春蘭內(nèi)生菌的分離及其在種苗生產(chǎn)上的應(yīng)用

1、江蘇省高等學(xué)校大學(xué)生實踐創(chuàng)新訓(xùn)練計劃項目申請表項目名稱春蘭內(nèi)生菌的分離及其在種苗生產(chǎn)上的應(yīng)用項目所屬一級專業(yè)門農(nóng)林牧漁項目所屬二級專業(yè)類農(nóng)業(yè)技術(shù)項目類型（） 個人項目 （） 團隊項目項目實施時間起始時間： 2009年9月 完成時間： 2010年11 月申請人或申請團隊姓名年級學(xué)校所在院系、專業(yè)聯(lián)系電話E-mail主持人丁云三南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院園藝/日語吳承東一南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院植物保護成 員胡長婷二南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院園林工程王文娟一南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院植物保護成誼新一南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院植物保護楊曉雪一南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院植物保護導(dǎo) 師姓名吳雯雯，陳錦坤年齡26，44單位南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)

2、學(xué)院行政職務(wù)/專業(yè)技術(shù)職務(wù)講師，教授主要成果吳雯雯，2008年畢業(yè)于揚州大學(xué)農(nóng)學(xué)院作物遺傳育種專業(yè)，2008年-2009年參與學(xué)院植物組織培養(yǎng)技術(shù)項目課程的建設(shè)與實施，2008年指導(dǎo)的學(xué)生創(chuàng)新作品生態(tài)水生鳶尾苗獲得南通市第二屆職業(yè)教育創(chuàng)新大賽一等獎，并獲得江蘇省比賽二等獎。陳錦坤：1、近5年來承擔的技術(shù)研發(fā)項目或技術(shù)服務(wù)及效果課 題 名 稱來 源年限作用效果甲殼素及其衍生物在農(nóng)業(yè)和環(huán)保上的應(yīng)用南通市科技局1999-2002主持好牧草的引種與適應(yīng)性研究南通市科技局1999-2003主持好專用高蛋白大豆的引進及其優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)標準化南通市科技局2001-2004主持好2、在國內(nèi)外公開發(fā)行刊物上發(fā)表的相關(guān)

3、論文論文、論著題目刊物名稱發(fā)表時間署名次序NP配比對專用高蛋白大豆產(chǎn)量和品質(zhì)的調(diào)節(jié)效應(yīng)大豆科學(xué)2006年第2期第一作者播期對專用高蛋白大豆產(chǎn)量和品質(zhì)的調(diào)節(jié)效應(yīng)大豆科學(xué)2007年第1期第一作者“作物栽培環(huán)境”教材江蘇科學(xué)技術(shù)出版社2007年2月主編3、獲得的表彰/獎勵或獲得的專利獎項名稱授予單位時間“外向型萬畝蔬菜園區(qū)建設(shè)江蘇省農(nóng)林廳農(nóng)業(yè)科技進步三等獎南通市農(nóng)業(yè)科技推廣三等獎”省農(nóng)林廳市政府1999年一、申請理由（包括自身具備的知識條件、自己的特長、興趣、已有的實踐創(chuàng)新成果等）春蘭以其色雅、味甜、形美、氣清而深受人們的青睞，江浙等地已將此作為產(chǎn)業(yè)化發(fā)展和經(jīng)濟增長的重要支撐點。春蘭一般散生或片生于

4、海拔600 -1800 m的自然林緣地帶，也有生長在海拔300-600 m的山間溪谷，如浙江的四明山、杭州的五云山等低海拔山區(qū)均有名種產(chǎn)出，其中春蘭皇后“綠云”就出于杭州的五云山。春蘭所生長的局部環(huán)境往往要在散射光充足，濕度較大、遮光率40-50的溝邊竹林或次生林叢種，而太陰或陽光直射的林地則少有生長。從春蘭的數(shù)量和品質(zhì)上來說，浙江、江蘇為盛產(chǎn)區(qū)，而江蘇尤以南通出名，現(xiàn)種植品種有70多個。據(jù)資料記載，我國1978年以前發(fā)現(xiàn)、培育的春蘭有近300種，目前，在浙江杭州、紹興、余姚、寧波等地，通過蘭友引種、栽培和市場流通的春蘭新種約有200多種。然而真正好的蘭花由于數(shù)量的限制，一直是達官貴人們的玩物

5、，普通老百姓雖然喜愛蘭花，面對高昂的價格，也只能望蘭興嘆。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，運用科學(xué)栽培管理技術(shù)養(yǎng)蘭花，提高了蘭花的自然繁殖率，使得更多的人可以在家里欣賞到自己喜愛的蘭花，尤其是現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，蘭花的組織培養(yǎng)獲得成功，組培苗的商品化生產(chǎn)和推廣，使名貴蘭花走進尋常百姓家成為可能。春蘭組培雖然能大量繁殖，但移栽后的組培苗成活率低，生長緩慢，開花延遲，花小甚至不開花。其原因是蘭根中不形成菌根結(jié)構(gòu)，菌根真菌不能為蘭花的生長提供所需的營養(yǎng)物質(zhì)。組培苗菌根化是促進春蘭快速繁殖的重要技術(shù)，也是解決瀕危蘭花資源人工栽培的關(guān)鍵。因此，開展內(nèi)生菌在春蘭栽培上的應(yīng)用，探索利用蘭科內(nèi)生菌根真菌促進地生蘭生長

6、發(fā)育的方法，可提高春蘭組培苗的成活率，為解決蘭科珍貴花卉人工栽培提供理論依據(jù)，也使得本項研究具有一定的挑戰(zhàn)性。我們研究小組由6人組成，都是生物工程系的學(xué)生，其中1人為雙專科三年級的學(xué)生,1人為在校二年級學(xué)生，4人為在校一年級學(xué)生。6個人平時對搞小科研都比較感興趣，跟老師接觸也比較多，因而對有老師指導(dǎo)的科研活動比較喜歡，我們決心將這次科研活動搞好，圓滿完成這次實踐創(chuàng)新訓(xùn)練任務(wù)。二、項目方案（包括項目的訓(xùn)練目標、前期準備、組織實施、過程管理、實踐環(huán)節(jié)、教師指導(dǎo)、項目結(jié)題等）本項研究我們準備分兩步進行，第一步是春蘭內(nèi)生菌的分離篩選。這項工作的進行，首先通過對蘭花根際及其土壤微生物的培養(yǎng)，分離出若干微

7、生物種類，然后將已分離出的微生物與春蘭組培苗根系共生，篩選出適合于春蘭根系共生的菌株。 第二步是內(nèi)生菌在春蘭栽培上的應(yīng)用。我們通過對春蘭根系共生菌進行生物學(xué)鑒定，確定該菌株的結(jié)構(gòu)、生長、繁殖條件，并進行大量繁殖。然后系統(tǒng)研究組培苗接種內(nèi)生菌對春蘭生長發(fā)育的影響，內(nèi)容包括內(nèi)生菌對春蘭養(yǎng)分、水分吸收、呼吸作用、干物質(zhì)積累等方面的影響。三、學(xué)校提供條件（包括項目開展所需的實驗實訓(xùn)情況、配套經(jīng)費、相關(guān)扶持政策等）我們都是高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院的學(xué)生，分別來自生物工程系的園藝和植保專業(yè)，其中4人為在校一年級的學(xué)生，1人為在校二年紀的學(xué)生，1人為雙?？迫昙壍膶W(xué)生。我們的指導(dǎo)老師具有教授職稱。大家對于科研都很有

8、熱情，也經(jīng)常幫助老師做實驗，尤其對微生物和園藝類的試驗很感興趣，所以大家申報這次的科研課題。我們系的植物組織培養(yǎng)室有30多人可以同時操作的配制培養(yǎng)基的準備室、8臺超凈工作臺16人同時操作的無菌操作室和年產(chǎn)30萬苗的培養(yǎng)室。實驗室中配備了全自動的和手提式的高壓滅菌器、搖床、光溫培養(yǎng)箱等先進設(shè)備。該實驗室已成為南通市生物技術(shù)重點實驗室以及江蘇省教育廳園藝實訓(xùn)基地的重要組成部分。我們系的組培苗栽培基地擁有1000 m2的智能溫室和7000 m2的連棟大棚，配置了全自動熱風加溫機、水簾、鼓風機、上噴系統(tǒng)和滴灌系統(tǒng)、施肥器、發(fā)芽車、種植床和運輸工具等，能保證科研的正常進行。而且我們系自1998年以來已從

9、事組織培養(yǎng)技術(shù)研究10多年，已經(jīng)成功培養(yǎng)過大花惠蘭、非洲菊、水生鳶尾、金邊絲蘭、滿天星等10多種植物的組培苗，技術(shù)力量完全可以承擔本課題中的春蘭組培苗的培養(yǎng)。在科技管理能力方面，本校5年前就專門設(shè)立了科技管理處?？萍脊芾硖庁撠熣n題信息的傳達、課題的申報與審批、課題的實施管理、課題經(jīng)費的管理、課題參加人員的協(xié)調(diào)等方面的工作，管理公開、規(guī)范，管理能力優(yōu)秀。 四、預(yù)期成果我們想針對移栽后的組培苗成活率低、開花能力不強的根本原因是蘭根中不形成菌根結(jié)構(gòu)的這一特性，分離、篩選出對蘭苗生長有促進作用的菌株至少1個，并進行大量繁殖，從而對春蘭達到快速繁殖的目的， 獲得示范栽培春蘭組培苗50盆。五、經(jīng)費預(yù)算能源材料0.4萬；試劑消耗0.2萬；其它費用0.4萬，共計1萬。六、導(dǎo)師推薦意見整個科研周期不是很長，滿足學(xué)生在校期間基本能夠完成課題任務(wù)。由于花費時間不是很多，對學(xué)生的業(yè)余時間也沒有造成太大沖擊，