春蘭內(nèi)生菌的分離及其在種苗生產(chǎn)上的應(yīng)用

1、江蘇省高等學(xué)校大學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目申請(qǐng)表項(xiàng)目名稱春蘭內(nèi)生菌的分離及其在種苗生產(chǎn)上的應(yīng)用項(xiàng)目所屬一級(jí)專業(yè)門農(nóng)林牧漁項(xiàng)目所屬二級(jí)專業(yè)類農(nóng)業(yè)技術(shù)項(xiàng)目類型（） 個(gè)人項(xiàng)目 （） 團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目項(xiàng)目實(shí)施時(shí)間起始時(shí)間： 2009年9月 完成時(shí)間： 2010年11 月申請(qǐng)人或申請(qǐng)團(tuán)隊(duì)姓名年級(jí)學(xué)校所在院系、專業(yè)聯(lián)系電話E-mail主持人丁云三南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院園藝/日語(yǔ)吳承東一南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院植物保護(hù)成 員胡長(zhǎng)婷二南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院園林工程王文娟一南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院植物保護(hù)成誼新一南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院植物保護(hù)楊曉雪一南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院植物保護(hù)導(dǎo) 師姓名吳雯雯，陳錦坤年齡26，44單位南通農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)

2、學(xué)院行政職務(wù)/專業(yè)技術(shù)職務(wù)講師，教授主要成果吳雯雯，2008年畢業(yè)于揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)學(xué)院作物遺傳育種專業(yè)，2008年-2009年參與學(xué)院植物組織培養(yǎng)技術(shù)項(xiàng)目課程的建設(shè)與實(shí)施，2008年指導(dǎo)的學(xué)生創(chuàng)新作品生態(tài)水生鳶尾苗獲得南通市第二屆職業(yè)教育創(chuàng)新大賽一等獎(jiǎng)，并獲得江蘇省比賽二等獎(jiǎng)。陳錦坤：1、近5年來(lái)承擔(dān)的技術(shù)研發(fā)項(xiàng)目或技術(shù)服務(wù)及效果課 題 名 稱來(lái) 源年限作用效果甲殼素及其衍生物在農(nóng)業(yè)和環(huán)保上的應(yīng)用南通市科技局1999-2002主持好牧草的引種與適應(yīng)性研究南通市科技局1999-2003主持好專用高蛋白大豆的引進(jìn)及其優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化南通市科技局2001-2004主持好2、在國(guó)內(nèi)外公開發(fā)行刊物上發(fā)表的相關(guān)

3、論文論文、論著題目刊物名稱發(fā)表時(shí)間署名次序NP配比對(duì)專用高蛋白大豆產(chǎn)量和品質(zhì)的調(diào)節(jié)效應(yīng)大豆科學(xué)2006年第2期第一作者播期對(duì)專用高蛋白大豆產(chǎn)量和品質(zhì)的調(diào)節(jié)效應(yīng)大豆科學(xué)2007年第1期第一作者“作物栽培環(huán)境”教材江蘇科學(xué)技術(shù)出版社2007年2月主編3、獲得的表彰/獎(jiǎng)勵(lì)或獲得的專利獎(jiǎng)項(xiàng)名稱授予單位時(shí)間“外向型萬(wàn)畝蔬菜園區(qū)建設(shè)江蘇省農(nóng)林廳農(nóng)業(yè)科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)南通市農(nóng)業(yè)科技推廣三等獎(jiǎng)”省農(nóng)林廳市政府1999年一、申請(qǐng)理由（包括自身具備的知識(shí)條件、自己的特長(zhǎng)、興趣、已有的實(shí)踐創(chuàng)新成果等）春蘭以其色雅、味甜、形美、氣清而深受人們的青睞，江浙等地已將此作為產(chǎn)業(yè)化發(fā)展和經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)的重要支撐點(diǎn)。春蘭一般散生或片生于

4、海拔600 -1800 m的自然林緣地帶，也有生長(zhǎng)在海拔300-600 m的山間溪谷，如浙江的四明山、杭州的五云山等低海拔山區(qū)均有名種產(chǎn)出，其中春蘭皇后“綠云”就出于杭州的五云山。春蘭所生長(zhǎng)的局部環(huán)境往往要在散射光充足，濕度較大、遮光率40-50的溝邊竹林或次生林叢種，而太陰或陽(yáng)光直射的林地則少有生長(zhǎng)。從春蘭的數(shù)量和品質(zhì)上來(lái)說(shuō)，浙江、江蘇為盛產(chǎn)區(qū)，而江蘇尤以南通出名，現(xiàn)種植品種有70多個(gè)。據(jù)資料記載，我國(guó)1978年以前發(fā)現(xiàn)、培育的春蘭有近300種，目前，在浙江杭州、紹興、余姚、寧波等地，通過蘭友引種、栽培和市場(chǎng)流通的春蘭新種約有200多種。然而真正好的蘭花由于數(shù)量的限制，一直是達(dá)官貴人們的玩物

5、，普通老百姓雖然喜愛蘭花，面對(duì)高昂的價(jià)格，也只能望蘭興嘆。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，運(yùn)用科學(xué)栽培管理技術(shù)養(yǎng)蘭花，提高了蘭花的自然繁殖率，使得更多的人可以在家里欣賞到自己喜愛的蘭花，尤其是現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展，蘭花的組織培養(yǎng)獲得成功，組培苗的商品化生產(chǎn)和推廣，使名貴蘭花走進(jìn)尋常百姓家成為可能。春蘭組培雖然能大量繁殖，但移栽后的組培苗成活率低，生長(zhǎng)緩慢，開花延遲，花小甚至不開花。其原因是蘭根中不形成菌根結(jié)構(gòu)，菌根真菌不能為蘭花的生長(zhǎng)提供所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。組培苗菌根化是促進(jìn)春蘭快速繁殖的重要技術(shù)，也是解決瀕危蘭花資源人工栽培的關(guān)鍵。因此，開展內(nèi)生菌在春蘭栽培上的應(yīng)用，探索利用蘭科內(nèi)生菌根真菌促進(jìn)地生蘭生長(zhǎng)

6、發(fā)育的方法，可提高春蘭組培苗的成活率，為解決蘭科珍貴花卉人工栽培提供理論依據(jù)，也使得本項(xiàng)研究具有一定的挑戰(zhàn)性。我們研究小組由6人組成，都是生物工程系的學(xué)生，其中1人為雙?？迫昙?jí)的學(xué)生,1人為在校二年級(jí)學(xué)生，4人為在校一年級(jí)學(xué)生。6個(gè)人平時(shí)對(duì)搞小科研都比較感興趣，跟老師接觸也比較多，因而對(duì)有老師指導(dǎo)的科研活動(dòng)比較喜歡，我們決心將這次科研活動(dòng)搞好，圓滿完成這次實(shí)踐創(chuàng)新訓(xùn)練任務(wù)。二、項(xiàng)目方案（包括項(xiàng)目的訓(xùn)練目標(biāo)、前期準(zhǔn)備、組織實(shí)施、過程管理、實(shí)踐環(huán)節(jié)、教師指導(dǎo)、項(xiàng)目結(jié)題等）本項(xiàng)研究我們準(zhǔn)備分兩步進(jìn)行，第一步是春蘭內(nèi)生菌的分離篩選。這項(xiàng)工作的進(jìn)行，首先通過對(duì)蘭花根際及其土壤微生物的培養(yǎng)，分離出若干微

7、生物種類，然后將已分離出的微生物與春蘭組培苗根系共生，篩選出適合于春蘭根系共生的菌株。 第二步是內(nèi)生菌在春蘭栽培上的應(yīng)用。我們通過對(duì)春蘭根系共生菌進(jìn)行生物學(xué)鑒定，確定該菌株的結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)、繁殖條件，并進(jìn)行大量繁殖。然后系統(tǒng)研究組培苗接種內(nèi)生菌對(duì)春蘭生長(zhǎng)發(fā)育的影響，內(nèi)容包括內(nèi)生菌對(duì)春蘭養(yǎng)分、水分吸收、呼吸作用、干物質(zhì)積累等方面的影響。三、學(xué)校提供條件（包括項(xiàng)目開展所需的實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)情況、配套經(jīng)費(fèi)、相關(guān)扶持政策等）我們都是高等職業(yè)技術(shù)學(xué)院的學(xué)生，分別來(lái)自生物工程系的園藝和植保專業(yè)，其中4人為在校一年級(jí)的學(xué)生，1人為在校二年紀(jì)的學(xué)生，1人為雙?？迫昙?jí)的學(xué)生。我們的指導(dǎo)老師具有教授職稱。大家對(duì)于科研都很有

8、熱情，也經(jīng)常幫助老師做實(shí)驗(yàn)，尤其對(duì)微生物和園藝類的試驗(yàn)很感興趣，所以大家申報(bào)這次的科研課題。我們系的植物組織培養(yǎng)室有30多人可以同時(shí)操作的配制培養(yǎng)基的準(zhǔn)備室、8臺(tái)超凈工作臺(tái)16人同時(shí)操作的無(wú)菌操作室和年產(chǎn)30萬(wàn)苗的培養(yǎng)室。實(shí)驗(yàn)室中配備了全自動(dòng)的和手提式的高壓滅菌器、搖床、光溫培養(yǎng)箱等先進(jìn)設(shè)備。該實(shí)驗(yàn)室已成為南通市生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室以及江蘇省教育廳園藝實(shí)訓(xùn)基地的重要組成部分。我們系的組培苗栽培基地?fù)碛?000 m2的智能溫室和7000 m2的連棟大棚，配置了全自動(dòng)熱風(fēng)加溫機(jī)、水簾、鼓風(fēng)機(jī)、上噴系統(tǒng)和滴灌系統(tǒng)、施肥器、發(fā)芽車、種植床和運(yùn)輸工具等，能保證科研的正常進(jìn)行。而且我們系自1998年以來(lái)已從

9、事組織培養(yǎng)技術(shù)研究10多年，已經(jīng)成功培養(yǎng)過大花惠蘭、非洲菊、水生鳶尾、金邊絲蘭、滿天星等10多種植物的組培苗，技術(shù)力量完全可以承擔(dān)本課題中的春蘭組培苗的培養(yǎng)。在科技管理能力方面，本校5年前就專門設(shè)立了科技管理處?？萍脊芾硖庁?fù)責(zé)課題信息的傳達(dá)、課題的申報(bào)與審批、課題的實(shí)施管理、課題經(jīng)費(fèi)的管理、課題參加人員的協(xié)調(diào)等方面的工作，管理公開、規(guī)范，管理能力優(yōu)秀。 四、預(yù)期成果我們想針對(duì)移栽后的組培苗成活率低、開花能力不強(qiáng)的根本原因是蘭根中不形成菌根結(jié)構(gòu)的這一特性，分離、篩選出對(duì)蘭苗生長(zhǎng)有促進(jìn)作用的菌株至少1個(gè)，并進(jìn)行大量繁殖，從而對(duì)春蘭達(dá)到快速繁殖的目的， 獲得示范栽培春蘭組培苗50盆。五、經(jīng)費(fèi)預(yù)算能源材料0.4萬(wàn)；試劑消耗0.2萬(wàn)；其它費(fèi)用0.4萬(wàn)，共計(jì)1萬(wàn)。六、導(dǎo)師推薦意見整個(gè)科研周期不是很長(zhǎng)，滿足學(xué)生在校期間基本能夠完成課題任務(wù)。由于花費(fèi)時(shí)間不是很多，對(duì)學(xué)生的業(yè)余時(shí)間也沒有造成太大沖擊，