凍干人纖維蛋白原制造及檢定規(guī)程

1、凍干人纖維蛋白原制造及檢定規(guī)程本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血漿中分離、提純、凍干并經(jīng)病毒滅活處理制成。主要成份為纖維蛋白原，純度在 70% 以上。含適量枸櫞酸鈉、氯化鈉和葡萄糖作為穩(wěn)定劑。不含防腐 劑，專供靜脈輸注用。用于治療產(chǎn)后大出血及因大手術(shù)、外傷或 內(nèi)出血等引起的纖維蛋白原缺乏而造成的凝血障礙。1制造1.1 制造要求1.1.1 對(duì)血漿的要求1.1.1.1 血漿應(yīng)符合原料血漿采集（單采血漿術(shù)）規(guī)程 要求新鮮分離的液體血漿或冰凍血漿，去除冷沉淀以及凝血因子后的血漿，均可用于生產(chǎn)。1.1.1.2 分離后的血漿應(yīng)保持無菌，否則應(yīng)及時(shí)投料制造或低溫水冰凍保存。冰凍保存期最長(zhǎng)不應(yīng)超過2年。1.1

2、.2 對(duì)制造工作室、設(shè)備及原材料的要求與人血白蛋白（低溫乙醇法）制造及檢定規(guī)程中項(xiàng)要求相同1.2 制造工藝1.2.1 采用低溫乙醇法提制，并經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)的適宜方法進(jìn)行病毒滅活處理。122 分批同一容器混合溶解的制品作為1批，不同機(jī)柜凍干的制品分別作為亞批。1.2.3 溶解液及穩(wěn)定劑的規(guī)定溶解纖維蛋白原沉淀用的溶解液所含的穩(wěn)定劑應(yīng)符合下列 規(guī)定：枸櫞酸三鈉(2H2O 1.2% (g/ml)注射用葡萄糖5% (g/ml)氯化鈉 0.85%( g/ml)1.2.4 除菌過濾及分裝制品可直接濾入無菌的成品瓶?jī)?nèi)，每瓶纖維蛋白原裝量應(yīng)不少于出品規(guī)格。1.2.5 凍干過濾分裝后應(yīng)立即凍結(jié)，并按人血白蛋白（低

3、溫乙醇法） 制造及檢定規(guī)程125項(xiàng)的規(guī)定進(jìn)行凍干，在凍干全過程中， 制品溫度不應(yīng)超過35Co126 半成品檢定半成品應(yīng)抽樣做理化檢查及熱原質(zhì)試驗(yàn)，并按亞批做無菌試驗(yàn)。1.3 劑型與規(guī)格為凍干劑型，每瓶成品含纖維蛋白原 0.5、1.0、1.5或2.0g2成品檢定2.1 抽樣每批成品應(yīng)抽樣作全面質(zhì)量檢定，不同機(jī)柜凍干的制品應(yīng)分別抽樣做無菌及水分檢定。2.2 物理檢查2.2.1 外觀應(yīng)為灰白色或淡黃色疏松體，無融化跡象。重溶后，溶液應(yīng) 澄明或輕微乳光，允許有少量細(xì)小絮狀物或蛋白顆粒。2.2.2 真空度以高頻火花真空測(cè)定器檢測(cè)，瓶?jī)?nèi)應(yīng)出現(xiàn)藍(lán)紫色輝光。223溶解時(shí)間制品溫度應(yīng)先平衡至 3037 C,按瓶

4、簽標(biāo)示量加 3037C 注射用水，為約1%蛋白濃度溶液，制品應(yīng)在30分鐘內(nèi)完全溶解。2.3 化學(xué)檢定按生物制品化學(xué)檢定規(guī)程進(jìn)行。2.3.1 pH 值取項(xiàng)下溶液測(cè)定，pH值應(yīng)為6.87.8。2.3.2 水分水分含量應(yīng)w 5%( g/g )。2.3.3 純度取項(xiàng)下溶液，用生理鹽水稀釋至每ml含纖維蛋白原23mg用鎢酸沉淀法測(cè)定蛋白含量。另取上述稀釋液10ml，加入每ml含0.3IU凝血酶溶液10ml, 攪勻待凝固后，置一盛水的盤內(nèi)加罩密封。在室溫放置12小時(shí)。移置210C過夜。然后攪碎凝塊，離心(或過濾)分離清液。用鎢酸沉淀法測(cè)定其殘余蛋白量，按下式計(jì)算制品的純度，應(yīng)不低于70%纖維蛋白原制品純度

5、(% =(蛋白總量一殘余蛋白量)/蛋白總量x 100234纖維蛋白原含量根據(jù)項(xiàng)的測(cè)定結(jié)果，按下式計(jì)算纖維蛋白原含量，應(yīng)不低于出口規(guī)格。纖維蛋白原含量(g)=蛋白總%(g/ml )制品純度x總體積(ml)。2.3.5 枸櫞酸離子測(cè)定取項(xiàng)下溶液測(cè)定，枸櫞酸離子含量應(yīng)為1.1%1.3%(g/ml )。2.3.6 葡萄糖含量應(yīng)為 4.5%5.5% (g/ml )。2.3.7 氯化鈉含量應(yīng)為 0.8%0.9% (g/ml )。2.4 凝固活力測(cè)定于小試管內(nèi)加入凝血酶溶液（3IU/ml ） 0.5ml，置37C水浴預(yù)熱1分鐘，再中入223項(xiàng)下的溶液。用生理鹽水稀釋成每ml含3mg纖維蛋白原，加0.5ml，

6、搖勻。置37C水浴中觀察其 凝固時(shí)間。兩次測(cè)定結(jié)果平均值應(yīng)不超過60秒。2.5 無菌試驗(yàn)按生物制品無菌試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。2.6 安全試驗(yàn)2.6.1 豚鼠試驗(yàn)用體重300400g健康豚鼠2只，每只腹腔注射檢品5ml（約 1%蛋白濃度），注射后半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯異常反應(yīng)，觀察 7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要 求，用4只豚鼠復(fù)度，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。2.6.2 小白鼠試驗(yàn)用體重1820g小白鼠5只，每只腹腔注射檢品0.5ml （約 1%蛋白濃度），半小時(shí)內(nèi)動(dòng)物不應(yīng)有明顯的異常反應(yīng)，繼續(xù)觀察 7天，動(dòng)物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上術(shù)要 求，用10只小白鼠復(fù)試一次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。2.7 熱原質(zhì)試驗(yàn)按生物制品熱原質(zhì)試驗(yàn)規(guī)程進(jìn)行。注射劑量按家兔每kg體重注射30mg纖維蛋白原。判定標(biāo)準(zhǔn)按該規(guī)程 4.2項(xiàng)要求進(jìn) 行。2.8 HBsAg檢測(cè)用敏感性為1ng/ml以下的試劑盒檢測(cè)，應(yīng)為陰性。2.9 抗HCV檢測(cè)用敏感的方法檢測(cè)，應(yīng)為陰性2.10 抗HIV 1及2檢測(cè)用敏感方法檢測(cè)，應(yīng)為陰性。2.11 鑒別試驗(yàn)用免疫雙擴(kuò)散法，僅與抗人的血清產(chǎn)生沉淀線，與