是當(dāng)前世界治療癌癥的領(lǐng)先技術(shù)

1、ACTL是當(dāng)前世界一流的治療癌癥技術(shù)ACTL多靶點(diǎn)靶向性抗腫瘤細(xì)胞免疫技術(shù)具有世界先進(jìn)水平，被業(yè)內(nèi)美譽(yù)為“生物導(dǎo)彈”。劉勇教授從師生物免疫學(xué)之父拉爾夫·斯坦曼（Steinman），是發(fā)明這一技術(shù)的主要成員之一?，F(xiàn)將簡(jiǎn)要情況介紹如下：1、 ACTL抗腫瘤細(xì)胞靶向治療的概念（1）中文解釋 全稱 “ AAV-DC-CTL靶向性抗腫瘤細(xì)胞免疫技術(shù)”，簡(jiǎn)稱“ACTL”或“ACTL技術(shù)”或“ACTL腫瘤細(xì)胞靶向治療”。（2）英文解釋 "ACTL Anti-Cancer Cellular Immunotherapy"2、ACTL技術(shù)背景2011年10月3日，加拿大科學(xué)家、美國(guó)醫(yī)

2、學(xué)會(huì)和美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院拉爾夫·斯坦曼（Steinman）教授獲得2011年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。斯坦曼獲獎(jiǎng)的原因在于他在“樹突狀細(xì)胞（Dendritic Cell,DC細(xì)胞）及其在適應(yīng)性免疫系統(tǒng)方面作用的發(fā)現(xiàn)”。21世紀(jì)初，美國(guó)斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院腫瘤中心劉勇教授在斯坦曼教授的指引下將其研究的以重組腺相關(guān)病毒(Recombinant Adeno-associated Virus, rAAV)與斯坦曼教授研究的DC細(xì)胞相結(jié)合，研發(fā)以攜帶某種或數(shù)種特定腫瘤相關(guān)抗原決定簇基因的重組腺相關(guān)病毒轉(zhuǎn)染DC細(xì)胞，在體外刺激患者T淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生特異性殺傷某種或數(shù)種腫瘤相關(guān)抗原陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（C

3、ytotoxic Lymphocyte,CTL細(xì)胞），隨后進(jìn)行相關(guān)的臨床試驗(yàn)研究，獲得成功。此治療技術(shù)稱為ACTL腫瘤細(xì)胞靶向治療技術(shù)，已獲得5項(xiàng)國(guó)際專利保護(hù)，由此技術(shù)制備的特異性殺傷腫瘤相關(guān)抗原陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞稱為特異殺傷性T細(xì)胞（ACTL，A代表特異性抗原）具有高效性、靶向性（即特異性）殺傷某種或數(shù)種特定腫瘤相關(guān)抗原陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞以及PSMA 陽(yáng)性的腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞的強(qiáng)大功能，對(duì)正常細(xì)胞無(wú)損傷作用。ACTL腫瘤細(xì)胞靶向治療技術(shù)臨床應(yīng)用的典型例子為斯坦曼教授自身晚期胰腺癌的治療和蘋果公司喬布斯晚期胰腺癌的治療。拉爾夫·斯坦曼（Steinman）教授僅采用了此治療技

4、術(shù)，延長(zhǎng)了4年生存時(shí)間。在斯坦福大學(xué)腫瘤中心，經(jīng)過(guò)數(shù)年的臨床研究，于2010年證明了ACTL特異殺傷性T細(xì)胞不僅能夠直接靶向殺傷腫瘤細(xì)胞，而且可封閉腫瘤新生血管，發(fā)揮間接殺傷腫瘤細(xì)胞作用，明顯提升臨床療效。此項(xiàng)研究成果被2010年美國(guó)腫瘤臨床學(xué)會(huì)(ASCO)評(píng)為2010年度上半年腫瘤生物治療領(lǐng)域最重要的突破。在美國(guó)進(jìn)行的臨床研究表明，ACTL 特異殺傷性T細(xì)胞不僅有可能逆轉(zhuǎn)婦科和前列腺等惡性腫瘤對(duì)抗激素治療產(chǎn)生的耐藥性，而且有可能逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對(duì)易瑞沙、阿瓦斯丁等分子靶向藥物治療的耐藥性。3、ACTL技術(shù)治療機(jī)理AAV-DC-CTL腫瘤細(xì)胞靶向治療技術(shù)是將無(wú)致病性的野生型腺相關(guān)病毒(Adeno-

5、associated virus,AAV) 通過(guò)基因重組技術(shù)改建為攜帶特定腫瘤相關(guān)抗原決定簇基因的重組腺相關(guān)病毒，感染患者的外周血單核細(xì)胞(Monocytes. Mo)，經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)，單核細(xì)胞轉(zhuǎn)化為具有強(qiáng)大抗原提呈功能的DC細(xì)胞。經(jīng)此技術(shù)獲得的DC細(xì)胞在體外刺激患者的T淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生有效殺傷腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CytotoxicT lymphocytes,CTL)。所產(chǎn)生的CTL 具有腫瘤抗原特異性，即靶向性，僅針對(duì)某種或數(shù)種特定腫瘤相關(guān)抗原陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞以及PSMA 陽(yáng)性的腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞具有殺傷作用，對(duì)抗原陰性的細(xì)胞無(wú)任何作用。CTL細(xì)胞是CD8+的T細(xì)胞亞群，為一種特異T

6、細(xì)胞，對(duì)某些病毒、腫瘤細(xì)胞等具有直接殺傷作用，與自然殺傷細(xì)胞構(gòu)成機(jī)體抗病毒、抗腫瘤的重要防線。 CTL殺傷機(jī)制有：釋放穿孔素，顆粒酶，裂解靶細(xì)胞；通過(guò)FasL介導(dǎo)靶細(xì)胞的凋亡。主要作用途徑：AAV-TAAs轉(zhuǎn)染DC- CTL靶向性殺傷腫瘤細(xì)胞 DC刺激淋巴細(xì)胞產(chǎn)生CTL應(yīng)用機(jī)理。4、ACTL技術(shù)臨床治療流程第一步：抽取腫瘤患者靜脈外周血(80-150毫升)或采用血細(xì)胞分離機(jī)直接分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)。第二步：經(jīng)培養(yǎng)，PBMC被分離為淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，淋巴細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)，備用。rAAV病毒感染單核細(xì)胞，并以細(xì)胞因子誘導(dǎo)成熟的樹突狀細(xì)胞(DC)產(chǎn)生。將成熟的DC與淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)，使淋

7、巴細(xì)胞誘導(dǎo)成為具有抗原特異性的、殺傷抗原陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(ACTL)。最后，將被激活的ACTL細(xì)胞回輸給腫瘤患者。整個(gè)過(guò)程需要12-14天。5、ACTL技術(shù)治療腫瘤優(yōu)勢(shì)（1）創(chuàng)新性。劉勇教授經(jīng)過(guò)多年努力，不但獲得了7項(xiàng)中國(guó)專利和1項(xiàng)待批專利，而且發(fā)獲得了5項(xiàng)歐美及國(guó)際專利，預(yù)計(jì)今后5年內(nèi)還可獲得20余項(xiàng)國(guó)際、國(guó)內(nèi)新專利（詳見(jiàn)附件一）。目前，劉勇教授組織的宮頸癌、肝硬化、肝癌專利即將問(wèn)世，明年至少有兩項(xiàng)專利。（2）安全性。AAV是唯一獲得美國(guó)NIH及FDA認(rèn)證的RG1病毒載體;不良反應(yīng)?。ㄔ斠?jiàn)附件一）。（3）精準(zhǔn)性。腫瘤抗原決定簇誘導(dǎo)CTL精確靶向殺傷腫瘤細(xì)胞。（4）高效性。AA

8、V精確轉(zhuǎn)染率高;體外培養(yǎng)產(chǎn)生的CTL可量化及質(zhì)量控制;強(qiáng)大的靶向殺傷腫瘤細(xì)胞，療效確切，治療腫瘤譜廣。（5）方便性。只經(jīng)過(guò)一次轉(zhuǎn)染;臨床治療周期短(12-14天)。6、ACTL技術(shù)的特點(diǎn)ACTL腫瘤細(xì)胞靶向治療技術(shù)在臨床使用中的相對(duì)其他腫瘤治療技術(shù)有四大特點(diǎn)，包括：安全性好、感染率高、逆轉(zhuǎn)耐藥性、大量獲得ACTL特異殺傷性T細(xì)胞。具體如下：（1）安全性好。ACTL腫瘤治療技術(shù)采用的AAV野生型腺相關(guān)病毒，是美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院NIH和FDA允許用于基因治療的最安全的載體，對(duì)人體無(wú)害。本技術(shù)的AAV病毒滴度高達(dá)10的14次方(FDA要求臨床應(yīng)用的AAV病毒滴度應(yīng)高于10的11次方)，活性強(qiáng)，純度高，無(wú)

9、野生型腺相關(guān)病毒和腺病毒污染，完全符合臨床治療的要求。（2）感染效率高。本技術(shù)采用攜帶腫瘤抗原基因的重組腺相關(guān)病毒能夠高效率地感染人樹突狀細(xì)胞(DC)，感染效率高達(dá)95%。傳統(tǒng)的以蛋白或多肽感染人樹突狀細(xì)胞(DC)的效率在15%以下。（3）逆轉(zhuǎn)耐藥性。ACTL腫瘤治療技術(shù)不僅可避免治療的毒副作用，而且可逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對(duì)抗激素和生物藥靶向治療產(chǎn)生的耐藥性，這是本技術(shù)的顯著特點(diǎn)之一。（4）大量獲得ACTL特異殺傷性T細(xì)胞。ACTL腫瘤治療技術(shù)被感染的樹突狀細(xì)胞在體外能夠有效地激活T淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生CTL，而且數(shù)量巨大，達(dá)10的9次方以上，保證臨床療效顯著。而傳統(tǒng)的DC細(xì)胞試圖在體內(nèi)激活T淋巴細(xì)胞，產(chǎn)生

10、CTL，但患者的薄弱的免疫系統(tǒng)微環(huán)境使得DC細(xì)胞很難在體內(nèi)激活T細(xì)胞產(chǎn)生CTL，而且數(shù)量稀少，療效不佳。7、ACTL技術(shù)的臨床優(yōu)勢(shì)（1）療效確切。ACTL特異殺傷性T細(xì)胞治療機(jī)理明確，具有高效率、連續(xù)、大量殺傷癌靶細(xì)胞的強(qiáng)大功能，臨床療效可進(jìn)行影像學(xué)、血清腫瘤標(biāo)志物、生活質(zhì)量、生存時(shí)間等客觀指標(biāo)評(píng)價(jià)。（2）可逆轉(zhuǎn)分子靶向藥的耐藥性。ACTL特異殺傷性T細(xì)胞不僅有可能逆轉(zhuǎn)婦科和前列腺等惡性腫瘤對(duì)抗激素治療產(chǎn)生的耐藥性，而且有可能逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對(duì)易瑞沙、阿瓦斯丁等生物靶向藥物治療的耐藥性。（3）無(wú)毒副作用。ACTL特異殺傷性T細(xì)胞具有抗原特異性，即靶向性。僅針對(duì)某種或數(shù)種腫瘤相關(guān)抗原陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞以

11、及PSMA陽(yáng)性的腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞具有殺傷作用，對(duì)正常細(xì)胞無(wú)損傷作用。8、ACTL技術(shù)適應(yīng)癥。ACTL 腫瘤細(xì)胞靶向治療的適應(yīng)癥非常廣泛。腫瘤患者如符合以下條件，便可接受治療：（1）腫瘤組織MHC-I 類分子(HLA-I 類抗原)陽(yáng)性；（2）至少一種腫瘤相關(guān)抗原陽(yáng)性(請(qǐng)見(jiàn)“腫瘤患者篩選標(biāo)準(zhǔn)”)；（3）肝腎功能正常；（4）無(wú)嚴(yán)重貧血；（5）停止化學(xué)治療和放射治療，外周血白細(xì)胞數(shù)無(wú)偏低；（6）較大的腫瘤組織已經(jīng)去除；（7）無(wú)嚴(yán)重的過(guò)敏癥。9、ACTL適用范圍（ACTL特異殺傷性T細(xì)胞適用范圍）（1）早期患者術(shù)中或術(shù)后的治療；（2）晚期患者放化療同時(shí)治療或放化療后的序貫治療；（3）晚期患者的獨(dú)立治

12、療ACTL專利治療技術(shù)應(yīng)用范圍廣泛，針對(duì)某種或數(shù)種腫瘤相關(guān)抗原陽(yáng)性的肺癌、乳腺癌、大腸癌、前列腺癌、宮頸癌、卵巢癌、鼻咽癌、食道癌、腎癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、黑色素瘤、淋巴瘤以及多發(fā)性骨髓瘤等惡性腫瘤進(jìn)行ACTL腫瘤細(xì)胞靶向治療。10、ACTL技術(shù)臨床安全性經(jīng)近二十年的全世界廣泛研究證明腺相關(guān)病毒(AAV)是一種非致病性病毒，感染人體后，不會(huì)導(dǎo)致任何病理變化，這已經(jīng)為醫(yī)學(xué)界所公認(rèn)。美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院(NIH)和食品及藥品管理局(FDA)宣布，AAV 是用于基因治療的最安全的病毒載體。美國(guó)阿肯色醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合美國(guó)的其它大學(xué)所進(jìn)行的流行病學(xué)調(diào)查研究以及實(shí)驗(yàn)室研究表明，AAV 不僅無(wú)致病性，而且可抑

13、制宮頸癌的生長(zhǎng)，并可抑制人乳頭瘤病毒，乙型肝炎病毒以及愛(ài)滋病毒等病毒的復(fù)制。11、ACTL技術(shù)臨床應(yīng)用具有合法性2009年3月2日，我國(guó)衛(wèi)生部出臺(tái)了醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法，將自體免疫細(xì)胞治療技術(shù)列為第三類醫(yī)療技術(shù)管理。2009年5月25日，衛(wèi)生部辦公廳下發(fā)了衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)（2009）84號(hào)文件，題為關(guān)于公布首批允許臨床應(yīng)用的第三類醫(yī)療技術(shù)目錄的通知，正式宣布自體免疫細(xì)胞（T細(xì)胞、NK細(xì)胞）治療技術(shù)允許臨床應(yīng)用，而ACTL技術(shù)正是T細(xì)胞系列中治療腫瘤效果最顯著、最安全的代表。這充分表明ACTL技術(shù)治療腫瘤進(jìn)入臨床應(yīng)用，我國(guó)早就具備了合法性。詳細(xì)情況，見(jiàn)附件二。12、ACTL技術(shù)的專家團(tuán)隊(duì)與科研 ACTL技術(shù)的專家團(tuán)隊(duì)強(qiáng)悍、研發(fā)能力強(qiáng)大，國(guó)外國(guó)內(nèi)均建有先進(jìn)的科研基地。在國(guó)內(nèi)也取得了豐碩的科研成果，獲得深圳2014年度生物/生命健康產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新成果獎(jiǎng)金。在臨床應(yīng)用與實(shí)踐中非常深入，技術(shù)服務(wù)科學(xué)規(guī)范，對(duì)腫瘤治療效果非常顯著。詳細(xì)情況，見(jiàn)附件三