實(shí)驗(yàn)一染色體玻片標(biāo)本的制作與染色體觀察

1、遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院遼寧師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院張劍鋒張劍鋒1. 用具：用具：染色板、載玻片、蓋玻片、指管、染色板、載玻片、蓋玻片、指管、溫度計(jì)、試劑瓶、滴瓶、鑷子、解剖針和溫度計(jì)、試劑瓶、滴瓶、鑷子、解剖針和毛邊紙等。毛邊紙等。2. 藥品：藥品：無水酒精、無水酒精、70酒精、冰醋酸、對酒精、冰醋酸、對二氯苯或秋水仙素、醋酸鈉、堿性品紅、二氯苯或秋水仙素、醋酸鈉、堿性品紅、石碳酸、甲醛、山梨醇、纖維素酶、果膠石碳酸、甲醛、山梨醇、纖維素酶、果膠酶、中性樹膠或油派膠酶、中性樹膠或油派膠(Euparal)和二甲苯。和二甲苯?？ㄖZ固定液的配制：卡諾固定液的配制：3 份無水酒精，加份無水酒精，加1 份

2、冰醋酸份冰醋酸(現(xiàn)配現(xiàn)現(xiàn)配現(xiàn)用用)。酶液的配制：酶液的配制：以以0.1mol/L 醋酸鈉為溶劑，配成纖維素酶醋酸鈉為溶劑，配成纖維素酶(2)和果膠酶和果膠酶(0.5)的混和液。的混和液。染色液的配制：染色液的配制：配方配方：石碳酸品紅石碳酸品紅(Carbol. fuchsin)染色液，先配母液染色液，先配母液A和和B。母液母液A：稱取稱取3克堿性品紅，溶解于克堿性品紅，溶解于100毫升的毫升的70酒精中酒精中(此液可此液可長期保存長期保存)。母液母液B：取母液取母液A 10毫升，加入毫升，加入90毫升的毫升的5石碳酸水溶液石碳酸水溶液(2周內(nèi)周內(nèi)使用使用)。石碳酸品紅染色液：石碳酸品紅染色液：

3、取母液取母液B 45毫升，加入毫升，加入6毫升冰醋酸和毫升冰醋酸和6毫升毫升37的甲醛。此染色液含有較多的甲醛，在植物原生質(zhì)體培養(yǎng)過的甲醛。此染色液含有較多的甲醛，在植物原生質(zhì)體培養(yǎng)過程中，觀察核分裂比較適宜，后來在此基礎(chǔ)上，加以改良的配方程中，觀察核分裂比較適宜，后來在此基礎(chǔ)上，加以改良的配方，稱改良石碳酸品紅，可以普遍應(yīng)用于植物染色體的壓片技術(shù)。，稱改良石碳酸品紅，可以普遍應(yīng)用于植物染色體的壓片技術(shù)。配方配方：改良石碳酸品紅改良石碳酸品紅取配方取配方石碳酸品紅染色液石碳酸品紅染色液2-10毫升，加入毫升，加入90-98毫升毫升45的醋酸的醋酸和和1.8克山梨醇克山梨醇(sorbitol)。

4、此染色液初配好時(shí)顏色較淺，放置二周。此染色液初配好時(shí)顏色較淺，放置二周后，染色能力顯著增強(qiáng)，在室溫下不產(chǎn)生沉淀而較穩(wěn)定。后，染色能力顯著增強(qiáng)，在室溫下不產(chǎn)生沉淀而較穩(wěn)定。1. 根尖取材方便，是觀察植物染色體最常用的材料，根尖取材方便，是觀察植物染色體最常用的材料，也可以用莖尖作為材料。也可以用莖尖作為材料。2. 植物細(xì)胞分裂周期的長短不同，在十到幾十小時(shí)之植物細(xì)胞分裂周期的長短不同，在十到幾十小時(shí)之間，溫度影響分裂周期，對于一個(gè)不太熟悉的實(shí)驗(yàn)材間，溫度影響分裂周期，對于一個(gè)不太熟悉的實(shí)驗(yàn)材料，最好在特定溫度下長根，掌握有絲分裂高峰期，料，最好在特定溫度下長根，掌握有絲分裂高峰期，以便得到更多的

5、有絲分裂的細(xì)胞。以便得到更多的有絲分裂的細(xì)胞。3. 前處理的目的是降低細(xì)胞質(zhì)的粘度，使染色體縮短前處理的目的是降低細(xì)胞質(zhì)的粘度，使染色體縮短分散，防止紡錘體形成，讓更多的細(xì)胞處于分裂中期，分散，防止紡錘體形成，讓更多的細(xì)胞處于分裂中期，一般在分裂高峰前，把根尖放到藥劑中處理一般在分裂高峰前，把根尖放到藥劑中處理3-4 小時(shí)。小時(shí)?？商幚淼乃巹┖芏?，如秋水仙素、對二氯苯、可處理的藥劑很多，如秋水仙素、對二氯苯、8-羥基羥基喹啉等。喹啉等。4. 解離的目的是使分生組織細(xì)胞間的果膠質(zhì)分解，細(xì)解離的目的是使分生組織細(xì)胞間的果膠質(zhì)分解，細(xì)胞壁軟化或部分分解，使細(xì)胞和染色體容易分散壓平，胞壁軟化或部分分解