同型半胱氨酸測定檢測操作程序

1、概述血清同型半胱氨酸（Hcy）是人體內(nèi)含硫氨基酸的一個重要的代謝中間產(chǎn)物，可能是動脈粥樣 硬化等心血管疾病發(fā)病的一個獨立危險因子。Hcy水平升高被認為是動脈粥樣硬化性疾病獨立的漸進性致病因素，血漿中同型半胱氨酸含量與遺傳因素、營養(yǎng)因素、雌激素水平、 年齡因素等有關(guān)，同型半胱氨酸又稱為高半胱氨酸，Hcy的正常參考值隨測定方法和種族人群的不同而有所不同，一般正?？崭寡獫{總Hcy水平為5-15pmol/L。研究表明：Hcy每升高5umol/L腦卒中風(fēng)險升高 59%缺血性心臟病風(fēng)險升高 32% Hcy每降低5umol/L腦卒中風(fēng)險 降低24%缺血性心臟病風(fēng)險降低16%.Hcy水平與心血管事件風(fēng)險呈正相

2、關(guān)。1目的 規(guī)范血清同型半胱氨酸檢測測試，確保檢測結(jié)果準確性和重復(fù)性。2檢測方法和原理 檢測方法：速率法 檢測原理：本產(chǎn)品基于一種新型酶法，樣本中的氧化型 Hcy被轉(zhuǎn)化為游離型 Hcy后，進行一系列循環(huán)反應(yīng)，這種基于共價底物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的酶循環(huán)反應(yīng)系統(tǒng)大大提高了檢測的靈敏度，主要是利用S-腺昔同型半胱氣酸（SAH）水解酶反應(yīng)原理，在該反應(yīng)中SAH被水解酶水解成腺昔和Hcy,腺昔立即水解成氨和次黃喋吟，氨在谷氨酸脫氫酶的作用下，NADH轉(zhuǎn)化為NAD, 樣本中Hcy濃度與NADH?；俾食烧?。3標(biāo)本米集與保護新鮮無溶血血清或 EDTA肝素抗凝血漿遵守以下推薦的血清標(biāo)本處理，運行和儲存步驟 用真空采樣

3、管采集血液標(biāo)本時須遵守常規(guī)注意事項 離心前使標(biāo)本完全自然形成凝塊 全程保證樣品管的密閉狀態(tài) 盡快分離血清，并及時測定如果標(biāo)本不能在 24小時內(nèi)檢測或運送標(biāo)本時，將標(biāo)本保存在4 c或更低溫度的環(huán)境中：冷藏標(biāo)本室溫放置 20分鐘后再測定；冷凍標(biāo)本室溫解溶后放置20分鐘后再測定不符合標(biāo)本處理溶血和乳糜血標(biāo)本在報告單的備注欄注明標(biāo)本量過少的標(biāo)本，嚴重溶血和乳糜血標(biāo)本與臨床溝通并將標(biāo)本退回，填寫不合格標(biāo)本拒接登記。4試劑和設(shè)備 試齊1J采用深圳奧薩制藥有限公司試劑 試劑組成試劑1 S-腺昔甲硫氨酸（SAM）0. 1 mM煙酸胺腺喋吟二核甘酸（NADH） 0. 3 mM 三（2-竣乙基）瞬氯化氫（TCEP

4、）0. 5 mMa 酮戊二酸（Oxoglutarate）5. 0 mMHcy甲基轉(zhuǎn)移酶（HMTase）KU/L試劑2 谷氨酸脫氫酶（GLDHKU/LS-腺昔同型半胱氨酸（SAH）水解酶（SAHase KU/L腺昔脫氨酶（ADAKU/L試劑準備；恢復(fù)室溫后使用試劑保存試劑28 避光保存，并于有效期為12 個月質(zhì)控品質(zhì)控品為與試劑配套的臨床化學(xué)質(zhì)控品警告和注意事項只可用于體外診斷；試劑中含有防腐劑和穩(wěn)定劑， 可能存在一定刺激作用和毒性， 請勿直接接觸皮膚和眼睛， 請勿吞服；試劑盒的測定結(jié)果僅作為臨床各種疾病的輔助診斷依據(jù)儀器便攜式同型半胱氨酸監(jiān)測儀5 操作程序檢測過程流程簽收樣品-離心-上機檢測-

5、審核報告-簽發(fā)報告-標(biāo)本保存樣本簽收嚴格按標(biāo)本接收程序簽收標(biāo)本標(biāo)本處理以 3000r/min ，離心610min ，分離血清上機測定，若標(biāo)本不能及時檢測，將分離血清冷藏于 28的冰箱內(nèi)標(biāo)本檢測從冰箱中取出試劑 1 (R1) 和試劑 2 (R2), 使試劑恢復(fù)至室溫；按照便攜式同型半胱氨酸檢測儀操作方法，插卡，輸入樣本信息，確認；按照儀器提示，精密量取8 u 1 樣本加入試劑 1 的比色管中；啟動反應(yīng)，等到儀器發(fā)出提示音后，按照儀器操作步驟，精密量取40 u 1 試劑 2 加入比色管中；儀器啟動檢測；自動檢測完成后，讀取檢測結(jié)果或打印報告檢驗后標(biāo)本保存保存在標(biāo)本冰箱內(nèi)，保存期為 7d6 校準程序

6、校準品的準備和儲存直接使用，28 保存。校準條件在室內(nèi)質(zhì)控失控， 或更換儀器主要配件， 或進行大保養(yǎng)后均需校準。 無特殊情況校準周期為21d校準程序本儀器校準由廠家工程師負責(zé)校準。7 質(zhì)量控制程序控制品的準備和儲存試劑28 避光保存控制品水平和分析批長度每 24h 至少進行 1 批。質(zhì)控操作程序參見生化組的質(zhì)量控制操作程序。8性能參數(shù)準確性 線性偏差不超過± 10%精密度CVW 10線性范圍348umol/L9生物參考區(qū)間 015umol/L 10異常結(jié)果的處理 結(jié)果與診斷不符或兩次結(jié)果差異較大時，應(yīng)及時與臨床溝通。 11臨床意義10%勺冠心病患者與同型半胱氨酸升高有關(guān)，輕、中度同型

7、半胱氨酸水平升高可使心血管疾 病死亡危險性增加 4-6倍，血漿總Hcy水平每升高5 mol/L則冠心病危險性男性增加 60% 女性增加80%相對危險性男性為，女性為，相當(dāng)于總膽固醇每升高20mg/dL的危險性，因此成為冠心病的一個獨立危險因素。血漿同型半胱氨酸水平與冠狀動脈病變血管的支數(shù)有一定關(guān)系，有人研究結(jié)果表明，單支、雙支、多支血管病變的患者血漿 Hcy水平呈逐級上升趨勢。并且與血管病變的嚴重程度有關(guān)，研究表明，冠狀動脈狹窄99%勺患者血漿Hcy水平明顯高于狹窄75%勺患者。血漿同型半胱氨酸水平還與冠心病患者的遠期預(yù)后、生存率、病死率有關(guān)。12干擾因素抗壞血酸三0.5g/L對實驗結(jié)果無影響

8、。膽紅素三855科mol/L對實驗結(jié)果無影響。血紅蛋白三5.0g/L對實驗結(jié)果無影響。乳糜三%寸實驗結(jié)果無影響。13安全防護措施血液標(biāo)本運輸必須保證運輸過程的生物安全，防止溢出。血液標(biāo)本溢出后，應(yīng)立即對污染環(huán)境和設(shè)備進行消毒處理；對標(biāo)明有污染性疾病的血液標(biāo)本應(yīng)特別的防護，以不污染環(huán)境和保證工作安全為前提； 在進行血液分析的一切操作過程中應(yīng)按照檢驗科生物安全管理程序進行； 與血液標(biāo)本接觸的一切器皿。儀器組裝/拆卸組合零件都應(yīng)視為污染源，因此操作人員不小心接觸到了這種污染源時，應(yīng)立即用清水清洗被污染區(qū)域并進行消毒；如果操作人員皮膚或衣服上污染（沾到）了血液或廢液應(yīng)立即沖洗并進行消毒處理。如果眼睛被濺入了血液或廢液應(yīng)立即用大量清水沖洗并進行必要的醫(yī)療措施。血液標(biāo)本離心的過程中所有標(biāo)本都應(yīng)該加蓋，離心后，開啟試管時應(yīng)注意防止氣溶（霧）膠污染環(huán)境；所有檢測過的血液標(biāo)本及有關(guān)廢物，都會給您帶來潛在的危險及生物污染。所有廢棄樣本及廢物的處理方法同血液標(biāo)本的處理