凝血檢測(cè)質(zhì)量保證

1、凝血檢測(cè)質(zhì)量保證凝血檢測(cè)質(zhì)量保證炮制雖繁必不敢省人工品味雖貴必不敢減物力臨床實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制臨床實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制檢驗(yàn)結(jié)果：是臨床醫(yī)生診斷疾病，觀察療效，判斷預(yù)后的重要依據(jù)，檢驗(yàn)結(jié)果的可靠與否直接影響醫(yī)療質(zhì)量質(zhì)量控制技術(shù)：以臨床允許誤差為質(zhì)量目標(biāo)，由實(shí)驗(yàn)室選擇合適的控制規(guī)則和確定每批做幾個(gè)控制樣品，建立自己的控制方法，使檢驗(yàn)的質(zhì)量真正符合臨床要求全面質(zhì)量控制全面質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)比對(duì)室內(nèi)比對(duì)室間比對(duì)室間比對(duì)室間質(zhì)評(píng)室間質(zhì)評(píng)分析分析前前質(zhì)量控制質(zhì)量控制分析分析后后質(zhì)量控制質(zhì)量控制1、抗凝劑、抗凝劑：109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝。 與鈣離子形成可溶性螯合物而起到抗凝作用 有效阻止凝血因子

2、FV、FVIII的降解 不受肝素影響，以用于肝素治療的監(jiān)測(cè) EDTA ：抑制或干擾纖維蛋白凝塊形成纖維蛋白單體聚合， 對(duì)FV保護(hù)性差。 肝素：可與AT-作用抑制凝血因子的反應(yīng)。 草酸鹽：與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響血凝儀的光電終點(diǎn)。 分析前2、采血管順序、采血管順序（CLSI H3-A6）： 血培養(yǎng)管，凝血項(xiàng)目管（如：藍(lán)帽凝血項(xiàng)目管（如：藍(lán)帽） 含有或不含促凝劑、含有或不含分離膠的血清管（如：紅帽） 含有或不含分離膠的肝素血漿管（如：綠帽） 含有或不含分離膠的EDTA 管（如：紫帽或珍珠色帽） 含酵解抑制劑管（如：灰帽）對(duì)于凝血項(xiàng)目該對(duì)于凝血項(xiàng)目該文件改變文件改變了第一管必須棄置的要求了第一

3、管必須棄置的要求，當(dāng)，當(dāng)凝血管為第一管時(shí)，凝血管為第一管時(shí)，無論是正常人或口服華無論是正常人或口服華法令患者法令患者其其PT或或INR均均不受不受影響，正常人影響，正常人的的APTT不受影不受影響。但是尚不知其它凝血項(xiàng)目是否受到影響，因此對(duì)其它凝血項(xiàng)目，還是建響。但是尚不知其它凝血項(xiàng)目是否受到影響，因此對(duì)其它凝血項(xiàng)目，還是建議第二管采集議第二管采集。分析前3、采血管：內(nèi)壁應(yīng)硅化，而且死腔量越小越好。4、采血量：通常按1：9的抗凝比例采血。 但對(duì)于HCT55%的患者，血漿相對(duì)于抗凝劑量會(huì)減少，使凝血試驗(yàn)的結(jié)果延長(zhǎng)，應(yīng)調(diào)整采血量。需取出需取出抗凝抗凝劑量劑量(ml)=0.3-血量（血量（ml）0.

4、00185 (100-HCT%)5、標(biāo)本送檢條件：室溫下2小時(shí)內(nèi)送檢，低溫會(huì)損傷血小板活化因子，使PT結(jié)果降低。6、標(biāo)本保存時(shí)間：2-8 4小時(shí)，-20 1周，-80 6個(gè)月。7、凝血、溶血標(biāo)本為不合格標(biāo)本。分析前造成標(biāo)本溶血的原因注射器采血時(shí)抽吸力太大血液與抗凝劑比例失調(diào)混勻樣本時(shí)過度振蕩全血放置時(shí)間長(zhǎng)或突然受冷或受熱注射器中的血沫注入試管殘存負(fù)壓造成紅細(xì)胞破裂不拔針頭直接注入采血管樣本離心時(shí)離心力過大室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控的功能室內(nèi)質(zhì)控的功能：查找分析測(cè)定中的誤差，即用室內(nèi)質(zhì)控物的檢測(cè)結(jié)果去確認(rèn)常規(guī)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的有效性，如果確認(rèn)通過，此時(shí)的常規(guī)標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果才可用于疾病的診斷、治療及預(yù)后觀察等室內(nèi)

5、質(zhì)控1. 質(zhì)控品的選擇質(zhì)控品的選擇 1.1 檢測(cè)系統(tǒng)配套的質(zhì)控品1.2 第三方質(zhì)控品1.3 質(zhì)控品要求1 穩(wěn)定性 均質(zhì)性(瓶間差)2 基質(zhì)效應(yīng)3 定值與非定值4 項(xiàng)目覆蓋率5 分析物分析物水平水平6 效期、供貨、成本等自動(dòng)質(zhì)控！自動(dòng)質(zhì)控！室內(nèi)質(zhì)控2. 室內(nèi)室內(nèi)質(zhì)控項(xiàng)目、質(zhì)控頻度質(zhì)控項(xiàng)目、質(zhì)控頻度2.1 室內(nèi)質(zhì)控項(xiàng)目PT、INR、APTT、Fbg、TT、DD、FDP2.2 質(zhì)控頻度質(zhì)控頻度質(zhì)控頻度常規(guī)常規(guī) PT、INR4h一次、APTT5h一次、 TT 2h一次、Fbg 3h一次 DD開機(jī)時(shí)1次急診急診 PT、INR、APTT、Fbg、TT、DD 8h一次 FDP每日一次p允許CV建立與評(píng)估20

6、12年凝血允許CV評(píng)估p 失控率p 儀器失控率p 項(xiàng)目失控率室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控3. 質(zhì)控目標(biāo)的確立質(zhì)控目標(biāo)的確立失控限警告限室內(nèi)質(zhì)控4.質(zhì)控靶值及質(zhì)控靶值及SD的的累積累積 4.1 靶值設(shè)定？靶值設(shè)定？質(zhì)控廠商提供的數(shù)據(jù)僅供參考！質(zhì)控廠商提供的數(shù)據(jù)僅供參考！ 不同儀器對(duì)同一批號(hào)質(zhì)控的反應(yīng)程度不一樣！不同儀器對(duì)同一批號(hào)質(zhì)控的反應(yīng)程度不一樣！ 4.2 SD設(shè)設(shè)定？定？室內(nèi)質(zhì)控5. 質(zhì)控規(guī)則（質(zhì)控規(guī)則（Westgard多規(guī)則）多規(guī)則）http:/ 警告：12s、10 x、41s5.2 失控：22s、13s、R4s室內(nèi)質(zhì)控6. 室內(nèi)質(zhì)控月報(bào)表、失控處理記錄 允許誤差本室標(biāo)準(zhǔn)PT15%15%APTT15%

7、15%TTNA15%FBG20%10%DD3SD20%室內(nèi)比對(duì)1、頻率：每年2次。2、參與儀器：所有儀器，以參加EQA的儀器為參考儀器。3、執(zhí)行人員：當(dāng)班人員、質(zhì)控員；組長(zhǎng)、主任簽字確認(rèn)。4、比對(duì)血漿：收集高、中、低水平新鮮血漿共20份。5、比對(duì)項(xiàng)目：PT、INR、APTT、FBG、TT、DD。6、數(shù)據(jù)處理：錄入專用的EXCEL表格，統(tǒng)計(jì)r、bias%。7、判斷標(biāo)準(zhǔn)：PT、INR、APTT、FBG、DD各項(xiàng)r0.975，并且80%的樣本bias%在下列標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)為合格。8、比對(duì)試驗(yàn)不合格的儀器需啟用校準(zhǔn)程序。室內(nèi)比對(duì)*WFH衛(wèi)生部、北京市衛(wèi)生部、北京市CAPWFH（世界血友病聯(lián)盟）EQASPT

8、/INR、APTT、Fbg、TT（衛(wèi)生部，北京市）PT/INR、APTT、Fbg、D Dimer、FDP、凝血因子、狼瘡抗凝物、蛋白S/C、AT-III、vWF：Ag室間質(zhì)評(píng)室間質(zhì)評(píng)室間質(zhì)評(píng)室間質(zhì)評(píng)失控處理室間質(zhì)評(píng)失控處理*室間質(zhì)評(píng)室間質(zhì)評(píng)失控處理室間質(zhì)評(píng)失控處理-1*室間質(zhì)評(píng)室間質(zhì)評(píng)失控處理室間質(zhì)評(píng)失控處理-2*室間質(zhì)評(píng)室間質(zhì)評(píng)失控處理室間質(zhì)評(píng)失控處理-3APTT、TT無定標(biāo)項(xiàng)目1、訂貨量；2、東西兩院保持批號(hào)一致；3、試劑更換批號(hào)后進(jìn)行標(biāo)本傳遞（質(zhì)控品、標(biāo)本），觀察批間差。試劑更換批號(hào)后進(jìn)行標(biāo)本傳遞（質(zhì)控品、標(biāo)本），觀察批間差。2014/1/7PT舊試劑新試劑CS5100CA7000-2C

9、A7000-3CA7000-4143.342.643.64043220.920.72219.720.9316.616.717.915.816.9436.435.235.433.735.5511.511.8INR舊試劑新試劑CS5100CA7000-2CA7000-3CA7000-413.713.83.65 3.683.7221.821.861.83 1.791.8231.451.511.49 1.431.486 3.063.0851.011.071.00 1.011.06室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本傳遞舉例標(biāo)本傳遞舉例怎么怎么來來？怎么怎么用用？ APTT 10

10、0s或 15s； Fbg 1.0g/L； FDP 40g/ml，同時(shí)Fbg 1.0g/L； PT 70s或9s； TT 150s；危急值危急值分析后分析后華法林凝血酶原時(shí)間（凝血酶原時(shí)間（Prothrombin Time, PT）PT檢測(cè)影響因素試劑構(gòu)成凝血活酶組織萃取、組織培養(yǎng)、分子生物合成人源性、動(dòng)物源性組織因子、磷脂、鈣離子檢測(cè)方法光學(xué)法-波長(zhǎng)等機(jī)械法結(jié)果判讀方式PT=各國(guó)貨幣各國(guó)貨幣INR=美金美金INR=（患者（患者PT/MNPT）ISILocal ISI ISI值確定？ ISI是什么：反映試劑對(duì)Vitamin K依賴的凝血因子水平的敏感程度，通過國(guó)際參考品（Internationa

11、l reference preparation，IRP）來溯源。一級(jí)一級(jí)二二級(jí)級(jí)67 / 40BCT/ 253三三級(jí)級(jí)rTF / 95RBT / 90參考試劑參考試劑BCA校正用戶所用批號(hào)的試劑校正用戶所用批號(hào)的試劑Local ISI=MNPTPTINRISI預(yù)先ISI賦值的促凝血酶原活酶試劑，Local ISI校準(zhǔn)。用戶預(yù)先測(cè)定 MNPT計(jì)算計(jì)算MNPT和和ISI值值 PT-INR系統(tǒng)校準(zhǔn)系統(tǒng)校準(zhǔn)Local ISI MNPT3、凍干標(biāo)準(zhǔn)血漿、凍干標(biāo)準(zhǔn)血漿1、儀器、儀器/廠商數(shù)據(jù)廠商數(shù)據(jù) 地域、人群差異地域、人群差異2、凍干正常水平、凍干正常水平質(zhì)控質(zhì)控4、20例正常新鮮例正常新鮮血漿血漿PT

12、幾何均數(shù)幾何均數(shù)潛在問題：工作量較大潛在問題：工作量較大Local ISI直接直接INRINR測(cè)定測(cè)定用56個(gè)濃度的認(rèn)證血漿（不同系統(tǒng)的定值不一樣）產(chǎn)生本實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)線。使用本實(shí)驗(yàn)的凝血活酶/聯(lián)合試劑測(cè)定認(rèn)證血漿的PT值，將所得的結(jié)果和認(rèn)證血漿的INR賦值繪成對(duì)數(shù)圖?？梢杂镁€性的或正交的回歸方法繪制校準(zhǔn)線，從校準(zhǔn)線上讀取患者的INR值。這種方法與ISI和正常人PT均值（MNPT）無關(guān)。所有的本地因素都被消除了。給每個(gè)批號(hào)試劑校準(zhǔn)INRMNPT2,03,0 4,0 5,01,010203040= 1/ISIINRPT (sec)PT-INR系統(tǒng)校準(zhǔn)系統(tǒng)校準(zhǔn)Local ISI 用參考血漿對(duì)試劑進(jìn)行

13、定標(biāo)作校準(zhǔn)曲線，根據(jù)定標(biāo)曲線直接得到INR 室間的變異可以大大降低 多點(diǎn)定標(biāo)進(jìn)行的校準(zhǔn)更加精密準(zhǔn)確 所有的當(dāng)?shù)匾蛩囟急幌薒ocal ISI采用INR定值血漿校準(zhǔn)當(dāng)?shù)氐腜T/INR檢測(cè)系統(tǒng)，不僅使INR結(jié)果更加準(zhǔn)確，而且加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室間的INR結(jié)果的一致性，使口服抗凝劑的監(jiān)測(cè)更加有效。Local ISI定標(biāo)定標(biāo):PT-INR的標(biāo)準(zhǔn)化絕不僅僅是對(duì)某一儀器或某一試劑的校準(zhǔn)，從實(shí)驗(yàn)室角度出發(fā)是對(duì)整個(gè)系統(tǒng)整個(gè)系統(tǒng)（System）的標(biāo)準(zhǔn)化！“一個(gè)樣本，一個(gè)結(jié)果一個(gè)樣本，一個(gè)結(jié)果”，不同系統(tǒng)結(jié)果趨于一致。，不同系統(tǒng)結(jié)果趨于一致。Local ISI性能驗(yàn)證的目的 確保正確的選擇實(shí)驗(yàn)室方法，并在方法使用前進(jìn)行

14、充分、有效的評(píng)價(jià)，以保證方法的可靠性 對(duì)實(shí)驗(yàn)室正在使用的檢驗(yàn)系統(tǒng)/方法進(jìn)行定期的、有效的驗(yàn)證，以保證所使用的檢驗(yàn)系統(tǒng)/方法能夠滿足臨床和患者的需求，并保證檢驗(yàn)系統(tǒng)/方法的可靠性定量方法的性能驗(yàn)證 精密度 準(zhǔn)確度評(píng)價(jià) 線性 攜帶污染 方法學(xué)比較 參考范圍驗(yàn)證 分析干擾及稀釋驗(yàn)證性能驗(yàn)證內(nèi)容 批內(nèi)不精密度參數(shù)參數(shù)PTAPTTTTFibD-dimerFDP水平1判定標(biāo)準(zhǔn)%2.002.005.004.005.005.00水平2判定標(biāo)準(zhǔn)%4.004.0010.008.0010.0010.00性能驗(yàn)證內(nèi)容 日間精密度參數(shù)參數(shù)PTAPTT TT Fib D-dimerFDP判定標(biāo)準(zhǔn)CV %5.005.006

15、.676.67 6.676.67性能驗(yàn)證內(nèi)容 準(zhǔn)確度：是測(cè)量結(jié)果中系統(tǒng)誤差與隨機(jī)誤差的綜合，表示測(cè)量結(jié)果與真值的一致程度。保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性最有效的手段是建立和保證檢驗(yàn)結(jié)果的溯源性 計(jì)算定值參考物質(zhì)或校準(zhǔn)品的測(cè)定值（測(cè)定三次取均值）與靶值的偏差 判斷標(biāo)準(zhǔn)：小于1/2CLIA88允許變異性能驗(yàn)證內(nèi)容線性：選取一份接近預(yù)期上限的高值血漿樣本（H），分別按100%、90%、75%、50%、25%的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測(cè)定2次，計(jì)算均值。將實(shí)測(cè)值與預(yù)測(cè)值作比較（偏離應(yīng)小于10%），計(jì)算 y=ax+b，驗(yàn)證線性范圍。判斷結(jié)果：a值在10.1范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)R2 0.95y = 0.9899x +

16、 0.2657R2 = 0.99970.010.020.030.040.050.060.070.080.090.00.0020.0040.0060.0080.00100.00系列1線性 (系列1)性能驗(yàn)證內(nèi)容 攜帶污染：指分析物含量高的標(biāo)本對(duì)分析物含量低的標(biāo)本其測(cè)定結(jié)果的影響 攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)*100% 攜帶污染率3%性能驗(yàn)證內(nèi)容稀釋驗(yàn)證：選取高值樣本，分別以儀器自動(dòng)稀釋和手工法兩種方式，按照原倍、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32的比例進(jìn)行稀釋，將兩次結(jié)果比較，偏離應(yīng)小于10%。性能驗(yàn)證內(nèi)容 參考范圍驗(yàn)證：收集20例健康人血漿，年齡20-70歲，男10例，女

17、10例計(jì)算檢測(cè)系統(tǒng)的R值（R值=落在參考范圍內(nèi)的樣本數(shù)/總樣本數(shù)）。要求R0.9性能驗(yàn)證內(nèi)容 方法學(xué)比對(duì)：為保證檢驗(yàn)結(jié)果的可比性，使用實(shí)驗(yàn)室的不同分析系統(tǒng)和/或公認(rèn)的參考方法同時(shí)檢測(cè)一批病人標(biāo)本，從測(cè)定結(jié)果的差異了解不同分析系統(tǒng)之間的偏倚 標(biāo)本范圍應(yīng)涵蓋所比對(duì)項(xiàng)目的高中低值，正常結(jié)果占4060%，分別用被比較的儀器方法以及比較儀器方法檢測(cè)性能驗(yàn)證內(nèi)容干擾實(shí)驗(yàn)：分析干擾是指某一物質(zhì)對(duì)某分析物的濃度或催化活力測(cè)定中任何一步驟的影響作用 在標(biāo)本中添加不同濃度的干擾物后與未添加干擾物的標(biāo)本同時(shí)測(cè)定懷疑被干擾的項(xiàng)目，比較兩者的結(jié)果 通常添加干擾物的標(biāo)本和未添加干擾物的標(biāo)本測(cè)定結(jié)果的差異應(yīng)10%。干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果（乳糜）性能驗(yàn)證謝謝聆聽！ ww_檢測(cè)項(xiàng)目1/3允許誤差1/2允許誤差2/3允許誤差允許誤差實(shí)驗(yàn)室自定標(biāo)準(zhǔn)建議允許CV備注PT5.00%7.50%10.00%15.00%5.40%5.40%2011.01-2012.05三水平共158次CV%結(jié)果，7次超出允許CV，均在5/12CLIA88（6.25%）以內(nèi)。APTT5.00%7.50%10.00%15.00%5.00%2011.01-2012.05三水平共158次CV%結(jié)果，5次超出允許CV，最高值6.78%。與試劑換批號(hào)后批間差有關(guān)，維持1/3CLIA88。Fbg6.67%10.00%