染色體疾病的產(chǎn)前診斷

1、 染色體疾病的產(chǎn)前診斷時(shí)間:2013-01-31 來(lái)源:網(wǎng)絡(luò)綜合整理188-染色體病是指由染色體異常引起的疾病。據(jù)估計(jì)染色體異常占出生兒的1/1501/120。產(chǎn)前診斷中最常見(jiàn)的染色體異常有：染色體數(shù)目異常、染色體結(jié)構(gòu)異常和微結(jié)構(gòu)異常染色體疾病。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道我國(guó)每年出生染色體異常的新生兒約10萬(wàn)人，在活嬰兒中染色體異常者占0.3%。因此，普及染色體疾病的產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷，對(duì)降低出生缺陷的發(fā)生有著非常重要的意義。下面就常見(jiàn)的染色體疾病及染色體病的產(chǎn)前篩查和染色體疾病的產(chǎn)前診斷作簡(jiǎn)單的闡述。一、染色體數(shù)目異常疾病染色體數(shù)目異常是臨床上最主要的染色體病，其中以13號(hào)、21號(hào)、18號(hào)，X、Y染色體異常

2、最為常見(jiàn)，占染色體非整倍體畸變95%以上。這些染色體異常占全部染色體病的80%90%。常見(jiàn)的可以進(jìn)行產(chǎn)前診斷的染色體病有以下幾種。（一）21三體綜合征21三體綜合征（trisomy 21 syndrome）又稱先天愚型綜合征和唐氏綜合征（Down syndrome），是胎兒和新生兒中最常見(jiàn)的非整倍體染色體異常。在新生兒中的發(fā)病率為1/600，在受精卵中為1/150。主要的臨床特征為：智力低下，特殊面容，眼裂上斜，鼻梁扁平，舌大、外伸和流涎。約40%患者伴有先天性心臟病。患者核型絕大多數(shù)（92.5%）為單純型21三體，即47，某，（xy），21；4.8%為易位型（如14/21、21/22易位）；

3、少數(shù)為嵌合型。單純型21三體幾乎都是新突變，與父母核型無(wú)關(guān)，它是減數(shù)分裂染色體不分離所致。單純型21三體的發(fā)生率與母親的生育年齡密切相關(guān)，高齡孕婦生育21三體患兒的比例明顯升高。（二）18三體綜合征18三體綜合征又稱為Edward綜合征，是一種嚴(yán)重的畸形，出生后不久死亡?；純号R床表現(xiàn)為頭面、手足有嚴(yán)重畸形，頭長(zhǎng)而枕部凸出，猶如冬瓜樣，稱冬瓜頭。眼距寬，眼球小，手緊握拳，足突出，向背部翹起，呈帆船狀腳，95%的病例有先天性心臟病。細(xì)胞遺體學(xué)檢查80%患者核型為47，XY（或某），18；另外10%患者為嵌合體，即46，XY（或某）/47，XY（或某），18；其余為各種易位，主要是18號(hào)與D組染色體

4、的易位。（三）13三體綜合征13三體綜合征又稱Patau綜合征。新生兒中的發(fā)病率為125 000。臨床表現(xiàn)為智力發(fā)育障礙、小頭、眼球小、前腦發(fā)育缺陷，常伴有腭裂。細(xì)胞遺傳學(xué)檢查80%的病例為游離型13三體，核型為47，某（或XY），13。其余的為嵌合型或易位型。易位型通常以13號(hào)和14號(hào)染色體羅泊遜易位居多。（四）性染色體異常綜合征1. klinefelter syndrome綜合征：又稱先天性睪丸發(fā)育不全綜合征。臨床表現(xiàn)主要是小睪丸、無(wú)精子產(chǎn)生，97%患者不育。患者男性第二性征發(fā)育差，身材高，四肢長(zhǎng)，可有智商低，精神異常及精神分裂癥傾向。細(xì)胞遺傳學(xué)檢查絕大多數(shù)患者核型為47，某Y。大約有15

5、%患者為嵌合體，其中常見(jiàn)的為46，某/47，某Y；46，XY/48某XY。額外的X是由于親代減數(shù)分裂時(shí)X染色體不分離的結(jié)果。2. XYY綜合征：在男嬰中發(fā)生率為1900?；颊吣行员硇驼＃聿母叽?，易興奮，常有攻擊行為。睪丸發(fā)育不全，生精過(guò)程障礙。XYY核型是父親精子形成過(guò)程中第二次減數(shù)分裂時(shí)發(fā)生Y染色體不分離的結(jié)果。3. Turner綜合征：又稱為45，X，女性先天性性腺發(fā)育不全綜合征。染色體為X單體。在新生兒女嬰中的發(fā)病率為0.2%0.4%，患者表型為女性，身材矮小，智力一般，頸部發(fā)際低，女性第二性征發(fā)育不全。細(xì)胞遺傳單方面Turner綜合征的核型典型的是45，X；約占55%。其他核型常見(jiàn)

6、有嵌合體46，某和46，X和X等臂染色體X，i（xq）。本病發(fā)病機(jī)制是雙親配子形成過(guò)程中的不分離，其中75%的染色體丟失發(fā)生在男方，絕大部分是由于精卵細(xì)胞的染色體不分離所致。4.47，某Y和多X女性綜合征：本病又稱多雌綜合征，其外形、性功能與生育能力都是正常，有少數(shù)患者有繼發(fā)閉經(jīng)。約2/3的患者有智力低下。多X綜合征是由于細(xì)胞的減數(shù)分裂時(shí)染色體的不分離所致。X染色體數(shù)目愈多，智力損害和發(fā)育畸形愈嚴(yán)重。其他染色體三體綜合征能活到出生的非常難見(jiàn)。大部分的7-三體、8-三體、10-三體和14-三體綜合征都在早孕期流產(chǎn)，除非是嵌合體。二、染色體結(jié)構(gòu)異常（一）常染色體結(jié)構(gòu)異常包括染色體部分缺失、環(huán)狀染色

7、體、等臂染色體、倒位、易位、重復(fù)、插入等染色體結(jié)構(gòu)的改變。（二）性染色體結(jié)構(gòu)異常X染色體結(jié)構(gòu)畸變包括X短臂缺失（某P-）；X染色體長(zhǎng)臂缺失（某q-）；X等臂染色體、X環(huán)形染色體；易位染色體和X脆性綜合征。Y染色體結(jié)構(gòu)異常包括Y的長(zhǎng)臂或短臂缺失；等臂染色體i（yq）和i（yp）；環(huán)形染色體和雙著絲粒染色體等。（三）染色體微結(jié)構(gòu)異常綜合征染色微結(jié)構(gòu)異常疾病是由于染色體微小片段缺失或重復(fù)，使正?；蚪M劑量發(fā)生改變而導(dǎo)致臨床可識(shí)別的一組疾病。染色體微結(jié)構(gòu)異常是用常規(guī)的染色體顯帶方法不能或不容易被發(fā)現(xiàn)的染色體結(jié)構(gòu)異常。隨著分子細(xì)胞遺傳技術(shù)的發(fā)展，特別是最近兩年CGH微陣列方法的引進(jìn)，被發(fā)現(xiàn)的染色體微結(jié)構(gòu)

8、引起的疾病將會(huì)越來(lái)越多。下面簡(jiǎn)單介紹幾種常見(jiàn)的染色體微缺失綜合征。1.22q11.2微缺失綜合征：22q11.2微缺失綜合征是由于22號(hào)染色體長(zhǎng)臂近著絲粒端微片段22q11.21缺失引起的遺傳綜合征，其遺傳病理基礎(chǔ)是22q11.2片段的微缺失。主要臨床表現(xiàn)為心臟畸形、面容異常、胸腺發(fā)育不良、腭裂及低鈣血癥5個(gè)癥狀。又稱DiGeorge綜合征（DiGeorge syndrome，DGS）和腭心面綜合征（velocardiofacial syndrome，VCFS）。近年研究認(rèn)為22q11.2微缺失綜合征與學(xué)習(xí)認(rèn)知障礙、精砷異常、發(fā)育遲緩等有關(guān)。其發(fā)病率為活產(chǎn)新生兒的1/40001/3000。是人

9、類最常見(jiàn)的染色體微缺失綜合征。2.22q11微重復(fù)綜合征：22q11微重復(fù)綜合征是由22q11.2區(qū)域所含的DNA微重復(fù)所致。臨床表現(xiàn)與22q11.13缺失綜合征相似，但有其特殊表型，其中包括上位眉毛，眼眶下斜、輕度小頜、臉部細(xì)長(zhǎng)等。3. Prader-Willi綜合征：Prader-Willi綜合征（PWS）又稱力減退-智力減退-性腺功能減退與肥胖綜合征，是Angelman綜合征同系15q11q13的缺失所致。4. Williams綜合征：Williams綜合征是指因7號(hào)染色體長(zhǎng)臂近著絲端片段7q11.23微缺失引起，主要臨床表現(xiàn)有動(dòng)脈狹窄，精神發(fā)育不良和認(rèn)知缺陷。發(fā)病率為1/10 000。

10、5. 其他常見(jiàn)已知的染色體微缺失綜合征：1P36單體綜合征，1q部分單體綜合征，1q部分三體綜合征，4P部分單體綜合征，5P部分單體綜合征，18q24.1q24.13缺失和16號(hào)、7號(hào)染色體短臂部分缺失綜合征。染色體微缺失是不能通過(guò)核型分析檢測(cè)出來(lái)的，需用高分辨染色體核型分析，現(xiàn)可用特異探針進(jìn)行FISH探測(cè)和QF-PCR通過(guò)擴(kuò)增短串聯(lián)重復(fù)序列檢測(cè)和CGH微陣列方法檢測(cè)。三、染色體病的產(chǎn)前篩查及產(chǎn)前診斷方法（一）產(chǎn)前唐氏綜合征篩查目前唐氏綜合征的篩查方法主要有：（1）孕中期二聯(lián)篩查：指以中孕期（1520周）血清甲胎蛋白（AFP）和游離B-HCG為指標(biāo)，結(jié)合孕婦年齡等參數(shù)計(jì)算胎兒患唐氏綜合征風(fēng)險(xiǎn)的

11、方法。（2）三聯(lián)篩查：以中孕（1520周）血清AFP、游離B-HCG、非結(jié)合雌三醇（E3）為指標(biāo)，結(jié)合孕婦年齡等參數(shù)計(jì)算胎兒患唐氏綜合征風(fēng)險(xiǎn)的聯(lián)合篩查方法。（3）聯(lián)合篩查：早孕（1113周）超聲測(cè)定胎兒頸后透明層（nuchal translcenc，NT）厚度，結(jié)合孕婦血清游離B-HCG和妊娠相關(guān)血漿蛋白A（pregnancy associated plasma protein-A，PAPP-A）水平以及孕婦年齡以計(jì)算胎兒患唐氏綜合征的風(fēng)險(xiǎn)。據(jù)報(bào)道，單用年齡（35歲）Down綜合征的檢出率僅為49%；中孕二聯(lián)篩查檢出率為73%；中孕三聯(lián)篩查檢出率為78%；早孕NTB-HCGPAPP-A檢出率為

12、86%。用NTNB（鼻骨）B-HCGPAPP-AAFPE3的方案則Down綜合征的檢出率可>95%。在我國(guó)目前廣泛開(kāi)展的是中孕二聯(lián)篩查，其方法簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉。有條件的地區(qū)已開(kāi)展早孕NTPAPP-AB-HCG的方案。唐氏篩查只是一種篩查方法，不能作為診斷，篩查高風(fēng)險(xiǎn)患者還須進(jìn)一步做染色體檢查才能確診。（二）細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)主要從染色體的數(shù)目、形態(tài)、結(jié)構(gòu)和行為來(lái)研究人類的遺傳現(xiàn)象，主要應(yīng)用常規(guī)G顯帶技術(shù)。每個(gè)單倍體都可以顯示150550條帶，每條帶大約代表（510）×106 bP的DNA。高分辨顯帶是采用細(xì)胞同步化等方法，獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)的有絲分裂晚前期或早中期的顯帶核型。

13、高分辨顯帶染色體的優(yōu)點(diǎn)是染色體細(xì)長(zhǎng)，顯出的帶紋多可達(dá)5001000條帶，從而極提高了識(shí)別染色體細(xì)胞微結(jié)構(gòu)改變的能力。可以檢出常規(guī)G顯帶技術(shù)難以發(fā)現(xiàn)的染色體缺陷，提高了染色體病的檢出率。利用染色體顯帶技術(shù)可對(duì)經(jīng)過(guò)培養(yǎng)的絨毛、羊水、臍血中的胎兒細(xì)胞進(jìn)行核型鑒定，以發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)的改變。目前該技術(shù)仍是診斷13,18,21三體等染色體病的金標(biāo)準(zhǔn)。應(yīng)用胎兒細(xì)胞培養(yǎng)作核型鑒定細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)的適應(yīng)證有：（1）年齡35歲的孕婦；（2）有染色體病的孕婦；（3）家族中有遺傳病的孕婦；（4）出生過(guò)先天畸形兒和宮死胎的孕婦，有習(xí)慣性流產(chǎn)史的孕婦；（5）接觸過(guò)放射線的孕婦；（6）出生過(guò)染色體病兒的孕婦；（7）Do

14、wn篩查陽(yáng)性的孕婦；（8）超聲檢查胎兒NT3 mm的孕婦；（9）早、中孕超聲檢查有胎兒結(jié)構(gòu)異常和胎兒宮發(fā)育不良的孕婦等。（三）熒光原位雜交技術(shù)（fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）FISH是分子遺傳學(xué)和免疫學(xué)相結(jié)合，采用已知核酸序列作為探針，用熒光素直接標(biāo)記或非放射性物質(zhì)標(biāo)記后與靶DNA進(jìn)行雜交，在熒光顯微鏡下對(duì)標(biāo)本中待測(cè)核酸進(jìn)行定性、定位分析。FISH具有快速、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)?？捎糜谕庵苎?xì)胞、臍血、未經(jīng)培養(yǎng)的間期細(xì)胞染色檢查；快速的性染色體檢查；快速的染色體產(chǎn)前診斷；染色體微缺失綜合征（需制備特定的探針）；胚胎植入前診斷；孕婦外周血分離胎兒細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)

15、前診斷時(shí)具有優(yōu)越性。FISH探針?lè)N類有：（1）-衛(wèi)星DNA序列探針，位于毎條染色體的著絲粒區(qū)域；（2）-衛(wèi)星DNA序列探針位于近端著絲粒染色體（即13、14、15、21和22號(hào)染色體）的短臂；（3）端粒DNA探針位于染色體端粒；（4）染色體全涂染探針；（5）具有特異性的一些染色體微缺失探針，如染色體22q11.2微缺失綜合征；7q11.23微缺失綜合征；15q11q13微缺失綜合征等。目前國(guó)產(chǎn)的已用于臨床的染色體診斷的FISH探針有：21、18、13/21、13/18號(hào)和X、Y等探針。（四）定量熒光多聚酶鏈反應(yīng)染色體技術(shù)（quantitative fluorescence polymerase

16、 chain reaction，QF-PCR）和多重連接探針擴(kuò)增（multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA）等方法它們對(duì)常見(jiàn)21、18、13號(hào)常染色體和性染色體X、Y的非整倍體異常檢測(cè)的靈敏度和特異性已為許多大樣本的研究所證實(shí)。它通過(guò)擴(kuò)增短串聯(lián)重復(fù)序列（short tanden repeat，STR），然后通過(guò)分析這些STR的拷貝數(shù)來(lái)判斷檢測(cè)樣品的染色體數(shù)目是否正常。這些方法檢出常見(jiàn)非整倍體的敏感性很高。1993年，Mansfield等首先將STR作為遺傳標(biāo)記，用QF-PCR對(duì)唐氏綜合征患者進(jìn)行基因診斷。STR位點(diǎn)是QF-PCR

17、中檢測(cè)染色體數(shù)目異常最適合的標(biāo)記，其數(shù)量多、穩(wěn)定，具有高度的多態(tài)性，可提供較多的信息量，而且在上下代的傳遞過(guò)程中遵循孟德尓共顯性遺傳定律。Lee等用QF-PCR擴(kuò)增21號(hào)染色體上的4個(gè)STR位點(diǎn)，結(jié)果顯示診斷的敏感性、特異性和有效率在95.4%99.5%。但QF-PCR不能對(duì)嵌合體或易位型唐氏綜合征作出正確的診斷9。QF-PCR對(duì)常見(jiàn)非整倍體檢出的準(zhǔn)確性已在大量研究中被證實(shí)與FISH相似，而QF-PCR和MLPA的檢測(cè)需要DNA測(cè)序儀，設(shè)備昂貴，但自動(dòng)化程度高，易于操作10。FISH和QF-PCR是兩種比較成熟的檢測(cè)技術(shù)，對(duì)常見(jiàn)非整倍體的研究準(zhǔn)確率相似，不論FISH方法還是QF-PCR方法得出

18、錯(cuò)誤的診斷結(jié)果的概率都相當(dāng)小。目前在西方先進(jìn)國(guó)家已較廣泛使用，這僅用于快速非整倍體的檢測(cè)，隨后仍需常規(guī)染色體G顯帶檢測(cè)，以進(jìn)一步確定染色體核型。（五）快速染色體異常檢測(cè)（rapid aneuploidy detection，RAD）RAD能在13 d診斷包括唐氏綜合征在的常見(jiàn)染色體數(shù)目異常，顯著縮短了報(bào)告時(shí)間，對(duì)常見(jiàn)21、18、13號(hào)常染色體和性染色體X、Y的非整體異常探測(cè)的敏感度和特異度已為許多大規(guī)模的研究證實(shí)。但是RAD無(wú)法對(duì)所有染色體進(jìn)行探測(cè)。對(duì)于核型分析檢測(cè)到的所有染色體異常，RAD只能檢出70%85%。但是在診斷常見(jiàn)的染色體異常方面，他們可與傳統(tǒng)的核型分析技術(shù)相媲美，且方法簡(jiǎn)單，容易

19、操作。美國(guó)遺傳學(xué)會(huì)認(rèn)為RAD是“相對(duì)成熟的技術(shù)”；英國(guó)國(guó)家篩查委員會(huì)建議對(duì)于唐氏篩查高風(fēng)險(xiǎn)孕婦可以不采用核型分析的方法，直接通過(guò)FISH或QF-PCR的快速產(chǎn)前診斷確診胎兒是否有唐氏綜合征。（六）染色體異常的產(chǎn)前超聲診斷隨著超聲技術(shù)的提高，能發(fā)現(xiàn)染色體異常的結(jié)構(gòu)畸形。很多胎兒結(jié)構(gòu)畸形都伴有染色體異常。目前發(fā)現(xiàn)不少的胎兒結(jié)構(gòu)異常伴有染色體微缺失；21、18、13號(hào)染色體三體等異常有早期超聲改變。因此，超聲檢測(cè)可以作為胎兒染色體異常的軟指標(biāo)，在篩查胎兒染色體異常中起到一定的作用，常用的胎兒染色體畸形產(chǎn)前超聲有以下的指標(biāo)。1. NT：在孕1114周NT增厚與很多染色體異常有關(guān)。通常標(biāo)準(zhǔn)為2.53.0 mm。美國(guó)FMF報(bào)道：NT對(duì)21三體綜合征胎兒檢出率為82%，其他染色體異常的檢出率為78%。目前在西方國(guó)家NT已作為常規(guī)超聲檢查。2. 胎兒鼻骨：在孕1114周胎兒鼻骨缺失與21三體綜合征及其他染色體異常有很高的相關(guān)性。在21三體胎兒中鼻骨