現代五分類血細胞分析儀的原理和使用（課堂PPT）

1、現代五分類血液分析儀現代五分類血液分析儀原理及使用原理及使用1 血液分析儀血液分析儀, ,臨床血液一般檢查最常用儀器。臨床血液一般檢查最常用儀器。5050年代，美國庫爾特（年代，美國庫爾特（W.H.CoulterW.H.Coulter）發(fā)明）發(fā)明電子血細胞計數儀并申請專利。電子血細胞計數儀并申請專利。 1982 1982 年，年，Technicon Technicon 公司生產了公司生產了 H6000 H6000 型血液細胞，分析儀器，應該是首款具有型血液細胞，分析儀器，應該是首款具有白細胞白細胞五分類能力的儀器五分類能力的儀器。同時代日本日。同時代日本日立公司推出圖像分析法的白細胞分析儀立公

2、司推出圖像分析法的白細胞分析儀HITACHI 8200 HITACHI 8200 型，僅僅是用于完成白細胞型，僅僅是用于完成白細胞血片分類的儀器，沒有其他血細胞計數分血片分類的儀器，沒有其他血細胞計數分析能力。析能力。血液分析儀優(yōu)勢血液分析儀優(yōu)勢檢測項目多檢測項目多 速度快速度快 精度高精度高 易操作易操作2 血液細胞分析儀是醫(yī)院檢驗科、化驗室的常規(guī)設備之一，也是發(fā)展最快、應用最普及的檢驗儀器，當前血液細胞分析儀分為三分群和五分類兩種。國際市場上五分類血液細胞分析儀已經成為發(fā)達國家醫(yī)院血液臨床檢驗的主流產品，但由于五分類血液細胞分析儀需集光學、電子、氣路、液路、計算機等技術于一體，技術含量非常

3、高，縱觀全球，也僅有美國、法國、日本等國家的 6 個廠家能夠生產真正意義上的五分類血液細胞分析儀。 2006年 4 月深圳邁瑞 BC-5500推出之前，由于國內沒有掌握該類產品生產制造的核心技術，因而在中國市場銷售的該類產品由國外品牌所壟斷，價格都比較昂貴，導致該類產品不能在中國醫(yī)院臨床檢驗中大范圍推廣應用，BC-5500 的推出推動了五分類血液細胞分析儀在國內的臨床應用，提高整個國內血液細胞檢測的臨床應用水平。3一、常見血細胞分析儀品牌 1、庫爾特 2、希思美康 3、邁瑞 4、雅培 5、光電 6、拜耳 7、4二、五分類血細胞分析儀的檢測原理（一）、儀器基本結構（一）、儀器基本結構1 1、機械

4、系統、機械系統 2 2、電學系統、電學系統 3 3、光學系統、光學系統 5（二）、分類計數的基本原理 1、電阻抗的利用 2、激光技術、射頻技術、組織化學技術的應用6 血細胞五分類技術是一種綜合應 用光學、機械學、流體力學、電子計算機、細胞生物 學、免疫學等學科技術，讓被測溶液流經測量區(qū)域 并逐一檢測其中每一個細胞的物理和化學特性從而對 高速流動的細胞或亞細胞進行快速定量測定和分析的 方法。它一秒鐘能分析幾千個細胞，并同時測定細胞 的多個參數。阻抗法也在五分類血細胞儀中被采用，即所謂的鞘流阻抗法。71、電阻抗原理，又稱庫爾特原理、電阻抗原理，又稱庫爾特原理 孔電流 真空 內電極 外電極 - +

5、血細胞 懸液 標本杯8鞘流技術聯合電阻抗的應用92、激光技術、射頻技術、組織化學技術的應用五分類儀器與三分類儀器的主要區(qū)別在五分類儀器與三分類儀器的主要區(qū)別在于：白細胞不再粗略地以大小來進行分群，于：白細胞不再粗略地以大小來進行分群，而是采用激光技術、組織化學技術、射頻技而是采用激光技術、組織化學技術、射頻技術等等來對白細胞進行分類。根據儀器廠家術等等來對白細胞進行分類。根據儀器廠家的不同，不同品牌的儀器采用了不同的分類的不同，不同品牌的儀器采用了不同的分類計數。計數。10 在激光技術中目前有半導體激光和氣體激光。半導體激光功率弱,但作為細胞分類自己足夠;氣體激光功率強。二者比較半導體激光具有

6、壽命長(710年)體積小,啟動快,耗電小,對穩(wěn)壓要求低,更為經濟適用等特點。11 （1 1） 電阻抗、高頻電導及激光散射聯電阻抗、高頻電導及激光散射聯合檢測法合檢測法 即庫爾特公司的即庫爾特公司的VCS技術。技術。 V:代表體積容量。電阻法微孔技術應用于計數血細胞和測代表體積容量。電阻法微孔技術應用于計數血細胞和測定其體積的大小。定其體積的大小。 C:代表傳導性即電導代表傳導性即電導(conductivity),指一束電磁波或稱射指一束電磁波或稱射頻頻,穿透細胞的傳導性穿透細胞的傳導性,它取決于細胞的大小和內部結構它取決于細胞的大小和內部結構;經經校正后的傳導性叫校正后的傳導性叫opacity

7、即即“不透明性不透明性”,這時不再反映這時不再反映細胞大小細胞大小,而是反映細胞內部的結構而是反映細胞內部的結構,像核的大小像核的大小,核漿比例核漿比例和密度等。和密度等。 S:代表散射代表散射(scatter),指在不同角度測得的散射光強度。指在不同角度測得的散射光強度。由于各類細胞的表面結構不同和顆粒大小不同而對光的散由于各類細胞的表面結構不同和顆粒大小不同而對光的散射各異射各異,進而區(qū)分各類細胞。進而區(qū)分各類細胞。12容 量 、 電 導 、 光 散 射容 量 、 電 導 、 光 散 射 （ v o l u m e ，conductivity， scatter, VCS）法法原理原理細胞體

8、積技術細胞體積技術（測量（測量細胞大?。┘毎笮。╇妼约夹g電導性技術（測量細（測量細胞內部結構）胞內部結構）光散射技術光散射技術（測量細（測量細胞形態(tài)、細胞核和細胞胞形態(tài)、細胞核和細胞顆粒）。顆粒）。13 體積 電導 光散射14VCSVCS可顯示可顯示3 3種細胞散點圖種細胞散點圖DF1DF1（體積值和散射光值）（體積值和散射光值）DF2DF2（體積值和電導值）（體積值和電導值）DF3DF3（體積值和電導值）（體積值和電導值）15 儀器在單一通道上同時用這三種方法對同儀器在單一通道上同時用這三種方法對同一白細胞進行測量一白細胞進行測量,避免了有些血液分析儀避免了有些血液分析儀要設計好幾個通道

9、或加染色試劑的麻煩。要設計好幾個通道或加染色試劑的麻煩。 采用采用VCS技術的儀器主要是技術的儀器主要是Coulter公司的公司的STKS型、型、MAXM型以及型以及Gen.s型五分類血型五分類血液分析儀。液分析儀。MAXM型和型和Gen.s型可計數網織型可計數網織紅細胞紅細胞,Gen.s型可選配自動制血片機。以型可選配自動制血片機。以上幾種型號還可直接計數上幾種型號還可直接計數CD4和和CD8淋巴淋巴細胞細胞,并算出其比率。并算出其比率。16（2）光散射和細胞化學染色聯合應用 Bayer公司的的DVIA120型和2120型血細胞分析儀、Sysmex公司的SF-3000型、邁瑞的BC-5500

10、血細胞分析儀均采用了該原理進行工作。 利用激光散射和過氧化物酶染色技術進行細胞分類。利用光散射的原理計數血細胞,因細胞表面結構不同,在不同角度上散射光有差別,有助于對白細胞的區(qū)分。17 白細胞化學染色 在稀釋液中加入過氧化酶(MPO)的底物及顯色劑,根據白細胞對MPO的反應分類。中性細胞MPO為強陽性,嗜酸性細胞陽性更強,單核細胞為弱陽性,淋巴細胞陰性,嗜堿性細胞亦為陰性,故綜合光散射和細胞化學染色的特點, 可得到二維或三維圖像-不同顏色的散點圖。由于嗜堿性細胞不含此酶,不能被檢測,因此一些儀器專門設置了嗜堿性細胞檢測系統,它的測量通道采用時間差的方法,與RBC、PLT的測量系統共用一個通道。

11、18（3）電阻抗和射頻電導聯合檢測法 這種方法是分別采用四個檢測系統來檢測不同類型的細胞 淋巴細胞、單核細胞和中性粒細胞檢測系統:在細胞懸浮液中加入溶血劑使紅細胞溶解,而使白細胞保持完整細胞漿及核形態(tài)近似于生理狀態(tài),當這些細胞通過檢測系統時,對白細胞進行電阻抗法(測量細胞體積)和射頻電導法(檢測細胞核和顆粒密度)的聯合檢測,結果將細胞分成淋巴細胞、單核細和中性粒細胞三個群體。19 嗜酸性細胞和嗜堿性細胞兩種檢測系統:在細胞懸浮液中加入特殊的溶血劑,除嗜酸性細胞和嗜堿性細胞外,其他細胞均被溶解或萎縮再對保持完整的嗜酸性細胞或嗜堿性細胞進行計數。 幼稚細胞檢測系統:在細胞懸浮液中加入硫化氨基酸,由

12、于占位不同,結合在幼稚細胞的氨基酸比成熟細胞多,且對溶血劑有抵抗作用,當加入溶血劑時,成熟細胞被溶解,只保留著可能存在的幼稚細胞用來計數。Sysmex公司的SE-9000血細胞分析儀就是采用這種方法進行五分類的。20電阻抗與射頻法能透入細胞內，測量核的電阻抗與射頻法能透入細胞內，測量核的大小及顆粒的多少。大小及顆粒的多少。RF:RF:射頻電流射頻電流 細胞內部結構信息細胞內部結構信息DC:DC:直流電直流電 細胞大小的信息細胞大小的信息 21（4） 多角度激光偏振光散射檢測法 儀器使用鞘流液將標本血稀釋,稀釋后白細胞的內部結構近似于自然狀態(tài),只有嗜堿性細胞由于其吸濕的特性而使細胞結構有輕微改變

13、。紅細胞內的血紅蛋白在高滲透壓的作用下,從細胞中分離出來。而鞘流的水分則進入紅細胞內,使細胞膜結構仍然完整,它與鞘流的折光系數相同,不影響白細胞的檢測。儀器同時從四個角度來檢測通過激光束的細胞所產生的散射光,因為細胞大小、折射指數、核形、核漿比率以及顆粒性質等,均可影響在不同角度測得的散射光量。220 0：前角光散射：前角光散射（1 13 3），可粗略測），可粗略測定細胞大小。定細胞大小。 1010：狹角光散射：狹角光散射（7 71111），可測），可測定細胞內部結構相對特征。定細胞內部結構相對特征。 9090：垂直光散射：垂直光散射（7070110110），測），測定細胞核分葉情況。定細胞核

14、分葉情況。 9090：消偏振光散射：消偏振光散射（7070110110），），區(qū)分嗜酸性粒細胞與其他細胞。區(qū)分嗜酸性粒細胞與其他細胞。 2324 值得一提的是市面上偶見假五分類血球儀。假五分類血球儀則不用上述原理分析血細胞成分,更多的使用電腦軟件的分析而得出五分類結果。分辨是否真五分類技術的血球儀，如果是試劑法,試劑不應該少于四種,如果是激光法,試劑不少于三種。25三、五分類血細胞分析儀的使用 1、自動進樣 2、手工進樣 3、末梢血、靜脈血的可選性 4、結果的判斷 5、質量控制 6、儀器的校準 準品的來源、什么情況下需要校準？如何校準？ 7、儀器的維護26標本的重要性 1、高檔的儀器并不意味著

15、結果一定可靠。 2、標本的采集直接關系到結果的準確性。 壓脈帶的使用時間、抗凝劑的影響、真空管的使用、血量的控制、標本放置的溫度和時間、標本的混勻等等。27檢驗報告的審核 1、當日質控是否在控。 2、比較報告各參數之間是否有矛盾。 3、注意觀察多個測定標本相關參數是否有一致的系統誤差。 4、報告與臨床是否符合，不符合時可能存在的原因。如PLT過低、過高。 5、什么樣的結果必須手工復查？如何復查？復查完畢后的報告簽發(fā)模式。 6、直方圖、散點圖的利用。28血細胞自動分析異常結果人工顯微鏡復檢 1、鏡檢復核的現狀、鏡檢復核的現狀 血細胞分析儀仍只能作為CBC 分析的一種過篩手段 ，當遇到可疑情況 ，

16、尤其是在病理條件下 ，其測定結果并不可靠 ，需要人工以顯微鏡復查 ，這已是不爭的事實 。但是 ，國內目前各醫(yī)院檢驗科對CBC異常結果基不或很少進行人工顯微鏡復查 ，這種現象在經濟發(fā)達的沿海地區(qū)更是普遍 。有資料顯示 ，國內各醫(yī)院 CBC實際鏡檢率在0% 15% ，大部分醫(yī)院鏡檢率 5%或者不鏡檢 。這種現象引發(fā)了不少的醫(yī)療投訴 、糾紛或事故 。分析這類題出現的原因可能有 : (1)認識不夠 ，認為血細胞分析儀尤其是五分群的血細胞分析儀的檢測結果可靠 ，不需要復查 ； ( 2)工作量大 ； ( 3 )怕麻煩 ，圖省事 ； ( 4 )目前沒有一個可參照的執(zhí)行標準 ，即對CBC結果的人工復查的標準

17、、內容 、方法及程序尚無明確的規(guī)定 。29需要鏡檢的標準 目前即使是最先進的血細胞分析儀也不能完全取代人工鏡下白細胞分類。因此，各實驗室應根據所使用的儀器型號、性能和實驗室條件，制定出手工復檢方案，建立涂片復檢制度。只有在WBC、Hb、Plt均在正常范圍內，細胞散點圖和直方圖均正常，儀器無報警顯示情況下，儀器分類結果才可作為篩選數據報告。 通過鏡檢達到的目的 通過顯微鏡檢查，核實儀器出現的各類報警是否真實存在，有無原始及幼稚細胞，有無血細胞形態(tài)異常，有無小紅細胞、紅細胞碎片、微小血凝塊、巨大血小板、血小板聚集等，并估計白細胞、血小板數量，必要時對結果進行校正后才能發(fā)出報告（如有核紅細胞存在時對

18、白細胞計數進行校正）。 30血細胞自動分析與臨床的緊密結合 CBC檢測結果最終是用于臨床患者的診斷 、治療 、預后監(jiān)測或用于受檢者的健康狀況的評估 。因此 ，當遇檢測結果異常時 ，一方面可咨詢受檢者當事人 /親屬或通過實驗室信息系統 (L IS)查受檢者檢測記錄外 ；另一方面與臨床聯系非常重要 ，因為臨床醫(yī)生更加了解受檢者 /患者的病情與實際情況 ，通過與臨床的聯系 ，可了解并證實異常 CBC結果與患者病情的符合程度或因其他原因如輸液或患者標本張冠李戴引起的CBC結果異常 ?？傊?，與臨床聯系可起到事半功倍的效果 。 311 1、血細胞直方圖、血細胞直方圖 橫坐標為血細胞體積大小橫坐標為血細胞

19、體積大小 縱坐標為不同體積細胞的相對頻率?？v坐標為不同體積細胞的相對頻率。32結果的判斷33白細胞直方圖白細胞直方圖 %35 90 160 300 400 450(fl)34紅細胞直方圖紅細胞直方圖 100 200 300 400 (fl)%35血小板直方圖血小板直方圖直方圖在228fl（不同儀器不一）。 10 20 30(fl)10 20 30(fl)%36散點圖371 1、白細胞直方圖、白細胞直方圖正常白細胞直方圖正常白細胞直方圖異常白細胞直方圖異常白細胞直方圖382 2、紅細胞直方圖、紅細胞直方圖（1 1）正常紅細胞分布：）正常紅細胞分布：5050200fl 200fl （2 2）異常紅

20、細胞直方圖）異常紅細胞直方圖393 3、血小板直方圖、血小板直方圖正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布：正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布：2 230fl30fl分布，主要在分布，主要在2 215fl15fl。 異常血小板直方圖40血液分析儀血液分析儀江蘇大學基礎醫(yī)學與醫(yī)學技術學院江蘇大學基礎醫(yī)學與醫(yī)學技術學院朱偉朱偉41 血細胞分析儀血細胞分析儀教學要求教學要求 掌握血細胞分析儀的概念、庫爾特原理、掌握血細胞分析儀的概念、庫爾特原理、儀器的基本結構。儀器的基本結構。 熟悉聯合檢測型血細胞分析儀器的檢測原熟悉聯合檢測型血細胞分析儀器的檢測原理，網織紅細胞檢測原理，血紅蛋白檢測理，網織紅細胞檢測原理，血紅蛋白

21、檢測原理、儀器性能評價和維護。原理、儀器性能評價和維護。 了解血細胞分析儀的分類、性能指標、常了解血細胞分析儀的分類、性能指標、常見故障和排除及進展。見故障和排除及進展。42一、血細胞分析儀概述一、血細胞分析儀概述血細胞分析儀血細胞分析儀(Blood cell analyzer,BCA)是是指對一定體積全血內血細胞異質性進行自動分析指對一定體積全血內血細胞異質性進行自動分析的臨床檢驗常規(guī)儀器。又稱血細胞自動計數儀的臨床檢驗常規(guī)儀器。又稱血細胞自動計數儀(ABCC)、血液學自動分析儀、血液學自動分析儀(AHA)。ABCC代表代表早期的低檔次早期的低檔次BCA，AHA外延過大。外延過大。43發(fā)發(fā)

22、展展 史史 手工計數手工計數儀器簡單計數儀器簡單計數兩分群兩分群三分群三分群五分群五分群五分群網織紅五分群網織紅44 20世紀世紀40年代末，年代末， 電阻抗法微粒子計數專利電阻抗法微粒子計數專利 50年代，年代， Coulter Model A型用于臨床型用于臨床 60年代，年代， 測定參數達測定參數達7項項 70年代，年代， 全血細胞計數（全血細胞計數（CBC） 80年代，年代， 雙通道、白細胞雙通道、白細胞23分群、五分群分群、五分群 90年代以來，多功能、多參數、流水線年代以來，多功能、多參數、流水線45血細胞計數儀（Blood cell counter)lCoulter princi

23、ple ：微小粒子通過特殊的小孔時可產生電阻變化，并根據這種電阻變化特點將其應用于微小粒子的粒度測量和計數上。l1953 年獲得美國發(fā)明專利 Wallance H. Coulter 昨天昨天46血細胞計數儀血細胞計數儀 1958年，庫爾特電子（Coulter Electronics ）公司成立 電阻式血細胞計數原理。 單參數測定儀器，只能對血液中的紅細胞和白細胞進行計數，并且需人工切換。 昨天昨天47日本東亞公司（SYSMEX）CC-1001日本TOY公司1962 年生產的CC-1001 型血球計數儀昨天昨天48血紅蛋白檢測功能的增加具有單獨的血紅蛋白比色計，將加入專用的溶血劑后的樣本進行白細

24、胞計數后再將其倒入血紅蛋白比色計， 即可得到比色法測定的血紅蛋白結果。當時國內使用最多的血細胞計數儀是Coulter ZF 型和血紅蛋白計。此時就能檢測MCV、HCT、MCH、MCHC。昨天昨天49 1975 年日本東亞公司（TOA， Sysmex 的前身） 推出了包含以上7 個參數的全自動血細胞計數儀器CC710 和CC 720 型。 昨天昨天50血小板自動計數儀器使用特殊離心速度將紅細胞和白細胞進行沉淀，使上層血漿中盡量保存最為豐富的血小板，然后應用這種PRP 血漿進行血小板計數。如Sysmex PA-701 型和CONTRAVE 1000 型，此類儀器多配有專用PRP 離心機。右圖為TO

25、A PLT-100 型血小板計數儀和離心機。昨天昨天51血細胞計數儀血小板計數功能的增加血細胞分析儀將血小板計數這一重要功能合并到全血細胞計數（CBC） 范圍內。將血小板按體積大小劃分到64 個通道，分別累加體積大小不同的血小板數量。除了給出血小板數量外，還提供了兩個新的參數，平均血小板體積(MPV) 和血小板體積分布寬度（PDW）。昨天昨天Sysmex CC-800 52白細胞分類功能的增加 二分類 1970 年起Coulter 公司首先推出了兩分類的S-PLUS 系列儀器。1980年又推出了T系列，都是可進行白細胞兩分類的儀器。 Sysmex F800 和F820 型也是根據白細胞體積分布

26、直方圖進行粗略兩分群的儀器。昨天昨天Sysmex F82053三分群時代 經過特殊溶血劑處理的白細胞，在白細胞分布直方圖上出現兩個明顯的細胞分布峰。 體積較小的一群細胞稱為淋巴細胞群（LYM）。 右側體積較大的稱為粒細胞群（GRAN）。 位于兩者之間的稱為中間細胞群（MID）， 中間細胞群一般指含有嗜酸粒細胞，嗜堿粒細胞和單核細胞的細胞群。今天今天54五分類血液分析儀 BECKMEN COULTE：VCS ABBOTT：MAPSS(多角度偏振光散射多角度偏振光散射) ADVIA：POX SYSMEX：核酸熒光染色：核酸熒光染色今天今天55 血液細胞分析儀是醫(yī)院檢驗科、化驗室的常規(guī)設備之一，也是

27、發(fā)展最快、應用最普及的檢驗儀器，當前血液細胞分析儀分為三分群和五分類兩種。國際市場上五分類血液細胞分析儀已經成為發(fā)達國家醫(yī)院血液臨床檢驗的主流產品，但由于五分類血液細胞分析儀需集光學、電子、氣路、液路、計算機等技術于一體，技術含量非常高，縱觀全球，也僅有美國、法國、日本等國家的 6 個廠家能夠生產真正意義上的五分類血液細胞分析儀。2006年 4 月深圳邁瑞 BC-5500推出之前，由于國內沒有掌握該類產品生產制造的核心技術，因而在中國市場銷售的該類產品由國外品牌所壟斷，價格都比較昂貴，導致該類產品不能在中國醫(yī)院臨床檢驗中大范圍推廣應用，BC-5500 的推出推動了五分類血液細胞分析儀在國內的臨

28、床應用，提高整個國內血液細胞檢測的臨床應用水平。56一、常見血細胞分析儀品牌 1、庫爾特 2、希思美康 3、邁瑞 4、雅培 5、光電 6、拜耳 7、57庫爾特COULTER GEN.S System58庫爾特5-diff 系統59COULTER HmX血液分析儀60SYSMEX XE-5000型五分類血細胞分析儀61XT-1800i五分類血液細胞分析儀62ABBOTT CELL-DYN3200五分類血液分析63光電8222k血細胞分析儀64DIANA-5儀器65BC-5500五分類血液細胞分析儀66二、儀器分型檢測原理二、儀器分型檢測原理（一）血細胞分析儀分型（一）血細胞分析儀分型 按自動化程

29、度按自動化程度 按檢測原理按檢測原理 按對白細胞的分類水平按對白細胞的分類水平嗜酸性細胞嗜酸性細胞淋巴細胞淋巴細胞單核細胞單核細胞中性粒細胞中性粒細胞血小板血小板嗜堿性細胞嗜堿性細胞67 請記住哦請記住哦！電電 阻阻 抗抗 法法 血血 細細 胞胞 檢檢 測測 原原 理理二、儀器分型檢測原理二、儀器分型檢測原理68聯合檢測型原理聯合檢測型原理 主要體現在白細胞分類，實質是選用較特異的方法將血中主要體現在白細胞分類，實質是選用較特異的方法將血中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細胞檢出，發(fā)現異常細胞。含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細胞檢出，發(fā)現異常細胞。共共有特點是有特點是：均使用了鞘流技術。：均使用了鞘流技術。

30、 前前 鞘鞘 流流后后 鞘鞘 流流檢檢 測測 窗窗69容量、電導、光散射檢測技術容量、電導、光散射檢測技術光散射光散射電導性電導性電阻抗電阻抗每個細胞接受三維分析每個細胞接受三維分析定義到三維散點圖的相應位置定義到三維散點圖的相應位置 電導性電導性(conductivity，C) 高頻電磁探針，測量細胞內部結構，細胞內核漿比例。高頻電磁探針，測量細胞內部結構，細胞內核漿比例。體積體積(volume，V) 電阻抗原理測定細胞體積和數量。電阻抗原理測定細胞體積和數量。光散射光散射(scatter，S)細細 胞內粗顆粒的光散射強胞內粗顆粒的光散射強 度要比細顆粒更強。度要比細顆粒更強。70光散射與細

31、胞化學聯合檢測技術光散射與細胞化學聯合檢測技術 這類儀器是應用激光散射與細胞化學染色技術對這類儀器是應用激光散射與細胞化學染色技術對白細胞進行分類計數。白細胞進行分類計數。 返回本節(jié)目錄71白細胞分類散射圖白細胞分類散射圖 聯合使用多項技術聯合使用多項技術(流式、激光、射頻、電導、電阻抗、流式、激光、射頻、電導、電阻抗、細胞化學染色細胞化學染色)同時分析一個細胞，綜合分析實驗數據，從而同時分析一個細胞，綜合分析實驗數據，從而得出較為準確的白細胞得出較為準確的白細胞“五分群五分群”結果。結果。 返回本節(jié)目錄72網織紅細胞檢測原理網織紅細胞檢測原理 網織紅細胞中嗜堿性物質網織紅細胞中嗜堿性物質RN

32、A，在活體狀態(tài)下與，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結合特殊的熒光染料結合 熒光強度與熒光強度與RNA含量成正比含量成正比 用流式細胞術檢測用流式細胞術檢測 網織紅細胞大小和網織紅細胞大小和 RNA含量及血紅蛋含量及血紅蛋 白的含量白的含量二、儀器分型檢測原理二、儀器分型檢測原理73（五）血紅蛋白測定原理（五）血紅蛋白測定原理 除干式、無創(chuàng)型外，各型除干式、無創(chuàng)型外，各型BCA對血紅蛋白測對血紅蛋白測定都采用光電比色原理。定都采用光電比色原理。 血細胞懸液中加入溶血劑后，紅細胞溶解釋放出血細胞懸液中加入溶血劑后，紅細胞溶解釋放出血紅蛋白，后者與溶血劑中有關成分結合形成血血紅蛋白，后者與溶血劑中有關

33、成分結合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統。紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統。 特定波長特定波長(530550nm)下進行光電比色。下進行光電比色。二、儀器分型檢測原理基本結構二、儀器分型檢測原理基本結構74溶血素的作用原理 細胞膜表面脂質成分的差異 紅細胞膜表面含有較多的脂質 磷脂 膽固醇 成熟白細胞膜磷脂類成分相對較少 幼稚粒細胞膜磷脂類成分更少 溶血素的主要成分 表面活性劑 主要攻擊細胞膜的磷脂類成分75儀器基本結構儀器基本結構 機械系統機械系統 電學系統電學系統 血細胞檢測系統血細胞檢測系統 血紅蛋白測定系統血紅蛋白測定系統 計算機計算機 鍵盤控制系統鍵盤控制系統76三、儀器的

34、性能指標、評價與調校三、儀器的性能指標、評價與調校（一）血細胞分析儀的性能指標（一）血細胞分析儀的性能指標 1.測試參數測試參數 2.細胞形態(tài)學分析細胞形態(tài)學分析 3.測試速度測試速度 4.樣本量樣本量 5.精密度與示值范圍精密度與示值范圍 6.打印打印 77血細胞分析儀的評價血細胞分析儀的評價 ICSH公布了電子血細胞分析儀的公布了電子血細胞分析儀的評價方案：在細胞計數、血紅蛋白測評價方案：在細胞計數、血紅蛋白測定方面，要評價儀器測試樣本的總變定方面，要評價儀器測試樣本的總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準確性等和準確性等三、儀器的性能指標、評價與調校三、

35、儀器的性能指標、評價與調校78四、儀器的維護與常見故障四、儀器的維護與常見故障 （一）儀器的維護（一）儀器的維護 1.安裝：安裝： 潔凈的環(huán)境、穩(wěn)定的電源、潔凈的環(huán)境、穩(wěn)定的電源、可靠的接地、適宜的溫度和濕度是保證可靠的接地、適宜的溫度和濕度是保證BCA正常工作的前提。正常工作的前提。79 2.維護：良好的工作環(huán)境是儀器正常維護：良好的工作環(huán)境是儀器正常工作的前提，精心細致的維護是儀器處工作的前提，精心細致的維護是儀器處于良好工作狀態(tài)的保證。做好儀器的維于良好工作狀態(tài)的保證。做好儀器的維護保養(yǎng)，有助于提高儀器測量的準確性，護保養(yǎng)，有助于提高儀器測量的準確性，減少故障的發(fā)生，延長儀器的使用壽命。

36、減少故障的發(fā)生，延長儀器的使用壽命。四、儀器的維護與常見故障四、儀器的維護與常見故障80檢測器的維護檢測器的維護 采血順利采血順利防止纖維絲堵孔防止纖維絲堵孔關機前對檢測器的微孔進行清理沖洗關機前對檢測器的微孔進行清理沖洗計數期間，及時按計數期間，及時按 “反沖反沖”鍵，沖掉沉積鍵，沖掉沉積變性的蛋白質變性的蛋白質定期卸下檢測器，用定期卸下檢測器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗次氯酸鈉浸泡清洗儀器的維護與常見故障儀器的維護與常見故障81三、五分類血細胞分析儀的使用 1、自動進樣 2、手工進樣 3、末梢血、靜脈血的可選性 4、結果的判斷 5、質量控制 6、儀器的校準 準品的來源、什么情況下需要校準？如何

37、校準？ 7、儀器的維護82標本的重要性 1、高檔的儀器并不意味著結果一定可靠。 2、標本的采集直接關系到結果的準確性。 壓脈帶的使用時間、抗凝劑的影響、真空管的使用、血量的控制、標本放置的溫度和時間、標本的混勻等等。83檢驗報告的審核 1、當日質控是否在控。 2、比較報告各參數之間是否有矛盾。 3、注意觀察多個測定標本相關參數是否有一致的系統誤差。 4、報告與臨床是否符合，不符合時可能存在的原因。如PLT過低、過高。 5、什么樣的結果必須手工復查？如何復查？復查完畢后的報告簽發(fā)模式。 6、直方圖、散點圖的利用。84血細胞自動分析異常結果人工顯微鏡復檢1、鏡檢復核的現狀、鏡檢復核的現狀血細胞分析儀仍只能作為CBC 分析的一種過篩手段 ，當遇到可疑情況 ，尤其是在病理條件下 ，其測定結果并不可靠 ，需要人工以顯微鏡復查 ，這已是不爭的事實 。但是 ，國內目前各醫(yī)院檢驗科對CBC異常結果基不或很少進行人工顯微鏡復查 ，這種現象在經濟發(fā)達的沿海地區(qū)更是普遍 。有資料顯示 ，國內各醫(yī)院CBC實際鏡檢率在