廣東省北京師范大學(xué)東莞石竹附屬學(xué)校2017-2018學(xué)年高二下學(xué)期4月測(cè)試生物試題含答案精品

1、北京紳范大學(xué)東莞石竹附屬學(xué)枝fDONGGUAN SHIZHU SCHOOL ATTACHED TO BEIJING NORMAL UNIVERSITY 臨2017 2018學(xué)年度第二學(xué)期高二年級(jí)第一次月考考試生物試卷一、選擇題。（總分60分，每題2分）1. 關(guān)于基因工程下列說法正確的有（） 重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶和載體 基因工程是在DNA上進(jìn)行的分子水平的設(shè)計(jì)施工 限制酶的切口一定是GAATT（堿基序列 只要目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞就能成功實(shí)現(xiàn)表達(dá) 所有的限制酶都只能識(shí)別同一種特定的核苷酸序列 限制酶只用于切割獲取目的基因 質(zhì)粒是基因工程常用的運(yùn)載體A. 2項(xiàng) B. 3

2、項(xiàng) C. 4 項(xiàng) D. 5 項(xiàng)2. 下列關(guān)于cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)的說法中，正確的是（）A. 同一物種的cDNA文庫(kù)只有1種B. 某真核生物的cDNA文庫(kù)中的某基因一定比基因組文庫(kù)中的該基因短C. 可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)D. 只有cDNA文庫(kù)的基因可實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流3. 用基因工程技術(shù)生產(chǎn)羧酸酯酶 （CarE）制劑的流程如圖所示，下列敘述正確的是（）A. 過程需使用Taq聚合酶B. 過程需使用解旋酶和 PCR獲取目的基因C. 過程使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCI溶液制備D. 過程可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否己導(dǎo)入受體細(xì)胞4.下圖為四種限制酶 BamHl, ECc

3、Ri, Hind川以及Bgl n的識(shí)別序列。箭頭表示每一種限制 酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補(bǔ)？其正確的末端互補(bǔ)序列是（）ttA.BanHI和EcRI、末端互補(bǔ)序列-AATFB.BanHI和Hind出、末端互補(bǔ)序列-GAT&C.EcORI和 Hi nd川、末端互補(bǔ)序列-AATT-D.BanHI和Bgln、末端互補(bǔ)序列-GATOBsfllIA.G ATCT"T CTTAjG t5. 下圖是某質(zhì)粒示意圖， 其中ori為質(zhì)粒復(fù)制所必需的核苷酸序列，amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示目的基因插入位點(diǎn)。受體大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)原

4、來不含有這兩種抗生素抗性基因。下列有關(guān)敘述正確的是（）A. amp和tet是一對(duì)等位基因，常作為基因工程的標(biāo)記基因B. ori是重組質(zhì)粒得以順利導(dǎo)入受體細(xì)胞所必需的C. 將重組質(zhì)粒2、4導(dǎo)入不同大腸桿菌，大腸桿菌都不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上分裂生長(zhǎng)D. 將重組質(zhì)粒1、3導(dǎo)入不同大腸桿菌，大腸桿菌都不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上分裂、 生長(zhǎng)6. 圖1為某種質(zhì)粒簡(jiǎn)圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI、BamH、Hi nd川的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A. 在基因工程中若只用一種限制酶完成對(duì)質(zhì)粒和外源DNA的切割，則可選 EcoRIB. 如果將一個(gè)外源

5、 DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用 EcoRI酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組 DNA此重組DNA中EcoRI酶切點(diǎn)有1個(gè)C. 為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時(shí)可使用BamH和Hi nd川兩種限制酶同時(shí)處理D. 一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng) EcoRI切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)7. 下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因植物的敘述中，正確的是（）A. 科學(xué)家可以利用一些調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因來提高作物的抗病和抗干旱能力B. 由于抗蟲棉可以抵抗所有危害棉花植株的害蟲，所以得到推廣C. 科學(xué)家往往將必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因?qū)胫参镏校蕴岣咿r(nóng)作物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值D. 引起植物生病

6、的病原微生物主要是病毒8. 據(jù)圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是（）A. 限制性內(nèi)切酶可以切斷 a處，DNA連接酶可以連接a處B. DNA聚合酶可以連接a處C. 解旋酶可以使b處解開D. 連接c處的酶可以為DNA連接酶9.下圖示“番茄一馬鈴薯”雜種植株的培育過程其中表示過程，字母表示細(xì)胞、組B.經(jīng)過和過程形成的c細(xì)胞只有AABB這一種類型B.經(jīng)過和過程形成的c細(xì)胞只有AABB這一種類型)織或植株。下列說法正確的是（O氣鈴懷細(xì)胞A. 過程需在低滲溶液中用相應(yīng)的酶處理B. e是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞C. 可根據(jù)質(zhì)壁分離現(xiàn)象鑒別雜種細(xì)胞的細(xì)胞壁是否再生D. 過程完成的標(biāo)志是兩個(gè)細(xì)胞核完全

7、融合10.以下為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖，其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞，所含有的染色體組分別是 AA和BB據(jù)圖分析不正確的是（）B.經(jīng)過和過程形成的c細(xì)胞只有AABB這一種類型B.經(jīng)過和過程形成的c細(xì)胞只有AABB這一種類型圖中過程發(fā)生的化學(xué)變化是纖維素和果膠水解B.經(jīng)過和過程形成的c細(xì)胞只有AABB這一種類型C. 過程一般使用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑D. 過程產(chǎn)生的細(xì)胞是具有分生能力的薄壁細(xì)胞11 下圖是“白菜一甘藍(lán)”雜種植株的培育過程。下列說法正確的是正在融合的原生質(zhì)體雜種細(xì)胞愈肖俎織白棄一甘藍(lán)幼苗 甘藍(lán)體細(xì)胞原生質(zhì)體日A. 植物體細(xì)胞雜交技術(shù)己經(jīng)能使雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)

8、良性狀B. 愈傷組織的代謝類型是自養(yǎng)需氧型C. 上述過程中包含著有絲分裂，細(xì)胞分化和減數(shù)分裂等過程D. “白菜一甘藍(lán)”雜種植株產(chǎn)生的變異屬于染色體變異12 下圖表示植物組織培養(yǎng)過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是（）通過曇赭擄n井在id賣培禪基申培悴A. 試管的培養(yǎng)基中含有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，不含有有機(jī)物B. 試管中的細(xì)胞能進(jìn)行減數(shù)分裂C. 調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官D. 植株根尖細(xì)胞的全能性比植株根尖細(xì)胞的強(qiáng)13 采用基因工程方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是（） 將毒素蛋白質(zhì)注射到棉花受精卵中；將編碼毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中；將編碼毒素蛋白質(zhì)的

9、DNA序列與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌，用該細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞再進(jìn)行組織培養(yǎng)；將編碼毒素蛋白質(zhì)的DNA序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的受精卵A. B.C.D.14 在下列過程中，需要用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是（） 利用秋水仙素處理萌發(fā)的四倍體小黑麥種子或幼苗獲得八倍體植株 利用紫草細(xì)胞獲得治療燙傷的紫草素 利用莖尖大量繁殖三倍體無子西瓜 利用細(xì)胞工程培養(yǎng)“番茄一馬鈴薯”雜種植株 培育轉(zhuǎn)基因“向日葵豆”植株A. B. C. D. (2N=18)花粉植15. 花粉植株是體細(xì)胞遺傳研究和突變育種的理想材料。下面是培育四季柑桔株的過程示意圖，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(D取花粉松播愈傷組級(jí)捧到叢芽轉(zhuǎn)接到轉(zhuǎn)播到|并詼轟*種到

10、壇養(yǎng)墓A培養(yǎng)墓B培養(yǎng)基C培養(yǎng)基D植株A.花粉植株培育的原理是花粉粒細(xì)胞具有全能性，其技術(shù)是植物組織培養(yǎng)B. 過程是細(xì)胞再分化，其根本原因是基因選擇性表達(dá)C. 四種培養(yǎng)基均屬于固體培養(yǎng)基，其中所含植物激素的種類和比例有差異D. 觀察處于分裂中期的四季柑桔花粉植株根尖細(xì)胞，可觀察到18條染色體16. 如圖為某種質(zhì)粒的簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn)，P為轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)部位。已知目的基因的兩端有EcoRI、BariHI的酶切位點(diǎn)，受體細(xì)胞為無任何抗藥性的原核細(xì)胞。下列有關(guān)敘述正確的是A. 將含有目的基因的 DNA與質(zhì)粒分別用 EcoRI酶切，在DNA 連接酶作用下，

11、生成由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有兩種B. DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來形 成一個(gè)重組質(zhì)粒，該過程形成兩個(gè)磷酸二酯鍵C. 為了防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自身環(huán)化，酶切時(shí)可選用的酶是EcoRI和BartHID. 能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的受體細(xì)胞表明該目的基因已成功導(dǎo)入該細(xì)胞17. 下圖是植物組織培養(yǎng)的簡(jiǎn)略表示。據(jù)此回答不正確的是()脫分化 再分化 A表示離體的植物器官、組織或細(xì)胞，它能被培養(yǎng)成為植株理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性。 B表示愈傷組織，它與相比分化程度低，全能性低。C若想制作人工種子，應(yīng)選用。若利用此項(xiàng)技術(shù)制造治療燙傷、割傷的藥物紫草素，培養(yǎng)將進(jìn)行到D若是胡蘿

12、卜根尖細(xì)胞， 則培養(yǎng)成的的葉片的顏色是綠色，這說明根尖細(xì)胞含有與葉綠體 形成相關(guān)的基因.18. 一環(huán)狀DNA分子，設(shè)其長(zhǎng)度為1,已知某種限制性核酸內(nèi)切酶在該分子上有3個(gè)酶切位點(diǎn)，如圖中A、B、C三處。如果該 DNA分子在3個(gè)酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷，則會(huì)產(chǎn)生0.2、0.3、0.5三種不同長(zhǎng)度的 DNA片段?，F(xiàn)有多個(gè)上述 DNA分子，若在每個(gè)分子上至少有1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷；則從理論上講，經(jīng)該酶切后，這些DNA分子最多能產(chǎn)生長(zhǎng)度不同的線狀DNA的種類數(shù)是19下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是A. cDNA文庫(kù)中的基因可以進(jìn)行物種間的基因交流B. 轉(zhuǎn)基因棉花是否具抗蟲特性可通過檢測(cè)棉花對(duì)某種害蟲的抗

13、性來確定C. 外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的起始密碼和終止密碼之間才能進(jìn)行表達(dá)D. 抗蟲棉的抗蟲基因可通過花粉傳遞至近緣作物，從而造成基因污染人工料康I?址輝人工R320. 下圖為人工種子示意圖，下列與其培育生產(chǎn)過程有關(guān)的敘述中不正確的是A. 人工種子一般用離體的植物細(xì)胞通過組織培養(yǎng)技術(shù)獲得B. 胚狀體是由未分化的且有分裂能力的細(xì)胞構(gòu)成C. 同一批次的人工種子一般具有相同的基因型D. 胚狀體是由愈傷組織分化而成，離體細(xì)胞只有形成愈傷 組織才能表現(xiàn)出全能性21. 下列說法正確的是（）A. DNA連接酶可使目的基因與載體的黏性末端形成氫鍵，實(shí)現(xiàn)黏性末端的黏合，形成重組DNAB. 限制性核酸內(nèi)切酶的切

14、割位點(diǎn)是DNA中磷酸和堿基之間的磷酸二酯鍵C. T4DNA連接酶既可以連接雙鏈 DNA片段互補(bǔ)的黏性末端又可以連接雙鏈DNA片段的平末端D. 去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，便于植物雜交育種22. 下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的說法錯(cuò)誤的有（）項(xiàng) 蛋白質(zhì)工程無需構(gòu)建基因表達(dá)載體 通過蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)有的仍是天然的蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)工程需要用到限制酶和DNA連接酶 蛋白質(zhì)工程是在蛋白質(zhì)分子水平上改造蛋白質(zhì)的A. 1 B. 2 C. 3 D. 423. 某種微生物合成的蛋白酶與人體消化液中的蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是其熱穩(wěn)定性 較差，進(jìn)入人體后容易失效?，F(xiàn)要將此酶開發(fā)成一種片劑，臨床治療食物消化不

15、良，最佳方 案是（）A. 替換此酶中的少數(shù)氨基酸，以改善其功能B. 將此酶與人蛋白酶進(jìn)行拼接，形成新的蛋白酶C. 重新設(shè)計(jì)與創(chuàng)造一種蛋白酶D. 減少此酶在片劑中的含量RNA鏈24. 以下為形成cDNA過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。據(jù)圖分析，下列說法正確的是（）DNA鏈Z|核酸薩比RKA單鏈雜交雙鋰 ”55-60'A. 催化過程的酶是 RNA聚合酶B. 過程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合C. 由于cDNA上不含啟動(dòng)子和終止子，所以cDNA文庫(kù)屬于部分基因文庫(kù)D. 如果RNA單鏈中A與U之和占該鏈堿基含量的 40%則一個(gè)雙鏈 DNA中, A與U之和也占該DNA堿基含量的40%25. a i

16、-抗胰蛋白酶缺乏癥是北美常見的一種單基因遺傳病，患者成年后會(huì)出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病，嚴(yán)重者甚至死亡。利用基因工程技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫?，最終培育出能在乳腺細(xì)胞表達(dá)人 a i-抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更容易獲得這種酶。衛(wèi)' 受精卵一轉(zhuǎn)菲因羊時(shí)抗膜蛋白酶颶肉TTTTTTpT -載體>-GFP基因F列關(guān)于該過程的敘述中錯(cuò)誤的是（）A. 載體上綠色熒光蛋白基因（GFP的作用是便于篩選含有目的基因的受體細(xì)胞B. 將目的基因?qū)胙虬螂准?xì)胞中，將會(huì)更加容易得到a 1-抗胰蛋白酶C. 培養(yǎng)出的轉(zhuǎn)基因羊的所有細(xì)胞中都含有該目的基因，故該羊有性生殖產(chǎn)生的后代也都能產(chǎn) 生a 1-抗胰蛋

17、白酶D. 目的基因與載體重組過程需要DNA1接酶的催化作用26. 下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是 利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 從基因文庫(kù)中獲取目的基因 反轉(zhuǎn)錄法 通過DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成目的基因A. B. C.D. 的是（）27. 下圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，不正確O構(gòu)建表達(dá)廠、導(dǎo)入植物Ti質(zhì)粒含抗蟲基因重組Ti的DNA質(zhì)粒A.t利用兩種不同限制酶處理，能避免抗蟲基因的含Jt組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌DNA片段自身環(huán)化培養(yǎng)再生細(xì)胞.:植株細(xì)胞植株B. t可用氯化鈣處理農(nóng)桿菌，有助于促進(jìn)重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到農(nóng)桿菌細(xì)胞中C. t用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，重組Ti質(zhì)粒

18、整合到植物細(xì)胞的染色體上D. t用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)，具有抗蟲性狀的植株產(chǎn)生了可遺傳變異28. 圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，amp表示氨芐青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是（）HindmPst 1目的基因#外源4| DNABamH I Psi I乙A圖甲中的質(zhì)粒用 BamH切割后，含有 4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B. 用Pst I和Hind川酶切，加入 DNA連接酶后可得到1種符合要求的重組質(zhì)粒C. 在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用Pst I和BamH切割質(zhì)粒和外源 DNAD. 導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)29. 下圖表示利用植物細(xì)胞工程

19、對(duì)棉花進(jìn)行改良的過程，表示實(shí)驗(yàn)過程，請(qǐng)據(jù)圖回 答，下列說法正確的是外源基因棉花葉肉細(xì)胞 2*原生質(zhì)體空f愈傷組織一匚根、芽 棉花幼苗A外源基因能夠?qū)氩⒋罅繌?fù)制的物質(zhì)基礎(chǔ)是自然界共用一套密碼子B. 過程能定向改變?cè)|(zhì)體的遺傳特性C. 過程只能通過液體懸浮培養(yǎng)技術(shù)才能實(shí)現(xiàn)D. 基因工程技術(shù)與花藥離體培養(yǎng)技術(shù)相結(jié)合可快速獲得純合棉花植株30. 如圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖，以下敘述錯(cuò)誤的是（）A.的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶兩種酶參與A. 圖示此過程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時(shí)最好采用顯微注射法B. 抗蟲基因整合到受體細(xì)胞核DNA上需借助于Ti質(zhì)粒中的T-DNAC. 細(xì)胞的染

20、色體上含有抗蟲基因，植株也不一定會(huì)表現(xiàn)出抗蟲性狀、填空題（總分 40分，每題10 分）（ 10分，每空1分）研究人員利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增了目的基因，并培育了能合成凝乳酶的轉(zhuǎn) 基因酵母菌。請(qǐng)結(jié)合下圖回答：I h I II mu iii mu linn n i in in i it mtn ihm i r 11 un n凝乳酶擺因liliill-ftiilllll InilllilS III* I 汕llll|i|1：| |D|i III1JRA35 因（1） 利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因原理 。該過程與細(xì)胞中 DNA復(fù)制過程相比，該過程不需要 酶。是在 L填“酶的名稱”）作用下進(jìn)行延伸的。（2）

21、左圖中引物為單鏈 DNA片段，它是根據(jù) 的脫氧核苷酸序列合成的。從理論上推測(cè)，第2輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物 A的DNA片段所占的比例為 。（3） 右圖所示的基因表達(dá)載體中的URA3基因能編碼乳清苷 5-磷酸脫羧酶，該酶能催化酵母菌尿嘧啶的合成，若酵母菌缺乏乳清苷5-磷酸脫羧酶，就無法生長(zhǎng)，除非在培養(yǎng)基中加入尿嘧啶。利用URA3基因作為基因來篩選轉(zhuǎn)化成功的酵母菌，要選擇的酵母菌作為受體細(xì)胞，所使用培養(yǎng)基 （填“需要”或“不需要”）添加尿嘧啶。（4） 奶酪生產(chǎn)中的凝乳酶是一種分泌蛋白。工業(yè)生產(chǎn)過程中， （能/否）選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞表達(dá)出凝乳酶？原因是 。31. （ 10分，每空1分）圖1表示含有

22、目的基因 D的DNA片段長(zhǎng)度（bp即堿基對(duì)）和部分堿 基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?，F(xiàn)有MspI、BamH、Mbol、Sma!4 種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CJ CGG GJ GATCC J GATC CCQ GGG請(qǐng)回答下列問題:（1）基因工程的“四步曲”中，是基因工程的核心步驟， 的階段沒有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象。（2）如圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由 連接若用限制酶 Smal完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是 末端，其產(chǎn)物長(zhǎng)度為 (3) 若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對(duì)被 T-A堿基對(duì)替換，那么基因 D就突變?yōu)榛騞。從隱性純合子分離出圖1及

23、其對(duì)應(yīng)的DNA片段，用限制酶 Smal完全切割，產(chǎn)物中共有 種不同DNA片段。為了提高實(shí)驗(yàn)成功率，需要通過 技術(shù)擴(kuò)增目的基因，以獲得大量的目的基因。(4) 若將圖2中質(zhì)粒和目的基因 D通過同種限制酶處理后進(jìn)行，形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含質(zhì)粒的大腸桿菌，一般先用添加的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng).(5) 經(jīng)檢測(cè)，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是.32. ( 10分,每空1分)雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細(xì)胞因子，廣泛用于動(dòng) 物領(lǐng)域的抗病毒治療。科研人員將雞干擾素基因作為目的基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體，通過農(nóng) 桿菌導(dǎo)入煙草，

24、以獲得抗病毒煙草。下圖為科研人員制備能合成雞干擾素的煙草愈傷組織細(xì) 胞的流程，表示相關(guān)的操作，兩種限制酶EcoRI和BamH 的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)分別是GJ AATTC和GJ GATCC如表所示。請(qǐng)回答下列問題：含簡(jiǎn)干擾責(zé)基國(guó)笙DM戶訊 rn 1說別序列和鎖劃恒點(diǎn)mn gattc環(huán)H 1G6ATCC©能合戍再于憂臺(tái)荒熠草愈恃組織筑嗣(1) 步驟中，利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，需要設(shè)計(jì)引物序列，科研人員還在兩種引物的一端分別加上了 和序列，以便于后續(xù)的剪切和連接。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種限制酶，選擇的原則是 。A. Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)B. 目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)C. 酶切后，目的基因形成的兩個(gè)黏性末端序列不相同D. 酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個(gè)黏性末端序列相同(2) 步驟所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有，其中啟動(dòng)子的作用 是是 識(shí)別和結(jié)合的部位。2+(3) 步驟中需先用 Ca處理農(nóng)桿菌，使其成為 細(xì)胞，以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞，這種介導(dǎo)方法叫 ?？蒲腥藛T提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后，先通過 獲得DNA再進(jìn)行PCRT增，若最終未能檢測(cè)出干擾素基因，其可能原因是 。(4) 治療中發(fā)現(xiàn)，用于口