《生物技術(shù)實(shí)踐》

1、選修一 生物技術(shù)實(shí)踐專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用3. (理綜1卷)下列關(guān)于通過發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸的敘述，錯(cuò)誤的是A.發(fā)酵時(shí)需要不斷通入無菌空氣，否則會(huì)積累乳酸B.發(fā)酵時(shí)常采用的培養(yǎng)基為液體天然培養(yǎng)基C.從自然界分離的野生型菌株可直接用于生產(chǎn)D.當(dāng)菌體生長進(jìn)入穩(wěn)定期時(shí)，補(bǔ)充營養(yǎng)物可提高谷氨酸產(chǎn)量專題二 微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用40（寧夏）.【生物選修1生物技術(shù)實(shí)踐】（15分） （1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn)，因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。 （2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基

2、和培養(yǎng)皿進(jìn)行_（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能_。 （3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_。 （4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的_。 （5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_。 （6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。答案:（1）溫度 酸堿度 易培養(yǎng) 生活周期短 （2）滅菌 消

3、毒 損傷DNA的結(jié)構(gòu) （3）比例合適 （4）鑒定(或分類) （5）將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生. （6）滅菌33.（10分）（全國理綜2）利用微生物分解玉米淀粉生產(chǎn)糖漿，具有廣闊的應(yīng)用前景。但現(xiàn)有野生菌株對淀粉的轉(zhuǎn)化效率低，某同學(xué)嘗試對其進(jìn)行改造，以獲得高效菌株。（1）實(shí)驗(yàn)步驟：配置_（固體、半固體、液體）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的碳源應(yīng)為_。將_接入已滅菌的培養(yǎng)基平板上。立即用適當(dāng)劑量的紫外線照射，其目的是_。菌落形成后，加入碘液，觀察菌落周圍培養(yǎng)基的顏色變化和變化范圍的大小。周圍出現(xiàn)_現(xiàn)象的菌落即為初選菌落，經(jīng)分離、純化后即可達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。?）若已得到

4、二株變異菌株I和II，其淀粉轉(zhuǎn)化率較高，經(jīng)測定菌株I淀粉酶的催化活性高，菌株II的淀粉酶蛋白含量高，經(jīng)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，突變發(fā)生在淀粉酶基因的編碼區(qū)或非編碼區(qū)，可推測出菌株I的突變發(fā)生在_區(qū)，菌株II的突變發(fā)生在_區(qū)。答案：（1）固體、玉米淀粉；野生菌株；（誘發(fā)野生菌株發(fā)生基因突變）對野生菌株進(jìn)行誘變；（透明圈）淺色范圍大；（2）編碼區(qū)、非編碼區(qū)6. （安徽）下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白膝培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105 、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1ml，分別涂布于各組平板上C將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板倒置，370

5、C恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)D確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)3（重慶）下列有關(guān)大腸桿菌的敘述，正確的是A大腸桿菌以復(fù)制方式進(jìn)行繁殖，其擬核是一個(gè)環(huán)狀DNA分子B在含葡萄糖和乳糖的培養(yǎng)基上，大腸桿菌首先利用乳糖作碳源C用大腸桿菌工程菌生產(chǎn)干擾素時(shí)應(yīng)及時(shí)添加核酸等生長因子D處于對數(shù)期的大腸桿菌常作為生產(chǎn)用的菌種和科研的材料專題三 植物組織培養(yǎng)技術(shù)34（山東）（8分）（生物一生物技術(shù)實(shí)踐）人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)人參皂苷的大致流程如下：請回答：（1）配制誘導(dǎo)愈傷組織的固體培養(yǎng)基，分裝后要進(jìn)行 。 接種前，要對人參根進(jìn)行 。（2）用

6、于離體培養(yǎng)的根切塊，叫做 。培養(yǎng)幾天后發(fā)現(xiàn)少數(shù)培養(yǎng)基被污染，若是有顏色的絨毛狀菌落，屬于 污染；若是有光澤的黏液狀菌落，屬于 污染。（3）用少量 酶處理愈傷組織，獲取單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，可有效提高人參皂苷合成量。（4）人參皂苷易溶于水溶性（親水性）有機(jī)溶劑，從培養(yǎng)物干粉中提取人參皂苷宜選用 方法，操作時(shí)應(yīng)采用 加熱。答案：（1）滅菌 消毒（2）外植體 真菌（霉菌） 細(xì)菌（3）果膠（4）萃?。ń。?水浴專題四 酶的研究與應(yīng)用3（江蘇）下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是 A固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢明顯B固定化酶的應(yīng)用中，要控制好pH、溫度和溶解

7、氧C利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥，需提供適宜的營養(yǎng)條件 D利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類的作用只是作為反應(yīng)底物22（江蘇多選）加工橘子罐頭，采用酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò))，會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò)，可減少污染。下列生長在特定環(huán)境中的4類微生物，可以大量產(chǎn)生所用酶的有 A生長在麥麩上的黑曲霉 B生長在酸奶中的乳酸菌C生長在棉籽殼上的平菇 D生長在木屑上的木霉32.（17分）（全國理綜2）請用所給的實(shí)驗(yàn)材料和用具，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證哺乳動(dòng)物的蔗糖酶和淀粉酶的催化作用具有專一性。要求完成實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)步驟、預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果、得出結(jié)論，并回答問題。實(shí)驗(yàn)材料與用具：適宜濃度的蔗糖酶、唾液

8、淀粉酶、蔗糖、淀粉四種溶液，菲林試劑、試管、37恒溫水浴鍋，沸水浴鍋。（1）若“+”代表加入適量的溶液，“”代表不加溶液，甲、乙等代表試管標(biāo)號(hào)，請用這些符號(hào)完成下表實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，請?jiān)诖痤}卡上作答。 溶液試管蔗糖溶液淀粉溶液蔗糖酶溶液唾液淀粉酶溶液甲+               （2）實(shí)驗(yàn)步驟：按照上表中的設(shè)計(jì)，取試管、加溶液。（3）結(jié)果預(yù)測：_。（4）結(jié)論：_。（5）在上述試驗(yàn)中，如果僅將37恒溫水浴鍋的溫度調(diào)到20。而在其他條件不變的情況下重做上

9、述實(shí)驗(yàn)，出現(xiàn)磚紅色試管中的顏色會(huì)比37時(shí)的淺，其原因是_。32、答案：（1） 溶液試管蔗糖溶液淀粉溶液蔗糖酶溶液唾液淀粉酶溶液甲+乙+丙+丁+（2）混勻，37恒溫水浴一段時(shí)間；取出試管，分別加入適量的斐林試劑，混勻，沸水浴一段時(shí)間；觀察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（3）含有蔗糖和淀粉酶溶液的試管（試管甲），以及含有淀粉和淀粉酶溶液的試管（試管乙）中出現(xiàn)磚紅色沉淀，其他試管中不出現(xiàn)磚紅色沉淀；（4）（哺乳動(dòng)物的蔗糖酶和淀粉酶）酶的催化作用具有專一性；（5）20低于酶的最適溫度，酶活性低，水解產(chǎn)生的還原糖少。31(理綜1卷)（10分）桃果實(shí)成熟后，如果軟化快，耐貯運(yùn)性就會(huì)差。下圖表示常溫下A、B兩個(gè)品

10、種桃果成熟后硬度等變化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。據(jù)圖回答：（1）該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示桃果實(shí)成熟后硬度降低，其硬度降低與細(xì)胞壁中的 降解有關(guān)，該物質(zhì)的降解與 的活性變化有關(guān)，也與細(xì)胞壁中的 降解有關(guān)，該物質(zhì)的降解與 的活性變化有關(guān)。（2）A、B品種中耐貯運(yùn)的品種是 。（3）依據(jù)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測，桃果實(shí)采摘后減緩變軟的保存辦法應(yīng)該是 ，因?yàn)?。（4）采摘后若要促使果實(shí)提前成熟，科選用的方法有 和 。（5）一般來說，果實(shí)成熟過程中還伴隨著綠色變淺，其原因是 。答案：（10分）（1）纖維素，纖維素酶，果膠質(zhì)，果膠酶（2）A（3）適當(dāng)降低溫度，低溫可降低有關(guān)酶的活性，延緩果實(shí)軟化（4）用乙烯進(jìn)行處理，適當(dāng)提高貯存溫度（5）葉

11、綠素含量降低31（江蘇）(6分)酶解法制備原生質(zhì)體的原理是利用酶溶液對細(xì)胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛(以植物為食)消化腺中提??；果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果，某實(shí)驗(yàn)小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表。請回答有關(guān)問題。 試管編號(hào)項(xiàng)目IV 蒸餾水(mL)2O1111 緩沖液(mL)0210.50.50.5果膠酶液(mL)O0O0.5O0蝸牛酶液(mL)O0OO0.50纖維素酶液(mL)0O0O00.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果(綠色深淺程度)+ + + + + + +(注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無顯著變化)(1

12、)實(shí)驗(yàn)過程中，需要輕搖試管，其目的是 ，使原生質(zhì)體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺。(2)從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有 等多種酶。該實(shí)驗(yàn)中 是空白對照組，其設(shè)置意義是 。(3)用網(wǎng)篩過濾原生質(zhì)體到離心管內(nèi)，離心后收集沉淀物，并用 洗滌。(4)原生質(zhì)體是否符合要求還需進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢驗(yàn)的方法是 。答案：(6分)(1)為了使細(xì)胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果 (2)果膠酶和纖維素酶I、排除無關(guān)變量的干擾 (3)等滲溶液 (4)低滲漲破法專題五 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)23（江蘇多選）下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有 A提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)

13、都需用蒸餾水漲破細(xì)胞 B用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)C蛋白質(zhì)提取和分離過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNAD蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化38. （廣東A卷）（10分）生物技術(shù)實(shí)踐（1）商品化植酸酶主要來自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過程中，常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板，植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生 ，可根據(jù)其大小選擇目的菌株，所得菌株需要進(jìn)一步測定植酸酶活性?；钚詼y定可以植酸鈉作為底物，活性可用一定條件下單位時(shí)間 表示。（2）利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖中的主要成分為 ；中包含多種酸酶等多種蛋白質(zhì)。請寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依