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文檔簡介

1、血小板檢查血小板檢查檢驗系臨檢教研室檢驗系臨檢教研室 xx1感謝你的觀看2019年9月13目的要求目的要求掌握:血小板計數的原理、方法、質量掌握:血小板計數的原理、方法、質量控制、參考值、方法學平價及臨床意義??刂?、參考值、方法學平價及臨床意義。重點重點 : 血小板計數血小板計數難點難點: 血小板形態(tài)血小板形態(tài)2感謝你的觀看2019年9月13一、概述一、概述3感謝你的觀看2019年9月13(一)血小板的生成(一)血小板的生成造血多能干細胞造血多能干細胞TPO調控調控分化分化原巨核細胞原巨核細胞促進巨核細胞祖細胞增促進巨核細胞祖細胞增殖、分化、成熟與釋放殖、分化、成熟與釋放plt 進入血液進入血

2、液Plt 2/3在循環(huán)血,其余貯存于脾。在循環(huán)血,其余貯存于脾。4感謝你的觀看2019年9月13(二)血小板的破壞(二)血小板的破壞血小板的平均壽命為血小板的平均壽命為714天,具有止血功天,具有止血功能僅開始能僅開始2天。衰老的血小板在單核巨噬細天。衰老的血小板在單核巨噬細胞破壞,主要在脾破壞。胞破壞,主要在脾破壞。脾池化脾池化:全身約有:全身約有1/3的血小板滯留于脾竇的血小板滯留于脾竇和脾髓的細胞間,血小板在脾內的這種滯和脾髓的細胞間,血小板在脾內的這種滯留現象即留現象即“脾池化脾池化”,脾池中的血小板和,脾池中的血小板和循環(huán)池中的血小板可以互換。循環(huán)池中的血小板可以互換。5感謝你的觀看

3、2019年9月13(三)血小板檢測常用項目(三)血小板檢測常用項目1、血小板計數、血小板計數 (PLT):手工單項或血液手工單項或血液分析儀多項檢測分析儀多項檢測2、血小板平均體積(、血小板平均體積(MPV)3、血小板分布寬度、血小板分布寬度(PDW) 4、血小板比積、血小板比積(PCT) 血液分析儀測血液分析儀測6感謝你的觀看2019年9月13二、血小板計數二、血小板計數(手工法)(手工法)7感謝你的觀看2019年9月13(一)原理(一)原理將血液稀釋一定倍數,充入計數池內計數,將血液稀釋一定倍數,充入計數池內計數,計算出每一升血中血小板數。稀釋液破壞計算出每一升血中血小板數。稀釋液破壞RB

4、C, 固定固定Pt并防止聚集。并防止聚集。8感謝你的觀看2019年9月13(二)器材(二)器材光學顯微鏡;血球計數板、光學顯微鏡;血球計數板、Hb吸管、試管、采血針吸管、試管、采血針等。等。(三)試劑(三)試劑:下列試劑任選一種:下列試劑任選一種1.草酸銨稀釋液:草酸銨草酸銨稀釋液:草酸銨1.0g,EDTA-Na2 0.012g,蒸,蒸餾水加至餾水加至100mL.首選試劑。首選試劑。2.許汝和稀釋液(復方尿素稀釋液):尿素許汝和稀釋液(復方尿素稀釋液):尿素10g,枸,枸櫞酸鈉櫞酸鈉0.5g,40%甲醛甲醛0.1mL蒸餾水加至蒸餾水加至100mL。過濾冰箱保存。過濾冰箱保存。9感謝你的觀看20

5、19年9月13(四)操作(四)操作1.在小試管中加入在小試管中加入plt稀釋液稀釋液0.38mL。2.取末梢血取末梢血20L加入試管中,迅速搖勻。加入試管中,迅速搖勻。室溫放置室溫放置10分鐘。分鐘。3.充池,靜置充池,靜置1015分鐘。分鐘。4.高倍鏡下計數中央大方格中四角及正中共高倍鏡下計數中央大方格中四角及正中共5個中方格內的個中方格內的plt數。數。10感謝你的觀看2019年9月13(五)計算(五)計算血小板數血小板數/L=5個中方格內血小板數(個中方格內血小板數(N) 51020106/L =5個中方格內血小板總數個中方格內血小板總數109/L(六)結果報告(六)結果報告 PLT:

6、109/L11感謝你的觀看2019年9月13(七)注意事項(七)注意事項 1.全部用具和稀釋液要特別清潔,防塵、防全部用具和稀釋液要特別清潔,防塵、防菌,以免計數時誤認。菌,以免計數時誤認。2.針刺要深,吸血及稀釋動作要快,防聚集。針刺要深,吸血及稀釋動作要快,防聚集。3.同時做多項檢查時,優(yōu)先采同時做多項檢查時,優(yōu)先采plt計數之血。計數之血。4.充池前應充分搖勻,充池后需靜置充池前應充分搖勻,充池后需靜置10分鐘分鐘以上待以上待plt全部下沉后再計數。全部下沉后再計數。1h內完成。內完成。12感謝你的觀看2019年9月13(八)方法學平價(八)方法學平價1.草酸銨法對草酸銨法對RBC破壞力

7、強,使視野清晰,破壞力強,使視野清晰,plt形態(tài)清楚,是全國臨床檢驗操作規(guī)程推形態(tài)清楚,是全國臨床檢驗操作規(guī)程推薦方法。由于薦方法。由于Plt體積小,易粘附、聚集及體積小,易粘附、聚集及破壞等,結果不甚理想。破壞等,結果不甚理想。2.復方尿素法優(yōu)點是復方尿素法優(yōu)點是plt脹大易辨認,但不脹大易辨認,但不能完全溶解能完全溶解RBC,且尿素易分解,試劑保,且尿素易分解,試劑保存時間短。存時間短。13感謝你的觀看2019年9月133.血液分析儀法可同時測血液分析儀法可同時測MPV、PDW等多等多個指標,快速,臨床適用。但不能鑒別紅個指標,快速,臨床適用。但不能鑒別紅細胞碎片、灰塵等與細胞碎片、灰塵等

8、與plt大小相似之物,故大小相似之物,故計數誤差大。當直方圖出現變化時,應用計數誤差大。當直方圖出現變化時,應用顯微鏡計數法校準之。顯微鏡計數法校準之。14感謝你的觀看2019年9月134.流式細胞儀法:用血小板單克隆抗體染色流式細胞儀法:用血小板單克隆抗體染色標記血小板,根據熒光強度和散射光強度,標記血小板,根據熒光強度和散射光強度,用獨立的流式細胞儀檢測可得到準確性極用獨立的流式細胞儀檢測可得到準確性極高的血小板數。流式細胞儀法式目前血小高的血小板數。流式細胞儀法式目前血小板計數參考方法。板計數參考方法。15感謝你的觀看2019年9月135.相差顯微鏡法:相差顯微鏡下,血小板立相差顯微鏡法

9、:相差顯微鏡下,血小板立體感增強,有助于識別血小板,還可照相體感增強,有助于識別血小板,還可照相后核對計數結果,作為手工法血小板計數后核對計數結果,作為手工法血小板計數的參考方法。的參考方法。(九)參考值(九)參考值:(:(100300)109/L16感謝你的觀看2019年9月13(十)質量保證(十)質量保證原則是:避免血小板被激活、破壞,避免原則是:避免血小板被激活、破壞,避免雜物污染。雜物污染。1.檢測前檢測前:采血要順暢,抗凝劑選用合適,:采血要順暢,抗凝劑選用合適,儲存時間適當;儲存時間適當;2.檢測中檢測中:手工法計數要定期檢查稀釋液質:手工法計數要定期檢查稀釋液質量,儀器法要質控合

10、格;量,儀器法要質控合格;17感謝你的觀看2019年9月133.檢測后:檢測后:(1)用同一份標本制備學血涂片染色精簡)用同一份標本制備學血涂片染色精簡觀察血小板數量、大小、分布情況,并注觀察血小板數量、大小、分布情況,并注意有無異常增多的紅、白細胞碎片。意有無異常增多的紅、白細胞碎片。(2)用參考方法核對。)用參考方法核對。(3)同一份標本)同一份標本2次計數誤差要次計數誤差要10%。18感謝你的觀看2019年9月13(十一)臨床意義(十一)臨床意義生理變化:生理變化:新生兒新生兒嬰兒,出生后嬰兒,出生后3個月達成人水平。個月達成人水平。晨間晨間午后,春季午后,春季冬季,毛細血管冬季,毛細血

11、管6.4fL,出血,出血發(fā)生率也低。發(fā)生率也低。26感謝你的觀看2019年9月13四、血小板分布寬度四、血小板分布寬度(PDW)和血小板比積和血小板比積(PCT)27感謝你的觀看2019年9月131 PDW:是血液分析儀對血小板分布情況是血液分析儀對血小板分布情況進行數據處理得到的血小板體積的變異系進行數據處理得到的血小板體積的變異系數。數。2 PCT:是血小板計數值和是血小板計數值和MPV經過計算經過計算得到的,其值的大小與得到的,其值的大小與PLT和和MPV值有關。值有關。 PCT = PLTMPV28感謝你的觀看2019年9月133、參考值、參考值: PDW:15.5%18.1% PCT

12、: 成人:成人:0.108%0.282% 115歲兒歲兒童:童:0.221%0.406%4、臨床意義:、臨床意義: 暫未用于臨床,須與其他參數聯合應用暫未用于臨床,須與其他參數聯合應用 29感謝你的觀看2019年9月13五、血小板形態(tài)檢查五、血小板形態(tài)檢查30感謝你的觀看2019年9月13形態(tài)檢查內容形態(tài)檢查內容血小板大?。河袩o巨大血小板或小型血血小板大?。河袩o巨大血小板或小型血小板;小板;形態(tài):胞質的顏色,顆粒有無、分布、形態(tài):胞質的顏色,顆粒有無、分布、粗細,空泡;粗細,空泡;PLT分布。分布。31感謝你的觀看2019年9月13(一一)正常形態(tài)正常形態(tài)1.53m,呈圓形、橢,呈圓形、橢圓形

13、、逗點形或不規(guī)則圓形、逗點形或不規(guī)則形;胞質呈淡藍或粉紅,形;胞質呈淡藍或粉紅,中心有若干細小紫紅色中心有若干細小紫紅色顆粒,無細胞核,血片顆粒,無細胞核,血片上上35成群。成群。32感謝你的觀看2019年9月13血小板血小板 (血涂片)(血涂片)33感謝你的觀看2019年9月1334感謝你的觀看2019年9月13(二二)異常形態(tài)異常形態(tài) 1、大小異常、大小異常(1)大血小板:直徑)大血小板:直徑47m,巨型血小板直,巨型血小板直徑徑7.5m。見于。見于ITP、巨大血小板綜合征、巨大血小板綜合征、脾切除等。脾切除等。(2)小血小板:直徑)小血小板:直徑1.5m,主要見于缺鐵,主要見于缺鐵貧、再

14、障等。貧、再障等。35感謝你的觀看2019年9月13巨大血小板巨大血小板36感謝你的觀看2019年9月132.形態(tài)異常形態(tài)異常(1)幼稚形:顆粒少。)幼稚形:顆粒少。(2)老年形)老年形:邊緣不規(guī)則,顆粒粗,呈離心邊緣不規(guī)則,顆粒粗,呈離心分布,有空泡。分布,有空泡。(3)病理幼稚形:體積大,胞質淡藍,幾)病理幼稚形:體積大,胞質淡藍,幾乎無顆粒。乎無顆粒。37感謝你的觀看2019年9月13(4)病理刺激形:體積增大,形態(tài)不一,)病理刺激形:體積增大,形態(tài)不一,胞質呈淡藍胞質呈淡藍/紫紅,顆粒多而大小一致。紫紅,顆粒多而大小一致。(5)退化形:大小、形態(tài)不一,有大空泡,)退化形:大小、形態(tài)不一,有大空泡,無顆?;蝾w粒聚集。無顆?;蝾w粒聚集。正常人異常正常人異常plt10%才有意才有意義。義。38感謝你的觀看2019年9月13(6)血小板衛(wèi)星現象:血小板粘附、圍繞)血小板衛(wèi)星現象:血小板粘附、圍繞于中性粒細胞(或偶爾粘附于單核細胞)于中性粒細胞(或偶爾粘附于單核細胞)的現象。偶見于的現象。偶見于EDTA抗

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