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1、管 號(hào)1 2 3 4 5 6 7 8底物液底物液(0.04M)碳酸緩碳酸緩液液(pH=10)蒸餾水蒸餾水0.05 0.15 0.25 0.30 0.40 0.60 0.80 0.00 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 0.95 0.85 0.75 0.70 0.60 0.40 0.20 1.00混勻后混勻后37水浴,預(yù)溫水浴,預(yù)溫5分鐘左右分鐘左右 加入酶液后立即混勻(保持加入酶液后立即混勻(保持37水浴),水?。磻?yīng)開始。反應(yīng)開始。從加入酶液起計(jì)時(shí)至下一步從加入酶液起計(jì)時(shí)至下一步 加入堿性加入堿性溶液停止反應(yīng),溶液停止反應(yīng),各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)準(zhǔn)確一
2、各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)準(zhǔn)確一致,為致,為15分鐘。分鐘。堿性溶液堿性溶液 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.04-氨基安氨基安 替比林替比林鐵氰化鉀鐵氰化鉀 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 混勻,室溫放置混勻,室溫放置10分鐘左右分鐘左右, 以以8號(hào)管為號(hào)管為空白,于空白,于5l0nm比色,記錄各管的光密度比色,記錄各管的光密度底物濃度底物濃度 mmol/L 1 3 5 6 8 12 16 0 1/S 1/OD1 0.333 0.200 0.167 0.125 0.083 0.063 - 1、原始數(shù)據(jù)、原始數(shù)據(jù)S1/2VMAXOD510VMAXKm底物濃度與反應(yīng)速度關(guān)系曲線底物濃度與反應(yīng)速度關(guān)系
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