細(xì)胞工程總復(fù)習(xí)

1、第一章 緒論一、概念細(xì)胞工程：是運(yùn)用細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和微生物學(xué)的基本理論及工程學(xué)原理，以生物體組織或細(xì)胞為研究對(duì)象，按照預(yù)定目標(biāo)，有計(jì)劃地大規(guī)模培養(yǎng)生物組織和細(xì)胞，獲得生物產(chǎn)品，或改變生物性狀，為人類生產(chǎn)或生活服務(wù)的學(xué)科。組織培養(yǎng)：利用生物體的各部分組織、細(xì)胞或器官進(jìn)行離體培養(yǎng)，包括動(dòng)植物組織、細(xì)胞核器官、植物花藥和花粉培養(yǎng)，動(dòng)物生殖細(xì)胞、胚胎和干細(xì)胞培養(yǎng)等，使之形成細(xì)胞群，愈傷組織或完整有機(jī)體。染色體工程：是指借助于物理、化學(xué)或生物學(xué)等方法，將生物染色體有目的地添加、消除或置換，從而改變生物染色體的數(shù)目和結(jié)構(gòu)，達(dá)到改變生物體性狀的目的。轉(zhuǎn)基因生物：是指利用細(xì)胞工程結(jié)合基因工程的方法將人

2、們需要的目的基因?qū)氲绞荏w生物細(xì)胞中，使外源基因與其染色體基因組整合，并隨著細(xì)胞的分裂而增殖，并使目的基因在受體生物體內(nèi)表達(dá)，并穩(wěn)定遺傳給后代。二、簡(jiǎn)答（一）細(xì)胞工程的研究?jī)?nèi)容？u 組織培養(yǎng)u 原生質(zhì)體培養(yǎng)和細(xì)胞融合u 染色體工程u 轉(zhuǎn)基因生物u 植物無病毒植株培養(yǎng)及繁殖u 動(dòng)物胚胎移植u 動(dòng)物體外受精和克隆動(dòng)物u 微生物發(fā)酵和固定化技術(shù)u 種質(zhì)資源保存或保藏第二章一、概念細(xì)胞全能性：是指植物體的每個(gè)活細(xì)胞都具有該植物的全套遺傳信息，與合子一樣具備發(fā)育成完整植株的潛能。細(xì)胞增殖的方式：（一）無絲分裂（二）有絲分裂（三）減數(shù)分裂有絲分裂：是指一種真核細(xì)胞分裂產(chǎn)生體細(xì)胞的過程。細(xì)胞壞死：指細(xì)胞受到

3、物理、化學(xué)或生物因素（如機(jī)械損傷、毒物、微生物、輻射等）的侵襲而造成的細(xì)胞崩潰裂解，是一種被動(dòng)的、突發(fā)性的、非生理性死亡。細(xì)胞凋亡：是指細(xì)胞在一定的生理或病理?xiàng)l件下，受基因調(diào)控主動(dòng)結(jié)束生命的現(xiàn)象。由于受嚴(yán)格的由遺傳機(jī)制決定的程序性調(diào)控也稱細(xì)胞程序性死亡。細(xì)胞分化：胚胎細(xì)胞分裂后，后代細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生差異的過程。細(xì)胞決定：發(fā)育過程中不同細(xì)胞有著自己的特殊發(fā)育方向。細(xì)胞在發(fā)生形態(tài)和功能的分化之前，就已收到約束，而具有向著特定方向分化的趨勢(shì)。二、簡(jiǎn)答（一）細(xì)胞分化的基本特征？答：細(xì)胞形態(tài)和功能間出現(xiàn)穩(wěn)定差異；細(xì)胞生理狀態(tài)發(fā)生改變；細(xì)胞分化潛能逐漸變窄；細(xì)胞核分化潛能保持完整；（二）什么

4、是細(xì)胞的全能性？動(dòng)物和植物細(xì)胞的全能性如何理解？答：細(xì)胞全能性是指細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能，其物質(zhì)基礎(chǔ)是具有供發(fā)育所需要的整套的遺傳物質(zhì)。因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞都是由受精卵經(jīng)有絲分裂而來，遺傳物質(zhì)和受精卵相同，因此都具有供發(fā)育所需要的全套遺傳物質(zhì)，從可能性上講都具有發(fā)育的全能性。但是就目前已經(jīng)通過植物組織培養(yǎng)可將例題的植物細(xì)胞培養(yǎng)成新植株，證明了植物細(xì)胞的全能性，而動(dòng)物細(xì)胞在體外只能培養(yǎng)成細(xì)胞或組織器官，而不能發(fā)育成完整個(gè)體，而利用核移植的方法克隆而來的動(dòng)物也只能說明其細(xì)胞核具有全能性。所以，目前為止，所說的植物和動(dòng)物細(xì)胞具有全能性是指植物的體細(xì)胞和動(dòng)物的細(xì)胞核具有全能性。第三章 細(xì)胞工程

5、基本技術(shù)一 概念消毒：是指殺死物體上病原微生物的方法，并不一定能殺死含芽孢的細(xì)菌或非病原微生物。滅菌：是指殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌要求高，包括殺滅細(xì)菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。二簡(jiǎn)答細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室的基本結(jié)構(gòu)？第四章 植物組織培養(yǎng)技術(shù)一、概念植物組織培養(yǎng)：在離體（in vitro）條件下，利用人工培養(yǎng)基對(duì)植物器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等進(jìn)行培養(yǎng)，使其長(zhǎng)成完整的植株。 極性：細(xì)胞的結(jié)構(gòu)或物質(zhì)分布形成軸性梯度，產(chǎn)生不對(duì)稱極的特性。外植體：植物組織培養(yǎng)中，用來進(jìn)行無菌培養(yǎng)的離體材料，可以是器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。愈傷組織：在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團(tuán)不規(guī)則細(xì)胞。

6、（多在外植體切面上產(chǎn)生，且多為薄壁細(xì)胞）繼代培養(yǎng)：愈傷組織在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，營(yíng)養(yǎng)物枯竭，水分散失，并積累了一些代謝產(chǎn)物，此時(shí)需要將這些組織轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上，這種轉(zhuǎn)移為繼代培養(yǎng)。細(xì)胞分化：細(xì)胞形成不同的結(jié)構(gòu)，引起功能改變或潛在發(fā)育方式改變的過程。脫分化：已分化的細(xì)胞在人工誘導(dǎo)條件下，恢復(fù)分生能力，回復(fù)到分生組織狀態(tài)的過程。再分化：脫分化后具有分生能力的細(xì)胞再經(jīng)過與原來相同的分化過程，重新形成各類組織和器官的過程。胚狀體：在離體培養(yǎng)過程中產(chǎn)生一種形似胚，功能與胚相同的結(jié)構(gòu)。胚狀體及體細(xì)胞胚。植物細(xì)胞全能性：植物離體繁殖：指利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其短期內(nèi)獲得遺傳性一致

7、的大量再生植株的方法。褐變：是指外植體在培養(yǎng)過程，自身組織從表面向培養(yǎng)基釋放出褐色物質(zhì)，以致培養(yǎng)基逐漸變成褐色，外植體也隨之進(jìn)一步變褐而死亡的現(xiàn)象?；ㄋ幣囵B(yǎng)和花粉培養(yǎng)：指離體培養(yǎng)花藥和花粉，使花粉改變?cè)瓉淼呐渥芋w發(fā)育途徑，轉(zhuǎn)向孢子體體發(fā)育途徑，形成花粉胚或花粉愈傷組織，最后形成花粉植株從中鑒定出單倍體植株并使之二倍化的細(xì)胞工程技術(shù)胚胎培養(yǎng)：指使胚或具胚器官（如子房、胚珠等）在離體無菌條件下發(fā)育成幼苗的技術(shù)。幼胚培養(yǎng)：則指胚齡處于早期原胚、球形期胚、心形期胚、魚雷期胚的培養(yǎng)。成熟胚培養(yǎng)：一般指子葉期至發(fā)育成熟胚的培養(yǎng)，其培養(yǎng)較易成功。胚培養(yǎng)：指在無菌條件下將胚從胚珠或種子中分離出來，置于培養(yǎng)基上

8、進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)。胚乳培養(yǎng)：指對(duì)處于細(xì)胞期的胚乳組織進(jìn)行離體培養(yǎng)的方法。胚珠培養(yǎng)：是指未受精或受精后的胚珠離體培養(yǎng)。離體授粉（離體受精）：離體授粉指在無菌條件下培養(yǎng)未受精子房或胚珠和花粉，使花粉萌發(fā)進(jìn)入胚珠，完成受精過程。脫毒苗：是利用植物組織培養(yǎng)方法，脫除影響植物正常生長(zhǎng)的病毒，通過可靠的檢測(cè)技術(shù)驗(yàn)證，然后采用無菌快繁獲得的不帶特定病毒的苗木。指示植物：病毒學(xué)家在研究新的或可疑的病毒，尤其是可以通過汁液傳播的病毒時(shí)，希望能尋求到一種轉(zhuǎn)株寄主植物，而這種轉(zhuǎn)株寄主能對(duì)汁液接種產(chǎn)生迅速和特有的反應(yīng)，如能在接種葉片上形成局部病斑等，通常將這種轉(zhuǎn)株寄主植物稱為指示植物。二、簡(jiǎn)答（一）體細(xì)胞胚發(fā)生的途徑？

9、1.直接從器官外植體上發(fā)生2.愈傷組織發(fā)生 3.懸浮細(xì)胞發(fā)生4.單倍體細(xì)胞發(fā)生 5.原生質(zhì)體發(fā)生 （二）植物組織培養(yǎng)的基本步驟？1.無菌外植體的獲得2.初代培養(yǎng)物的建立3.形態(tài)發(fā)生和植株再生4.培養(yǎng)物的觀察和記錄（三）植物離體繁殖的特點(diǎn)？1、繁殖效率高。2、培養(yǎng)條件可控性強(qiáng)。3、占用空間小。4、管理方便，利于自動(dòng)化控制。5、便于種質(zhì)保存和交換。（四）病毒的分布特點(diǎn)？答：1.病毒侵染植物后是隨維管束轉(zhuǎn)移到其他部位2.老葉和成熟組織及其器官中病毒含量較高，幼嫩和未成熟的組織及器官中病毒含量較低，而在根尖、莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)0.1-1mm區(qū)域幾乎不含病毒。（五）植物脫毒的方法？1.熱處理脫毒法2.莖尖培養(yǎng)脫

10、毒法3.莖尖培養(yǎng)與熱處理相結(jié)合脫毒法4.微體嫁接法5.愈傷組織脫毒法6.花藥組織脫毒法7.化學(xué)方法8.低溫結(jié)合莖尖培養(yǎng)法（六）脫毒植株檢測(cè)方法？1.直接檢測(cè)法2.指示植物檢測(cè)法3.抗血清檢測(cè)法4.分子生物學(xué)檢測(cè)法（七）花藥和花粉植株倍性鑒定？1.形態(tài)鑒定2.結(jié)實(shí)性鑒定3.染色體數(shù)目鑒定4. 遺傳標(biāo)記鑒定5. 流式細(xì)胞儀鑒定法（八）基本培養(yǎng)基的選擇（1）常用的培養(yǎng)基有MS、Nitsch、B5、N6、H、Miller培養(yǎng)基等（2）基本培養(yǎng)基的影響實(shí)質(zhì)上是無機(jī)鹽離子濃度、氮源總濃度、銨態(tài)氮和硝態(tài)氮的濃度和比值等差異造成的。如MS和Nitsch培養(yǎng)基為大多數(shù)十字花科和豆科植物所選用。（九）生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)

11、的選擇1、在花藥和花粉培養(yǎng)的脫分化階段，生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的選擇是最重要的壞節(jié)。2、和花粉培養(yǎng)的主要內(nèi)容是生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的篩選，包括生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的種類、濃度及配比。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的選擇，主要根據(jù)植物種類和植株再生方式來進(jìn)行。如玉米胚狀體發(fā)生的適宜激素配比是2mg/L 2, 4-D+1.0mg/L KT+2,0mg/L 6-BA，器官發(fā)生則為2.0mg/L 2，4-D+1.0mg/L KT；而葡萄胚狀體發(fā)生的適宜激素配比則為0.2mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA,器官發(fā)生為位0.5mg/L 2,4-D+10mg/L +-BA。需要注意的是，附加生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)以盡可能少為好，尤其是2,4-D，否則易

12、產(chǎn)生白化苗。以下是作業(yè)生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素和赤霉素的作用及相互作用？（1）生長(zhǎng)素類誘導(dǎo)愈傷組織形成；誘導(dǎo)根的分化；促進(jìn)細(xì)胞分裂伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。（2）細(xì)胞分裂素類誘導(dǎo)芽的分化，促進(jìn)側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)。促進(jìn)細(xì)胞分裂與擴(kuò)大；抑制根的分化。（3）赤霉素類 赤霉素主要用于刺激在培養(yǎng)中形成的不定胚發(fā)育成小植株，促進(jìn)幼苗莖的伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。赤霉素和生長(zhǎng)素協(xié)同作用，對(duì)形成層的分化有影響 赤霉素還用于打破休眠，促進(jìn)種子、塊莖、鱗莖等提前萌發(fā)（4）生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑之間的相互關(guān)系細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素相互作用： 當(dāng)組織內(nèi)生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比例低時(shí)，誘導(dǎo)愈傷組織或器官分化出不定芽；比值高有利于根的分化，抑制芽的形成，比值低是有利于芽的分化，抑制根

13、的形成，比值適中是促進(jìn)愈傷組織的形成。生長(zhǎng)素與赤霉素的相互作用： 當(dāng)生長(zhǎng)素/赤霉素比值高時(shí)有利于木質(zhì)部分化，比值低時(shí)有利于韌皮部分化。 植物離體繁殖中器官發(fā)生方式?短枝發(fā)生型（不定芽型）叢生芽發(fā)生型（器官型）器官發(fā)生性胚狀體發(fā)生型原球莖發(fā)生型。莖尖分生組織帶毒低的主要原因？植物體內(nèi)，病毒容易通過維管系統(tǒng)而移動(dòng)，但分生組織中不存在維管系統(tǒng)。病毒在細(xì)胞間移動(dòng)的另一個(gè)途徑是通過胞間連絲，但是移動(dòng)速度很慢，難以追趕上活躍生長(zhǎng)的莖尖。在旺盛分裂的分生細(xì)胞中，代謝活性很高，病毒無法復(fù)制。莖尖中存在高水平內(nèi)源生長(zhǎng)素，可以抑制病毒的增殖。倘若在植物體內(nèi)確實(shí)存在著“病毒鈍化系統(tǒng)”的話，它在分生組織中應(yīng)該比在任何

14、其他區(qū)域都有更高的活性，因而分生組織不侵染。單倍體培育的意義？克服后代分離，縮短育種年限；選擇效率高；有利于隱性基因控制性狀的選擇；快速獲得純合自交系；其他：復(fù)壯；遠(yuǎn)緣雜交；進(jìn)行花粉發(fā)育等的理論研究。單倍體的鑒定方法？1.形態(tài)鑒定2.結(jié)實(shí)性鑒定3.染色體數(shù)目鑒定4. 遺傳標(biāo)記鑒定5. 流式細(xì)胞儀鑒定法6.植物胚胎培養(yǎng)的意義胚乳、胚珠和子房培養(yǎng)的意義？答：胚乳培養(yǎng)的意義：胚乳培養(yǎng)再生植株證明了全能性理論； 研究胚和胚乳的關(guān)系及胚乳組織的功能；再生植株多為三倍體，產(chǎn)生無籽果實(shí)；可以從胚乳愈傷中分離和篩選各種類型的非整倍體植株；胚乳細(xì)胞是研究淀粉、蛋白質(zhì)和脂類天然產(chǎn)物代謝途徑的理想系統(tǒng)。胚珠培養(yǎng)的意

15、義：防止雜種胚早期敗育，獲得雜種植株；受精前胚珠培養(yǎng)，可作為試管受精的基礎(chǔ)；未受精的胚珠培養(yǎng)，能培養(yǎng)獲得單倍體植株，用于單倍體育種；子房培養(yǎng)的意義：獲得雜種植株；未授精子的子房培養(yǎng)為試管受精提供技術(shù)基礎(chǔ)；未受精子房培養(yǎng)能獲得單倍體植株，用于單倍體育種；離體授粉的意義？答：可以克服遠(yuǎn)緣雜交中不親和性，特別是離體子房授粉和離體胚珠授粉能消除柱頭和花柱所造成的受精前障礙。褐變的原因及預(yù)防措施？答：褐變?cè)颍?多酚氧化酶木質(zhì)素 醌 積累造成毒害。 O褐變的防止措施：（1）選擇適宜的外植體（2）選擇合適的培養(yǎng)條件（3）外植體預(yù)處理（還原劑浸泡）（4）加快繼代轉(zhuǎn)接的速度（5）加抗氧化劑（VC、PVP、牛血

16、清、牛蛋白） （6）0.10.5%活性炭第五章 植物細(xì)胞培養(yǎng)及次生代謝物生產(chǎn)一、概念植物細(xì)胞培養(yǎng)：是指在離體條件下對(duì)植物單個(gè)細(xì)胞或小的細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)并使其增殖，獲得大量細(xì)胞群體的一種技術(shù)。細(xì)胞融合：指使用人工方法使兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞合并形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。細(xì)胞同步化：是指同一懸浮培養(yǎng)體系的所有細(xì)胞都同時(shí)通過細(xì)胞周期的某一特定時(shí)期，使細(xì)胞保持相對(duì)一致的細(xì)胞學(xué)和生理學(xué)狀態(tài)，便于研究細(xì)胞分裂和細(xì)胞代謝。植物細(xì)胞生物反應(yīng)器：是指用于植物細(xì)胞批量化培養(yǎng)的裝置及其相應(yīng)控制系統(tǒng)。植板率：是能長(zhǎng)出細(xì)胞團(tuán)的單細(xì)胞在接種單細(xì)胞總和中所占的比例。看護(hù)培養(yǎng)：是指用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來促進(jìn)培養(yǎng)細(xì)胞持續(xù)分裂和增殖的

17、培養(yǎng)方法。細(xì)胞固定化定義：指將游離的細(xì)胞包埋在多糖或多聚化合物制備成的網(wǎng)狀支持物中，培養(yǎng)液呈流動(dòng)狀態(tài)，進(jìn)行無菌培養(yǎng)的一種技術(shù)。初級(jí)代謝產(chǎn)物：是通過初級(jí)代謝產(chǎn)生的維持細(xì)胞生命活動(dòng)必需的物質(zhì)，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂類等。次生代謝產(chǎn)物：是通過次級(jí)代謝合成的產(chǎn)物，是指植物中一大類并非植物生長(zhǎng)發(fā)育所必需的小分子有機(jī)化合物，其產(chǎn)生和分布通常有種屬、器官組織和生長(zhǎng)發(fā)育期的特異性。細(xì)胞系：是由原代培養(yǎng)經(jīng)傳代培養(yǎng)純化，獲得的以一種細(xì)胞為主的、能在體外長(zhǎng)期生存的不均一的細(xì)胞群體。細(xì)胞株：是指從一個(gè)經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。誘導(dǎo)子：指能刺激細(xì)胞合成次生代謝

18、產(chǎn)物的物質(zhì)。二、簡(jiǎn)答1.懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的同步化方法？答：物理方法：(1)體積選擇法：又稱分選法;(2)冷處理法 化學(xué)法:(1)饑餓法;(2)抑制法;(3)有絲分裂阻抑法2.提高次生代謝產(chǎn)物的方法?答：選擇高產(chǎn)細(xì)胞系優(yōu)化培養(yǎng)基飼喂前體物質(zhì)使用誘導(dǎo)子（elicitor）改善培養(yǎng)條件改進(jìn)培養(yǎng)方法固定化細(xì)胞培養(yǎng)第六章 植物原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交一、概念原生質(zhì)體：指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是一個(gè)被質(zhì)膜所包圍的裸露細(xì)胞。原生質(zhì)體融合：是指將植物的不同種、屬甚至科間的原生質(zhì)體，通過人工方法誘導(dǎo)融合，然后進(jìn)行離體培養(yǎng)，使其再生成為雜種植株的技術(shù)。體細(xì)胞雜交：兩種異源（種、屬間）原生質(zhì)體，在人工控制條件下，相互接觸從

19、而發(fā)生膜融合，胞質(zhì)融合和核融合并形成雜種細(xì)胞的過程。二、簡(jiǎn)答1.原生質(zhì)體培養(yǎng)的意義？u 建立單細(xì)胞無性系u 用于原生質(zhì)體融合u 遺傳轉(zhuǎn)化的良好受體u 多種基礎(chǔ)理論研究的實(shí)驗(yàn)材料2.體細(xì)胞雜交的意義？ 實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交，形成新的物種； 創(chuàng)造細(xì)胞質(zhì)雜種； 培育作物新種質(zhì)和新品種；3.雜種細(xì)胞的篩選方法？1. 根據(jù)物理特性直觀選擇2. 互補(bǔ)篩選法3. 根據(jù)生長(zhǎng)和再生能力的差別選擇第七章 人工種子一、概念人工種子：是指植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的胚狀體或不定芽包裹在含有營(yíng)養(yǎng)成分和保護(hù)功能的人工胚乳和人工種皮中形成的能發(fā)芽出苗的顆粒體。人工種子的結(jié)構(gòu)：由胚狀體、人工種皮和人工胚乳構(gòu)成。二、簡(jiǎn)答（一）人工種子的特點(diǎn)?

20、通過組織培養(yǎng)的方法可以獲得數(shù)量很多的胚狀體而且繁殖速度快，結(jié)構(gòu)完整； 可根據(jù)不同植物對(duì)生長(zhǎng)的要求配置不同成分的“種皮”； 在大量繁殖苗木和用于人工造林方面，人工種子比采用試管苗的繁殖方法更能降低成本，而且方便機(jī)械化播種，可節(jié)省勞動(dòng)力； 體細(xì)胞胚是由無性繁殖體系產(chǎn)生的，因而可以固定雜種； 有時(shí)可以在人工種子中加入某些農(nóng)藥、菌肥、有益微生物、激素等； 胚狀體發(fā)育的途徑可以作為高等植物基因工程和遺傳工程的橋梁。 解決了有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題。第八章 植物種質(zhì)資源保存一、概念種質(zhì)：是決定生物遺傳性狀，并將遺傳信息從親代傳遞給子代的遺傳物質(zhì)。種質(zhì)資源：即為攜帶各種不同遺傳物質(zhì)的

21、植物總稱，又稱遺傳資源或品種資源，包括栽培，野生及人工創(chuàng)造的各種植物的品種種質(zhì)資源保存：是指在天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境條件下，貯存植物種質(zhì)，使其保持生命力與遺傳性的技術(shù)。原生境保存（原地保存）：將植物的遺傳材料保存在它們的自然環(huán)境中。非原生境保存（異地保存）：將植物的遺傳材料保存在不是它們的自然生境的地方。種質(zhì)資源的離體保存：是指對(duì)離體培養(yǎng)的小植株、器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體等材料，采用限制、延緩或停止其生長(zhǎng)的處理措施使之保存，在需要時(shí)可重新恢復(fù)其生長(zhǎng)，并再生植株的方法。二、簡(jiǎn)答1 為什么要進(jìn)行種質(zhì)資源的保存？答：種質(zhì)資源或稱基因庫是選育新品種的最基本的原始材料。植物種質(zhì)資源的多樣性由于自然災(zāi)

22、害和人為活動(dòng)受到嚴(yán)重影響，作物品種資源日益匱乏。2 種質(zhì)資源保存的方法？答：種植保存、貯藏保存、離體保存和基因文庫保存。3.超低溫保存的原理？答：細(xì)胞冰凍結(jié)冰保護(hù)性脫水理論溶液的玻璃化理論4.離體保存的意義 ？答：可使一些無性繁殖作物種質(zhì)資源低溫長(zhǎng)期保存，避免資源的丟失。節(jié)省土地和勞力，方法簡(jiǎn)單，花費(fèi)少并能在保存中脫毒。一旦利用可快速繁殖；也利于種質(zhì)交換。5.細(xì)胞冰凍結(jié)冰保護(hù)性脫水理論？答：常溫下，細(xì)胞及其溶液處于滲透平衡的狀態(tài)，當(dāng)溫度降到冰點(diǎn)以下時(shí)，首先是細(xì)胞外溶液部分“凍結(jié)”出冰；胞外溶液的濃度升高，破壞了細(xì)胞內(nèi)外溶液的平衡，水分由胞內(nèi)通過細(xì)胞膜向外滲透，細(xì)胞收縮，細(xì)胞內(nèi)濃度提高；當(dāng)溫度不

23、斷降低時(shí)，凍結(jié)和滲透過程不斷進(jìn)行，這種過程稱為保護(hù)性脫水。當(dāng)復(fù)溫時(shí)，溫度升高，凍結(jié)的冰不斷融化，水分由胞外向胞內(nèi)滲透，使收縮的細(xì)胞膨脹，可能恢復(fù)原狀。精確控制上述過程，能使細(xì)胞在降溫、復(fù)溫、滲透過程中不被損傷而死亡。6.溶液的玻璃化理論？答：溶液在降溫時(shí)，如果沒有均一晶核或晶核生長(zhǎng)缺乏足夠的時(shí)間，就首先形成過冷溶液。繼續(xù)降溫，均一晶核形成。如果降溫速度不夠快，就形成尖銳的冰晶。降溫速度足夠快，均一晶核很少或幾乎沒有形成，或均一晶核生長(zhǎng)缺乏足夠的時(shí)間，溶液就進(jìn)入無定型的玻璃化狀態(tài)。7.超低溫保存的基本程序？答：植物材料（培養(yǎng)物）的選取材料的預(yù)處理降溫冷凍及超低溫保存解凍：分快速解凍、慢速解凍再培養(yǎng)超低溫保存后細(xì)胞或組織活力檢測(cè)第九章 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)一、概念動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)：用無菌方法將動(dòng)物體內(nèi)細(xì)胞或組織取出，模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，在體外進(jìn)行培養(yǎng)，使離體細(xì)胞或組織生存、生長(zhǎng)并維持結(jié)構(gòu)和功能的一門技術(shù)。原代培養(yǎng)：直接從機(jī)體取出的細(xì)胞或組織進(jìn)行培養(yǎng)的過程。繼代培養(yǎng)：從原代培養(yǎng)的細(xì)胞繼續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)稱繼代培養(yǎng).細(xì)胞系：由原代細(xì)胞培養(yǎng)后經(jīng)初步純化，獲得的以一種細(xì)胞為主、能在體外長(zhǎng)期生存的不均一的細(xì)胞群體，一般為有限細(xì)胞系。細(xì)胞株：細(xì)胞系經(jīng)過克隆或其他方法獲得、由單細(xì)胞形成的單一類型的細(xì)胞群