抗肝纖維化藥物的研究與進展

1、2010屆 浙江醫(yī)藥高等?？茖W校畢業(yè)設計（論文）抗肝纖維化藥物的研究進展王友祥摘 要：肝纖維化（HF）是指肝細胞發(fā)生壞死及炎癥刺激時，肝臟中膠原蛋白等細胞外基因（ECM）的增生與降解失去平衡，導致結(jié)肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常沉積的病理過程，也稱為纖維化。研究證實，肝星狀細胞（HSC）在肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，有效干預HSC的生物學行為則能成功防治肝纖維化。目前最有效的抗HF措施就是積極有效地根除或控制慢性肝病的始發(fā)因素，對原發(fā)病的有效治療本質(zhì)上就是組織細胞外基因（ECM）沉淀或是促進其降解。最新研究發(fā)現(xiàn)，肝纖維化甚至早期肝硬化都是可以逆轉(zhuǎn)的，因而促進了抗肝纖維化藥物的研究，最終對這方

2、面的研究取得了一定的進展和和成效。本文分四部分介紹抗HF藥物，即化學藥物，中藥，基因藥物和復方聯(lián)合治療藥物。 關(guān)鍵詞：抗肝纖維化藥物；化學藥；中藥；基因治療；復方聯(lián)合治療0 引言肝纖維化（Hapatic fibrosis, HF）是慢性肝病的重要特征，是進一步向肝硬化、肝癌發(fā)展的重要環(huán)節(jié)，也是病變纏綿難愈，甚至惡變死亡的主要原因。隨之國內(nèi)外也不斷地對抗肝纖維化藥物進行研究和開發(fā)，理想的抗HF藥物應具有長達幾十年的良好耐受性，對肝臟有特異的靶效應，無毒或低毒。經(jīng)查文獻知醫(yī)藥學領(lǐng)域?qū)垢卫w維化藥物的研究成果已經(jīng)有了一定的進展。因此，本文就目前國內(nèi)外抗肝纖維化藥物中的化學藥物，中藥有效成分，基因藥物

3、，復方聯(lián)合治療藥物的研究進展加以綜述。1 化學藥物1.1 抑制炎癥反應類藥物 炎癥和免疫反應在HF發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮主要作用，抑制或減輕炎癥和免疫反應必將有助于HF的預防或促進其逆轉(zhuǎn)。許多藥物具有抗炎活性，可阻斷刺激物對肝星狀細胞（HSC）的激活熊脫氧膽酸對原發(fā)性膽汁性肝硬化病人有益，一定程度上源于其抗炎活性，解熱抗炎藥甲苯吡啶酮能有效地逆轉(zhuǎn)實驗性HF；有抗炎活性的藥物馬洛替酯在動物模型上可保護肝細胞、減少肝膠原沉積，特異性中和某些致炎因子或補充某些抗炎因子是抑制肝臟炎癥的另一途徑。白介素-1（1L-1）受體拮抗劑或可溶性腫瘤壞死因子（TNF）受體可減輕肝組織炎癥壞死，減輕HF程度；重組白介素

4、-10（一種強抗炎和抗干纖維化因子）治療慢性丙型肝炎，初步結(jié)果表明可改善肝臟炎癥，逆轉(zhuǎn)HF。1.2 作用于HSC的藥物 HSC活化是發(fā)生的關(guān)鍵，活化的HSC具有增殖、纖維生成、致炎和收縮等肌成纖維細胞的表型和生物學的行為，阻斷該細胞的活化與增殖是目前HF治療的中心策略。1TGF-1是最主要的HF促進因子，采用可溶性TGF-受體、單體或蛋白酶抑制劑等方法阻斷TGF-活性，在動物模型或細胞培養(yǎng)中證實對肝纖維化有效。調(diào)節(jié)血管活性的措施也可用于HF治療。內(nèi)皮素-1（ET-1）通過內(nèi)皮素受體（ETR）促進HSC收縮，增殖及膠原合成。其拮抗劑具有抗HF和降低門靜脈高壓的作用，機制可能是減少ET-1或增加其

5、生理性拮抗物質(zhì)一氧化氮（NO）。選擇性ETR拮抗劑LU135252，血管緊張素I受體拮抗劑在動物實驗中也有抗HF作用。與之對應，舒血管物質(zhì)如前列腺素E和NO則可抑制HSC增殖?？扇苄跃彼?甘氨酸-天門冬氨酸三肽（RGD）能與HSC膜上的整合素膜受體競爭性結(jié)合而阻斷ECM對HSC的影響，動物實驗中發(fā)現(xiàn)可抑制HSC增殖，減輕HF程度。21.3 促進誘導HSC凋亡類藥物 激活的HSC發(fā)生凋亡是HF消退的主要機制之一。HSC凋亡則活化HSC的絕對數(shù)量減少，既可減少膠原合成，又可通過減少金屬蛋白酶組織抑制物（TIMPS）表達使對膠原降解的抑制減弱。靜止期的HSC不發(fā)細菌凋亡，但激活期的HSC會凋亡，其

6、機制可能與CD95/CD95配體系統(tǒng)有關(guān)。曲霉菌素在體內(nèi)外均被證明可使活化的HSC數(shù)量減少50%，肝纖維化程度明顯減輕。精甘-天冬-絲氨酸四肽（RGDS），RGDS是一種整合素抑制劑。張曉嵐等3應用體外HSC培養(yǎng)技術(shù)，發(fā)現(xiàn)RGD5可明顯破壞纖維素連結(jié)素（FN）與HSC之間的黏附作用，干擾整合素介導的生存信號通路，誘導HSC凋亡。1.4 抑制或中和細胞因子活性類藥物 血小板源性生長因子（PDGF）和TGF-是HSC活化及產(chǎn)生ECM的主要刺激因子，HSC活化后可分泌PDGF和TGF-，二者反過來又可促進HSC的增殖，形成細胞因子自分泌放大環(huán)。TGF-是新近發(fā)現(xiàn)的一種重要的細胞因子。由兩條多肽鏈組成

7、，分子量為25KD。TGF-具有多肽性，已鑒定出5種類型，分別命名為TGF-1-5 ，在肝纖維化時TGF-1明顯升高，與膠原、FN、蛋白酶聚糖、PP等反映肝纖維化指標的增加相伴隨4。說明TGF-1與肝纖維化發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。又經(jīng)張敏5對45例慢性病毒性肝炎患者肝組織進行的TGF-1免疫細胞化學檢測，并比較也得出肝臟TGF-1 與肝纖維化關(guān)系更密切。抑制TGF-1 活性可達到抑制基質(zhì)生成和促進基質(zhì)降解的雙重目的。TGF-1抑制劑有：（1）Dcorin,一種能降解TGF-1的蛋白多；（2）潛在型結(jié)合肽（Latency-associated peptide, LAP）,一種前TGF-1相關(guān)性蛋白，在

8、培養(yǎng)的細胞中具有抗纖維化活性；（3）中和性TGF-1單克隆抗體，在細胞培養(yǎng)中顯示抗纖維化的活性；（4）重組人型抗TGF-1抗體；（5）TGF-1可溶性受體拮抗劑，如反義寡核苷酸，重組甘糖-6-磷酸鹽等。61.5 促肝細胞生長素（HGF）類藥物 HGF能抑制成纖維細胞增殖分化，減少膠原纖維生成。吳國春等7用不同劑量HGF治療肝硬化患者36例，結(jié)果顯示：大劑量HGF具有一定抗肝纖維化作用，其機制可能為：（1）HGF可促進肝細胞內(nèi)DNA的合成，保護肝細胞免疫受損傷；（2）可刺激膠原蛋白酶活性，促進膠原降解；（3）可抑制轉(zhuǎn)化生長因子1（TGF1）mRNA的過度表達和肝細胞的凋亡而間接發(fā)揮抗肝纖維化的作

9、用。71.6 細胞保護類藥物 本類藥物的作用機制為保護肝細胞阻止其凋亡?？莘窦毎?、HSC竇狀內(nèi)皮細胞等能產(chǎn)生前列腺素E1（PGE1），作為局部激素作用于肝細胞，具有保護肝細胞，阻止肝細胞壞死，改善局部微循環(huán)，調(diào)節(jié)免疫病理反應，抑制HF等多種作用8。有報道二甲基前列腺素E2（PGE2）可抑制慢性營養(yǎng)性肝損傷模型鼠肝內(nèi)膠原的沉積，顯著改善CCL4誘發(fā)HF大鼠模型的HF程度，在實驗性膽汁性HF尚能減少對PDGF和TGF-1的反應性。S-腺苷甲硫氨酸（SAM）作為一種改善細胞代謝的生化藥物，可防止肝臟因膽汁淤積等導致的肝炎，脂肪肝和肝纖維化，使肝病時炎癥與肝細胞損傷減輕，抑制HF的發(fā)生與發(fā)展，在治療H

10、F中可作為輔助用藥。2 中藥2.1 苦參素（Kwoninone） 苦參素是從中藥廣豆根中分離所得生物堿類，具有抗炎、抗病菌、抑制免疫、抗腫瘤等生物作用。朱梁9等研究發(fā)現(xiàn)苦參素能抑制肝內(nèi)膠原纖維母細胞的增殖，并且呈劑量依賴性。劉天燈10應用苦參素治療慢性乙型肝炎中度的病人，結(jié)果顯示：苦參素治療組血清肝纖維化指標ALT、TBL下降明顯，與治療前及對照組比較差異顯著性?？鄥⑺啬苡行У慕档虷A、PC、ALT、TBIL，改善臨床癥狀，減輕炎癥細胞浸潤及肝細胞壞死，具有抗肝纖維化作用。2.2 粉防E堿（Tet） Tet又名漢防已甲素，是從防已科植物粉防已根中提取的一種異喹啉化合物的生物堿，是一種鈣通道阻滯

11、劑。有研究表明，Tet除直接抑制細胞增殖，降低膠原合成，發(fā)揮抗肝纖維化作用外，經(jīng)可通過PDGF起到抗肝纖維化作用。112.3 水飛薊素 是從植物中提取的多聚不飽和磷脂，已被作為肝細胞保護藥物廣泛使用。其在膽管阻塞大鼠模型中具有抗肝纖維化效果12，故可作為抗肝纖維化的藥物。2.4 大黃素 大黃素屬單蒽類1，8-二羥基蒽衍生物，具有抗病毒、抑菌、利尿等多種作用。大黃素可使CCL4所致的HF模型大鼠肝功能明顯改善，血清HA及LN含量顯著降低，肝組織膠原蛋白含量明顯減少，并呈劑量依賴關(guān)系。其機制為保護肝細胞并抑制HSC的激活。133 基因治療藥物基因藥物是一類特殊的藥物，其成分是特定的核苷酸序列，目前

12、基因治療主要集中于調(diào)控HF相關(guān)細胞因子的表達，研究較多的有TGF-、HGF及IFN-。常見的方法有：通過基因工程技術(shù)阻斷TGF-在肝臟的信號傳導，增強肝細胞生長因子、IFN-、UPA、單核細胞趨化蛋白-1在肝臟的表達，抑制膠原mRNA表達，增加MMPS活性，抑制炎癥反應的發(fā)展，通過核酶高度靶向性地對HF有關(guān)的內(nèi)源性RNA進行破壞，通過載體將抗HF基因?qū)氚薪M織，證實均可改善肝纖維化或肝硬化患者或動物的肝功能，緩解肝纖維化，甚至使肝硬化動物免于死亡。理論上有效地抗肝纖維化基因治療須符合以下條件：（1）有明確的分子生物學機制；（2）藥效學上的優(yōu)勢；（3）藥物能在靶環(huán)境中維持較長的時間，或能在損傷部

13、位無限期的存在。在各種載體中腺病毒載體具有一定優(yōu)勢：對肝細胞有較高的親和性，并穩(wěn)定轉(zhuǎn)導HSC。注射后主要集中分布于肝臟，可減少機體產(chǎn)生全身性毒性?？笻F的基因治療能阻斷HF的發(fā)展，刺激肝細胞的增殖或恢復肝組織結(jié)構(gòu)的完整性，令人鼓舞。但轉(zhuǎn)移外源基因進入肝臟的方法和載體系統(tǒng)還要受到一定的限制。例如腺病毒蛋白的免疫原性細胞毒性，逆轉(zhuǎn)病毒載體轉(zhuǎn)染效率相對較低。由于HVJ-脂質(zhì)體介導的基因治療都是單基因治療，效果較局限。再者，人體HF發(fā)生機制更為復雜，需要考慮的方面更多，基因治療有可能引起基因組的改變，不利于人類基因的傳遞和穩(wěn)定。此外?？笻F藥物療效的判斷是基于試驗性肝損傷，而且在肝損傷早期治療。這有益

14、于了解藥物的活性及機制。但臨床上大多數(shù)患者通常是已經(jīng)有HF才前來就醫(yī)，這些患者肝臟正在發(fā)生進行性炎癥和HF，上述基因治療是否有效有待深入研究。最后提及雙環(huán)醇的抗HF作用，該藥是中國醫(yī)學科學院藥物研究所所創(chuàng)制的國家一類抗肝炎新藥，已獲國家批準正式生產(chǎn)，廣泛用于臨床慢性乙肝患者的治療。藥理研究發(fā)現(xiàn)雙環(huán)醇對多種類型的肝損傷具有明顯的保護作用，能抑制肝和T淋巴細胞Fas/FasL mRNA的表達，兼有一定的抗肝炎病毒效果。并已有研究實驗證明雙環(huán)醇對大鼠HF有抑制作用的基礎上，又能促進已形成的HF的消退。其療效和保護肝細胞，抑制炎癥反應，調(diào)節(jié)肝TGF-SMAD信號傳導，降低肝臟層黏連蛋白、血小板源性生長

15、因子、MMP2、TIMP1及羥脯氨酸含量，增加肝臟膠原酶活性有關(guān)14。慢性肝炎久治不愈最終發(fā)展為肝硬化、肝癌。如果能在治療肝炎的同時，又能發(fā)揮防治肝纖維化的作用，則具有重要的理論和實際意義，很值得在臨床觀察雙環(huán)醇抗HF的效果。4 聯(lián)合用藥 4.1復方牛胎肝提取物聯(lián)合拉米夫定 經(jīng)勞國琴，吳勇等15所做的“復方牛胎肝提取物聯(lián)合拉米夫定對慢性乙型肝炎患者肝纖維化的影響”結(jié)果證明了復方牛胎肝提取物聯(lián)合拉米夫定治療慢性乙型肝炎肝纖維化有顯著療效。2000年1月-2003年10月，由姚志敏16應用丹參聯(lián)合復方甘草酸苷治療肝纖維化患者45例，并與單用丹參注射液和單用復方甘草酸苷、常規(guī)用藥作比較，取得了較好的

16、療效，得出結(jié)論抗肝纖維化采用丹參注射液聯(lián)合復方甘草酸苷的治療方案優(yōu)于單用丹參注射液或復方甘草酸苷的治療方案。5 結(jié)論與展望綜上所述，抗HF藥物的研究雖在模型上取得了重要進展，研究思路和藥物作用靶點也相當明確，但從臨床治療應用來評估，抗HF藥物研究尚未取得重大突破性進展。但從化學藥物、生物制劑、中藥等實驗性抗肝纖維化研究已較深入，仍存在許多問題。筆者認為以后的工作中應積極開展動物模型的研究，開展多因素造模，尋找出與人類肝纖維化相近的動物模型，并且要加抗病毒治療的研究。同時從中醫(yī)中藥發(fā)掘防治HF新藥有著很大潛力，同樣也應當加強綜合研究。 參考文獻1 季鳳，鳳良元，歐敏.治療肝纖維化藥物現(xiàn)狀概述J.

17、安徽醫(yī)藥，2005，4（4）：244-245.2 胡慶偉，劉耕陶.抗肝纖維化藥物研究的進展J.藥學學報，2006，41（1）：7-11.3 張曉嵐，姜慧卿，劉麗，等.精甘-天冬絲氨酸四肽對肝星狀細胞整合素信號及凋亡的影響J.中華肝臟病雜志，2003，11（8）：479-82.4 胡紅顏，侯振江.肝纖維化實驗室檢查的國內(nèi)研究概況J.實用醫(yī)藥雜志，2005，12（12）：1130.5 張敏，張玲霞，辛紹杰，等.TGF-1 與病毒性肝炎肝纖維化的關(guān)系J.臨床肝膽病雜志，2000，16（1）：32.6 胡慶偉，劉耕陶.抗肝纖維化藥物研究的進展J.藥學學報，2006，41（1）：7-11.7 吳國春，何

18、忠華，王雄.不同劑量促肝細胞生長素治療肝硬化血清肝纖維化指標的變化J.江蘇醫(yī)藥，2003，29（6）：456-8.8 Akamatsu K, Yamasak, Y, Nishikawa M, etal. Synthesis and pharmacological activity of a novel watersoluble hepatocyte-specific polymeric prodrug of prostaglandin E(1) using lactosylated poly as a carrierJ. Biochen Pharmacol,2001,62:1531-1536.9 朱梁.苦參素對成纖維細胞增殖形態(tài)學及轉(zhuǎn)化生長因子1的影響J.中國新藥與臨床雜志，2000，19：4615.10 劉天燈.苦參素抗肝纖維化作用的臨床評價J.安徽醫(yī)藥，2002，6（2）：25.11 田子彬,劉思良，李定國，等.漢防已甲素對血小板衍生生長因子促細胞增殖效應的阻斷作用J.中華醫(yī)學雜志，1997，77（1）：50-3.12 于樂成，顧長海.水飛薊素藥理學效應研究進展J.中國醫(yī)院藥學雜志，2001，21（8）493-4.13 胡慶偉，劉耕陶.抗肝纖維化藥物研究的進展J.藥學學報，2006，41（1）：9-10.14 胡慶偉，劉耕陶.抗肝纖維化藥