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文檔簡介
1、微量加樣器的質(zhì)控微量加樣器是微量酶免疫測定中加樣時必用的設(shè)備,其使用和校準(zhǔn)對酶免疫測定結(jié)果有直接的影響,以下對如何正確地使用微量加樣器及其校準(zhǔn)等進(jìn)行介紹:1. 加樣器的使用1.1 吸液 標(biāo)準(zhǔn)吸液步驟如下: 把按鈕壓至第一停點(diǎn); 垂直握持加樣器,使吸頭浸入液樣中,浸入液體深度視型號而定(見附表)不同加樣器允許浸入液體深度加樣器型號浸入液體深度P2和P101mmP20和P1002-3mmP200和P10002-4mmP50003-6mmP10ML5-7mm 緩慢、平穩(wěn)地松開按鈕,吸液樣。等一秒鐘,然后將吸頭提離液面。用藥用吸紙抹去吸嘴外面可能附著的液滴,小心勿觸及吸頭口。1.2. 放液 將吸頭口貼
2、到容器內(nèi)壁并保持10°-40°傾斜 平穩(wěn)地把按鈕壓到第一停點(diǎn)。第一秒鐘后再把按鈕壓至第二停點(diǎn)以排除剩余液體。 壓住按鈕,同時提起加樣器,使吸頭貼容器壁察過。 松開按鈕。 按吸頭彈射器除去吸頭(只有改用不同液體時才需要更換吸頭)。1.3. 預(yù)洗 當(dāng)裝上一個新吸頭(或改變吸取的容量值)時應(yīng)預(yù)洗吸頭,先吸入一次液樣并將之排回原容器中。預(yù)洗新吸頭能有效提高移液的精確度和重現(xiàn)性。這是因?yàn)榈谝淮挝〉囊后w會在吸頭內(nèi)壁形成液膜,導(dǎo)致計量誤差。而同一吸頭在連續(xù)操作時液膜相對保持不變,故第二次吸液時誤差即可消除。1.4. 致密及粘稠液體的吸取 對于密度高于水的液體,可將容量計的讀數(shù)調(diào)到低于所
3、需值來進(jìn)行補(bǔ)償。例如:用P20移液器轉(zhuǎn)移10ml血清。先將讀數(shù)調(diào)到10ml,吸取后以重量法測定。如實(shí)測體積為9.5ml,即偏差0.5ml并重復(fù)一次。如第二次測定仍不夠準(zhǔn)確,根據(jù)偏差再作調(diào)整。排放致密或粘稠液體時,宜在第一停點(diǎn)多等一二秒鐘再壓到第二停點(diǎn)。1.5. 加樣器吸頭 加樣器吸頭是整個移液系統(tǒng)的有機(jī)組成部分,對其基本要求是,必須有高機(jī)械、熱力學(xué)和化學(xué)穩(wěn)定性,且純度高,生產(chǎn)過程純凈,無有機(jī)或化學(xué)物質(zhì)(如染料)和重金屬污染。選擇密封良好的環(huán)口、薄壁和嘴口尖細(xì)的吸頭,將使得在加樣時,吸頭的安裝或卸脫更加容易。吸頭管壁有彈性,加樣吸液時不會產(chǎn)生旋渦,如此加樣的精度就更高。吸頭嘴口無毛刺,表面光潔平
4、滑,使得其沾濕性極小,可避免液體留外壁引起的誤差。吸頭應(yīng)與加樣器上吸頭套筒密封完好,可防止由于空氣泄漏而造成加樣精度或準(zhǔn)確度的誤差。此外,吸頭還應(yīng)有液體容積刻度線。D200吸頭在20ml和100ml處有標(biāo)記;D1000吸頭在300ml處有標(biāo)記,D10吸頭在2ml處有標(biāo)記。最后,吸頭應(yīng)可在1211Pa壓力下消毒20min。如果在使用加樣中,想絕對避免樣品與樣品、樣品與加樣器或樣品與操作人員之間的污染,建議使用Diamond帶濾芯吸頭。Diamond帶濾芯吸頭可以經(jīng)高溫消毒,其內(nèi)置濾芯不會損壞。2. 加樣器的校準(zhǔn)加樣器容量性能的鑒定,可依據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)文件ISO/DIS8655和國家技
5、術(shù)監(jiān)督局頒發(fā)的有關(guān)定量、可調(diào)移液器的中華人民共和國國家計量檢定規(guī)程定量、可調(diào)移液器試行檢定規(guī)程(JJG646-90)規(guī)定的重量測試方法。這是目前用于此類儀器有效的校準(zhǔn)方法。加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序2.1. 適用加樣器范圍 各種品牌、型號的固定、可調(diào)和多通道加樣器。2.2. 校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求 室溫20-25,測定中波動范圍不大于±0.5。 電子天平:放置于無塵和震動影響的臺面上,房間盡可能有空調(diào)。稱量時,為保證天平的濕度(相對濕度60%-90%),天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯。 小燒杯:5-10ml體積。 測定液體:溫度為20-25的去氣雙蒸水。2.3. 選定校準(zhǔn)體積 擬校
6、準(zhǔn)體積;加樣器標(biāo)定體積的中間體積;最小可調(diào)體積(不小于擬校準(zhǔn)體積的10%)。如為固定體積加樣器,則只有一種校準(zhǔn)體積。2.4. 校準(zhǔn)步驟 將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積,選擇合適的吸頭。 調(diào)節(jié)好天平。 來回吸吹蒸餾水3次,以使吸頭濕潤,用紗布拭干吸頭。 垂直握住加樣器,將吸頭浸入液面2-3mm處,緩慢(1-3s)一致地吸取蒸餾水。 將吸頭離開液面,靠在管壁,去掉吸頭外部的液體。 將加樣器以30°角放入稱量燒杯中,緩慢一致地將加樣器壓至第一檔,等待1-3s,再壓至第二檔,使吸頭里的液體完全排出。 記錄稱量值。 擦干吸頭外面。 按上述步驟稱量10次。 取10次測定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量,按蒸餾水在不同溫度及氣壓下的重量與體積的換算因子計算體積。然后,按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)加樣器。2.5加樣器的維護(hù)保養(yǎng)程序加樣器應(yīng)根據(jù)使用頻率進(jìn)行維護(hù),但至少應(yīng)每3個月進(jìn)行一次,具體方法如下:.一般維護(hù)可用中性洗滌劑清潔,或者用60的異丙醇,然后用蒸餾水反復(fù)洗滌,去除洗滌劑或異丙醇,晾干。清潔后活塞處可使用一定量的潤滑劑。.如果有液體進(jìn)入加樣器內(nèi)的嚴(yán)重污染,可將加樣器拆開后進(jìn)行清潔,具體拆開步驟參照加樣器說明書。.高壓消毒,有的加樣器的吸管部分可高壓消毒,但需注意的是消毒時不可超溫超時,也不能擠壓放置,以免造成變形。.可調(diào)式移液器在不使用時應(yīng)妥善地豎立放于支架上,
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