實驗室液相色譜儀的日常維護和故障排除

1、實驗室液相色譜儀的日常維護和故障排除日常維護:泵 泵是液相色譜儀的心臟，須精心維護和保養(yǎng)。處于良好工作狀態(tài)的泵，其基線平穩(wěn)，保留時間重現(xiàn)性好，梯度洗脫時壓力變化緩慢而平穩(wěn)。要使泵具備良好的操作性能，應該保持泵系統(tǒng)的清潔。具體做法如下：(1)要選擇優(yōu)質(zhì)的容劑和試劑，在進入儀器前用0。45um膜過濾，并進行脫氣處理。(2)泵開始使用時，一定要用合適的流動相徹底清洗干凈。(3)定期檢查并更換在線過濾片及有關的墊圈，并經(jīng)常清洗進液處的微孔濾頭。(4)改變流動相時，應避免沉淀產(chǎn)生，以防止泵堵塞。12色譜柱色譜柱是化合物分離的關鍵。保養(yǎng)良好的色譜柱應具有很高的塔板數(shù)，且儀器基線平穩(wěn)。色譜柱比較嬌氣，在平時

2、的工作中須注意以下事項：(1)色譜柱不能夠碰撞、彎曲或強烈震蕩；安裝時，一定要保證閥件或管路的清潔。(2)流動相在使用前必須進行脫氣處理，盡量不使用或少使用高粘度的流動相。(3)在滿足靈敏度的情況下，盡可能使用小進樣量。如果樣品比較“臟，要進行凈化或提純處理。(4)分析結束語后，要清洗掉進樣閥中殘留的樣品，并用流動相或適當?shù)娜軇┣逑瓷V柱。(5)如色譜柱長期不用，應該用適當?shù)挠袡C溶劑保存并封閉或定期給柱子補充合適的流動相。13檢測器對于紫外檢測器，在分析柱平衡的差不多時，開啟檢測器；在分析完成后，馬上關閉檢測器。14進樣器分析結束后，應反復沖洗進樣口，防止樣品的交叉污染或堵塞。2常見故障的分析

3、與排除既使日常精心維護的液相色譜儀，隨著使用時間的增加或使用者經(jīng)驗不足也會出現(xiàn)一些問題或故障?，F(xiàn)將液相色譜儀容易出現(xiàn)的故障及解決辦法介紹如下：21保留時間變化保留時間的變化有三中情況：波動、縮短、延長。保留時間出現(xiàn)波動時，應檢查柱溫是否處于恒溫狀態(tài)，如果設置為室溫，氣溫的變化會引起保留時間的波動，應該設置為恒定溫度；等度和梯度間還沒有充分達到平衡狀態(tài)時，應該用十倍以上柱體積的流動相去平衡色譜柱；緩沖液濃度太低時，應換用25mml/L的緩沖液；色譜柱被污染或已經(jīng)接近柱壽命時，應更換保護柱或換新色譜柱。保留時間縮短時，流速增加，應檢查流速的設定；柱溫高時，應檢查柱的設置；進樣量太大時，減少樣品用量

4、或降低樣品濃度；流動相的組成發(fā)生了改變，比如流動相中易揮發(fā)有機相蒸發(fā)，兩相之間互溶不好，會導致流動相不均勻或某一相出現(xiàn)部分沉淀；流動相的PH值應保持37.5范圍內(nèi)，否則會引起柱鍵合相的流失。保留時間延長時，流速減小，應檢查流速的設定和管路是否有泄露；柱溫低時，檢查柱溫的設置；流動相的組成發(fā)生了改變，比如流動相中易揮發(fā)有機相蒸發(fā)，兩相之間互溶不好，會導致流動相不均勻或某一相出現(xiàn)部分沉淀；檢查流動相的pH值是否37.5范圍內(nèi)，否則會引起柱鍵合相的流失。 22峰拖尾色譜柱超載時，要減少進樣量或稀釋樣品或使用高溶量的色譜柱；色譜柱性能不佳時，更換色譜柱；死體積或柱外體積過大時，將連接降至最低，并對所有

5、連接點作合理的調(diào)整，盡可能采用細內(nèi)徑的連接；加入硅羥基，其作用是純化色譜柱，增加緩沖液的濃度，降低流動相的pH值，純化樣品；出現(xiàn)峰干擾時，應清潔樣品，調(diào)整流動相。23峰展寬進樣體積過大時，用流動相配樣；樣品過載時，進小濃度、小體積樣品；在進樣閥中造成峰擴展時，進樣前后排出氣泡，以降低擴散；流動相粘度過高時，提高柱溫，并采用低粘度流動相；等度洗脫，保留時間過長時，要增加流速或改用梯度洗脫；柱外體積過大時，將連接管徑和連結管降至最小1。24基線噪聲流動相或檢測器中有氣泡時，要對流動相進行脫氣處理；檢測器燈有連續(xù)噪聲時，更換氘燈；出現(xiàn)由污染引起的隨機噪聲時，應清洗色譜柱、凈化樣品、使用HIPLC級試

6、劑；偶然有噪聲時，可能是來自電源的干擾，如果電壓不穩(wěn)時，應采用穩(wěn)壓電源。25肩峰或分叉進樣量太大或樣品濃度過高時，要減少進樣量或稀釋樣品；樣品溶劑太強時，應使用軟弱的樣品溶劑；色譜柱性能欠佳時，應更換色譜柱。26鬼峰色譜柱未達到平衡時，要繼續(xù)平衡色譜柱；樣品中溶劑出峰時，使用流動相作樣品的溶劑；出現(xiàn)進樣閥殘余峰時，使用強溶劑清洗進樣閥，并改進閥和樣品的清洗程序；流動相用水不合格率，應使用HPLC級的水。3使用注意事項在使用混合溶劑作流動相時，一定要先混合，再過0.45um濾膜；等流動相恢復至室溫，用超聲波或He氣進行脫氣處理后，方可使用。更換流動相時，必須按一定的程序進行，否則會產(chǎn)生問題。更換流動相有三種情況：互溶性流動相的更換、無互溶性流動相的更換和緩沖溶液的更換。對于第一種情況，先用準備更換的流動相把吸濾器完全清洗干凈，再打開儀器的排液閥，按清洗鍵，清洗泵中的流動相。將吸濾器放入新流動腥中，減慢流速清洗數(shù)分鐘后關閉排液閥。接下來清洗色譜柱和檢測器檢測