二類IVD臨床試驗(yàn)方案

1、體外診斷試劑臨床試驗(yàn)方案產(chǎn)品名稱D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）型號規(guī)格：實(shí)施者：承擔(dān)臨床試驗(yàn)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)：臨床試驗(yàn)類別：臨床試驗(yàn)負(fù)責(zé)人：（簽字）1 醫(yī)療器械產(chǎn)品在臨床試驗(yàn)前，必須制定臨床試驗(yàn)方案。2 臨床試驗(yàn)方案由醫(yī)療機(jī)構(gòu)和實(shí)施者共同設(shè)計(jì)制定。實(shí)施者與醫(yī)療機(jī)構(gòu)簽署雙方同意的臨床試驗(yàn)方案，并簽訂臨床試驗(yàn)合同。3 市場上尚未出現(xiàn)的第三類植入體內(nèi)或借用中醫(yī)理論制成的醫(yī)療器械，臨床試驗(yàn)方案應(yīng)當(dāng)向醫(yī)療器械技術(shù)審評機(jī)構(gòu)備案。4 醫(yī)療機(jī)構(gòu)和實(shí)施者應(yīng)當(dāng)共同制定每病種的臨床試驗(yàn)例數(shù)及持續(xù)時間，以確保達(dá)到試驗(yàn)預(yù)期目的。5 臨床試驗(yàn)類別分臨床試用和臨床驗(yàn)證。一、臨床試驗(yàn)的背景D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白降

2、解中的一個特征性產(chǎn)物，在深靜脈血栓、彌散性血管內(nèi)凝血、心肌梗死、重癥肝炎、肺栓塞等疾病中升高，也可作為溶栓治療有效的觀察指標(biāo)，陳舊性血栓患者D-二聚體并不升高。隨著檢驗(yàn)學(xué)的快速發(fā)展，D-二聚體定性與定量的測定愈加受到醫(yī)學(xué)界的重視。D-二聚體測定方法主要有：膠乳凝集法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA法）、膠體金免疫滲透試驗(yàn)法及免疫比濁法。膠乳凝集法，是一種半定量的試劑盒，敏感度較低，只能作為篩查。ELISA法的敏感性較好，是檢測D-D勺經(jīng)典方法，但是，它存在操作費(fèi)時、復(fù)雜的不足，每次均需同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，增加了操作成本，不適于單個標(biāo)本檢驗(yàn)。然而對進(jìn)行溶栓治療的患者來說，作D-D濃度的動態(tài)觀察是十分必

3、要的，所以需要盡快、逐個出結(jié)果，隨時調(diào)整治療方案?？梢奅LISA法在臨床應(yīng)用中還存在缺陷。膠體金免疫滲透試驗(yàn)法雖然速度較快，但重復(fù)性和準(zhǔn)確性都不是很好，而且與ELISA法的結(jié)果相關(guān)性并不好。膠乳增強(qiáng)免疫比濁法檢測D一二聚體水平具有定量和快速、穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)，適合自動化儀器使用，可滿足門急診檢測等需要，目前把它作為排除肺栓塞診斷的首選試驗(yàn)，并逐步在臨床推廣應(yīng)用。本公司D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）研發(fā)工作已完成，為了驗(yàn)證該試劑盒在臨床應(yīng)用上的適用性和準(zhǔn)確性，現(xiàn)開展臨床驗(yàn)證工作。二、產(chǎn)品的機(jī)理、特點(diǎn)與試驗(yàn)范圍1機(jī)理該試劑盒利用膠乳顆粒作為載體，吸附抗體后遇到待測血漿中相應(yīng)抗原而發(fā)生凝聚

4、，測定膠乳凝聚時的吸光度，根據(jù)校準(zhǔn)曲線計(jì)算D-二聚體的含量。并能達(dá)到一定測試準(zhǔn)確性和精密度的試劑組合。2特點(diǎn)干粉試劑，便于運(yùn)輸與儲存，開瓶需蒸餾水復(fù)溶，適用于膠乳增強(qiáng)免疫測定法測定D-二聚體。3試驗(yàn)范圍本產(chǎn)品試驗(yàn)范圍：運(yùn)用在醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床中進(jìn)行人血漿中D-二聚體的體外定量分析。三、產(chǎn)品的適應(yīng)癥或功能本試劑適用于人血漿中D-二聚體的體外定量分析。D-二聚體測定是診斷活動性纖溶較好的指標(biāo)，對血栓形成性疾病如彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）、深靜脈血栓形成、腦血管疾病、肺栓塞、肝臟疾病、外科手術(shù)后、急性心梗等疾病均有重要的診斷價值，同時D-二聚體檢測還可用于溶栓藥物的治療監(jiān)測指標(biāo)。四、臨床試驗(yàn)的項(xiàng)目內(nèi)容和目

5、的1目的通過對本公司試劑盒的產(chǎn)品性能指標(biāo)進(jìn)行測定以及和對照組產(chǎn)品針對同一臨床樣本的對比試驗(yàn)驗(yàn)證與對照產(chǎn)品是否等效從而驗(yàn)證產(chǎn)品在臨床測定中的適用性和有效性。2項(xiàng)目內(nèi)容測試試劑盒的準(zhǔn)確性、重復(fù)性（批內(nèi)不精密度與批間不精密度）、線性范圍的性能指標(biāo)以及與對照組產(chǎn)品針對臨床樣本的對比試驗(yàn)的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析來驗(yàn)證本公司D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）與對照產(chǎn)品等效。五、總體設(shè)計(jì)1產(chǎn)品性能測定對D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）的準(zhǔn)確性、重復(fù)性（批內(nèi)不精密度與批間不精密度）、線性范圍的性能指標(biāo)進(jìn)行測試。2臨床樣本的選擇（1）樣本要求空腹靜脈采血，109mmol/L枸櫞酸鈉與全血按照

6、1：9比例混合均勻（1份抗凝劑9份全血）。以2500Xg離心15分鐘，用塑料移液管取出血漿，在4小時內(nèi)完成試驗(yàn)。樣本所含被測物的量應(yīng)盡可能的分散，應(yīng)包括被測物含量為正常值與異常值的臨床樣本。（2）樣本數(shù)量根據(jù)體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則，第二類產(chǎn)品的臨床研究的總樣本數(shù)為200例，由于第二類產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)單位要求為兩家或兩家以上。所以本方案要求在此次臨床試驗(yàn)中樣本數(shù)量不少于100例，其中被測物為異常值的樣本為30例，正常值樣本為70例，符合統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求。3對照產(chǎn)品的要求選擇已批準(zhǔn)上市且為目前臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同方法或原理產(chǎn)品作為對照產(chǎn)品。同時應(yīng)注明對照產(chǎn)品的生產(chǎn)廠家名稱、產(chǎn)品規(guī)格型號、注

7、冊證號、生產(chǎn)批號、有效期、測試原理。對比試驗(yàn)研究中重復(fù)測定結(jié)果仍不符的樣本，應(yīng)采用其他方法或原理試劑再次進(jìn)一步驗(yàn)證試驗(yàn)，以便對臨床研究結(jié)果進(jìn)行分析。4對比試驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)處理將本公司D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）與對照產(chǎn)品對同一臨床樣本進(jìn)行測定，分別記錄兩種產(chǎn)品的測定值，當(dāng)臨床樣本全部測定完成后將記錄的兩組數(shù)值進(jìn)行配對t檢驗(yàn)與相關(guān)性的計(jì)算，統(tǒng)計(jì)兩種產(chǎn)品檢測結(jié)果是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異且顯著性相關(guān)。5成功或失敗的可能性分析（1）產(chǎn)品方面由于液態(tài)試劑的本身狀態(tài)限制，可能會對包裝運(yùn)輸?shù)囊筝^高。這就要求包裝人員包裝時加內(nèi)塞，擰緊瓶蓋，以保證試劑的密封性；運(yùn)輸人員需用加冰袋的泡沫箱密封包裝，防止在

8、運(yùn)輸過程中發(fā)生漏液、碎瓶的現(xiàn)象。出現(xiàn)失敗的原因可能是運(yùn)輸中造成產(chǎn)品質(zhì)量的破壞，導(dǎo)致產(chǎn)品失效。由于干粉試劑本身狀態(tài)的限制，要求開瓶后需用蒸餾水復(fù)溶，為了保證產(chǎn)品性能與質(zhì)量，應(yīng)避免產(chǎn)品在復(fù)溶過程中出現(xiàn)差錯或受到污染而造成臨床試驗(yàn)失敗。（2）試驗(yàn)設(shè)計(jì)方面如果根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果得出的結(jié)論是本公司D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）與對照產(chǎn)品有顯著性差異，說明本公司D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）與對照產(chǎn)品不等效。六、臨床評價標(biāo)準(zhǔn)1產(chǎn)品性能產(chǎn)品性能測定結(jié)果應(yīng)達(dá)到下述要求：根據(jù)本公司D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）說明書和儀器操作說明書設(shè)定參數(shù)。（1）準(zhǔn)確性a） 試劑準(zhǔn)確性

9、用已批準(zhǔn)上市的D-二聚體質(zhì)控血漿進(jìn)行三次平行測量測定，取均值。均值在質(zhì)控血漿允許偏差范圍之內(nèi)。b） 校準(zhǔn)品準(zhǔn)確性用已批準(zhǔn)上市的D-二聚體試劑盒對校準(zhǔn)品進(jìn)行三次平行測量測定，取均值。均值與校準(zhǔn)品標(biāo)定值的不準(zhǔn)確度小于10%。（2）重復(fù)性a）試劑批內(nèi)不精密度用本公司同一批號的試劑對高、中、低值三個樣本分別進(jìn)行重復(fù)測定20次，計(jì)算變異系數(shù)CV,高、中、低值C環(huán)得大于10%（n=20）。變異系數(shù)CV十算公式:一2CV批內(nèi)（）X100%'、XiX/n-1X式中：Xi一樣本中被測物濃度測定值;X一測定結(jié)果的平均值；i1,2,3,n;n一重復(fù)測定次數(shù)。b）校準(zhǔn)品瓶內(nèi)不精密度用本公司配套試劑對本公司一瓶

10、校準(zhǔn)品進(jìn)行重復(fù)測定10次，計(jì)算變異系數(shù)CV,C環(huán)得大于10%（n=10）。變異系數(shù)CV十算公式:CV瓶內(nèi)()=一2'、Xi-X/n-1XX100%c）試劑批間不精密度用本公司三批試劑分別對試劑盒中校準(zhǔn)品重復(fù)進(jìn)行C"得大于15%變異系數(shù)CV十算公式：計(jì)算按公式（2）CV批間（%=（s批間/X總）X100%10次測量，計(jì)算其批間變異系數(shù)CV,(1)其中s批間按公式（3）2s批間(%)=s總2-s批內(nèi)d）校準(zhǔn)品批內(nèi)不精密度10次，計(jì)算變異系數(shù)CV,CV用本公司配套試劑對本公司同一批中校準(zhǔn)品進(jìn)行重復(fù)測定不得大于10%（n=10）。變異系數(shù)CV十算公式。CV比內(nèi)（%）=工iT"

11、;（nT）X100%X（3）線性范圍50科g/L5000本公司D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）的線性范圍為dg/L,相關(guān)系數(shù)丫>0.95。操作方法：將高值臨床樣本（或校準(zhǔn)品）用生理鹽水進(jìn)行倍比稀釋，取五個梯度濃度，每個濃度重復(fù)測定3次取平均值，計(jì)算稀釋比例與相應(yīng)測定濃度均值進(jìn)行線性回歸分析，計(jì)算相關(guān)系數(shù)丫。相關(guān)系數(shù)丫的計(jì)算公式：（通過Excel軟件中插入函數(shù)CORRE也可求出相關(guān)系數(shù)）n"XiY-'、XYr=_22_22gXiXi）"Y-eY）式中：Xi測定管溶液的濃度均值；Yi與測定管溶液濃度相對應(yīng)的稀釋比例；1 1,2,3,n;n測定樣本數(shù)。

12、2 .對比試驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)分析配對t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)分析得出P>0.05;線性相關(guān)分析得出r>0.95Pv0.001。統(tǒng)計(jì)出兩種產(chǎn)品檢測結(jié)果沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異且顯著性相關(guān)。七、臨床試驗(yàn)持續(xù)時間及其確定理由臨床試驗(yàn)持續(xù)時間沒有嚴(yán)格要求，可以根據(jù)樣本情況確定，只要能夠完成本方案規(guī)定的內(nèi)容即可。但是由于本產(chǎn)品開瓶穩(wěn)定性為2C-8c穩(wěn)定30天，所以本試驗(yàn)需要在一個月內(nèi)完成臨床試驗(yàn)。如果干粉試劑在使用中出現(xiàn)吸潮變粘稠的現(xiàn)象，說明試劑已經(jīng)失效或存在問題，請重新選擇同批試劑進(jìn)行試驗(yàn)。八、每病種臨床試驗(yàn)例數(shù)及其確定理由醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，正常值樣本和病理值樣本土不少于30例。本試驗(yàn)根據(jù)產(chǎn)品的功能特點(diǎn)及統(tǒng)計(jì)學(xué)原理的要求，

13、被測物為異常值的樣本計(jì)劃入組30例，例數(shù)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求與體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則、醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)規(guī)定的要求。九、選擇對象范圍、選擇對象數(shù)量及選擇理由1 .選擇對象范圍選擇對象：在臨床試驗(yàn)單位檢驗(yàn)室進(jìn)行D-二聚體含量測定的就醫(yī)人。D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）為人血漿中D-二聚體的體外定量分析試劑，臨床上只用于輔助診斷，并不具有確切的診斷意義，故在臨床上主要區(qū)分為含量測定正常值與異常值而非確定的病種，將臨床研究對象分為D-二聚體含量測試為異常值組和D-二聚體含量測試為正常值組，符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求與體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則、醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)規(guī)定的要求。（ 1） D-二

14、聚體含量測試為異常值組入選標(biāo)準(zhǔn)年齡1880，男女不限，用對照產(chǎn)品測定超出其正常參考范圍為異常值的患者，每家臨床試驗(yàn)單位為30例。（2）D-二聚體含量測試為正常值組入選標(biāo)準(zhǔn)年齡1880，男女不限，用對照產(chǎn)品測定在其正常參考范圍內(nèi)為正常值的就醫(yī)人，其中包括正常人群與D-二聚體含量測試為正常值的患者。每家臨床試驗(yàn)單位為70例。2選擇對象數(shù)量及選擇理由根據(jù)體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則，第二類產(chǎn)品的臨床研究的總樣本數(shù)為200例，由于第二類產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)單位要求為兩家或兩家以上。所以每家臨床試驗(yàn)單位臨床樣本數(shù)不少于100例，其中被測物為異常值的樣本為30例，正常值樣本為70例，符合統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求。十、副

15、作用預(yù)測及應(yīng)當(dāng)采取的措施D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）試劑屬于體外診斷試劑，不進(jìn)入人體，測試結(jié)果只用于臨床驗(yàn)證試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，不作為輔助診斷的依據(jù)，因此在使用過程中不會對在臨床試驗(yàn)單位檢驗(yàn)室進(jìn)行D-二聚體含量檢測的就醫(yī)人增加任何直接的風(fēng)險及副作用。十一、臨床性能的評價方法和統(tǒng)計(jì)處理方法1 臨床性能的評價方法通過對產(chǎn)品準(zhǔn)確性、重復(fù)性（批內(nèi)不精密度與批間不精密度）、線性范圍性能指標(biāo)的測試，各項(xiàng)達(dá)到臨床評價標(biāo)準(zhǔn)來驗(yàn)證產(chǎn)品在臨床中的準(zhǔn)確性、適用性。2 統(tǒng)計(jì)處理方法（1）配對t檢驗(yàn)：將D-二聚體測定試劑盒（自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法）與對照產(chǎn)品對正常值樣本與異常值樣本的測定數(shù)值分別計(jì)算平均

16、值與標(biāo)準(zhǔn)差，根據(jù)公式計(jì)算t值應(yīng)得出t<t0.05,f,P>0.05,兩種檢測結(jié)果的量值應(yīng)無顯著性差異。81)黑§2+(m1)xS；SRt值計(jì)算公式：(n1與n2分別為兩種產(chǎn)品測定樣本數(shù)，f=n1-1+n2-1)nin2-2(2)相關(guān)性計(jì)算：將D-二聚體測定試劑盒(自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法)與對照產(chǎn)品的測定數(shù)值進(jìn)行回歸分析，計(jì)算相關(guān)系數(shù)r,應(yīng)得r>0.95,Pv0.001,兩組測試數(shù)值具有顯著性正線性相關(guān)關(guān)系。r值計(jì)算公式如下：%(X1i-X1)(X2i-X2)、(X1i-X1)2x(X2i-X2)2(3)通過以上兩種統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法驗(yàn)證D-二聚體測定試劑盒(自動膠乳增強(qiáng)

17、免疫測定法)與對照產(chǎn)品等效，從而驗(yàn)證產(chǎn)品的有效性。十二、倫理委員會評審意見與受試者知情同意書因?yàn)榇舜闻R床試驗(yàn)使用醫(yī)院日常工作測定后的剩余樣本(為日常在臨床試驗(yàn)單位檢驗(yàn)室進(jìn)行D-二聚體含量測定的就醫(yī)人檢測完成后剩余的樣本量，并非為臨床試驗(yàn)專門采集的樣本)，所以此次臨床試驗(yàn)不涉及個人隱私可不經(jīng)受試者同意。D-二聚體測定試劑盒(自動膠乳增強(qiáng)免疫測定法)屬于體外診斷試劑，在臨床試驗(yàn)中不需要與患者直接接觸，不向病人提供檢測報(bào)告，且試驗(yàn)結(jié)果只用于對比研究，不作為輔助診斷依據(jù)，不會給受試者帶來任何風(fēng)險，因此“知情同意書”這項(xiàng)內(nèi)容可以省略。十三、各方承擔(dān)的職責(zé)公司：(1)負(fù)責(zé)為負(fù)責(zé)臨床試驗(yàn)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)提供試驗(yàn)用

18、試劑，及相關(guān)技術(shù)資料；(2)與實(shí)施者共同設(shè)計(jì)、制定臨床試驗(yàn)方案，雙方簽署臨床試驗(yàn)方案及協(xié)議。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)：(1)與實(shí)施方共同設(shè)計(jì)、制定臨床試驗(yàn)方案，雙方簽署臨床試驗(yàn)方案及協(xié)議;(2)如實(shí)記錄受試產(chǎn)品試驗(yàn)數(shù)據(jù)；(3)提交臨床研究報(bào)告，并對報(bào)告的正確性及可靠性負(fù)責(zé);4)對實(shí)施方提供的資料負(fù)有保密義務(wù)。臨床試驗(yàn)人員職務(wù)職稱所在科室檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科承擔(dān)臨床試驗(yàn)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)意見:（蓋章）年月日倫理委員會意見：2007年9月30日新法規(guī)關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料形式與基本要求的公告中明確申明如果產(chǎn)品無需倫理委員會的同意需要由臨床機(jī)構(gòu)中的牽頭單位提供有關(guān)倫理事宜的說明并簽章。（蓋章）年月日實(shí)施者意見:情感語錄1 .愛情合適就好，不要委屈將就，只要隨意，彼此之間不要太大壓力2 .時間會把最正確的人帶到你身邊，在此之前，你要