huán)血DNA主要來源于腫瘤細胞，其血漿DNA濃度平均可達180 ng·ml-1。Shapiro等檢測了386例消化道疾病患者血清DNA水平，發(fā)現(xiàn)腫瘤患者、良性疾病患者、正常人的血漿DNA水平平均分別為（412±63）、（118±14）和(14±3） g·L-1，3組間差異有明顯統(tǒng)計學意義。屠紅等檢測了483例惡性腫瘤及150例健康人血清DNA水平，分別為（81.3±98.3）和（22.2±13.4） ng·ml-1，兩者間差異有顯著性。

4、0;   目前 ，關于惡性腫瘤患者循環(huán)血DNA的來源及其發(fā)生機制有以下幾種假說：（1）腫瘤細胞不斷釋放DNA進入血液循環(huán)。淋巴細胞或離體培養(yǎng)的器官能通過一種自我平衡的機制自發(fā)釋放核蛋白復合物，并優(yōu)先釋放細胞內新合成的DNA。因此，有人推測腫瘤循環(huán)DNA可能以同樣的方式釋放入血。越來越多的研究表明，腫瘤在生長過程中能持續(xù)自發(fā)釋放腫瘤細胞DNA進入外周血液，成為循環(huán)血DNA的主要來源。（2）循環(huán)中腫瘤細胞或微轉移灶的裂解。最常見的假說認為腫瘤患者血漿中的DNA主要來源于循環(huán)腫瘤細胞或者微轉移灶細胞的裂解，但外周血中顯然沒有足夠的腫瘤細胞能產(chǎn)生如此高水平的血漿DNA。研究發(fā)現(xiàn)，血

5、漿DNA與一種18個賴氨酸的多肽結合成復合體，從而保持DNA在血漿中結構和功能的穩(wěn)定性，并且可能是DNA非病毒傳遞系統(tǒng)中的一種主要傳遞方式。（3）腫瘤細胞的壞死或凋亡。因為在具有較多壞死組織的大腫瘤或進展期伴轉移的晚期患者的血漿中發(fā)現(xiàn)較高水平的血漿DNA，從而推測血漿DNA可能來自腫瘤細胞的壞死。但是，在腫瘤早期也能在血漿中檢測到DNA水平的升高，說明腫瘤細胞的壞死可能不是循環(huán)血DNA的主要來源。由于血漿DNA電泳后可表現(xiàn)出凋亡細胞所特有的典型“梯型”條帶，因此，也有研究認為凋亡也是循環(huán)DNA的來源。另外腫瘤細胞侵襲周圍細胞引起組織變性而釋放DNA入血；淋巴細胞在與腫瘤細胞相互作用時亦能夠釋放

6、一定量的DNA。由此可見，腫瘤患者循環(huán)DNA的形成是多種途徑共同作用的結果，其來源與生理和病理狀態(tài)下細胞代謝過程密不可分。    2  腫瘤相關的不同類型血清DNA改變     2.1  抑癌基因啟動子的異常甲基化     DNA的甲基化是指生物體DNA在DNA甲基轉移酶的催化下，以S?腺苷甲硫氨酸為甲基供體，將甲基轉移到特定堿基上去的過程。其改變通過基因機制和表遺傳學機制引起與細胞增殖和分化有關的基因表達異常，造成細胞失去對正常分化過程的控制而發(fā)生癌變，最后形成腫瘤。異常甲

7、基化包括癌基因的低甲基化、抑癌基因的高甲基化、基因組不穩(wěn)定性和基因印跡等幾個方面，其中抑癌基因啟動子的高甲基化是抑癌基因失活的一個重要機制，在腫瘤發(fā)生 發(fā)展 中起重要作用。    甲基化特異性PCR(MSP)法是1996年發(fā)展起來的一種檢測血漿DNA高甲基化 方法 ，其原理是用硫酸鹽將未甲基化的胞嘧啶殘基轉化為尿嘧啶，通過設計CpG島的甲基化和非甲基化的特異引物各一對，進行特異性擴增即可將二者區(qū)分開來。LIU等用MSP法檢測不同癌癥患者血清中p16基因甲基化，其中大腸癌患者血清中p16甲基化檢出率早期為44%，晚期為54%。而肺癌、食管癌、乳腺癌和卵巢癌檢出率分別

8、為48%、50%、100%和40%。Zou等在38的大腸癌組織中檢出了p16基因甲基化，血清中與之符合率達70，而結腸腺瘤樣息肉患者、健康者血清中都未檢出p16甲基化，說明大腸癌患者組織和血清中p16甲基化改變的一致性。在肺癌方面，腺癌樣結腸息肉?。ˋPC）基因的高甲基化，被認為是生存較短的獨立預后指標；APC基因高甲基化也作為食管腺癌發(fā)生的危險因素，比年齡或疾病臨床分期更能預示患者的生存期和腫瘤復發(fā)。對食管鱗狀細胞癌，06?鳥嘌呤甲基化DNA甲基轉移酶（MGMT）啟動子異常甲基化引起MGMT失活也是一個常見的分子事件，有研究發(fā)現(xiàn)，正常食管組織中不存在MGMT甲基化，而食管癌中有38.7%存在MGMT甲基化。實際上高甲基化亦可以出現(xiàn)在正常的健康組織中，但血漿/血清DNA的高甲基化卻只存在于純惡性疾病中，因此其特異性診斷價值受到重視。不足之處在于這種檢出率在某些癌中不高，且與疾病分期有關，因此限制了其早期診斷的價值。 關鍵詞:研究,進展,循環(huán),腫瘤,患者,惡性,醫(yī)學論文,惡性腫瘤患者循環(huán)血DNA的研究進展 內容摘要:本文由中國論文范文收集整理。 【關鍵詞】