血涂片評價和分類計數(shù)的質量控制流程

1、精選文檔血涂片評價和分類計數(shù)的質量控制流程 血涂片評價血涂片的顯微鏡檢查是血液細胞學檢查的基本方法，臨床上應用極為廣泛，制備薄適宜，分布均勻，染色良好的血涂片是血液學檢查的重要基本技術之一。一、 血涂片制作取末梢血1滴，置載玻片一端，取另一邊緣光滑的推片，放在血滴前面慢慢后移，接觸血滴后稍停。血液即沿推片散開，將推片與載片保持30 45°角，向前平穩(wěn)均勻推動推片，載片上便留下一層薄血膜。血涂片制成后，立即在空氣中揮動，使其迅速干燥，以免血細胞變形。血膜干燥后，用鉛筆在血膜的一側寫上病人姓名或編號。一張良好的血片，厚薄要適宜，頭體尾要明顯，細胞分布要均勻，膜的邊緣要

2、整齊，并留有一定的空隙。涂片時血滴愈大，角度愈大，推片速度愈快則血膜愈厚，反之血膜愈薄。太薄的血膜片50%的白細胞集中于邊緣或尾部，血涂片過厚，細胞重疊縮小均不利于白細胞分類計數(shù)。如果血膜分布不勻，主要是推片不整齊，用力不均勻，載片不清潔所致。 二、血涂片的質量控制 1、血膜片的質量要求是厚薄均勻適度，低倍鏡下觀察全片，細胞不重疊，頭尾及兩側有一定的空隙，血膜頭部有明確的病人標志。 2、一些體積較大的特殊細胞常在血膜的尾部出現(xiàn)，因此蠟筆劃線時應注意保存血膜尾部細胞，血膜必須充分干燥，否則在染色過程中容易脫落。 3、配制染料須用優(yōu)質甲醇，稀釋染液用緩沖液，

3、因為緩沖液的pH 對細胞染色的影響很重要。在偏酸性環(huán)境中正電荷增多，在偏堿性環(huán)境中負電荷增多，又因為細胞著色對氫離子濃度十分敏感。如果染色偏堿，原是紫紅色的中性顆粒則染成深藍色，造成識別困難。沖洗須用中性水，雖亦可用自來水（但不能保持穩(wěn)定）。 4、對所用染液應進行預染試驗，新配制的染液放置一段時間后其中的美藍逐漸氧化成天青B ，天青B 對細胞核的著色效果比美藍好，因此，瑞氏染液放置時間越長染色效果越好，臨床上稱之為成熟。判斷染液成熟程度的簡易方法是用正常優(yōu)質血片做預染試驗，先用低倍鏡觀察載有染液的血片，認為著色滿意后，再按照染色后沖洗順序最后用油鏡鏡檢，

4、這樣不僅可了解染液的成熟程度，而且還可以選擇合適的染色時間，供臨床標本染色時參考。 5、染液與緩沖液的比例要適當，以12為宜。一般說來緩沖液稀釋度愈大，染色時間愈長，細胞著色愈勻稱、鮮艷。緩沖液和染液量要充足，否則染液很快蒸發(fā)，染料沉淀于細胞上，使細胞深染而無法檢查。細胞較多較厚的涂片（如紅細胞增多癥）染液應多些。細胞較少的涂片染液應少些。 6、染色時間與染液濃度、室溫高低、細胞多少有關，染液愈淡，室溫越低，細胞愈多，所需時間越長，應適當增加染液濃度，因此必須根據(jù)情況靈活掌握。 7、染色良好的血膜片，外觀呈淺紅色，紅細胞呈粉紅色，白細胞核呈暗紫紅色，染色質結構能辨

5、，粒細胞的顆粒呈固有種特異顏色。 四、注意：在日常工作中遇到特殊標本，在制片時就要特殊對待。如：貧血病人、WBC特高疑為白血病人、腹水或胸水。 個人：由檢驗師（士）完成涂片、染色、計數(shù)、分類。兩差比較：由主管技師計數(shù)、分類。雙份技術標準差評價法：由檢驗師（士）及副主管技師計數(shù)、分類后比較。質評：A級（優(yōu)）：90100分。B級（良）：8089分。C級（中）：7079分。D級（及格）：6069分。E級（不及格）: <60分。 檢驗士主管技師副主任技師 質控目的：1避免或消除技術誤差。 2縮小固有誤差。質控評價：1常規(guī)考核標準。2變異

6、百分數(shù)評價。3經(jīng)驗控制。分類計數(shù)的質量控制流程 制定血細胞分析儀血涂片復檢的標準并加以評價，建立適合我院的分類計數(shù)的標準。 方法：通過對200份臨床標本血涂片進行顯微鏡檢查，評價儀器提示結果與手工分類計數(shù)的一致性和標準執(zhí)行的可行性。復檢標準的標本均需要嚴格按照操作規(guī)程進行顯微鏡鏡檢，以免造成漏診、誤診現(xiàn)象，提高血液學分析質量。 白細胞分類計數(shù) 一、低倍鏡觀察：選擇細胞分布均勻、染色好的部位，轉油鏡下計數(shù)100200個細胞，求出各種白細胞所占百分比。包括：中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸細胞、嗜堿細胞。 二、細胞分布：頭體部以淋巴細胞較多，尾

7、部和兩側以中性粒、單核細胞較多，片尾部異常大的細胞較多。一般選擇體尾交界處，細胞分布均勻的地方按一定方式，有規(guī)律的移動視野。 三、發(fā)現(xiàn)幼稚或異常白細胞，應分類報告，包括在分類百分率中。如遇到不能確認的細胞，應另列入分類不明一項，如實報告，并保留血片。如發(fā)現(xiàn)有核紅細胞，應報告分類100個白細胞所見有核紅細胞數(shù)。檢驗人員必須能對所有常見白細胞進行分類，并了解大多數(shù)白細胞的形態(tài)異常，包括先天性和獲得性。參與細胞形態(tài)學檢查的檢驗人員必須進行專業(yè)培訓，并具備實際工作經(jīng)驗。檢驗人員的工作態(tài)度、動機和專心程度是關鍵因素。因為白細胞分類計數(shù)是一項主觀性很強的工作，影響分類計數(shù)的因素很多，有檢驗人員的態(tài)度、實驗室環(huán)境條件和工作量等。 四、血涂片考核考核樣本選擇10份樣本。樣本必須包含7種類型白細胞（中性分葉核粒細胞、性桿狀核粒細胞、淋巴細胞、異型淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞）。按照要求，每份樣本制備5張血涂片，按照第節(jié)所述方法染色，統(tǒng)一標簽，但檢驗人員不知道樣本來源。