蒸發(fā)光散射檢測器使用說明書1

1、UM-3000蒸發(fā)光散射檢測器使用說明書UnimicroTechnologiesInc.4713FirstStreet,225,Pleasanton,CA94566,USATel.:(925)846-8638Fax:(925)846-3687Web:上海張江高科技園區(qū)松濤路489號C01座上海通微分析技術有限公司電話：(021)50801569傳真：(021)38953636網(wǎng)址：為保證儀器安全使用，請在使用前仔細閱讀本說明書目錄1 .簡介11.1 UM-3000ELSD檢測器介紹11.2 操作原理22 .檢測器的安裝3 1必需組件3 2拆箱4 3檢測器的安裝位置4 4電源要求4 5氣路連接4

2、2.5.1氣體供應輸入連接52.5.2氣閥的連接52.5.3氣體出口的連接51 6數(shù)據(jù)線連接53.日常操作52. 1安全5 2操作注意事項62. 3開機運行62 4關機操作74.日常維護和清潔73 1日常維護74.1.1霧化器維護74.1.2激光光源的更換842日常清潔84.2.1流通渠道清潔84.2.2霧化器清潔84.2.3蒸發(fā)室清潔94.2.4檢測室清潔95.診斷和故障排除95.1檢測器故障95.2基線噪聲大105.3系統(tǒng)故障126.附錄136.1儀器規(guī)格136.2相關配件136.2揮發(fā)性流動相改性劑131 .簡介1. UM-3000ELSD檢測器介紹UM-3000型蒸發(fā)光散射檢測器（Ev

3、aporativeLightScatteringDetect。設計用于高效液相色譜系統(tǒng)，分析任何揮發(fā)性低于流動相的化合物。ELSD的應用范圍包括：碳水化合物，藥物，脂類，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化劑，營養(yǎng)滋補品，及組合分子庫等。蒸發(fā)光散射檢測器消除了常見于其他HPLC檢測器的問題。示差檢測受溶劑前沿峰的干擾使得分析復雜化，并且由于對溫度極其敏感使得基線很不穩(wěn)定，與梯度洗脫不相容。另外，示差檢測器的響應不如ELSD靈敏。而低波長紫外檢測器在急變梯度條件下受基線漂移的困擾，并要求被分析化合物帶有發(fā)色團。ELSD則不受這些限制。不同于這些檢測器，ELSD能在多溶劑梯度的情況下

4、獲得穩(wěn)定的基線，使得分辨率更好、分離速度更快。另外，因為ELSD的響應不依賴于樣品的光學特性，所以ELSD檢測時樣品不要求帶有發(fā)色團或熒光基團。UM-3000蒸發(fā)光散射檢測器通過對氣壓和溫度的精確控制，確保在霧化室內形成一個較窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸發(fā)所需要的溫度大大降低。采用低溫蒸發(fā)模式，維持了顆粒的均勻性，對半揮發(fā)性的物質和熱敏化合物同樣具有較好的靈敏度。UM-3000ELSD檢測器的主要技術參數(shù)4. 光源：650nm激光二極管5. 檢測元件：光電倍增管6. 蒸發(fā)區(qū)溫度范圍：室溫130c7. 溫度變化增量：1C8. 溫度控制精度：土1C9. 霧化氣體：氮氣或空氣10. 氣體消耗量：1.0

5、4.0L/min11. 氣體輸送壓力范圍：25bar12. 氣體壓力測量精度：0.01bar13. 模擬輸出：010mV,01V14. 電源：220V,50Hz15. 檢測限：1ng葡萄糖16. 噪音水平：0.1mV（流速1ml/min的有機溶液或水溶液）17. 計算機接口：RS23218. 檢測角度：120°19. 顯示：LCD1. 操作原理蒸發(fā)光散射檢測器的檢測原理是：首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā)，最后余下的不揮發(fā)性溶質顆粒在光散射檢測池中得到檢測。主要包括以下三個步驟：1 .流動相的霧化在霧化過程中將大量的液體流動相轉變成細小的液滴-氣溶膠，從而

6、使流動相更容易蒸發(fā)。霧化階段是一個非常重要的步驟，這個步驟的可靠程度和重現(xiàn)性決定了整個檢測器的靈敏度和重現(xiàn)性。氣體流量越低形成的液滴越大，液滴越大則散射的光越多，從而提高了分析靈敏度，但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發(fā)。每種方法均存在產生最佳信號噪音比率的最優(yōu)化氣體流量。流動相流速越低要求適當霧化的氣體流量也越低。用內徑為2.1mm的微徑柱代替內徑為4.6mm標準型分析柱，能大大降低流動相流速，因而提高分析的靈敏度。2 .流動相的蒸發(fā)當載氣從霧化室把氣溶膠運送到加熱漂移管時，氣溶膠中揮發(fā)性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發(fā)。為特定應用設置適當?shù)钠乒軠囟?，取決于流動相組成和流速，以及樣品的揮發(fā)性。高

7、有機含量流動相比高含水量流動相要求蒸發(fā)的漂移管溫度低。低流動相流速比高流動相流速要求蒸發(fā)的漂移管溫度越低。半揮發(fā)性樣品要求采用較低的漂移管溫度，以獲得最佳靈敏度。最佳溫度需要通過觀察各溫度時的信號噪音比率來確定。低蒸發(fā)溫度對于保持顆粒大小的均勻性和熱敏性溶質的完整性非常重要。流動相和霧化氣體中的非揮發(fā)性雜質會導致噪音。采用高品質的氣體，溶劑和揮發(fā)性緩沖液（經過過濾的），會很大程度上降低基線噪音。若流動相沒有完全揮發(fā)會導致基線噪音上升。仔細選擇設置檢測器的參數(shù)保證流動相完全揮發(fā)。3 .對含有待測物的剩余顆粒的光散射霧狀的溶質顆粒從漂移管出來后進入檢測池，在這里溶質穿過光束，被溶質顆粒散射的光的量

8、通過光檢測器加以檢測。光檢測器產生的電信號與通過檢測池的顆粒數(shù)量和大小成比例。2.檢測器的安裝1 1必需組件除了UM-3000型ELSD檢測器及其配件，用戶需要以下設備來配置完整的色譜系統(tǒng)。排氣系統(tǒng)：1 靠近檢測器的地方應有通風櫥或其它通風設備，將排出的氣體從實驗室中抽除。請使用隨儀器的附件-排氣冷阱。氣源：2 請使用純凈，干燥的氣體，最好是氮氣，壓力可調節(jié)，99.9%或以上的純度為好。氣源可以是高壓氣體鋼瓶，高壓液化氣罐，或是氮氣發(fā)生器以及空氣發(fā)生器。HPLC系統(tǒng)組件：3 HPLC泵，非梯度或者梯度的，在至少3000psiB力和0.1-1.5ml/min流速下，應能保持低脈沖溶劑輸送。對于微

9、孔柱，低流速輸送能力是必須的。4 自動進樣器或手動進樣閥。5 分離相關組份的分析柱，若您不能確定使用何種類型的柱子，您可與通微公司聯(lián)系。6 推薦使用與分離柱匹配的預柱幫助延長分析柱的使用壽命。7 柱溫箱，在需要時選用。8 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，電腦及工作站，能接收模擬輸出信號，010mV或0-1V均可其它：9 HPLC級流動相溶劑10 溶劑瓶，連接管，入口過濾器，打印紙，打印機等用于泵和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的配件。注意：流動相只可使用揮發(fā)性的緩沖溶液，含有緩沖溶液的流動相必須過濾以防止噪聲。2.2拆箱UM-3000型ELSD檢測器和附件用同一箱子運輸。小心拆開所有部件，確認裝箱單上的所有物品都包括在內，并且完

10、好無損。保留所有的紙箱和包裝材料以備日后使用。確保到達用戶手中時包裝完好，如有任何損壞請立即與通微公司聯(lián)系。2.3檢測器的安裝位置檢測器應安裝在一個平穩(wěn)的表面，安裝區(qū)應遠離氣溫變化大的地方。避免把檢測器放在窗口、通風口、烘箱等附近。避免陽光直射，遠離強磁場。放置時為檢測器以及相關HPLC系統(tǒng)留出足夠的操作空間。警告：檢測器和其后的垂直面至少保持15厘米的距離，以保證不阻礙風扇散熱。2.4電源要求檢測器電源為220V,50Hz,使用三相電源，以確保安全和正確操作。儀器要正確接地，與系統(tǒng)其他配件，如計算機、HPLC系統(tǒng)控制器、泵、自動進樣器等有共同的接地線，以避免“接地環(huán)”產生的不穩(wěn)定影響（如變化

11、的背景、高噪音等）。如有必要，可把地線接到同一根線上。警告：不要與其他大功率設備或電力震蕩系統(tǒng)（如離心機、電冰箱等）連接到同一個電源電路。2.5氣路連接1 5.1氣體供應輸入連接位于儀器后面板的氣體入口連接器可連接氣體調整器、一般氣體供應器或氣體生成儀器。對大多數(shù)情況，輸入氣壓在25bar之間可獲得最優(yōu)性能。為安全起見，當儀器使用有機溶劑時操作氣體必須使用惰性氣體如氮氣。如果混入氧氣或壓縮空氣可能會引起爆炸。氣體必須時干燥的、干凈的、沒有微粒。建議用戶在氣體供應和檢測器之間安裝氣體過濾器。2 5.2氣閥的連接氣體入口處安裝了一個電控氣閥，可自動開關控制氣體供應。當未檢測時氣閥是閉合的，在檢測器

12、不使用時防止氣流進入檢測器。打開氣閥時，按VALVE鍵開始供應氣體。當儀器未通過氣體時，不要讓溶劑輸送泵工作，檢測器處于運行狀態(tài)時，才能打開泵。3 5.3氣體出口的連接經過光學檢測室后，需要從儀器中排除的氣體（包括載氣、流動相蒸汽和溶解微粒）要經過排氣口排出。排氣口位于儀器后面板上，需要通過塑料排管連接其他排氣設備。排氣管中的氣體可能含有有機溶劑，為安全起見，要保證塑料排管正確排氣。4 6數(shù)據(jù)線連接儀器后面板的BNC提供模擬輸出信號，有010mV,01V兩個輸出信號范圍可選。3.日常操作5 1安全請遵守以下條例保證ELSDUM-3000操作安全：1 .實驗室保持良好通風以防止溶劑蒸汽積聚。2

13、.使用通風柜或其他通風設備以防止吸入排氣管逸漏的溶劑煙霧。3 .在使用可燃溶劑時避免使用明火和點火。4 .使用惰性氣體，最好是氮氣，用于含有有機溶劑的流動相的霧化。5 .請勿除去儀器的蓋子，除非在通微工作人員的指導下。6 .在除去蓋子前先切斷電源。注意：內部元件可能很燙，避免眼睛直接接觸激光。1 2操作注意事項5 .當漂移管未達到適當?shù)恼舭l(fā)溫度或霧化氣體關閉時，流動相不應開啟。否則流動相可能在漂移管中積聚。6 .只有揮發(fā)性的緩沖液允許加入到流動相中。非揮發(fā)性緩沖液的顆粒將會被檢測器作為樣品檢測，引起許多基線噪音。7 .在氣體流速設置為3L/min,且以水作為流動相，流速為1ml/min時，建議

14、設置蒸發(fā)溫度為40C。用戶可根據(jù)氣體流速設置、流動相組成以及流速來設置相應合適的蒸發(fā)溫度。1 3開機運行開啟電源后，儀器自動進入菜單模式，在此操作模式下，氣閥通常是關閉的。按MENU鍵進入運行條件設置界面。根據(jù)分析樣品的性質設置蒸發(fā)溫度，Te設置蒸發(fā)溫度，在室溫130c之間。設置完成后，按ENTER鍵進入第二頁設置F設置氣體流量。設置結束后按ENTER鍵進入運行界面，打開氣源后按RUN鍵開始蒸發(fā)溫度升溫運行，按VALVE鍵開放氣體流量計對儀器供氣。開始運行后屏幕顯示S:信號值，T:蒸發(fā)溫度，F(xiàn):氣體流量，P:氣體壓力。開機穩(wěn)定后記錄只有氣體打開時的基線1015min,觀察前面板的顯示和色譜圖的

15、信號輸出，基線必須是穩(wěn)定的、低噪音。如果基線不穩(wěn)定和/或漂移，儀器可能還沒有達到設定的溫度。在分析柱連接到檢測器前，先用流動相沖洗分析柱。沖洗的時間長短取決于分析柱存儲時間和曾經使用的樣品和流動相的類型。在連接到ELSDf確定分析柱沒有硅膠“顆?！被蚱渌廴疚锵疵撓聛怼７駝t會引起基線噪聲和波動，ELSDUM-3000會很靈敏地檢測污染物。將HPLC泵開啟，調節(jié)到所需的流速。請不要超過推薦的最大溶劑流速。如有需要時，請檢查連接是否有泄漏，并擰緊接頭。觀察顯示面板上的信號輸出，并記錄基線。在泵打開時信號初始升高之后，幾分鐘內信號水平應回落到接近于只有氣體打開時的信號水平。如果經充分平衡時間之后信號

16、仍舊高，流動相可能被污染（柱的顆粒，緩沖液，等等），或者是溫度或者是氣體流量設置太低，使得流動相沒有達到最佳蒸發(fā)。采取適當措施，讓系統(tǒng)重新平衡幾分鐘。系統(tǒng)整個平衡好后就可以進樣了。1 .4關機操作在確認色譜柱清洗完后，先關閉流動相，允許只通氣體，持續(xù)大約10分鐘的時間，以清除剩余的液滴。檢測器關機操作：按MENU停止蒸發(fā)飄移管加熱程序；關閉壓縮機氣體輸出閥門或氮氣輸出閥門，待壓力完全消失后關VALVE;最后關閉檢測器電源。注意：如果ELSD在幾天內不會使用，請將柱出口后霧化器進口斷開。重新連接前請沖洗分析柱。2 .日常維護和清潔3 1日常維護蒸發(fā)光散射檢測器不需要專門人員去維護，每次使用完請排

17、出儀器中的腐蝕性溶劑和包含改性劑的溶劑，否則將堵塞霧化器或降低儀器的性能。為保證ELSD的最佳性能，需要適當?shù)木S護霧化系統(tǒng)。2 1.1霧化器維護下列維護工作在正常使用期間至少每月完成一次，如果發(fā)現(xiàn)基線噪音變大，請多重復幾次。1 直接把HPLC泵接到檢測器上，不連色譜柱2 設置蒸發(fā)溫度為100C3 設置氣體流量為：ml/min1 流速設置為iml/min,用丙酮沖洗檢測器30min2 流速設置為iml/min,用甲醇沖洗檢測器30min3 流速設置為iml/min,用水沖洗檢測器30min所有步驟完成后，此程序可使儀器處于初始操作水平。如果霧化器因為沒有在適當?shù)臅r間間隔內完成維護或因為其他原因被

18、堵塞，首先應嘗試用此程序去補救，必要時可疏通霧化器。1.2激光光源的更換光源部件是特別設計用來優(yōu)化儀器信噪比的。ELSDUM3000采用的是半導體激光器，更換激光器時使用指定的部件，如果使用其他部件可能在安裝、調試方面無法進行，或者降低、損害儀器的性能。如果激光光源需要更換，請與通微公司聯(lián)系。警告：打開外蓋或燈光通道門（儀器后面）的情況下，千萬不要操作儀器，因為在檢測器有幾個區(qū)域存在高壓電，可能會引起身體的傷害并損壞儀器。注意：光源產生高亮度的輻射，會對人眼和皮膚產生危害，不要讓眼睛暴露在強光束下。2日常清潔儀器的外部不需要仔細清潔，但請保持干凈。清潔時用沾有肥皂水或非腐蝕性清潔產品的軟紙或軟

19、毛巾擦拭。用戶不需要做儀器內部清潔，如果有需要，請與通微公司聯(lián)系。4.2.1流通渠道清潔只要遵循儀器開關程序，儀器會按照自身設計進行內部流通渠道清潔。4.2.2霧化器清潔必須保持霧化器的清潔，這樣才能使流動相有好的霧化效果。一段時間后，由于內部結晶或顆粒的影響，霧化器可能會被堵塞。參照霧化器維護項下操作步驟清潔霧化器。如果清洗之后，霧化器仍然堵塞,請與通微公司聯(lián)系。2.3蒸發(fā)室清潔這部分不需要用戶來做，如果需要維護必須由經認可的技術工程師完成。2.4檢測室清潔這部分不需要用戶來做，如果需要維護必須由經認可的技術工程師完成。5.診斷和故障排除1檢測器故障癥狀解決方法打開檢測器后屏幕尤顯小.檢查電

20、源線是否連接，電壓是否正常。.檢查保險絲是否損壞，如果以損壞請更換同一型號保險絲。沒有氣壓.確認儀器的氣體供應連接正確。.確認氣閥打開。.確認供應氣壓至少是儀器要求的最小值。無檢測信號輸出.確認信號線連接正常。.關閉儀器和工作站再打開。靈敏度過低000000000000 .核實氣體供應連接正確沒有漏氣。111111111111 .確保蒸發(fā)溫度值設置不要太高。222222222222 .確保霧化溫度值設置不要太高?；€不穩(wěn).檢查氣體質量。.檢查溶劑質量，是否使用溶劑改性齊1。.檢測器沒肩充分平衡，讓檢測器充分平衡。.漂移管溫度設置不當，重新設置。5.流動相混合不當引起蒸發(fā)不當，更正流動相比例。雜

21、峰.確認使用干凈、惰性氣體。.漂移管溫度和氣體流量設置不當，重新設置。.更換新鮮的、高質量的流動相4,霧化器可能部分堵塞，清洗霧化器.漂移管和光室可能污染，請與通微公司聯(lián)系。蒸發(fā)溫度和霧化溫度沒有達到設定值.漂移管和霧化室的溫度傳感器可能需要更換。.確保儀器設置了止確的交流電壓。.加熱保險絲可能需要更換，請與通微公司聯(lián)系。5.2基線噪聲大癥狀解決方法A噪音來自于分析柱：分析柱連接意流動相霧化器氣體開著激光開著結果：與分析柱斷開后噪音消失1.分析柱中有硅膠顆粒或其他填料流出。更換此污染的分析柱B噪音來自于流動相分析柱斷開流動相霧化器氣體開著激光開著.當前的漂移管溫度和氣體流量設置可能不能為流動相

22、提供足夠的蒸發(fā)。重新設置霧化溫度和蒸發(fā)溫度。.霧化器和/或漂移管可能污染了。參考清洗程序。結果：泵關閉后噪音消失.流動相可能有顆粒污染。過濾流動相或用新鮮流動相替代。.流動相中存在過量氣泡。流動相脫氣。.泵也可能是噪首的來源。檢查泵的脈沖。確定泵已經完全清除氣泡。如需要時在加入脈沖阻尼器。檢查泵的閥和墊圈，必要時更換。C噪音來自于氣體分析柱斷開流動相關閉著霧化器氣體開著激光開著結果：氣體關閉后噪音消失.氣體供應源可能被污染了顆粒。使用質量更好/更純的氣體替換氣源。.霧化器、漂移管、和/或光池可能需要清潔。參考清洗程序。D噪音來自于光池分析柱斷開流動相關著霧化器氣體關著激光開著結果：激光關閉后，噪音消失.檢測器的光池或激光光源需要清洗。詳情請聯(lián)系通微公司。.檢查是否數(shù)據(jù)通訊電纜造成噪音。E噪音來自于電子設備與分析柱的連接斷開流動相關著氣體關著激光關著結果：基線噪音在上述條件下仍不消失1.可能是電路問題。請與通微公司聯(lián)系。5.3系統(tǒng)故障癥狀原因解決方法無峰被檢測在當前檢測條件下，樣品是揮發(fā)性的。化合物低于檢測限。樣品被保留在分析柱上。檢測器輸出信號未適當調零。自動進樣器針頭沒有提取適量的樣品，或樣品環(huán)堵塞。半揮發(fā)性化合物