免疫增殖病及檢驗

1、人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社免疫學(xué)檢驗免疫學(xué)檢驗人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社第二十七章第二十七章免疫增殖病及檢驗免疫增殖病及檢驗人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社1. 免疫增殖病的概念免疫增殖病的概念和分類和分類2. 單克隆丙種球蛋白病單克隆丙種球蛋白病的概念的概念3. 常見的常見的單克隆丙種球蛋白病單克隆丙種球蛋白病4. 本周蛋白本周蛋白、M蛋白的概念蛋白的概念5. 單克隆丙種球蛋白病的單克隆丙種球蛋白病的檢測檢測本章要點本章要點人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社目錄目錄 概述概述1單克隆丙種球蛋白病的臨床免疫學(xué)特征單克隆丙種球蛋白病的臨床免疫學(xué)特征2單克隆丙種球蛋白病的檢測方法單克隆丙種球蛋白病的檢測

2、方法3人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 免疫增殖?。庖咴鲋巢。╥mmunoproliferative diseaseimmunoproliferative disease）是是免疫免疫系統(tǒng)系統(tǒng)異常增生而引起的疾病。免疫增殖病的異常增生而引起的疾病。免疫增殖病的重要臨床表現(xiàn)包括免疫球蛋白數(shù)量和功能的異常，重要臨床表現(xiàn)包括免疫球蛋白數(shù)量和功能的異常，因此因此通過異常免疫球蛋白的檢測通過異常免疫球蛋白的檢測，可以可以為為該類疾該類疾病的診斷提供重要依據(jù)，檢測異常免疫球蛋白已病的診斷提供重要依據(jù)，檢測異常免疫球蛋白已經(jīng)成為臨床免疫經(jīng)成為臨床免疫檢驗檢驗的重要的重要檢測檢測內(nèi)容。內(nèi)容。前前 言言人民衛(wèi)生出

3、版社人民衛(wèi)生出版社第一節(jié)第一節(jié) 概述概述免疫增殖病的概念免疫增殖病的概念 免疫器官、免疫組織或免疫細胞異常增生（包免疫器官、免疫組織或免疫細胞異常增生（包括良性或惡性）所致的一組疾病括良性或惡性）所致的一組疾病。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社免疫增殖病的分類免疫增殖病的分類增殖細胞增殖細胞疾病疾病T細胞細胞急性淋巴細胞白血?。毙粤馨图毎籽。?0）淋巴母細胞瘤淋巴母細胞瘤部分非霍奇金淋巴瘤部分非霍奇金淋巴瘤Sezary綜合征綜合征蕈樣霉菌病蕈樣霉菌病B細胞細胞慢性淋巴細胞白血病慢性淋巴細胞白血病原發(fā)性巨球蛋白血癥原發(fā)性巨球蛋白血癥多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)性骨髓瘤重鏈病和輕鏈病重鏈病和輕鏈病Burki

4、tt淋巴瘤淋巴瘤其他多數(shù)淋巴細胞瘤其他多數(shù)淋巴細胞瘤傳染性單核細胞增多癥傳染性單核細胞增多癥人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社免疫增殖病的分類免疫增殖病的分類增殖細胞增殖細胞疾病疾病裸細胞裸細胞急性淋巴細胞白血?。毙粤馨图毎籽。?0）部分非霍奇金淋巴瘤部分非霍奇金淋巴瘤組織組織-單核細胞單核細胞急性單核細胞白血病急性單核細胞白血病急性組織細胞增多癥急性組織細胞增多癥其他（分類不統(tǒng)一）其他（分類不統(tǒng)一）毛細胞白血病毛細胞白血病其他霍奇金病其他霍奇金病人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社免疫球蛋白病的概念免疫球蛋白病的概念 由于由于B B細胞或細胞或漿細胞異常增殖所引起的免漿細胞異常增殖所引起的免疫球蛋白

5、疫球蛋白的的異常增加，異常增加，從而導(dǎo)致從而導(dǎo)致機體病理損機體病理損傷的免疫增殖病傷的免疫增殖病。 分類分類單克隆免疫球蛋白病（單一克隆、惡性）單克隆免疫球蛋白?。▎我豢寺?、惡性）多克隆免疫球蛋白?。ㄈ?、良性或繼發(fā)）多克隆免疫球蛋白?。ㄈ?、良性或繼發(fā)）人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社第二節(jié)第二節(jié) 單克隆丙種球蛋白病的臨床免疫學(xué)特征單克隆丙種球蛋白病的臨床免疫學(xué)特征 突出突出特點特點：患者血清存在異常增多的單克隆患者血清存在異常增多的單克隆免疫球蛋白免疫球蛋白 M M蛋白（蛋白（monoclonal proteinmonoclonal protein）：單克隆免單克隆免疫球蛋白理化性質(zhì)十分均一，

6、但是多無免疫活疫球蛋白理化性質(zhì)十分均一，但是多無免疫活性性，可以是可以是IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE或或IgDIgD，也可，也可以是以是或或輕鏈中的任何一型。輕鏈中的任何一型。 本周蛋白（本周蛋白（Bence-Jone proteinBence-Jone protein）：M M蛋白蛋白的輕鏈分子量較小，容易從尿中排出，的輕鏈分子量較小，容易從尿中排出，最早最早由由Bence-JonesBence-Jones測知。測知。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社一、一、多發(fā)性骨髓瘤多發(fā)性骨髓瘤 多發(fā)性骨髓瘤（多發(fā)性骨髓瘤（multiple myelomamultiple myelo

7、ma）是）是漿細胞異常增生的惡性腫瘤，也稱漿細胞瘤，漿細胞異常增生的惡性腫瘤，也稱漿細胞瘤，因其引起骨破壞而得名?；颊叱０橛胸氀?、因其引起骨破壞而得名。患者常伴有貧血、腎功損害和免疫功能障礙。近年發(fā)病有增高腎功損害和免疫功能障礙。近年發(fā)病有增高趨勢，男性多發(fā)，男女比約為趨勢，男性多發(fā)，男女比約為2:12:1，平均發(fā)病，平均發(fā)病年齡是年齡是46.546.5歲。歲。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社臨床表現(xiàn)：臨床表現(xiàn)： 骨痛骨痛 貧血貧血 感染感染 高黏血癥表現(xiàn)高黏血癥表現(xiàn) 腎功能損害腎功能損害 患者骨破壞所致頭顱腫患者骨破壞所致頭顱腫物及眼球突出物及眼球突出人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社特點：特點： 血

8、清中有大量單克隆血清中有大量單克隆M M蛋白或尿中有大量本周蛋白蛋白或尿中有大量本周蛋白 免疫球蛋白含量明顯降低免疫球蛋白含量明顯降低 骨髓發(fā)現(xiàn)大量漿細胞或組織活檢證實有漿細胞瘤骨髓發(fā)現(xiàn)大量漿細胞或組織活檢證實有漿細胞瘤 原發(fā)性的溶骨性損害或廣泛骨質(zhì)疏松原發(fā)性的溶骨性損害或廣泛骨質(zhì)疏松人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社類類 型型發(fā)生率發(fā)生率（%）本周蛋白尿本周蛋白尿陽性（陽性（%）臨床特點臨床特點IgG506050 70典型癥狀典型癥狀I(lǐng)gA20 2550 70高黏綜合征較多見高黏綜合征較多見IgD1 290骨髓外病變多見，溶骨病骨髓外病變多見，溶骨病變多見，變多見，44%淀粉樣變淀粉樣變IgE0.

9、01少見少見 非 分 泌非 分 泌型型1 5無無溶骨病變較少，神經(jīng)系統(tǒng)溶骨病變較少，神經(jīng)系統(tǒng)損害較多見損害較多見 不同類型的多發(fā)性骨髓瘤特點不同類型的多發(fā)性骨髓瘤特點 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社二、二、原發(fā)性巨球蛋白血癥原發(fā)性巨球蛋白血癥 原發(fā)性巨球蛋白血癥（原發(fā)性巨球蛋白血癥（macroglobulinemiamacroglobulinemia）是以分泌是以分泌IgMIgM的漿細胞惡性增殖為病理基礎(chǔ)的疾的漿細胞惡性增殖為病理基礎(chǔ)的疾病，好發(fā)于老年男性。病，好發(fā)于老年男性。 主要表現(xiàn)骨髓外浸潤，以淋巴結(jié)、肝和脾主要表現(xiàn)骨髓外浸潤，以淋巴結(jié)、肝和脾腫大等為主要體征并伴有血黏滯過高綜合征。腫大等

10、為主要體征并伴有血黏滯過高綜合征。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社實驗室檢查：實驗室檢查： 血清中血清中患者血清患者血清IgMIgM水平往往超過水平往往超過300mg/dl300mg/dl 血清分離不出或呈膠凍狀，電泳時血清有時難以血清分離不出或呈膠凍狀，電泳時血清有時難以泳動，集中于原點是該病的電泳特征泳動，集中于原點是該病的電泳特征 骨髓象可見淋巴細胞、漿細胞和介乎兩者之間的骨髓象可見淋巴細胞、漿細胞和介乎兩者之間的漿細胞樣淋巴細胞明顯增多漿細胞樣淋巴細胞明顯增多 有些有些IgMIgM分子具有冷球蛋白的特征分子具有冷球蛋白的特征 有約有約4040的病人可出現(xiàn)本周蛋白尿的病人可出現(xiàn)本周蛋白尿人民

11、衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社三、三、良性單克隆丙種球蛋白病良性單克隆丙種球蛋白病 良 性 單 克 隆 丙 種 球 蛋 白 病 （良 性 單 克 隆 丙 種 球 蛋 白 病 （ b e n i g n b e n i g n monoclonal gammopathymonoclonal gammopathy）是指血清中出現(xiàn)高水）是指血清中出現(xiàn)高水平免疫球蛋白，但并無漿細胞惡性增殖的疾病。平免疫球蛋白，但并無漿細胞惡性增殖的疾病。一般無臨床癥狀，往往因其它疾病就診時發(fā)現(xiàn)一般無臨床癥狀，往往因其它疾病就診時發(fā)現(xiàn)血中有血中有M M蛋白，但其并不呈進行性增加，在少部蛋白，但其并不呈進行性增加，在少部分正常

12、老年人群中也可出現(xiàn)上述情況。分正常老年人群中也可出現(xiàn)上述情況。 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社三、惡性與良性單克隆丙種球蛋白三、惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別診斷病的鑒別診斷 惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別惡性與良性單克隆丙種球蛋白病的鑒別 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社四、四、冷球蛋白血癥冷球蛋白血癥 冷球蛋白（冷球蛋白（cryoglobulincryoglobulin）：）：指溫度低于指溫度低于30 30 時易自發(fā)形成沉淀，加溫后又可溶解的免疫時易自發(fā)形成沉淀，加溫后又可溶解的免疫球蛋白球蛋白 冷球蛋白血癥：冷球蛋白血癥：當血中含有冷球蛋白時稱為當血中含有冷球蛋白時稱為冷球蛋白血癥冷球

13、蛋白血癥人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社特點：特點： 多多見于某些原發(fā)性疾病，例如感染、自身免疫病見于某些原發(fā)性疾病，例如感染、自身免疫病和某些免疫增殖病和某些免疫增殖病 患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血患者常有因冷球蛋白沉淀所引起的高血黏度黏度、紅、紅細胞凝集、血栓形成等病理細胞凝集、血栓形成等病理表現(xiàn)表現(xiàn)。 常見癥狀常見癥狀有有雷諾現(xiàn)象（即寒冷性肢端紫紺）、皮雷諾現(xiàn)象（即寒冷性肢端紫紺）、皮膚紫癜、壞死、潰瘍、寒冷性蕁麻疹、關(guān)節(jié)痛、膚紫癜、壞死、潰瘍、寒冷性蕁麻疹、關(guān)節(jié)痛、腎損害、神經(jīng)系統(tǒng)病變（如腎損害、神經(jīng)系統(tǒng)病變（如感覺麻木感覺麻木、運動障礙、運動障礙等等）以及肝以及肝、脾等器官損害。脾

14、等器官損害。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社五、五、淀粉樣變性淀粉樣變性 淀粉樣變性（淀粉樣變性（amyloidosisamyloidosis）是組織器官中是組織器官中有淀粉樣物質(zhì)沉積的一種病理現(xiàn)象。該病比較有淀粉樣物質(zhì)沉積的一種病理現(xiàn)象。該病比較少見，?？衫奂案鞣N不同的組織和器官，但以少見，?？衫奂案鞣N不同的組織和器官，但以小動脈、腎小球、肝、脾和腎上腺最為常見。小動脈、腎小球、肝、脾和腎上腺最為常見。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社第三節(jié)第三節(jié) 單克隆丙種球蛋白病的檢測方法單克隆丙種球蛋白病的檢測方法 血清蛋白區(qū)帶電泳血清蛋白區(qū)帶電泳 免疫球蛋白定量檢測免疫球蛋白定量檢測 免疫球蛋白的分類鑒定免疫

15、球蛋白的分類鑒定 本周蛋白檢測本周蛋白檢測 冷球蛋白檢測冷球蛋白檢測人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社一、血清蛋白區(qū)帶電泳一、血清蛋白區(qū)帶電泳 血清區(qū)帶電泳是測定血清區(qū)帶電泳是測定M M蛋白的一種定性實驗，蛋白的一種定性實驗，常采用醋酸纖維素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。常采用醋酸纖維素膜和瓊脂糖電泳兩種方法。 M M蛋白在電泳時出現(xiàn)于蛋白在電泳時出現(xiàn)于 區(qū)代中，不同類區(qū)代中，不同類型的型的M M蛋白的電泳后所處位置。蛋白的電泳后所處位置。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社二、二、免疫球蛋白定量檢測免疫球蛋白定量檢測 免疫球蛋白定量測定較常用的方法有免疫球蛋白定量測定較常用的方法有單向擴單向擴散法散法與與免疫比

16、濁法免疫比濁法，前者較為簡便，后者更為，前者較為簡便，后者更為準確迅速。準確迅速。 惡性單克隆丙種球蛋白病常呈現(xiàn)某一類丙種惡性單克隆丙種球蛋白病常呈現(xiàn)某一類丙種球蛋白的顯著增高。球蛋白的顯著增高。 在良性丙種球蛋白病的血清標本中，在良性丙種球蛋白病的血清標本中，M M蛋白的蛋白的升高幅度一般不象惡性丙種球蛋白病那么高升高幅度一般不象惡性丙種球蛋白病那么高 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社三、三、免疫球蛋白免疫球蛋白的分類鑒定的分類鑒定 免疫電泳免疫電泳 免疫選擇電泳免疫選擇電泳 免疫免疫固定固定電泳電泳人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社免疫電泳：免疫電泳： 免疫電泳是將免疫電泳是將瓊脂糖電泳瓊脂糖電泳和

17、和免疫雙向擴散免疫雙向擴散相結(jié)相結(jié)合的一項技術(shù)。合的一項技術(shù)。 血清標本先行區(qū)帶電泳分成區(qū)帶，繼而用特定血清標本先行區(qū)帶電泳分成區(qū)帶，繼而用特定的抗血清進行免疫擴散，陽性樣本的的抗血清進行免疫擴散，陽性樣本的M M蛋白將在適蛋白將在適當?shù)牟课恍纬僧惓３恋砘?，根?jù)抗血清的種類、當?shù)牟课恍纬僧惓３恋砘。鶕?jù)抗血清的種類、電泳位置及沉淀弧的形狀可以對電泳位置及沉淀弧的形狀可以對M M蛋白作出判定。蛋白作出判定。 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社正常及某些患者免疫電泳圖譜正常及某些患者免疫電泳圖譜 上孔中為血清，下孔中為尿液，槽中為抗血清，箭頭所指為骨髓瘤蛋白上孔中為血清，下孔中為尿液，槽中為抗血清，箭頭

18、所指為骨髓瘤蛋白a：抗正常人血清；：抗正常人血清；b：抗：抗IgG血清；血清；c：抗：抗IgA血清；血清；d：抗：抗IgM血清血清e：抗：抗血清；血清；f：抗：抗血清血清A：IgA/型骨髓瘤；型骨髓瘤； B：IgG/型骨髓瘤；型骨髓瘤； C：IgG重鏈病重鏈病人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社免疫選擇電泳：免疫選擇電泳： 制備含抗制備含抗或或血清的薄層瓊脂板，打孔并加入血清的薄層瓊脂板，打孔并加入待測標本進行火箭電泳，待形成相應(yīng)的火箭樣沉待測標本進行火箭電泳，待形成相應(yīng)的火箭樣沉淀峰后，于孔的兩側(cè)各挖一槽，加入抗某類免疫淀峰后，于孔的兩側(cè)各挖一槽，加入抗某類免疫球蛋白血清或另一型抗輕鏈血清，溫育擴散

19、后，球蛋白血清或另一型抗輕鏈血清，溫育擴散后，根據(jù)沉淀弧形成的情況，進行分析鑒定。根據(jù)沉淀弧形成的情況，進行分析鑒定。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社免疫選擇電泳圖譜示意圖免疫選擇電泳圖譜示意圖 瓊脂中含抗瓊脂中含抗及抗及抗抗血清，示例孔中為血清標本，抗血清，示例孔中為血清標本，槽中為抗槽中為抗IgA重鏈抗血清重鏈抗血清 A：正常人；：正常人；B：重鏈??；重鏈??；C：IgA骨髓瘤骨髓瘤人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社免疫固定電泳：免疫固定電泳： 免疫固定電泳是血清區(qū)帶電泳與免疫沉淀反免疫固定電泳是血清區(qū)帶電泳與免疫沉淀反應(yīng)相結(jié)合的定性實驗。應(yīng)相結(jié)合的定性實驗。 與免疫電泳比較免疫固定電泳具有更高的靈與

20、免疫電泳比較免疫固定電泳具有更高的靈敏性，敏性，M M蛋白在免疫固定電泳中顯示狹窄而界蛋白在免疫固定電泳中顯示狹窄而界限明確的區(qū)帶，而多克隆增殖或正常血清限明確的區(qū)帶，而多克隆增殖或正常血清 球蛋球蛋白區(qū)帶則比較彌散。白區(qū)帶則比較彌散。 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社IgG/型多發(fā)性骨髓瘤的免疫固定電泳圖譜型多發(fā)性骨髓瘤的免疫固定電泳圖譜人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社四、四、本周蛋白檢測本周蛋白檢測3.直接定量分析直接定量分析尿液透析濃縮尿液透析濃縮50倍后進行倍后進行2.免疫固定電泳免疫固定電泳1.本周蛋白定性檢查本周蛋白定性檢查(篩查篩查)溶解溶解(+)90 沉淀沉淀標本標本5060 人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社五、五、冷球蛋白檢測冷球蛋白檢測 冷球蛋白冷球蛋白是血清中的一種特殊蛋白質(zhì)，在是血清中的一種特殊蛋白質(zhì)，在44時自發(fā)沉淀時自發(fā)沉淀，加溫至，加溫至3737時又可溶解時又可溶解，故常，故常利用這種可逆性冷沉淀的特性對其進行測定。利用這種可逆性冷沉淀的特性對其進行測定。人民衛(wèi)生出版社人民衛(wèi)生出版社 取患者外周血，分離出血清置取患者外周血，分離出血清置44冰箱冰箱中，一中，一般在般在2424h h72h72h出現(xiàn)沉淀出現(xiàn)沉淀，若，若1 1周仍不出現(xiàn)沉淀者周仍不出現(xiàn)沉淀者方可判斷為陰性。方可判斷為陰性。 如形