《細(xì)胞工程學(xué)》(實(shí)驗(yàn))教學(xué)大綱

1、細(xì)胞工程學(xué)（實(shí)驗(yàn)）教學(xué)大綱課程代碼：13.012課程名稱：細(xì)胞工程學(xué)（Cell Engineering）學(xué)時(shí)學(xué)分：總學(xué)時(shí)56學(xué)時(shí)，實(shí)驗(yàn)課學(xué)時(shí)20學(xué)時(shí)；課程總學(xué)分3.5。先修課程：普通生物學(xué)；細(xì)胞生物學(xué)；遺傳學(xué)；細(xì)胞生物學(xué)；發(fā)育生物學(xué)。實(shí)用專業(yè)：生物技術(shù)、生物學(xué)一、課程性質(zhì)和任務(wù)細(xì)胞工程學(xué)是應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)原理與方法，在細(xì)胞水平上研究改造生物遺傳特性，以獲得具有目標(biāo)性狀的細(xì)胞系或生物體的有關(guān)理論和技術(shù)的學(xué)科。它是一門現(xiàn)代生物科學(xué)理論和工程技術(shù)相結(jié)合的綜合性學(xué)科。細(xì)胞工程學(xué)是生物技術(shù)、生物學(xué)及生物工程*專業(yè)學(xué)生的必修專業(yè)課，也是我校其它生物類各本科專業(yè)學(xué)生的重要選修課。先修主要基礎(chǔ)課程有

2、普通生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)、生理學(xué)、生物化學(xué)。細(xì)胞工程是現(xiàn)代生物技術(shù)的重要組成部分，同時(shí)也是現(xiàn)代生物學(xué)研究的重要技術(shù)工具。要求學(xué)生通過本課程的學(xué)習(xí)掌握生物組織、器官及其細(xì)胞離體培養(yǎng)的原理與技術(shù)，為從事生物學(xué)領(lǐng)域的相關(guān)研究及其與細(xì)胞工程有關(guān)的生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)奠定良好的理論和技術(shù)基礎(chǔ)。二、教學(xué)目標(biāo)和要求（一） 理論知識(shí)方面重點(diǎn)掌握本學(xué)科的基本原理和基本技術(shù)即：細(xì)胞全能性學(xué)說在細(xì)胞工程中的指導(dǎo)作用；培養(yǎng)條件下的細(xì)胞分化和器官發(fā)生的調(diào)控；離體培養(yǎng)條件下的遺傳與變異特點(diǎn)。掌握不同組織、器官的培養(yǎng)特點(diǎn)和控制方法。了解細(xì)胞工程的各類技術(shù)在現(xiàn)代生物學(xué)與生物技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用途徑與發(fā)展?jié)摿?。（二?實(shí)踐技能方面重點(diǎn)

3、掌握細(xì)胞工程的基本操作技術(shù)無菌操作；掌握外植體選擇、愈傷組織和胚狀體誘導(dǎo)、器官發(fā)生調(diào)控等基本技術(shù)；了解細(xì)胞大批量培養(yǎng)方法，原生質(zhì)體分離與體細(xì)胞雜交技術(shù)。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與學(xué)時(shí)分配實(shí)驗(yàn)課總學(xué)時(shí)： 20 學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)名稱主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)性質(zhì)主要試材及儀器設(shè)備細(xì)胞工程基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技術(shù)目的：掌握培養(yǎng)基母液的配制方法；培養(yǎng)基的配制和滅菌技術(shù)；不同質(zhì)地實(shí)驗(yàn)用品的滅菌方法。內(nèi)容：細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室基本組成的了解和相關(guān)設(shè)備基本操作；培養(yǎng)基母液配制；愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基配制；培養(yǎng)基滅菌。4必修高壓滅菌鍋，加熱磁力攪拌器或電爐（4-8臺(tái)），天平，pH計(jì)（2-4臺(tái)），培養(yǎng)基分裝機(jī)（1-2套）。無菌操作及愈傷組織誘導(dǎo)技術(shù)目的：

4、掌握植物外植體的消毒技術(shù)、離體培養(yǎng)的無菌操作和愈傷組織誘導(dǎo)技術(shù)。內(nèi)容：外植體選擇、整理與滅菌；無菌操作室的消毒技術(shù)；外植體無菌接種（接種培養(yǎng)基為上次實(shí)驗(yàn)配制）3必修超凈工作臺(tái)（4-8）臺(tái)，小型電熱石英砂消毒器（4-8個(gè)），溫度控制培養(yǎng)箱（3臺(tái)）。器官發(fā)生與植株再生調(diào)控培養(yǎng)；愈傷組織繼代培養(yǎng)目的：了解離體培養(yǎng)中形態(tài)發(fā)生途徑與過程內(nèi)容：愈傷組織誘導(dǎo)結(jié)果的調(diào)查與統(tǒng)計(jì)；了解分化培養(yǎng)基特點(diǎn)與配方；將上次實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的愈傷組織一半轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基中；將上次實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)的愈傷組織另一半轉(zhuǎn)入愈傷組織繼代培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基均預(yù)先準(zhǔn)備。3必修同上，光照/溫度控制培養(yǎng)室。細(xì)胞懸浮系的建立目的：了解細(xì)胞懸浮系建立的全過程。內(nèi)容：

5、利用第二次實(shí)驗(yàn)繼代培養(yǎng)的愈傷組織進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)操作：包括單細(xì)胞制備；接種、細(xì)胞繼代等。2必修超凈工作臺(tái)（4-8）臺(tái)，小型電熱石英砂消毒器（4-8個(gè)），溫度搖床（4臺(tái)）。原生質(zhì)體分離與體細(xì)胞雜交目的：初步掌握植物原生質(zhì)體分離和細(xì)胞雜交的方法。內(nèi)容：利用上次實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)的植株葉片和懸浮細(xì)胞，分離原生質(zhì)體；利用分離的原生質(zhì)體進(jìn)行細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)6必修超凈工作臺(tái)，低速離心機(jī)（4臺(tái)），倒置顯微鏡，電融合儀實(shí)驗(yàn)結(jié)果調(diào)查、分析、課程論文寫作目的：掌握離體培養(yǎng)結(jié)果的觀察、數(shù)據(jù)處理及科學(xué)論文寫作的基本方法。內(nèi)容：對第二次實(shí)驗(yàn)中接種到分化培養(yǎng)基中個(gè)體再生結(jié)果進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計(jì)，對第5次實(shí)驗(yàn)細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的結(jié)果進(jìn)行檢測。統(tǒng)計(jì)結(jié)果

6、用于課程論文寫作；講解論文寫作方法與要求。（論文寫作不在課時(shí)中）2必修天平；倒置顯微鏡；體視顯微鏡；多媒體設(shè)備等。植物莖尖脫毒與病毒檢測目的：掌握植物莖尖脫毒的基本操作程序，內(nèi)容：利用馬鈴薯芽剝離莖尖培養(yǎng)；對培養(yǎng)植株采用ELASA技術(shù)進(jìn)行病毒檢測課外選修倒置顯微鏡；酶聯(lián)儀等植物離體誘導(dǎo)開花以矮牽牛為材料，通過不同誘導(dǎo)條件觀察成花條件課外選修超靜工作臺(tái)；光照培養(yǎng)室（箱）四、教學(xué)方式及考核辦法教學(xué)方式：主要采用在教師示范的基礎(chǔ)上，學(xué)生自主操作、教師分別指導(dǎo)為主?？己宿k法：本課程實(shí)驗(yàn)設(shè)置基本按照本學(xué)科研究的基本環(huán)節(jié)設(shè)計(jì)，因此，整個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)實(shí)行模擬研究型方式，每次實(shí)驗(yàn)學(xué)生進(jìn)行詳細(xì)觀察記載，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后形成完整實(shí)驗(yàn)資料，在此基礎(chǔ)上撰寫實(shí)驗(yàn)論文，作為實(shí)驗(yàn)考核的主要依據(jù)；同時(shí)，每次實(shí)驗(yàn)由指導(dǎo)老師對操作環(huán)節(jié)進(jìn)行等級評定。最后的實(shí)驗(yàn)成績按照操作成績和論文成績綜合評分。五、主要