不同中醫(yī)治法對(duì)急性心肌缺血大鼠心電圖及內(nèi)皮素的影響-醫(yī)藥學(xué)論文論著

1、不同中醫(yī)治法對(duì)急性心肌缺血大鼠心電圖及內(nèi)皮素的影響-醫(yī)藥學(xué)論文/論著【摘要】【目的】觀察不同中醫(yī)治法（活血祛瘀法、通陽(yáng)豁痰法和芳香溫通法）代表方抗急性心肌缺血的作用?！痉椒ā咳?SD 大鼠 80 只隨機(jī)分為正常對(duì)照組，模型組，血府逐瘀湯高、低劑量組（劑量分別為 20.5、6.8gkg-1d-1），瓜蔞薤白半夏湯高、低劑量組（劑量分別為 18.0、6.0gkg-1d-1），冠心蘇合膠囊高、低劑量組（劑量分別為 0.19、0.06gkg-1d-1），采用尾靜脈注射垂體后葉素（Pit，1.5U/kg）復(fù)制急性心肌缺血模型；觀察 3 種不同中醫(yī)治法代表方對(duì)急性心肌缺血模型大鼠心電圖和血漿內(nèi)皮素（ET）

2、的影響?！窘Y(jié)果】（1）在心電圖方面，各用藥組與模型組比較，ST 段上移幅度差異有顯著性意義（P0.05 或 P0.01）；不同中醫(yī)治法代表方高、低劑量組間比較，差異均有顯著性意義（P0.05 或 P0.01）。（2）在血漿 ET 水平方面，不同中醫(yī)治法代表方高劑量組與模型組比較，大鼠血漿 ET 水平差異均有顯著性意義（P0.01）；不同中醫(yī)治法代表方高劑量組間比較，其中血府逐瘀湯高劑量組血漿 ET 水平顯著低于瓜蔞薤白半夏湯高劑量組（P0.01）和冠心蘇合膠囊高劑量組（P0.05），而瓜蔞薤白半夏湯與冠心蘇合膠囊高劑量組間差異無(wú)顯著性意義（P0.05）；不同中醫(yī)治法代表方低劑量組 ET 水平與

3、模型組比較，血府逐瘀湯低劑量組與模型組比較差異有顯著性意義（P0.05），而瓜蔞薤白半夏湯和冠心蘇合膠囊低劑量組與模型組比較差異均無(wú)顯著性意義（P0.05），不同中醫(yī)治法代表方高、低劑量組間比較差異均有顯著性意義（P0.01）。【結(jié)論】不同中醫(yī)治法代表方對(duì)垂體后葉素所致的急性心肌缺血大鼠心電圖均有一定改善作用。其機(jī)制可能與降低血漿 ET 水平有關(guān)，其中活血祛瘀法作用最顯著。【關(guān)鍵詞】 心肌缺血/中藥療法 血府逐瘀湯/藥理學(xué) 瓜蔞薤白半夏湯/藥理學(xué)冠心蘇合膠囊/藥理學(xué) 心電圖 疾病模型 動(dòng)物 大鼠心肌缺血是心血管的常見病之一，急性發(fā)作死亡率較高，在醫(yī)學(xué)界引起了廣泛的重視。為了探討不同中醫(yī)治法抗急

4、性心肌缺血的作用，本研究選取中醫(yī)心痛病發(fā)作期常用治法：活血祛瘀法、通陽(yáng)豁痰法和芳香溫通法，觀察比較不同治法的相應(yīng)代表方-血府逐瘀湯、瓜蔞薤白半夏湯和冠心蘇合膠囊對(duì)垂體后葉素致急性心肌缺血大鼠的心電圖和血漿內(nèi)皮素（ET）的干預(yù)作用，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1 材料與方法1.1 動(dòng)物 SD 大鼠 80 只，SPF 級(jí)，雌雄兼用，體質(zhì)量 180230g，購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)：SCXK 粵 20030001，粵監(jiān)證字2006A014。1.2 藥物 組方中藥材均購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院中藥房；冠心蘇合膠囊由廣州敬修堂藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：G01001。1.3 試劑與儀器 垂體后

5、葉素（Pit）由上海第一生化藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：06071；水合氯醛由上海國(guó)藥生產(chǎn)，批號(hào)：060705；ET 放免試劑盒由解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心提供，批號(hào)：060825；TSN695B 型放免測(cè)量?jī)x由上海日環(huán)儀器廠生產(chǎn)。1.4 藥物的制備 本實(shí)驗(yàn)將成人每天常用生藥量定為低劑量，低劑量的 3 倍為高劑量。1.4.1 血府逐瘀湯煎劑的制備 組成為桃仁 12g，當(dāng)歸、紅花、生地黃、牛膝各 9g，川芎、桔梗各 4.5g，赤芍、枳殼各 6g，柴胡、甘草各 3g。以上藥物加重蒸水浸泡 30min 后，直火煎沸 60min，收集煎煮液，藥渣再加重蒸水，同前煎沸 30min，合并 2 次濾液，4 000

6、r/min 離心 15min 后，取上清液，濃縮，分裝滅菌，備用。低劑量為含生藥 0.5g/mL，高劑量為含生藥 1.5g/mL。1.4.2 瓜蔞薤白半夏湯煎劑制備 組成為瓜蔞實(shí)、半夏各 12g，薤白 9g，白酒適量。煎煮方法同 1.4.1 項(xiàng)下。低劑量為含生藥 0.4g/mL，高劑量為含生藥1.2g/mL。1.4.3 冠心蘇合膠囊藥液制備 去膠囊取藥粉，用蒸餾水分別配制成濃度為4.6mg/mL 低劑量藥液和 13.8mg/mL 高劑量藥液。1.5 分組與給藥 取 SD 大鼠 80 只，隨機(jī)分成 8 組，每組 10 只，分別為正常對(duì)照組，模型組，血府逐瘀湯高、低劑量組（劑量分別為 20.5、6

7、.8gkg-1d-1），瓜蔞薤白半夏湯高、低劑量組（劑量分別為 18.0、6.0gkg-1d-1），冠心蘇合膠囊高、低劑量組（劑量分別為 0.19、0.06gkg-1d-1）。1.6 造模 參照文獻(xiàn)方法1-3加以改進(jìn)，各組大鼠末次給藥后 1h，腹腔注射 100g/L 水合氯醛溶液（3.5mL/kg）麻醉；背位固定，記錄注射前心電圖；10min 后大鼠尾靜脈注射 Pit1.5U/kg，空白對(duì)照組注射等容積生理鹽水；注射后分別記錄 15s、30s、1min、3min、5min、10min 各時(shí)段的心電圖變化，并計(jì)算注射 Pit 后各組大鼠 15s10min 時(shí)間段心電圖 ST 段上移幅度的均值。1

8、.7 血漿 ET 水平檢測(cè) 大鼠注射 Pit 后 20min 心臟取血，注入乙二胺四乙酸二鉀（EDTAK2）抗凝管中，放-20冰箱保存待測(cè)血漿 ET 水平。1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS13.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。2 結(jié)果2.1 不同中醫(yī)治法代表方對(duì)急性心肌缺血模型大鼠心電圖的影響 表 1 結(jié)果顯示，在心電圖方面，不同中醫(yī)治法代表方各用藥組與模型組比較，ST 段上移幅度差異有顯著性意義（P0.05 或 P0.01），表明心痛發(fā)作期 3 種常用治法代表方對(duì)垂體后葉素所致的大鼠急性心肌缺血心電圖有改善作用。而且不同中醫(yī)治法代表方高、低劑量組間比較差異均有顯著性意義（P0.05 或 P0.

9、01），說(shuō)明各方藥的作用效應(yīng)存在著劑量效應(yīng)關(guān)系。瓜蔞薤白半夏湯和冠心蘇合膠囊高劑量組與血府逐瘀湯高劑量組比較差異均有顯著性意義（P0.05），但瓜蔞薤白半夏湯高劑量組與冠心蘇合膠囊高劑量組間比較無(wú)顯著性差異（P0.05），說(shuō)明在高劑量時(shí)活血祛瘀法作用效應(yīng)最強(qiáng)。瓜蔞薤白半夏湯和血府逐瘀湯低劑量組與冠心蘇合膠囊低劑量組比較差異均有顯著性意義（P0.05 或 P0.01），說(shuō)明低劑量時(shí)芳香溫通法作用效應(yīng)最強(qiáng)，其次為活血祛瘀法，再次為通陽(yáng)豁痰法。2.2 不同中醫(yī)治法代表方對(duì)急性心肌缺血模型大鼠血漿 ET 水平影響表 2 結(jié)果顯示，模型組與正常對(duì)照組比較，血漿 ET 水平顯著升高（P0.01），說(shuō)明 P

10、it 所致的大鼠急性心肌缺血病理改變之一是導(dǎo)致大鼠血漿 ET 水平升高。不同中醫(yī)治法代表方高劑量組與模型組比較血漿 ET 水平顯著下降（P0.01），說(shuō)明高劑量時(shí)均有通過(guò)降低血漿 ET 水平的途徑而起到抗急性心肌缺血的作用；而高劑量組間比較，瓜蔞薤白半夏湯和冠心蘇合膠囊高劑量組與血府逐瘀湯高劑量組比較，差異有顯著性意義（P0.05 或 P0.01）；而瓜蔞薤白半夏湯與冠心蘇合膠囊高劑量組比較無(wú)顯著性差異（P0.05），說(shuō)明在高劑量時(shí)活血祛瘀法降血漿 ET 作用效應(yīng)最強(qiáng)，優(yōu)于通陽(yáng)豁痰法和芳香溫通法。不同中醫(yī)治法代表方低劑量組與模型組比較，血府逐瘀湯血漿 ET 水平顯著下降（P0.05），而瓜蔞薤

11、白半夏湯和冠心蘇合膠囊血漿 ET 水平下降不明顯（P0.05），說(shuō)明低劑量時(shí)對(duì)大鼠血漿 ET 的降低僅活血祛瘀法具有一定的作用效應(yīng)。不同中醫(yī)治法代表方高、低劑量組間比較差異均有顯著性意義（P0.01），說(shuō)明不同中醫(yī)治法代表方對(duì)心肌缺血大鼠血漿 ET 水平的影響存在著劑量效應(yīng)關(guān)系。表 1 各組大鼠心電圖 ST 段上移的均值比較（略）Table 1 Comparison of ST segment rise ofECG in different groups統(tǒng)計(jì)方法：?jiǎn)我蛩胤讲罘治?；P0.01，與正常對(duì)照組比較；P0.05，P0.01，與模型組比較；P0.05，P0.01，與同組低劑量組比較；P0

12、.05，與血府逐瘀湯高劑量組比較；P0.05，P0.01，與冠心蘇合膠囊低劑量組比較表 2 各組大鼠血漿 ET 水平的比較（略）Table 2 Comparison of plasma ET level in different groups統(tǒng)計(jì)方法：?jiǎn)我蛩胤讲罘治?；P0.01，與正常對(duì)照組比較；P0.05，P0.01，與模型組比較；P0.01，與同組低劑量組比較；P0.05，P0.01，與血府逐瘀湯高劑量組比較3 討論內(nèi)皮素（endothelin，ET）是從內(nèi)皮細(xì)胞分離并純化的一種迄今所知最強(qiáng)的縮血管物質(zhì)。由 21 個(gè)氨基酸組成，有 3 種異構(gòu)肽，ET1、ET2、ET3，其中 ET1 縮血管

13、作用最強(qiáng)，可影響心肌收縮力、心室舒張時(shí)間、血管張力等心血管功能3-5。在心血管系統(tǒng)有豐富的 ET 受體分布，急性心肌缺血時(shí)，缺血心肌及外周血中 ET1 濃度均升高6-8；ET 可顯著增加冠狀動(dòng)脈的阻力導(dǎo)致心肌缺血，而心肌的缺血缺氧又可促進(jìn) ET 的合成釋放。有研究表明3，9：直接把 ET1 注入動(dòng)物模型的冠脈循環(huán)，可減少冠脈血流 90%以上，引起心肌梗死并發(fā)生心功能不全和心律失常，說(shuō)明 ET 是一種強(qiáng)有力的冠狀動(dòng)脈收縮劑。ET 升高可加重缺血心肌細(xì)胞的損害，與單純?nèi)毖?再灌注（IR）相比，灌注液中加 ET（910mol/L）后心肌損傷程度更嚴(yán)重，主要表現(xiàn)為冠脈血流量（CBF）銳減，心肌細(xì)胞內(nèi)肌

14、紅蛋白和乳酸脫氫酶（LDH）大量漏出，心肌脂質(zhì)過(guò)氧化和鈣聚積。Watanabe 等10研究證明 ET還可加重再灌注損傷，促進(jìn)心肌梗死的擴(kuò)展。本研究選用心痛發(fā)作期不同中醫(yī)治法-活血祛瘀、通陽(yáng)豁痰和芳香溫通法的相應(yīng)代表方，即血府逐瘀湯、瓜蔞薤白半夏湯和冠心蘇合膠囊，觀察比較不同治法對(duì)垂體后葉素所致的急性心肌缺血大鼠心電圖和 ET 的干預(yù)作用。由于冠脈痙攣會(huì)導(dǎo)致心肌缺血、缺氧，而后者恰恰是刺激 ET 大量合成釋放的最主要因素之一11。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了各組垂體后葉素所致急性心肌缺血大鼠血漿ET 的水平，并用心電圖監(jiān)測(cè)大鼠缺血的情況，結(jié)果表明：不同中醫(yī)治法均能通過(guò)降低/抑制心肌缺血大鼠血漿 ET 水平的途徑

15、而起到抗心肌缺血的作用，且存在著一定的劑量效應(yīng)關(guān)系，高劑量比低劑量作用效應(yīng)強(qiáng)。不同中醫(yī)治法代表方高劑量比較，3 者的作用效應(yīng)有顯著性差異，血府逐瘀湯作用效應(yīng)顯著強(qiáng)于瓜蔞薤白半夏湯和冠心蘇合膠囊。而在低劑量水平時(shí)，僅活血祛瘀法的血府逐瘀湯具有一定的作用效應(yīng)。綜合 ET 檢測(cè)與心電圖觀察的結(jié)果可以推測(cè)，心痛發(fā)作期不同中醫(yī)治法均有通過(guò)降低 ET 水平的途徑拮抗急性心肌缺血的作用，但是其作用效應(yīng)存在著顯著性差異，其中活血祛瘀法降 ET 的作用效應(yīng)最強(qiáng)，顯著優(yōu)于芳香溫通法和通陽(yáng)豁痰法。其確切機(jī)制有待進(jìn)一步研究。【參考文獻(xiàn)】1李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)M上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1991：562.2王怡，

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