微生物檢驗原始記錄(大腸菌群)

1、檢驗 原始 記 錄編號：報告類別：微生物共頁3 / 6項目： 大腸菌群 coliforms樣品名稱：樣品狀態(tài)： 符合檢驗要求； 其他檢驗地點：樣品編號： 環(huán)境條件：實驗依據(jù)與步驟 GB4789.3-2016固體和半固體樣品：稱取 25g 樣品置盛有 225ml 生理鹽水或磷酸鹽緩沖液的無菌均質(zhì)容器均質(zhì)，或放入盛有 225ml 稀釋液的無菌均質(zhì)袋中拍擊式均質(zhì)器拍打，制成為 1:10 樣品勻液。依次進(jìn)展 10 倍遞增稀釋。液體樣品：以無菌吸管吸取 25ml 樣品置盛有 225ml 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶瓶預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠中混勻，為 1:10 樣品勻液。樣品稀釋 樣品勻液的 ph

2、 應(yīng)在 6.5-7.5 之間，必要時分別用 1mol/lNaOH 或 1mol/lHcL 調(diào)節(jié)。取1mL110 稀釋勻液沿管壁緩緩注入9ml 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌試管中注意吸管或吸頭尖端不要觸與稀釋液面，振搖試管或換用一支無菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成 1:100 樣品勻液。按上述操作順序做 10 倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支 1mL 滅菌吸量管。從樣品勻液制備到樣品接種完畢，全過程不得超過 15min。每個樣品，選擇 3 個適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液液體樣品可以選擇原液，每個稀釋度接種 3 管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨LST肉湯大腸菌群測定：如果初發(fā)酵試驗9 超過 1ml，那么

3、用雙料 LST 肉湯管法 36±1 培養(yǎng) 24h±2h，觀察倒管是否有氣泡產(chǎn)生。產(chǎn)氣者進(jìn)展復(fù)發(fā)酵試驗，未產(chǎn)氣那么繼續(xù)培養(yǎng)至 48±2h，產(chǎn)期進(jìn)展復(fù)發(fā)酵試驗。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。復(fù)發(fā)酵試驗證實試驗用接種環(huán)從產(chǎn)氣的 LST 肉湯管中分別取培養(yǎng)物 1 環(huán)，移種于煌綠糖膽鹽肉湯BGLB管中，36±1培養(yǎng) 48h±2h，觀察產(chǎn)氣情況。數(shù)據(jù)分析與結(jié)果一、 菌落計數(shù)根據(jù)證實為大腸菌群的陽性管數(shù)，查 MPN 檢索表，報告大腸菌群的最可能數(shù)。二、緩沖液1. 磷酸鹽緩沖液磷酸二氫鉀 34.0g 蒸餾水 500ml稀釋液需要 1000ml貯存液：將 34.0g

4、磷酸二氫鉀溶于 500ml 蒸餾水中，用大約 175ml 的 1mol/l 氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) ph 至 7.2，用蒸餾水稀釋至 1000ml 后貯存冰箱。稀釋液：取貯存液 1.25ml 用蒸餾水稀釋至 1000ml 分裝于適宜容器，121高壓滅菌 15min。2. 無菌生理鹽水氯化鈉 8.5g蒸餾水 1000ml將稱取好的氯化鈉溶于1000ml 蒸餾水中， 121高壓滅菌15min。3. PH 調(diào)節(jié)劑1mol/l 氫氧化鈉溶液稱取 40g 氫氧化鈉溶于 1000ml 無菌蒸餾水中。1mol/l HcL 溶液移取 Hcl90ml，用無菌蒸餾水稀釋至 1000ml。三、微生物限量采樣方案根據(jù)GB

5、4789.1-20161. 采樣方案分為二級和三級方案，二級采樣方案設(shè)有 n、c、m 值，三級采樣方案設(shè)有 n、c、m 和 M 值。n：同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù)c：最大可允許超出 m 值的樣品數(shù)m：微生物指標(biāo)可承受水平的限量值M：微生物指標(biāo)的最高安全限量值2. 例：n=5,c=2,m=1cfu/g,M=10cfu/g,即從一批產(chǎn)品中采集 5 個樣品，假設(shè) 5 個樣品的檢測結(jié)果均小于或等于 m 值1cfu/g，那么這種情況是允許的； 假設(shè)2 個樣品的結(jié)果X位于 m 值和 M 值之間1cfu/gX10cfu/g，那么這種情況也是允許的；假設(shè)有 3 個與以上樣品的檢驗結(jié)果位于 m 和 M 之間，那么這種情況是不允許的； 假設(shè)有任一樣品的檢驗結(jié)果大于 M>10cfu/g，那么這種情況也是不允許的。檢測記錄：校對：檢測日期：菌落總數(shù)檢樣原始記錄5 / 6初發(fā)酵試驗未產(chǎn)氣培養(yǎng) 48±2h稀釋液與產(chǎn)氣管稀釋液與產(chǎn)氣管稀釋液與產(chǎn)氣管試數(shù)數(shù)接結(jié)數(shù)樣種果編日日號期期時時間間檢測產(chǎn)品日期名稱時間復(fù)發(fā)酵實驗接種