傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗(yàn)證

1、傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗(yàn)證編 pCode：版本Version:編寫Preparedby:日期Date:審核Checkedby:日期Date:批準(zhǔn)Approvedby:日期Date:生效日期DateofEffective:1、概述32、實(shí)施日期及時(shí)間安排33、驗(yàn)證小組成員34、儀器和設(shè)備35、材料與試劑36、驗(yàn)證過程47、驗(yàn)證結(jié)果記錄68、再驗(yàn)證周期79、相關(guān)SOP710、QA職責(zé)711、修改事項(xiàng)712、文檔71、概述進(jìn)入微生物室的物品通過傳遞窗，經(jīng)過紫外消毒后進(jìn)入微生物室。為了確認(rèn)傳遞窗紫外燈的消毒效果，特起草本方案對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)證。本驗(yàn)證用于QC微生物室、無菌室傳遞窗紫外燈表面消毒效果檢查。2

2、、實(shí)施日期及時(shí)間安排2012年月日開始進(jìn)行驗(yàn)證。3、驗(yàn)證小組成員QA負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)QA負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的批準(zhǔn)QC負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案、驗(yàn)證報(bào)告的審核、組織驗(yàn)證方案的培訓(xùn)和實(shí)施負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案和驗(yàn)證報(bào)告的起草驗(yàn)證方案的實(shí)施4、儀器和設(shè)備儀器名稱型號(hào)或規(guī)格凈化工作臺(tái)HS-1300-V型菌落計(jì)數(shù)器紫外線強(qiáng)度測(cè)定儀穩(wěn)壓器220V細(xì)菌培養(yǎng)箱SHP-150型霉菌培養(yǎng)箱GNP-9270型5、器材5.1滅菌刻度吸管(1ml,10ml)5.2滅菌試管5.3滅菌平皿5.4酒精燈5.5載體：(1.0X1.0cm的玻片)6、材料與試劑純化水營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基金黃色葡萄球菌CMCC(B)2

3、6003枯草芽抱桿菌CMCC(B)63501大腸桿菌CMCC(B)44102白色念珠菌CMCC(F)98001稀釋?夜(0.1%吐溫80,0.1%蛋白月東溶液)7、驗(yàn)證過程試驗(yàn)環(huán)境試驗(yàn)在潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，全過程嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。單向流空氣區(qū)、工作臺(tái)面及環(huán)境定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。每次操作開始前，開紫外燈照射1小時(shí)。培養(yǎng)基的制備營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配方：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉31.0g純化水1000ml配制：根據(jù)需要量稱取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉置適宜容器中，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至

4、7.1=0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121cX15分鐘。改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基配方：改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉42.0g純化水1000ml配制：根據(jù)需要量稱取改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4=0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115cx20分鐘。營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基配方：營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基20g純化水1000ml配制：稱取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基20克，加1000ml純化水，加熱溶解，加熱至沸，冷卻至常溫，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121cM5分鐘。改良馬丁培養(yǎng)基配方：改良馬丁培養(yǎng)基粉28.0g純化水1000ml配制：根據(jù)需要量稱取改良馬丁培養(yǎng)基粉，按配方比

5、例加入純化水，水浴加熱使溶解，調(diào)pH至6.4=0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115cx20分鐘。方法驗(yàn)證試驗(yàn)輻照強(qiáng)度測(cè)定開啟紫外燈5min后，用中心波長(zhǎng)為253.7nm的紫外線強(qiáng)度測(cè)定儀在燈管下方垂直1m的中心處測(cè)量其輻照度值（uW/cm2）。測(cè)量時(shí)，電壓應(yīng)穩(wěn)定在220V。普通型或低臭氧型直管紫外線燈（30W）,在燈管下方垂直1m的中心處，新燈管的輻照度值應(yīng)90uW/cm2。使用中的燈管的輻照度值應(yīng)70uW/cm2，低于此值者應(yīng)予更換。照射劑量表面消毒接受的照射劑量，應(yīng)達(dá)殺滅目標(biāo)微生物所需。對(duì)大腸桿菌，照射劑量應(yīng)達(dá)到X103uW-s/cm2,對(duì)金黃色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽抱桿菌應(yīng)

6、達(dá)到2.53X104uW-s/cm27.4.2.2照射劑量計(jì)算：照射劑量（uW-s/cm2）=紫外燈管強(qiáng)度（uW/cm2）x時(shí)間（s）7.4.3細(xì)菌及其芽抱和真菌殺滅效果的測(cè)定菌液的制備接種菌種名稱接種比加基培養(yǎng)條件金黃色葡萄球菌新鮮培養(yǎng)物營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基3035c培養(yǎng)1824小時(shí)大腸桿菌新鮮培養(yǎng)物枯草芽抱桿菌新鮮培養(yǎng)物白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物改良馬丁培養(yǎng)基2328c2448小時(shí)金黃色葡萄球菌、枯草芽胞桿菌、大腸桿菌、白色念珠菌培養(yǎng)后，將菌液進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。將滅菌載體平放于滅菌平皿內(nèi)，每個(gè)載體滴注定量菌懸液，（載體回收菌量達(dá)5X1055X106cfu/片），涂勻，放37c培養(yǎng)箱烘干。開啟紫外燈5min

7、后，將16個(gè)染菌玻片平放于滅菌平皿內(nèi)，水平放于適當(dāng)距離照射，于4個(gè)不同間隔時(shí)間（15min、30min、45min、60min）各取出4個(gè)染菌玻片，分別投入4個(gè)盛有5ml洗脫液試管中，振打80次。經(jīng)適當(dāng)稀釋后，取1ml洗脫液，作平板傾注，每個(gè)染菌玻片接種兩個(gè)，細(xì)菌放3035c培養(yǎng)48小時(shí)作活菌計(jì)數(shù)，真菌放2328c培養(yǎng)72小時(shí)作活菌計(jì)數(shù)。陽性對(duì)照， 除不做照射處理外， 取4個(gè)染菌玻片， 分別投入4個(gè)盛有5ml洗脫液試管中， 振打80次。 余按7.4.2.3同樣操作。計(jì)算殺滅率陽性對(duì)照回收菌數(shù)一試驗(yàn)組回收菌數(shù)殺滅率（%）=X100%陽性對(duì)照回收菌數(shù)判定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)指示菌殺滅率99.9%判為消毒合格。8

8、、驗(yàn)證結(jié)果記錄：附件1.試驗(yàn)菌數(shù)量測(cè)定原始記錄8、再驗(yàn)證周期傳遞窗構(gòu)造或紫外燈管放置位置發(fā)生改變時(shí)。9、相關(guān)SOP文件編號(hào)文件名稱020141微生物實(shí)驗(yàn)室管理020143物品進(jìn)出微生物檢驗(yàn)室020342微生物檢驗(yàn)區(qū)的清潔消毒020343培養(yǎng)基的配制020344細(xì)菌的接種、傳代和保存020377局壓滅菌021267微生物數(shù)量的測(cè)定10、QA職責(zé)QA必須參與驗(yàn)證的評(píng)審階段；QA必須審閱最終報(bào)告（包括草案）；QA審閱者不應(yīng)是參與實(shí)施的其他QA人員。11、修改事項(xiàng)在實(shí)施過程中，如果方案需要修改，必須提交書面的報(bào)告，闡述修改的原因，修改的內(nèi)容，并經(jīng)過驗(yàn)證小組負(fù)責(zé)人及QA的認(rèn)可。修改后的方案同先前執(zhí)行的方案一起歸檔。12、文檔所有的相關(guān)文檔都應(yīng)該保留至少