培養(yǎng)基及配制

1、培養(yǎng)基培養(yǎng)基種類種類成分成分配制配制技術(shù)技術(shù)一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基 培養(yǎng)基的成分培養(yǎng)基的成分3 碳源和能源碳源和能源 4 植物激素植物激素 1 無機鹽無機鹽 2 有機物有機物 5 瓊脂瓊脂 6 輔助物質(zhì)輔助物質(zhì)1 1 無無 機機 鹽鹽 元素名稱元素名稱 添加形式添加形式 N KNO3, NH4NO3大量大量 P KH2PO4 NaH2PO4元素元素 K KCl KNO3 (0.5mmol/L) Ca CaCl2 2H2O Mg Mg2SO4 7H2O S Fe FeNa2-EDTA微量微量 B H3BO3元素元素 Mn MnSO4( 0.5mmol/L) Cu CuSO4 Mo Na2MoO4

2、2H2O Cl CaCl2 2H2O1）大量元素）大量元素N是蛋白質(zhì)、酶、葉綠素、維生素、核酸、磷脂、是蛋白質(zhì)、酶、葉綠素、維生素、核酸、磷脂、生物堿等的組成成分，在植物生命活動中占有重生物堿等的組成成分，在植物生命活動中占有重要的位置。要的位置。 P是磷脂的主要成分。培養(yǎng)基中常用是磷脂的主要成分。培養(yǎng)基中常用KH2PO4 NaH2PO4等。等。 K對碳水化合物合成，轉(zhuǎn)移，以及氮素代謝等有對碳水化合物合成，轉(zhuǎn)移，以及氮素代謝等有密切關(guān)系。密切關(guān)系。Mg、S、Ca是葉綠素的組成成分，又是激酶的是葉綠素的組成成分，又是激酶的活化劑，對核蛋白體結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定作用；活化劑，對核蛋白體結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定作用；S

3、是含是含S氨基酸的蛋白質(zhì)的組成成分。氨基酸的蛋白質(zhì)的組成成分。Ca是構(gòu)成細胞壁的成分，對細胞分裂，穩(wěn)定質(zhì)是構(gòu)成細胞壁的成分，對細胞分裂，穩(wěn)定質(zhì)膜結(jié)構(gòu)有顯著作用，此外，膜結(jié)構(gòu)有顯著作用，此外，Ca及鈣調(diào)素在細胞及鈣調(diào)素在細胞信號轉(zhuǎn)導中起重要作用。信號轉(zhuǎn)導中起重要作用。2）微量元素）微量元素 在微量元素中，在微量元素中，鐵鐵的使用最大，鐵的使用最大，鐵是一些氧化酶的組成成分。同時又是葉是一些氧化酶的組成成分。同時又是葉綠素形成的必要條件。綠素形成的必要條件。 由于培養(yǎng)基的由于培養(yǎng)基的pH較高，所以培養(yǎng)中較高，所以培養(yǎng)中幾乎都使用不易分解的乙二胺四乙酸鐵幾乎都使用不易分解的乙二胺四乙酸鐵這種鰲合物來

4、防止鐵的沉淀。這種鰲合物來防止鐵的沉淀。 硼硼與蛋白質(zhì)合成、糖類運輸有著密切的關(guān)與蛋白質(zhì)合成、糖類運輸有著密切的關(guān)系；系； 銅銅是某些氧化酶的成分，能夠促進離體根是某些氧化酶的成分，能夠促進離體根的生長；的生長； 錳錳參與植物的光合、呼吸代謝；參與植物的光合、呼吸代謝； 鉬鉬參與氮素的代謝；參與氮素的代謝； 氯氯是光合作用水光解的活化劑。是光合作用水光解的活化劑。 微量元素的主要作用是作為酶的輔助微量元素的主要作用是作為酶的輔助因子或激活劑參與代謝的調(diào)節(jié)。因子或激活劑參與代謝的調(diào)節(jié)。No MS salts沒有任何生長特征沒有任何生長特征MS salts 0.47 g. l-1 長出更多的根長出

5、更多的根MS salts 9.52 g. l-1 長大量的再生苗而長大量的再生苗而無根無根 2有有機機物物2.1維生素維生素2.2 肌肌 醇醇2.4 氨基酸氨基酸2.3天然復合物天然復合物種類：種類： 硫胺素硫胺素-維生素維生素B1 VB1 吡哆素吡哆素-維生素維生素B6 VB6 煙煙 酸酸-維生素維生素B3 Vpp 抗壞血酸抗壞血酸-維生素維生素C Vc 以及以及B5、生物素、葉酸。、生物素、葉酸。濃度：濃度：0.11.0mg/L作用：作用： VB1促愈傷組織產(chǎn)生，提高活力促愈傷組織產(chǎn)生，提高活力VB6 促根生長促根生長Vpp與代謝和胚發(fā)育有關(guān)與代謝和胚發(fā)育有關(guān)Vc 防組織褐變防組織褐變2.

6、1 維生素維生素2.2 肌醇肌醇 促進愈傷組織生長、促進愈傷組織生長、胚狀體和芽的形成胚狀體和芽的形成 對組織細胞繁殖、對組織細胞繁殖、分化的促進作用分化的促進作用 濃度濃度100 mg/L100 mg/L 2有有機機物物2.1維生素維生素2.2 肌肌 醇醇2.4 氨基酸氨基酸2.3天然復合物天然復合物椰乳：椰乳：促愈傷組織和細胞培養(yǎng)，促愈傷組織和細胞培養(yǎng)，用量用量1020%。使用注。使用注意莖尖大小。意莖尖大小。 2.3 天然復合物天然復合物香蕉泥：香蕉泥：對對pH值緩沖大，用量值緩沖大，用量150 200ml/L ， 應用應用在蘭花組培。在蘭花組培。 水解酪水解酪(乳乳)蛋白：蛋白：濃度濃

7、度100-200mg/L，多用于微莖尖培養(yǎng)。多用于微莖尖培養(yǎng)。天然復合物天然復合物馬鈴薯提取液：馬鈴薯提取液：對對pH值緩沖大，用量值緩沖大，用量150-200g/L，使苗壯。，使苗壯。其它：其它：NoImage2.4 氨基酸氨基酸 p 種類：甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、絲氨酸、丙種類：甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、絲氨酸、丙氨酸、半胱氨酸以及酰胺類物質(zhì)（如天門冬酰胺）氨酸、半胱氨酸以及酰胺類物質(zhì)（如天門冬酰胺）和多種氨基酸的混合物（如水解酪蛋白、水解乳蛋和多種氨基酸的混合物（如水解酪蛋白、水解乳蛋白）等。白）等。p 注意：氨基酸類物質(zhì)只有在含有無機氮的情況注意：氨基酸類物質(zhì)只有在含有無機氮的情況下，對

8、離體組織生長才有較好的效果。下，對離體組織生長才有較好的效果。 培養(yǎng)基的成分培養(yǎng)基的成分 第一節(jié)第一節(jié)3 碳源和能源碳源和能源 4 植物激素植物激素 1 無機鹽無機鹽 2 有機物有機物 5 瓊脂瓊脂 6 輔助物質(zhì)輔助物質(zhì)3 碳源和能源碳源和能源種類：種類：蔗糖或葡萄糖、果糖、砂糖等。蔗糖或葡萄糖、果糖、砂糖等。蔗糖濃度：蔗糖濃度：1-5%，胚培養(yǎng)為，胚培養(yǎng)為4-15%。注意：注意：高壓滅菌部分糖會分解。高壓滅菌部分糖會分解。大生產(chǎn)時可用白砂糖。大生產(chǎn)時可用白砂糖。作用：作用：作為離體組織賴以生長的碳源作為離體組織賴以生長的碳源使培養(yǎng)基維持一定的滲透壓（一般在使培養(yǎng)基維持一定的滲透壓（一般在1.

9、5-4.1MPa）蔗糖蔗糖 （0%）蔗糖含量（蔗糖含量（ 1%）蔗糖含量蔗糖含量（ 5%）在外植體上既沒有在外植體上既沒有芽發(fā)生，也沒有根芽發(fā)生，也沒有根和愈傷組織產(chǎn)生和愈傷組織產(chǎn)生在外植體上表面邊緣在外植體上表面邊緣產(chǎn)生芽，也有一些根產(chǎn)生芽，也有一些根發(fā)生發(fā)生芽從外植體的上表面發(fā)芽從外植體的上表面發(fā)生而根從下表面發(fā)生生而根從下表面發(fā)生4 植物激素植物激素4.1.生長素類生長素類（1）種類）種類 IBA吲哚丁酸；吲哚丁酸； IAA吲哚乙酸；吲哚乙酸； NAA萘乙酸；萘乙酸； 2,4-D-2,4-二氯苯氧乙酸二氯苯氧乙酸 使用效價：使用效價： IAAIBANAA2,4-D NAA、IBA 生根培

10、養(yǎng)生根培養(yǎng) 2,4-D 愈傷組織誘導與增殖愈傷組織誘導與增殖（2）作用）作用誘導愈傷組織和根分化，促進細胞分裂誘導愈傷組織和根分化，促進細胞分裂和伸長。和伸長。 NAA和和IBA常與細胞分裂素結(jié)合用于芽的增殖。常與細胞分裂素結(jié)合用于芽的增殖。（3）濃度）濃度0.055mg/L（4）配制配制 生長素可溶解在稀生長素可溶解在稀NaOH中或溶于乙醇。中或溶于乙醇。4.2 細胞分裂素（細胞分裂素（CTK）（1）種類：）種類：Kt-激動素激動素 BAP-芐氨基嘌呤芐氨基嘌呤 2iP-異戊烯腺嘌呤異戊烯腺嘌呤 ZT-玉米素玉米素 TDZ（2）作用：）作用：啟動脫分化、細胞增殖，誘導愈傷組織芽啟動脫分化、細

11、胞增殖，誘導愈傷組織芽分化、芽增殖，叢生芽。分化、芽增殖，叢生芽。（3）濃度：）濃度：0.0510.0mg/L （4）配制：配制：溶于稀酸或稀堿溶于稀酸或稀堿 激素配比模式激素配比模式生長素與細胞分裂素：生長素與細胞分裂素：它們的比例決定著發(fā)育的方向，是愈它們的比例決定著發(fā)育的方向，是愈傷組織、長根還是長芽。傷組織、長根還是長芽。 高：有利于根的形成和愈傷組織的形成；高：有利于根的形成和愈傷組織的形成； 適中：有利于根芽的分化；適中：有利于根芽的分化； 低：有利于芽的形成低：有利于芽的形成生長素生長素 細胞分裂素細胞分裂素= 如：為了促進芽器官的分化，應除去或降低生長素如：為了促進芽器官的分化

12、，應除去或降低生長素的濃度，或者調(diào)整培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比的濃度，或者調(diào)整培養(yǎng)基中生長素與細胞分裂素的比例。例。細胞細胞分裂分裂素與素與生長生長素對素對器官器官或愈或愈傷組傷組織的織的影響影響No BAPBAP 0.1 mg. l-1 No NAAPoor shoot development and no roots. Extensive callus generationPoor shoot development and no rootsNAA 0.1 mg. l-1 More balanced development of roots and shoots. However, u

13、ndifferentiated callus is developing at the edges of the explantProfuse development of roots and a reduced number of shoots. Undifferentiated callus is developing at the edges of the explantNAA 5.0 mg. l-1Profuse development of roots over the explant upper and lower surface, and few shoots. Some cal

14、lus4.3 4.3 赤霉素（赤霉素（GAsGAs）（1 1）種類：）種類：GA3（2 2）作用：）作用：促莖伸長，促胚發(fā)育成植株；打促莖伸長，促胚發(fā)育成植株；打破休眠；一般在器官形成后加入。破休眠；一般在器官形成后加入。 注意：不耐熱；不耐熱；生理活性生理活性515d，時間太長，時間太長有抑制作用。有抑制作用。 較生長素和細胞分裂素少用，可溶于水。較生長素和細胞分裂素少用，可溶于水。5 瓊脂瓊脂/培養(yǎng)體支持材料培養(yǎng)體支持材料5.1.瓊脂瓊脂(1)用量用量 610g/L(2)種類種類 瓊脂粉瓊脂粉 瓊脂條瓊脂條(3)作用作用 固化作用固化作用注意：注意：瓊脂使用有優(yōu)缺點；新買應試凝固力。瓊脂使

15、用有優(yōu)缺點；新買應試凝固力。不凝原因：不凝原因：pH5不凝；長時間高壓滅菌；不凝；長時間高壓滅菌； 長期存放，易變質(zhì)；廠家不同，雜質(zhì)含量不同長期存放，易變質(zhì)；廠家不同，雜質(zhì)含量不同 配制時融解不充分，分裝不均勻；配制時融解不充分，分裝不均勻；5.2.5.2.其它其它玻璃纖維濾紙橋海綿、卡拉膠等玻璃纖維濾紙橋海綿、卡拉膠等6輔輔助助性性物物質(zhì)質(zhì)6.3 抗生素抗生素6.2 抗氧化物抗氧化物6.1 活性炭活性炭6.1 活性炭活性炭1)作用：作用：具吸附作用；具吸附作用； 莖尖初代培養(yǎng)可防褐化；促進新梢增殖（濃度莖尖初代培養(yǎng)可防褐化；促進新梢增殖（濃度0.1 -0.2%）；）； 促進生根促進生根,根避

16、光生長；根避光生長； 防止組培苗玻璃化（濃度防止組培苗玻璃化（濃度0.3%）；）； 有利于胚胎培養(yǎng)。有利于胚胎培養(yǎng)。2)常用濃度：常用濃度：0.510g/L3)注意：注意：活性炭具副作用。選擇活性炭具副作用。選擇吸附性差，導致營養(yǎng)損耗和吸附性差，導致營養(yǎng)損耗和 pH，應適當調(diào)高營養(yǎng)物質(zhì)與激素水平，應適當調(diào)高營養(yǎng)物質(zhì)與激素水平，并加大并加大Agar用量。用量。6.2 抗生素抗生素用量：用量：用量520mg/L注意：注意：抗生素對組織生長有抑制作用，使抗生素對組織生長有抑制作用，使用要慎重。用要慎重。 多數(shù)需過濾滅菌多數(shù)需過濾滅菌。作用：抑制內(nèi)生菌；種類：青霉素、鏈霉素、慶大霉素、慶大霉素、利福平

17、、卡那霉素等，6.3 抗氧化物抗氧化物2)用量：用量：50200mg/L，3)作用：作用：防止氧化防止氧化4)注意：注意：可用抗氧化劑洗可用抗氧化劑洗滌外植體傷口表面。滌外植體傷口表面。1)常用抗氧化劑：常用抗氧化劑：半胱氨酸、半胱氨酸、VC6.4 其它成分：其它成分：AgNO3 ： 作用：作用：吸附乙烯，促進莖芽分化，防玻璃吸附乙烯，促進莖芽分化，防玻璃化苗、早衰、落葉；只能短期培養(yǎng)，化苗、早衰、落葉；只能短期培養(yǎng)， 用量用量 110mg/L，需過濾滅菌需過濾滅菌pH值 在滅菌之前培養(yǎng)基的在滅菌之前培養(yǎng)基的pH值一般都是調(diào)節(jié)到值一般都是調(diào)節(jié)到5.0-6.0。 一般來說，當一般來說，當pH值高

18、于值高于6.0時培養(yǎng)基將會變硬；時培養(yǎng)基將會變硬； 低于低于5.0時，瓊脂不能很好地凝固。時，瓊脂不能很好地凝固。 pH值對不同植物的影響會有差異，如玉米胚乳愈值對不同植物的影響會有差異，如玉米胚乳愈傷組織在傷組織在pH值值7.0時鮮重增加最快，在時鮮重增加最快，在pH值值6.1時時干重增長最快。干重增長最快。種類種類最適最適pH值值種類種類最適最適pH值值杜鵑杜鵑4.0月季月季5.8越桔越桔4.5胡蘿卜、石刁柏胡蘿卜、石刁柏6.0蠶豆蠶豆5.5桃桃7.0番茄番茄5.7 不同植物對培養(yǎng)基最適不同植物對培養(yǎng)基最適pH值的要求不同值的要求不同(見表見表)二、 培養(yǎng)基的制備 1 水和藥品 水是植物原

19、生質(zhì)體的組成成分，也是一切代謝過水是植物原生質(zhì)體的組成成分，也是一切代謝過程的介質(zhì)和溶媒。它是生命活動過程中不可缺少程的介質(zhì)和溶媒。它是生命活動過程中不可缺少的物質(zhì)。的物質(zhì)。 配制培養(yǎng)基母液時要用配制培養(yǎng)基母液時要用蒸餾水或重蒸餾水蒸餾水或重蒸餾水，以保，以保持母液及培養(yǎng)基成分的精確性，防止貯藏過程發(fā)持母液及培養(yǎng)基成分的精確性，防止貯藏過程發(fā)霉變質(zhì)。霉變質(zhì)。 大規(guī)模生產(chǎn)時可用自來水。大規(guī)模生產(chǎn)時可用自來水。 但研究上盡量用蒸餾水，以防成分的變化引起不但研究上盡量用蒸餾水，以防成分的變化引起不良效果。良效果。藥品：藥品： 應選取等級較高的化學純（應選取等級較高的化學純（CP）或分析純）或分析純(

20、AR)； 藥品的稱量一定要準確、正確，防止藥勺藥品的稱量一定要準確、正確，防止藥勺之間的交叉污染。之間的交叉污染。2.1 母液（貯備液，母液（貯備液，stock solution)配制的目的配制的目的1）方便配置其他培養(yǎng)基；）方便配置其他培養(yǎng)基；2）保證各物質(zhì)成分的準確性及配制時的快速移取）保證各物質(zhì)成分的準確性及配制時的快速移取3）便于低溫保藏。便于低溫保藏。 2.2 母液配制方法母液配制方法（1）單配法：）單配法：將培養(yǎng)基配方中的各種成分分別配成一將培養(yǎng)基配方中的各種成分分別配成一定濃度的母液。定濃度的母液。（2）混配法：）混配法：將幾類營養(yǎng)成分按配方中的用量擴大一將幾類營養(yǎng)成分按配方中的

21、用量擴大一定倍數(shù)稱量，分別溶解后每一類混合在一起定容到一定倍數(shù)稱量，分別溶解后每一類混合在一起定容到一定體積配成混合母液定體積配成混合母液.（3）一般原則：）一般原則：p一般母液配成比所需濃度高一般母液配成比所需濃度高10-1000倍。倍。p母液配制時可分別配成大量元素、微量元素、鐵鹽、母液配制時可分別配成大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物和激素類等。其中維生素、氨基酸類可以分別有機物和激素類等。其中維生素、氨基酸類可以分別配制，也可以混在一起配制，也可以混在一起p配制時注意一些離子之間易發(fā)生沉淀，如配制時注意一些離子之間易發(fā)生沉淀，如Ca2+和和SO42-，Ca2+、Mg2+和和PO43- 一

22、起溶解后，會產(chǎn)生沉淀，一定一起溶解后，會產(chǎn)生沉淀，一定要充分溶解再放入母液中。要充分溶解再放入母液中。p各種藥品先以少量水讓其充分溶解，然后依次混合。各種藥品先以少量水讓其充分溶解，然后依次混合。p母液配好后放冰箱內(nèi)低溫保存，用時再按比例稀釋。母液配好后放冰箱內(nèi)低溫保存，用時再按比例稀釋。（4）母液配制的藥品與器材（5）母液配制（以）母液配制（以MS培養(yǎng)基為例）培養(yǎng)基為例） 有機物母液有機物母液鐵鹽母液鐵鹽母液無機大量無機大量 母液母液無機微量母液無機微量母液激素母液激素母液配制MS培養(yǎng)基時母液的計算B 無機微量母液（擴大100倍配1000ml）鐵鹽鐵鹽硫酸亞鐵，硫酸亞鐵，Na2-EDTA 在

23、裝有在裝有800ml 蒸餾水的燒杯中加入蒸餾水的燒杯中加入2粒氫氧化鈉。溶解后粒氫氧化鈉。溶解后加入加入3.73g EDTA-Na2，加熱使其全部溶解，然后邊攪拌邊慢加熱使其全部溶解，然后邊攪拌邊慢慢加入慢加入2.78g FeSO4.7H2O直至全部溶解，冷卻后定容至直至全部溶解，冷卻后定容至1000ml，置于冰箱中備用。置于冰箱中備用。有機物有機物甘氨酸甘氨酸VB1VB6煙酸煙酸肌醇肌醇后，再加后，再加入溫水冷卻后定容。入溫水冷卻后定容。(6) 母液的保存1) 裝瓶裝瓶: 將配制好的母液將配制好的母液分別倒入瓶中，貼好標分別倒入瓶中，貼好標簽，在標簽上注明母液簽，在標簽上注明母液名稱，配制倍

24、數(shù)，與配名稱，配制倍數(shù)，與配制日期。制日期。2）儲藏）儲藏： 母液配好后放人母液配好后放人冰箱內(nèi)冰箱內(nèi)4低溫保存，用低溫保存，用時再按比例稀釋。時再按比例稀釋。母液的稀釋計算吸取量吸取量=需要配制培養(yǎng)基的體積需要配制培養(yǎng)基的體積X 需要配制濃度需要配制濃度 母液濃度母液濃度其他準備其他準備加瓊脂加瓊脂第三節(jié)第三節(jié) 常用培養(yǎng)基的配方及其特點常用培養(yǎng)基的配方及其特點1 培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種類1.1 根據(jù)其態(tài)相不同分為根據(jù)其態(tài)相不同分為固體培養(yǎng)基：固體培養(yǎng)基：是指加凝固劑（如瓊脂）的培養(yǎng)基。是指加凝固劑（如瓊脂）的培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基：是指不加凝固劑的培養(yǎng)基。是指不加凝固劑的培養(yǎng)基。 1

25、.2 根據(jù)培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程分為根據(jù)培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程分為初代培養(yǎng)基：初代培養(yǎng)基：是指用來第一次接種從植物體上分離是指用來第一次接種從植物體上分離下來的外植體的培養(yǎng)基。下來的外植體的培養(yǎng)基。繼代培養(yǎng)基：繼代培養(yǎng)基：是指用來接種繼初代培養(yǎng)之后的培養(yǎng)是指用來接種繼初代培養(yǎng)之后的培養(yǎng)物的培養(yǎng)基。物的培養(yǎng)基。1.3 根據(jù)其作用不同分為根據(jù)其作用不同分為誘導培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基誘導培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基1.4 根據(jù)其營養(yǎng)水平不同分為根據(jù)其營養(yǎng)水平不同分為基本培養(yǎng)基：基本培養(yǎng)基：主要有主要有MS、White、B5、N6、改良、改良MS、Heller、Nitsh、Miller、SH等等完全培養(yǎng)

26、基：完全培養(yǎng)基：就是在基本培養(yǎng)基的基礎上，根據(jù)試就是在基本培養(yǎng)基的基礎上，根據(jù)試驗的不同需要，附加一些物質(zhì)，如植物生長調(diào)節(jié)驗的不同需要，附加一些物質(zhì)，如植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和其它復雜有機附加物等。物質(zhì)和其它復雜有機附加物等。下面介紹幾種基本培養(yǎng)基下面介紹幾種基本培養(yǎng)基:基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基無機鹽、離子無機鹽、離子 濃度高，濃度高，含高含高K、N，硝酸鹽含量較，硝酸鹽含量較高，含銨鹽高，含銨鹽。營養(yǎng)豐富營養(yǎng)豐富加速合作愈傷組織和培加速合作愈傷組織和培養(yǎng)物生長養(yǎng)物生長1962年由年由Murashige和和Skoog為培養(yǎng)煙為培養(yǎng)煙草細胞而設計的。廣泛地用于植物的草細胞而設計的。廣泛地用于植物的器官、花

27、藥、細胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)，器官、花藥、細胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)，效果良好。有些培養(yǎng)基是由它演變而效果良好。有些培養(yǎng)基是由它演變而來的來的。MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基MillerMiller培養(yǎng)基培養(yǎng)基B5培養(yǎng)基培養(yǎng)基SHSH培養(yǎng)基培養(yǎng)基N6培養(yǎng)基培養(yǎng)基KM-8P培養(yǎng)基培養(yǎng)基White培養(yǎng)基培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基無機元素用量是無機元素用量是MS的的1/31/2微量種類少微量種類少無肌醇無肌醇MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基MillerMiller培養(yǎng)基培養(yǎng)基B5培養(yǎng)基培養(yǎng)基SHSH培養(yǎng)基培養(yǎng)基N6培養(yǎng)基培養(yǎng)基KM-8P培養(yǎng)基培養(yǎng)基White培養(yǎng)基培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基無機鹽量較低無機鹽量較低使用廣泛使用廣泛適合生

28、根培養(yǎng)、胚適合生根培養(yǎng)、胚 胎培養(yǎng)等胎培養(yǎng)等提高了提高了MgSO4的濃度和增加了的濃度和增加了硼素。其特點是無機機鹽數(shù)量硼素。其特點是無機機鹽數(shù)量較低，適于生根培養(yǎng)。較低，適于生根培養(yǎng)。MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基MillerMiller培養(yǎng)基培養(yǎng)基White培養(yǎng)基培養(yǎng)基SHSH培養(yǎng)基培養(yǎng)基B5培養(yǎng)基培養(yǎng)基N6培養(yǎng)基培養(yǎng)基KM-8P培養(yǎng)基培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基含較低的銨，硝酸鹽和含較低的銨，硝酸鹽和鹽酸硫胺素用量較高。鹽酸硫胺素用量較高。適合雙子葉植物，適合雙子葉植物， 尤其尤其木本植物組培木本植物組培。1968年由年由Galmborg等為培養(yǎng)大豆根等為培養(yǎng)大豆根細胞而設計的。其主要特點是含有較細

29、胞而設計的。其主要特點是含有較低的銨，這可能對不少培養(yǎng)物的生長低的銨，這可能對不少培養(yǎng)物的生長有抑制作用。從實踐得知有些植物在有抑制作用。從實踐得知有些植物在B5培養(yǎng)基上生長更適宜，如雙子葉植培養(yǎng)基上生長更適宜，如雙子葉植物特別是木本植物。物特別是木本植物。MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基MillerMiller培養(yǎng)基培養(yǎng)基SHSH培養(yǎng)基培養(yǎng)基B5培養(yǎng)基培養(yǎng)基N6培養(yǎng)基培養(yǎng)基KM-8P培養(yǎng)基培養(yǎng)基White培養(yǎng)基培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基特點與特點與B5相似，相似，硫酸銨改用磷酸二氫硫酸銨改用磷酸二氫銨。銨。無機鹽濃度較高。無機鹽濃度較高。MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基MillerMiller培養(yǎng)基培養(yǎng)基SHSH培養(yǎng)基培養(yǎng)基B5培養(yǎng)基培養(yǎng)基N6培養(yǎng)基培養(yǎng)基KM-8P培養(yǎng)基培養(yǎng)基White培養(yǎng)基培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基基本培養(yǎng)基成分簡單成分簡單硝酸鉀和硫酸銨含量高硝酸鉀和硫酸銨含量高適合花粉、花藥培養(yǎng)適合花粉、花藥培養(yǎng)1974年朱至清等為水稻等禾谷類作物年朱至清等為水稻等禾谷類作物花藥培養(yǎng)而設計的。其特點是成分較花藥培養(yǎng)而設計的。其特點是成分較簡單，簡單，KNO3和（和（NH4）2SO4含量高。含量高。在國內(nèi)已廣泛應用于小麥、水稻及其在國內(nèi)已廣泛應用于小麥、水稻及