芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究課件

1、芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究Anand IS. Heart Failure, 1997芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究 6. aquaporin-2 芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究Aquaporin(AQP)Aquaporin(AQP)是具有高度選擇性水通道的同源蛋白質(zhì)家族，在維持機(jī)是具有高度選擇性水通道的同源蛋白質(zhì)

2、家族，在維持機(jī)體的水平衡中起著重要作用，并且與水平衡紊亂所致疾病有密切關(guān)系。體的水平衡中起著重要作用，并且與水平衡紊亂所致疾病有密切關(guān)系。 AQP2是腎臟在生理?xiàng)l件下最主要的受是腎臟在生理?xiàng)l件下最主要的受AVP調(diào)節(jié)的水通道，是目前唯一發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)的水通道，是目前唯一發(fā)現(xiàn)的其基因突變可導(dǎo)致腎性尿崩癥的的其基因突變可導(dǎo)致腎性尿崩癥的Aquaporin水通道蛋白，被認(rèn)為是維持體內(nèi)水通道蛋白，被認(rèn)為是維持體內(nèi)水平衡調(diào)節(jié)的必須物質(zhì)。水平衡調(diào)節(jié)的必須物質(zhì)。Nielsen S, Physiol Rev. 2002; 82: 205244.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究充血性心力衰

3、竭大鼠腎臟充血性心力衰竭大鼠腎臟AQP2AQP2水通道水通道m(xù)RNAmRNA表達(dá)的改變表達(dá)的改變C C HF1 HF1 HF2 HF2Xu DL. J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究 C C HF1 HF1 HF2 HF2 MXu DL. J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究研究背景研究背景芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究研研 究究 背背 景景CHFCHF大鼠血漿大鼠血漿A

4、VPAVP較對照組升高，同時(shí)上調(diào)腎臟較對照組升高，同時(shí)上調(diào)腎臟AQP-2AQP-2的基因和蛋白表達(dá)。的基因和蛋白表達(dá)。CHFCHF時(shí)水潴留的重要途徑時(shí)水潴留的重要途徑: : 心輸出量下降心輸出量下降 垂體分泌血管加壓素（垂體分泌血管加壓素（AVPAVP ） 腎集合管主細(xì)胞腎集合管主細(xì)胞V2-R AQP-2V2-R AQP-2表達(dá)上調(diào)表達(dá)上調(diào) 集合管水重吸收集合管水重吸收 水潴留。水潴留。下調(diào)腎臟下調(diào)腎臟AQP-2AQP-2的表達(dá)，是否可以成為糾正的表達(dá)，是否可以成為糾正CHFCHF患者水潴留、緩解臨床癥狀、改善心臟功能的靶患者水潴留、緩解臨床癥狀、改善心臟功能的靶點(diǎn)之一？點(diǎn)之一？Xu DL.

5、J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.許頂立等許頂立等, 中華醫(yī)學(xué)雜志中華醫(yī)學(xué)雜志,1998;78(2):118-120 芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究V2拮抗劑(OPC-31260)對充血性心力衰竭大鼠腎臟AQP2水通道蛋白mRNA表達(dá)的影響 C HF2 HF+V C HF2 HF+V C HF2 HF+V 腎皮質(zhì)腎皮質(zhì) 腎外髓質(zhì)腎外髓質(zhì) 腎內(nèi)髓質(zhì)腎內(nèi)髓質(zhì)Xu DL. J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究V2拮抗劑(OPC-31260

6、)對充血性心力衰竭大鼠腎臟內(nèi)髓質(zhì)AQP2水通道蛋白表達(dá)的影響 C C HF2 HF2 HF+V HF+V MXu DL. J Chin Invest, 1997; 99: 1500-1505.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究研研 究究 背背 景景 中藥芪藶強(qiáng)心的成分主要包括黃芪、附子及藶葶子中藥芪藶強(qiáng)心的成分主要包括黃芪、附子及藶葶子等中藥材，有益氣溫陽、活血通絡(luò)、利水消腫的作用。等中藥材，有益氣溫陽、活血通絡(luò)、利水消腫的作用。已有研究報(bào)道，芪藶強(qiáng)心可以增強(qiáng)心肌收縮力，增已有研究報(bào)道，芪藶強(qiáng)心可以增強(qiáng)心

7、肌收縮力，增加尿量，改善加尿量，改善CHFCHF患者的心臟功能，患者的心臟功能，那么芪藶強(qiáng)心是那么芪藶強(qiáng)心是否可以影響否可以影響CHFCHF大鼠腎臟大鼠腎臟AQP-2AQP-2的表達(dá)？的表達(dá)？因此，本研究選用芪藶強(qiáng)心作為干預(yù)藥物，觀察芪因此，本研究選用芪藶強(qiáng)心作為干預(yù)藥物，觀察芪藶強(qiáng)心對藶強(qiáng)心對CHFCHF大鼠尿量及腎臟大鼠尿量及腎臟AQP-2AQP-2表達(dá)的影響。表達(dá)的影響。芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究在結(jié)扎前降支后，觀察到前壁供血區(qū)心肌變蒼白。在結(jié)扎前降支后，觀察到前壁供血區(qū)心肌變蒼白。ECG出現(xiàn)出現(xiàn)J點(diǎn)抬高點(diǎn)抬高0.2 mV，提示結(jié)扎冠脈成功。，提示結(jié)扎

8、冠脈成功。AMI術(shù)后術(shù)后4周，存活大鼠經(jīng)超聲心動圖檢查后，見大鼠心周，存活大鼠經(jīng)超聲心動圖檢查后，見大鼠心臟前壁變薄，室壁運(yùn)動減弱，確定臟前壁變薄，室壁運(yùn)動減弱，確定CHF大鼠造模成功。大鼠造模成功。 CHF模型標(biāo)準(zhǔn)：模型標(biāo)準(zhǔn)：選用選用2月齡，雄性月齡，雄性SD大鼠，體重大鼠，體重200-250g，采用結(jié)扎左冠狀動脈致急性心，采用結(jié)扎左冠狀動脈致急性心肌梗死（肌梗死（AMI）后心力衰竭大鼠模型。）后心力衰竭大鼠模型。芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究 芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究結(jié)結(jié) 果果 Compared to CTL-1, :

9、P 0.01.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究結(jié)結(jié) 果果 The changes of urinary volume in different groups rats during 1 week treatment QH-1組、組、QM-1組、組、QL-1組大鼠隨著用藥時(shí)間的延長尿量顯著增加組大鼠隨著用藥時(shí)間的延長尿量顯著增加7654321bef ore時(shí)間（天）時(shí)間（天）24. 0022. 0020. 0018. 0016. 0014. 0012. 00尿尿量量（m lm l ）Q L-1Q M -1Q H -1C H F-1C TL-1分組芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰

10、竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒光定量PCRPCR檢測各組檢測各組V2-RmRNAV2-RmRNA變化變化 結(jié)結(jié) 果果 Compared to CTL-1,: P 0.01.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒光定量PCRPCR檢測各組檢測各組AQP-2-RmRNAAQP-2-RmRNA變化變化 結(jié)結(jié) 果果 CHF-1CHF-1組組AQP-2 mRNAAQP-2 mRNA表達(dá)較表達(dá)較CTL-1CTL-1組顯著增加（組顯著增加（P P0.010.01）而芪藶強(qiáng)心治療而芪藶強(qiáng)心治療1 1周后，周后，QH-1QH-1組、組、QM

11、-1QM-1組、組、QL-1QL-1組組AQP-2 AQP-2 mRNAmRNA表達(dá)與表達(dá)與CHF-1CHF-1組相比均無顯著性差異（組相比均無顯著性差異（P P0.050.05）Compared to CTL-1,: P 0.01.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究結(jié)結(jié) 果果 29KD3645KD 1 2 3 4 5. .注：注：1 1為為CTL-1CTL-1組組; 2; 2為為CHF-1CHF-1組組; 3; 3、4 4、5 5分別為分別為QH-1QH-1、QM-1QM-1、QL-1QL-1組組Compared to CTL-1,: P 0.01.芪藶強(qiáng)心對慢性

12、心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究結(jié)結(jié) 果果 : P 0.01, Compared to CTL-4; : P 0.01, Compared to CHF-4 group; : P 0.05, Compared to QH-4.芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究結(jié)結(jié) 果果 The changes of urinary volume in different groups rats during 4 week treatment 芪藶強(qiáng)心治療芪藶強(qiáng)心治療4 4周后，周后，QH-4QH-4組、組、QM-4QM-4組、組、QL-4QL-4組尿量較治療組尿量較

13、治療前顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。前顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2825211713951bef ore時(shí)間（天）時(shí)間（天）26. 0024. 0022. 0020. 0018. 0016. 0014. 00尿尿量量（m lm l ）Q L-4Q M -4Q H -4C H F-4C TL-4分組芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒光定量PCRPCR檢測各組檢測各組V2-RmRNAV2-RmRNA變化變化 結(jié)結(jié) 果果 Compared to CTL-4, : P 0.01; Compared to CHF-4 group, : P 0.05, : P

14、 0.01;Compared to QH-4,: P 0.05.00.511.522.53CTL-4CHF-4QH-4QM-4QL-4V2-R mRNA(% of control)芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒光定量PCRPCR檢測各組檢測各組AQP-2mRNAAQP-2mRNA變化變化 結(jié)結(jié) 果果 Compared to CTL-4, : P 0.01; Compared to CHF-4 group, : P 0.05, : P 0.01;Compared to QH-4,: P 0.05.00.511.522.533.5CTL-4CHF-

15、4QH-4QM-4QL-4AQP2 mRNA(% of control)芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究結(jié)結(jié) 果果 29KD3645KD 1 2 3 4 5 Compared to CTL-4, : P 0.01; Compared to CHF-4 group, : P 0.01;Compared to QH-4,: P 0.05.注：注：1 1為為CTL-4CTL-4組組; 2; 2為為CHF-4CHF-4組組; 3; 3、4 4、5 5分別為分別為QH-4QH-4、QM-4QM-4、QL-4QL-4組組 00.511.522.53CTL-4CHF-4QH-4QM-4QL-4AQP2 protein expression(% of control)芪藶強(qiáng)心對慢性心力衰竭大鼠腎臟AQP2及心臟功能的影響基礎(chǔ)研究腎臟水通道蛋白腎臟水通道蛋白2 2（AQP2AQP2）增加集合管對水的重吸收，對）增加集合管對水的重吸收，對CHFCHF時(shí)水潴留起著重要的作用時(shí)水潴留起著重要的作用各組大鼠腎臟髓質(zhì)各組大鼠腎臟髓質(zhì)AQP2AQP2免疫熒光表達(dá)，假手術(shù)組腎臟表達(dá)很少，免疫熒光表達(dá)，假