島津液相色譜工作站外標法使用解析

1、島津液相色譜工作站外標法使用解析外標法又稱工作曲線法，首先配制含待測組分濃度不同的系列標準工作溶液，如果待測組分不止一個，我們也把該標準溶液稱為混合標準溶液，然后進樣得濃度不同的系列標準工作溶液的色譜圖。通常利用濃度不同的系列標準工作溶液的色譜數(shù)據(jù)建立工作曲線和線性方程，然后根據(jù)試樣的色譜數(shù)據(jù)既可以利用工作曲線查得試樣的濃度數(shù)據(jù)，也可利用線性方程計算試樣中各組分的濃度。在相同色譜條件下，可以用已建立的工作曲線或線性方程進行批量樣品分析。一、進樣首先進濃度不同的系列標準工作溶液，然后進試樣，得標樣色譜圖和試樣色譜圖并保存。如果是單次分析（手動進樣模式），在設(shè)置單次分析條件時，應(yīng)將樣品瓶架設(shè)置為“

2、-1”，如圖所示，然后按電腦提示進樣，待采樣結(jié)束后停在分析。啟動或停止單次分析，既可以用助手欄“主項目”下的功能按鈕，也可用數(shù)據(jù)采集窗口中的功能按鈕，如圖所示。通常使用數(shù)據(jù)采集窗口的功能按鈕啟動和停止單次分析更為高效。無論是啟動或停止單次分析，系統(tǒng)均有“請稍后”的等待提示，務(wù)必等待足夠時間，方可進行下一步操作。二、色譜圖解析得到色譜圖后，套取組分的保留時間，確定組分的名稱，輸入標樣中各組分的濃度是最基本的工作。有時還要根據(jù)色譜圖的具體情況對色譜圖進行手動處理，色譜圖處理通常放在進樣完成后，停機或在流動相置換期間進行。點擊“LabSolutions Essentia主項目”窗口下的“處理工具”圖

3、標，再雙擊右邊窗口中的“再解析”圖標，彈出“再解析”（即數(shù)據(jù)處理）窗口。在數(shù)據(jù)管理器選擇文件所在的文件夾，切換到數(shù)據(jù)標簽，打開所需的數(shù)據(jù)文件，這里我們選擇打開“化妝品抗菌劑_Std11”數(shù)據(jù)文件，過程如圖所示。1.編輯色譜圖數(shù)據(jù)窗口由色譜圖視圖、結(jié)果視圖、方法視圖組成。方法視圖右上角有“視圖”和“編輯”兩個圖標，只有切換到“編輯”模式，色譜圖數(shù)據(jù)才是可以編輯的，在“視圖”模式下方法視圖里九個標簽下的編輯框是灰色的，只能瀏覽。要手動編輯色譜圖，點擊快捷圖標欄的“手動積分欄”圖標是不可少的，上述三個經(jīng)常使用的圖標如圖所示。要編輯色譜圖，單擊“手動積分欄”圖標，彈出手動積分欄，如圖所示。在編輯色譜圖

4、時，經(jīng)常想去掉不用的色譜峰，這時可用“去除峰（不校正）”功能按鈕，拖選不要的色譜峰使色譜圖簡潔，更有針對性。方法視圖里的九個標簽，最常用的是“積分”、“定量處理”和“化合物”三個標簽?！胺e分”標簽如下：一般使用默認值，但可通過修改“最小面積/高度”來控制色譜圖中峰顯示的多少。“定量處理”標簽是非常重要的標簽。這里我們要用的定量方法是外標法，所以定量方法選擇外標法，配制的羥苯混酯標準系列工作溶液有3個，所以校準曲線最大級別數(shù)選為3，如果只有一個標準溶液就設(shè)置為1，根據(jù)實際情況修改濃度單位和格式，島津工作站的濃度單位設(shè)置更為靈活，其他工作站一般是通過下拉列表框選擇合適的單位，濃度值格式更符合實際工

5、作的情況，在出報告時，我們更關(guān)心數(shù)字的有效位數(shù)。如果只有一個標樣，建議選擇工作曲線過原點，即“零截距”?！盎衔铩睒撕灨欠浅Ｖ匾臉撕?。在這里我們要套取色譜峰的保留時間，這是定性、定量的基礎(chǔ)，獲取了保留時間后，輸入相應(yīng)的化合物名稱和其在不同標樣里的濃度。完成上述必須的編輯修改后，保存修改后的數(shù)據(jù)文件。按相同的方法修改、保存數(shù)據(jù)文件“化妝品抗菌劑_Std12”至“化妝品抗菌劑_Std33”。需要說明的是，每個標準溶液進了3次樣， 所以“化妝品抗菌劑_Std11”至“化妝品抗菌劑_Std13”為第一個標樣的數(shù)據(jù)文件，“化妝品抗菌劑_Std21”至“化妝品抗菌劑_Std23”為第二個標樣的數(shù)據(jù)文件

6、，“化妝品抗菌劑_Std31”至“化妝品抗菌劑_Std33”為第三個標樣的數(shù)據(jù)文件。 至此，所有標樣的數(shù)據(jù)文件編輯、修改、保存完成。2.創(chuàng)建校準曲線島津LabSolutios有一種快速建立校準曲線的方法。打開保存的數(shù)據(jù)文件“化妝品抗菌劑_std11”，切換到視圖模式，點擊“主項目”下的“應(yīng)用到方法”圖標，在彈出的“方法另存為”對話框中輸入要保存的校準曲線的名稱，這里我們輸入“化妝品抗菌劑校準曲線”保存，接著在彈出來的窗口中選中“當前設(shè)置”，勾選“數(shù)據(jù)處理參數(shù)”和“系統(tǒng)適用性設(shè)置”，按“確定”按鈕保存。切換到方法標簽，可以看到“化妝品抗菌劑校準曲線”方法文件已經(jīng)存在了。島津把定量分析數(shù)據(jù)的校準曲

7、線文件稱為方法文件，后綴仍為“.lcm”，因此島津方法文件中可以有儀器參數(shù)方法文件和數(shù)據(jù)分析方法文件，建議把儀器參數(shù)文件和分析數(shù)據(jù)的方法文件分別建立、保存。在方法標簽的文件名框中雙擊“化妝品抗菌劑校準曲線”方法文件，在右面窗口中顯示校準曲線編輯窗口，校準曲線窗口由校準曲線視圖、方法視圖、色譜視圖和數(shù)據(jù)文件編輯窗口組成。數(shù)據(jù)文件的添加與刪除在數(shù)據(jù)文件窗口進行。在窗口右上角的數(shù)據(jù)文件窗口右擊數(shù)據(jù)文件下的“級別1”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，在彈出來的窗口中選中要添加得數(shù)據(jù)文件，比如“化妝品抗菌劑_Std11”至“化妝品抗菌劑_Std13”，點擊打開，如圖所示。你會發(fā)現(xiàn)，在級別1下面就出現(xiàn)了

8、剛才選中的三個數(shù)據(jù)文件。同理，右擊數(shù)據(jù)文件下的“級別2”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，選中要添加得數(shù)據(jù)文件“化妝品抗菌劑_Std21”至“化妝品抗菌劑_Std23”，點擊打開；再右擊數(shù)據(jù)文件下的“級別3”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，選中要添加得數(shù)據(jù)文件“化妝品抗菌劑_Std31”至“化妝品抗菌劑_Std33”，點擊打開，可以看到，每個級別下面均有了三個文件了，添加完數(shù)據(jù)文件后的“校準曲線視圖”窗口會出現(xiàn)每種物質(zhì)的校準曲線及相關(guān)信息，如圖所示。點擊化合物下的方向按鈕，可以切換、查看每種化合物的校準曲線和線性方程、線性相關(guān)系數(shù)R等信息，右側(cè)的色譜圖視圖中會發(fā)生相應(yīng)的變化，顯示所選中物質(zhì)的色譜峰。 當然，有了標準系列工作溶液的色譜數(shù)據(jù)文件后，要創(chuàng)建校準曲線，還可以直接在助手欄“主項目”中點擊“校準曲線”圖標，然后點擊菜單欄的“文件”/“新建方法文件”，在彈出來的窗口中選擇數(shù)據(jù)文件比如“化妝品抗菌劑_Std11”打開，進入校準曲線窗口，在窗口的數(shù)據(jù)文件小窗口里添加數(shù)據(jù)文件，在下面的方法視圖窗口再對數(shù)據(jù)文件進行編輯、保存，創(chuàng)建校準曲線。3.分析試樣校準曲線建好后，便可分析試樣了。校準曲線的最大好處就是可以進行批量樣品分析。島津工作站分析試樣非常簡單，首先打開要分析的試樣數(shù)據(jù)文件如“化妝品抗菌劑_Smp1.lcd”，然后點擊菜單欄“文件”/“加載方法參數(shù)