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1、丹參酮對血管性癡呆模型大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的改善作用 11-03-25 14:58:00 作者:李林,陳姿亦,茹立強 編輯:studa20【摘要】 目的: 研究丹參酮對擬人類血管性癡呆(VD)模型大鼠學(xué)習(xí)記憶功能障礙的改善作用。方法: 采用改良的大腦中動脈栓塞(MCAO)致局灶性腦缺血(3 h)和再灌注(30min)法,建立VD樣學(xué)習(xí)記憶障礙的大鼠模型。實驗動物隨機(jī)分成VD模型組、丹參酮治療組、假造
2、模對照組和正常對照組等4組。采用定位航行和空間探索試驗測定大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶功能。結(jié)果: (1) VD大鼠定位航行試驗的逃避潛伏期明顯延長;空間探索試驗的逃避潛伏期延長更明顯,而逃避頻率降低,與兩對照組比較有顯著性差異(P<0.01)。(2) 丹參酮治療后,VD大鼠定位航行試驗的逃避潛伏期縮短;空間探索試驗的逃避潛伏期縮短更明顯,而其安全逃避頻率有明顯提高。結(jié)論: (1) 本研究制成的VD樣學(xué)習(xí)記憶障礙的動物模型具有較好仿真人類VD的特點;水迷宮試驗?zāi)茌^真實地反映動物學(xué)習(xí)記憶功能。(2) 丹參酮對VD樣大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能障礙具有一定的改善作用。 【關(guān)鍵詞】 丹參酮; 血管性癡
3、呆; 動物模型; 大腦中動脈栓塞; 水迷宮試驗; 學(xué)習(xí)記憶; 大鼠血管性癡呆(vascular dementia, VD)是由各種腦血管疾病引起的腦功能障礙,是一種獲得性智能損害綜合征1,為老年期癡呆的主要類型之一,其主要臨床表現(xiàn)以記憶、認(rèn)知功能缺損為主,可伴有言語、運動、視空間和人格障礙。VD是唯一的一種可以預(yù)防的癡呆類型,早期積極防治具有可逆性。在導(dǎo)致VD的多種腦血管疾病中,以缺血性腦血管疾病為最多見。腦缺血再灌注后直接或間接損傷海馬等邊緣腦區(qū)神經(jīng)細(xì)胞,機(jī)體會啟動多種機(jī)制調(diào)控學(xué)習(xí)、記憶的功能活動。有報道,丹參酮A和B能縮小小鼠短暫的(急性)局灶性腦缺血的腦梗死灶體積,并可能有神經(jīng)保護(hù)作用2
4、,還能改善缺血再灌注損傷小鼠和東莨菪堿(抗膽堿藥)誘發(fā)的空間行為缺陷小鼠的學(xué)習(xí)記憶障礙3。因此,對VD的腦損傷機(jī)制及其防治已成為世界醫(yī)學(xué)領(lǐng)域聯(lián)合攻關(guān)、重點研究的項目。本研究采用改良的大腦中動脈栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)45致局灶性腦缺血再灌注法誘發(fā)VD大鼠模型,同時觀察丹參酮對其的治療作用,為探索人類VD的發(fā)病機(jī)制及其防治新措施提供實驗依據(jù)。1 材料和方法1.1 實驗動物與分組選用健康清潔二級SD雄性大鼠60只,體重(220±20)g,由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實驗動物學(xué)部提供。動物于專用實驗室內(nèi)分籠飼養(yǎng),室溫(22±2
5、),自由攝食和飲水。將大鼠隨機(jī)分為4組:VD模型組20只,丹參酮治療組20只,假造模對照組10只和正常對照組10只。1.2 主要試劑及儀器丹參酮,華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院臨床藥理學(xué)教研室惠贈;仿Morris水迷宮裝置,華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)生物學(xué)系研制。1.3 造模方法根據(jù)Zealonga等45的MCAO法,稍加改進(jìn)制作VD大鼠模型。大鼠造模前禁食(不禁水)12 h,以10%水合氯醛(0.35 g·kg-1)腹腔注射麻醉,常規(guī)皮膚消毒后解剖分離右側(cè)頸總動脈、頸內(nèi)動脈及頸外動脈,并掛上備用結(jié)扎線,電凝頸外動脈入腦分支和結(jié)扎其主干,分離頸內(nèi)動脈主干至翼腭動脈,并在其起始部位放置一動脈夾
6、。先將頸總動脈用動脈夾夾閉,再在頸外動脈殘端開0.2 mm切口,由切口處插入圓錐頭的尼龍線(直徑0.25 mm),于入口處結(jié)扎尼龍線,然后松開頸內(nèi)動脈的動脈夾,輕推尼龍線沿頸內(nèi)動脈入顱(深度約為18 mm),如此實現(xiàn)MCAO致腦局灶性缺血。隨后于腦缺血后3 h輕拉出外留尼龍線尾至結(jié)扎口處,如此實現(xiàn)大腦中動脈缺血再灌注(供血30min)造模。大鼠放回鼠籠中,保溫飼養(yǎng)。假造模對照組大鼠僅解剖分離上述動脈,不再作插線栓、結(jié)扎等處理。正常對照組大鼠不作任何處理。1.4 丹參酮治療造模后丹參酮治療組大鼠立即胃飼丹參酮,丹參酮按50 mg·kg-1·d-1溶于5 ml玉米油中灌胃6。兩對照組及VD模型組僅以等量玉米油灌胃。各連續(xù)14d,然后進(jìn)行有關(guān)指標(biāo)的檢測。1.5 造模動物神經(jīng)功能評定按照Zealonga等45級評分法,在造模大鼠清醒后立即進(jìn)行動物神經(jīng)功能的評定。評分標(biāo)準(zhǔn)為:正常0分,對側(cè)肢體屈曲1分,拖鼠尾后拉時對側(cè)肢體無力2分,拖鼠尾后拉時向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈3分,自發(fā)向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈或傾倒4分。選取評分為2分及以上者入圍實驗。1.6 動物學(xué)習(xí)記憶功能的測試對每組實驗大鼠分別進(jìn)行水迷宮學(xué)習(xí)記憶行為學(xué)測試78,選擇學(xué)習(xí)記憶行為“正?!钡拇笫笕雵鷮嶒?大鼠MCAO再灌注后立即做水迷宮試驗鑒定動物模型。1.7 統(tǒng)計學(xué)處理所有的數(shù)據(jù)以x±s
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