菌液濃度測定方法_第1頁
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文檔簡介

1、菌液濃度測定實(shí)驗(yàn)原理：一定濃度的細(xì)菌懸浮液有一定的稍光度，濃度與消光度呈正比，且在一定的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。以分光光度計(jì)為檢測工具，測定未知濃度菌懸液的消光度值，由事先作用的標(biāo)準(zhǔn)直線，即可求出該菌懸液的濃度。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、 材料與方法1.1 菌種大腸桿菌1.2 制備標(biāo)準(zhǔn)菌的懸浮液培養(yǎng)基的組成：牛肉膏0.3g蛋白月東1g氯化鈉0.5g瓊脂2g蒸儲水100mLpH7.07.2滅菌121C,22min1.3 儀器設(shè)備722型可見分光光度計(jì)、萬分之一電子分析天平、801型離心沉淀機(jī)1.4 最大吸收峰值的確定取10ml菌液調(diào)節(jié)PH=5,抑制菌體的繼續(xù)生長，利用分光光度計(jì)在500700(nm)波長范圍掃

2、描，選出最大吸收峰。作出所測波長與吸光度的關(guān)系曲線。選出最大吸收波長。大腸桿菌代謝過程的upH關(guān)系圖2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制重量法測菌濃將一離心管置于干燥烘箱中烘干至恒重，自然冷卻后用分析天平稱其質(zhì)量m-準(zhǔn)確稱其10ml菌液，調(diào)節(jié)PH=3,放入離心機(jī)中進(jìn)行離心分離(3500rmp>10min),傾去上清液，將菌體放進(jìn)干燥箱中烘干至恒重，自然冷卻后取出稱重m2,利用差量法求得菌液中菌體的真實(shí)濃度。m-m2=m)測定系列標(biāo)樣的吸光度取與重量法同一菌液，配制2、5、10、20、50倍的系列標(biāo)樣，以1cm比色皿比濁，波長600nm,以蒸儲水為參比，分別測定其吸光度A。記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：表1菌液濃度與吸光度的關(guān)系稀釋倍數(shù)菌液濃度/g/L菌液的吸光度125102050工作曲線的繪制以重量法所測的菌體濃度為橫坐標(biāo)，其對應(yīng)的系列標(biāo)樣吸光度為縱坐標(biāo)，繪制A-C標(biāo)準(zhǔn)曲線。菌體濃度的測定將待測菌液按2.2中

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