網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

1、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)1.項(xiàng)目名稱網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)2.檢驗(yàn)?zāi)康?.1觀察貧血療效2.2骨髓移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù)2.3其他疾病協(xié)診等臨床實(shí)驗(yàn)室3.檢驗(yàn)原理:網(wǎng)織紅細(xì)胞是尚未完全成熟的紅細(xì)胞,其胞漿內(nèi)尚存在有嗜堿性的RNA物質(zhì),甲藍(lán)活體染色后,其胞漿內(nèi)尚存在有嗜堿性的RNA物質(zhì),經(jīng)煌焦油藍(lán)或新亞呈淺藍(lán)或深藍(lán)色的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。4.性能參數(shù)4.1重復(fù)性4.2分析和計(jì)算參數(shù):百分比(%4.3樣本量:染液量=1:14.4精密度5.原始樣品系統(tǒng):全血6.容器和添加劑類型容器采用真空負(fù)壓專用抗凝管,添加劑類型為0.109M乙二胺四乙酸鉀7.試及顯微鏡7.1 10G/L新亞甲藍(lán)(或煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液:新亞甲藍(lán) 1.0G枸

2、櫞酸鈉0.4G氯化鈉0.85G溶于雙蒸餾水100ML中,混勻,過(guò)濾后備用。7.2 顯微鏡7.2.1 商標(biāo)8.校準(zhǔn)程序:顯微鏡的驗(yàn)證,光路系統(tǒng)校正燈泡大約半年更換一次9.程序步驟:9.1標(biāo)本采集與要求9.1.1標(biāo)本采集:抽取靜脈血1.8ml,加入到含有乙二胺四乙酸鉀溶液的抗凝真空試管中,并輕輕顛倒10次使之充分混勻,不得有凝塊、不得形成泡沫,總量不得超過(guò)2.0±0.2ml,并在試管上做好標(biāo)識(shí)。采血應(yīng)避免溶血,采血后2小時(shí)內(nèi)送到檢驗(yàn)科,需要運(yùn)輸時(shí)應(yīng)在低溫條件下運(yùn)輸。采集標(biāo)本時(shí)宜“一針見(jiàn)血”,以防止組織損傷。9.1.2不合格標(biāo)本的處理對(duì)凝固、有凝塊、采血量不符合要求、無(wú)條碼或無(wú)標(biāo)識(shí)等不合格

3、的標(biāo)本,距采集時(shí)間超過(guò)2小時(shí)并且沒(méi)有按要求儲(chǔ)存的標(biāo)本,按程序文件樣品核收、登記和保存程序處理9.1.3標(biāo)本保存檢測(cè)應(yīng)在標(biāo)本采集后2小時(shí)內(nèi)完成,28保存不超過(guò)4小時(shí),分析后的標(biāo)本保存三天。9.2檢驗(yàn)前準(zhǔn)備9.2.1把接收到的標(biāo)本按順序編寫序號(hào)。9.2.2準(zhǔn)備清潔、干燥、無(wú)塵、無(wú)油脂的載玻片、蓋玻片、毛細(xì)管,玻璃筆。9.3病人標(biāo)本的檢驗(yàn)9.3.1取小試管1支加10G/L新亞甲藍(lán)鹽水溶液2滴。9.3.2加入末梢血(或EDTA鉀抗凝靜脈血2滴于上述試管中,混勻。9.3.3室溫下放置1015MIN后,取1滴制成薄片。9.3.4油鏡下至少計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)。9.3.5計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)=

4、計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)/1000網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù)(個(gè)/L=網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比數(shù)*紅細(xì)胞數(shù)/L 【注意】1.活體染色時(shí)間不能過(guò)短。室溫低時(shí),放37攝氏度恒溫箱。2.最好制兩張片,每張計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞,避免分布不均引起的誤差。涂片要薄而均勻,不使紅細(xì)胞重疊。3.為計(jì)數(shù)方便,可于目鏡中放一中間有孔硬紙,縮小視野便于計(jì)數(shù)。4.試劑應(yīng)定期重配,以免變質(zhì)沉淀。5.染液與血液比例約為1:1,嚴(yán)重貧血時(shí)可適量增加血液的比例。10.質(zhì)量控制10.1顯微鏡法網(wǎng)織紅細(xì)胞目視激計(jì)數(shù)誤差較大,影響因素主要有:操作人對(duì)網(wǎng)織紅細(xì)胞認(rèn)識(shí)不同;血涂片的好壞;計(jì)數(shù)紅細(xì)胞數(shù)量的多少和計(jì)數(shù)方法等。10.2儀器法歲可計(jì)

5、數(shù)紅細(xì)胞1000050000個(gè),但如存在Howell-Jolly小體、有核紅細(xì)胞、巨血小板,則可見(jiàn)假陽(yáng)性。11.干擾12.參考區(qū)間網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)成人:0.0050.015新生兒:0.030.06兒童:0.0050.015網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù):成人:(2484*10*9/L13.實(shí)驗(yàn)室解釋:13.1判斷骨髓紅細(xì)胞造血情況13.1.1網(wǎng)織紅細(xì)胞增多:表示骨髓紅細(xì)胞生成旺盛。常見(jiàn)于:1.溶血性貧血,溶血時(shí)由于大量網(wǎng)織紅細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán),RET可增至6%8%或以上,急性溶血時(shí),可達(dá)到20%左右,嚴(yán)重者可在50%以上,絕對(duì)值常超過(guò)100*10*9/L。急性失血后510D網(wǎng)織紅細(xì)胞達(dá)到高峰,2周后恢復(fù)正常。

6、2.放射治療和化學(xué)治療后,造血恢復(fù)時(shí),可見(jiàn)RET短暫和迅速增高,是表明檢測(cè)幼稚RET的變化骨髓恢復(fù)較敏感的指標(biāo)。3.紅系無(wú)效造血時(shí),骨髓檢查表明紅系增生活躍,而外周網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)正?；騼H輕度高。13.1.2網(wǎng)織紅細(xì)胞減少:見(jiàn)于再生障礙性貧血、溶血性貧血再障危象時(shí)。典型的再生障礙性貧血網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)低于0.005,網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值低于15*10*9/L,為診斷其標(biāo)準(zhǔn)之一。13.2觀察貧血療效缺鐵性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血治療過(guò)程中,如RET增高,表明治療有效,說(shuō)明骨髓增生功能良好;如RET不增高,則表明治療無(wú)效,并提示有骨髓造血功能障礙,需進(jìn)一步檢驗(yàn)。RET是貧血患者隨訪檢查的項(xiàng)目之一。13.3骨髓

7、移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù)骨髓移植后第21天,如RET大于15*10*9/L,常表明無(wú)移植并發(fā)癥;RET小于15*10*9/L,伴中性粒細(xì)胞和血小板增高,可能為骨髓移植失敗。14.安全性防護(hù)措施14.1在操作顯微鏡時(shí)應(yīng)按照儀器作業(yè)指導(dǎo)書進(jìn)行操作,防止受傷、觸電等14.2請(qǐng)帶上橡膠手套進(jìn)行染色、沖片,在工作完成后,用消毒液清洗雙手,以免發(fā)生感染14.3在涂片時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎,應(yīng)始終戴上橡膠手套,以避免發(fā)生細(xì)菌感染,若樣本濺入眼睛或者傷口,須用大量清水沖洗,并立即就診14.4在配制染液時(shí):如果試劑不慎落入眼睛,立即用大量清水沖洗,并接受治療;如果不慎吞入試劑,立即向醫(yī)生求助,喝入大量清水,并盡量嘔出吞入試劑;如果試劑沾上皮膚或者手,用大量清水沖洗;在丟棄廢液和消耗品時(shí),請(qǐng)按照處理醫(yī)療、傳染性、工業(yè)性廢水的步驟進(jìn)行處理,如果其中含有血樣,可能導(dǎo)致細(xì)菌感染.15.變異的潛在來(lái)源15.1