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1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上生物化學(xué)單元測(cè)驗(yàn)III一、是非判斷題 (10分)1原核細(xì)胞和真核細(xì)胞中許多mRNA都是多順?lè)醋愚D(zhuǎn)錄產(chǎn)物。( )2已發(fā)現(xiàn)一些RNA前體分子具有催化活性,可以準(zhǔn)確地自我剪接,被稱(chēng)為核糖酶(ribozyme),或稱(chēng)核酶。( )3原核生物中mRNA一般不需要轉(zhuǎn)錄后加工。( )4RNA聚合酶對(duì)弱終止子的識(shí)別需要專(zhuān)一的終止因子(如 蛋白)。( )5原核細(xì)胞啟動(dòng)子中RNA聚合酶牢固結(jié)合并打開(kāi)DNA雙鏈的部分稱(chēng)為Pribnow box。( )6在蛋白質(zhì)生物合成中所有的氨酰-tRNA都是首先進(jìn)入核糖體的A部位。( )7tRNA的個(gè)性即是其特有的三葉草結(jié)構(gòu)。( )8從DNA分子的三聯(lián)體密
2、碼可以毫不懷疑的推斷出某一多肽的氨基酸序列,但氨基酸序列并不能準(zhǔn)確的推導(dǎo)出相應(yīng)基因的核苷酸序列。( )9與核糖體蛋白相比,rRNA僅僅作為核糖體的結(jié)構(gòu)骨架,在蛋白質(zhì)合成中沒(méi)有什么直接的作用。10多肽鏈的折疊發(fā)生在蛋白質(zhì)合成結(jié)束以后才開(kāi)始。( )二、名詞解釋?zhuān)總€(gè)3分,共39分)1、半保留復(fù)制2、復(fù)制叉3、Klenow片段4、前導(dǎo)鏈5、啟動(dòng)子6、內(nèi)含子7、簡(jiǎn)并密碼子(degenerate codon)8、開(kāi)放讀碼框(open reading frame)9、信號(hào)肽(signal peptide)10、鋅指(zine finger)11、亮氨酸拉鏈(leucine zipp
3、er)12、級(jí)聯(lián)系統(tǒng)(Cascade system)13、反饋抑制(Feedback inhibition)三、選擇題(10分)1下列關(guān)于因子的敘述哪一項(xiàng)是正確的:A是RNA聚合酶的亞基,起辨認(rèn)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)的作用B是DNA聚合酶的亞基,容許按53和35雙向合成C是50S核蛋白體亞基,催化肽鏈生成D是30S核蛋白體亞基,促進(jìn)mRNA與之結(jié)合E在30S亞基和50S亞基之間起搭橋作用,構(gòu)成70S核蛋白體2真核生物RNA聚合酶I催化轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是:AmRNA B45S-rRNAC5S-rRNA
4、60; DtRNA ESnRNA3下列關(guān)于原核細(xì)胞轉(zhuǎn)錄終止的敘述哪一項(xiàng)是正確的:A是隨機(jī)進(jìn)行的 B需要全酶的亞基參加C如果基因的末端含GC豐富的回文結(jié)構(gòu)則不需要亞基參加D如果基因的末端含AT豐富的片段則對(duì)轉(zhuǎn)錄終止最為有效E需要因子以外的ATP酶4下列關(guān)于真核細(xì)胞mRNA的敘述
5、不正確的是:A它是從細(xì)胞核的RNA前體核不均RNA生成的B在其鏈的3端有7-甲基鳥(niǎo)苷,在其5端連有多聚腺苷酸的PolyA尾巴C它是從前RNA通過(guò)剪接酶切除內(nèi)含子連接外顯子而形成的D是單順?lè)醋拥?核糖體上A位點(diǎn)的作用是:A接受新的氨基酰-tRNA到位 B含有肽機(jī)轉(zhuǎn)移酶活性,催化肽鍵的形成 C可水解肽酰tRNA、釋放多肽鏈 D是合成多肽鏈的起始點(diǎn)6蛋白質(zhì)的終止信號(hào)是由: AtRNA識(shí)別
6、 B轉(zhuǎn)肽酶識(shí)別C延長(zhǎng)因子識(shí)別 D以上都不能識(shí)別7下列屬于順式作用元件的是: A啟動(dòng)子 B結(jié)構(gòu)基因 C RNA聚合酶 D轉(zhuǎn)錄因子8下列屬于反式作用因子的是: A啟動(dòng)子
7、; B增強(qiáng)子 C終止子 D轉(zhuǎn)錄因子9下列有關(guān)癌基因的論述,哪一項(xiàng)是正確的:A癌基因只存在病毒中 B細(xì)胞癌基因來(lái)源于病毒基因 C癌基因是根據(jù)其功能命名的
8、; D細(xì)胞癌基因是正?;虻囊徊糠?0下列何者是抑癌基因 Aras基因 Bsis基因 CP53基因 Dsrc基因四、簡(jiǎn)答題(41分)1、在復(fù)制時(shí)DNA解螺旋影響的超螺旋密度。在DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶不在的時(shí)候,復(fù)制叉前面的DNA過(guò)分超螺旋,而復(fù)制叉后面的DNA螺旋不足。復(fù)制叉前面
9、的DNA超螺旋密度如果超過(guò)十014復(fù)制叉將停止前進(jìn)。假定一個(gè)6000 bp的質(zhì)粒在體外以雙向復(fù)制而反應(yīng)體系中沒(méi)有拓?fù)洚悩?gòu)酶。質(zhì)粒原先的 =-0.06,問(wèn)在復(fù)制叉停止前進(jìn)以前每個(gè)復(fù)制叉多少堿基對(duì)被解螺旋并復(fù)制?假定每個(gè)復(fù)制叉運(yùn)動(dòng)速度相同,且體系中存在著除了拓?fù)洚悩?gòu)酶以外的所有DNA延長(zhǎng)所需的成分。(6分)2、質(zhì)粒(plasmids) 為什么可作為載體DNA?(5分)3、何謂cDNA文庫(kù)?如何建立cDNA文庫(kù)?(5分)4、敘述DNA聚合酶,RNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA復(fù)制酶所催化的反應(yīng)的三個(gè)共同點(diǎn)。指出多核苷酸磷酸化酶與它們的相似點(diǎn)和不同點(diǎn)。5、一個(gè)雙螺旋DNA片斷的模板鏈含有順序:(5'
10、;)GTTAACACCCCTGACTTCGCGCCGTCG (a)寫(xiě)出從這條鏈轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的 mRNA的堿基順序; (b)從(a)中的 mRNA的 5'末端開(kāi)始翻譯產(chǎn)生的肽鏈的氨基酸順序是什么; (c)如果這條DNA的互補(bǔ)鏈被轉(zhuǎn)錄和翻譯,產(chǎn)生的氨基酸順序和 (b)中的一樣嗎?解釋你的答案的生物學(xué)重要性。(6分)6、甘氨酸的4個(gè)密碼子是GGUGGCGGA和GGG,請(qǐng)寫(xiě)出它們所有可能的反密碼子。 (6分)(a)根據(jù)你的答案決定甘氨酸密碼子特異性是密碼子的哪幾個(gè)位置? (b)這些密碼子反密碼子配對(duì)中哪個(gè)配對(duì)中有擺動(dòng)堿基? (c)哪些密碼子一反密碼子配對(duì)所有三個(gè)位置都是WatsonCrick配對(duì)?
11、7、大腸桿菌細(xì)胞被培養(yǎng)在以葡萄糖為惟一碳源的介質(zhì)中,突然補(bǔ)加色氨酸后細(xì)胞被繼續(xù)培養(yǎng),把培養(yǎng)時(shí)間劃分為每30min一段。請(qǐng)定量地介紹當(dāng)生長(zhǎng)條件改變時(shí),在下列條件下,細(xì)胞中色氨酸合成酶活性數(shù)量的變化。 (7分)(a)Trp mRNA是穩(wěn)定的(需幾小時(shí)才能緩慢降解); (b)Trp mRNA被迅速降解,但色氨酸合成酶是穩(wěn)定的; (c)Trp mRNA和色氨酸合成酶比通常更迅速地被降解。 8、普通原核阻遏子對(duì)特異DNA結(jié)合順序和非特異DNA順序的親和力差104106倍,每細(xì) 胞有10個(gè)阻遏子分子就足以保證高水平阻遏。推測(cè)帶有同樣特異性的阻遏子在人細(xì)胞中的情況:多少拷貝的阻遏子分子才能達(dá)到原核細(xì)胞的阻遏
12、水平(提示,大腸桿菌的基因組含4.7×106bp,人的單倍體基因組有2.4×109 bp)。(6分)參考答案是非題答案1、錯(cuò)。2、對(duì)。3、對(duì)。4、對(duì)。5、對(duì)。6、錯(cuò)。7、錯(cuò)。8、錯(cuò)。9、錯(cuò)。10、錯(cuò)名詞解釋答案1、半保留復(fù)制(semiconservative replication):DNA復(fù)制的一種方式。每條鏈都可用作合成互補(bǔ)鏈的模板,合成出兩分子的雙鏈DNA,每個(gè)分子都是由一條親代鏈和一條新合成的鏈組成。2、復(fù)制叉(replication fork):Y字型結(jié)構(gòu),在復(fù)制叉處作為模板的雙鏈DNA解旋,同是合成新的DNA鏈。3、Klenow片段(Klenow fragmen
13、t):E.coli DNA聚合酶I經(jīng)部分水解生成的C末端605個(gè)氨基酸殘基片段。該片段保留了DNA聚合酶I的5-3聚合酶和3-5外切酶活性,但缺少完整酶的5-3外切酶活性。4、前導(dǎo)鏈(leading strand):與復(fù)制叉移動(dòng)的方向一致,通過(guò)連續(xù)的5-3聚合合成的新的DNA鏈。5、啟動(dòng)子(promoter):在DNA分子中,RNA聚合酶能夠結(jié)合并導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄起始的序列。6、內(nèi)含子(intron):在轉(zhuǎn)錄后的加工中,從最初的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物除去的內(nèi)部的核苷酸序列。術(shù)語(yǔ)內(nèi)含子也指編碼相應(yīng)RNA外顯子的DNA中的區(qū)域。7、簡(jiǎn)并密碼子(degenerate codon):也稱(chēng)為同義密碼子。是指編碼相同的氨基酸的
14、幾個(gè)不同的密碼子。8、開(kāi)放讀碼框(open reading frame):DNA或RNA序列中一段不含終止密碼的連續(xù)的非重疊核苷酸密碼。9、信號(hào)肽(signal peptide):常指新合成多肽鏈中用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)夸膜轉(zhuǎn)移(定位)的N-末端氨基酸序列(有時(shí)不一定在N端)。10、鋅指(zine finger):是調(diào)控轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)因子中與DNA結(jié)合的一種基元,它由大約30個(gè)氨基酸殘基的肽段與鋅螯合形成的指形結(jié)構(gòu),鋅以4個(gè)配位鍵與肽鏈的Cys或His殘基結(jié)合,指形突起的肽段含12-13個(gè)氨基酸殘基,指形突起嵌入DNA的大溝中,由指形突起或其附近的某些氨基酸側(cè)鏈與DNA的堿基結(jié)合而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)
15、合。11、亮氨酸拉鏈(leucine zipper):這是真核生物轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白與蛋白質(zhì)及與DNA結(jié)合的基元之一。兩個(gè)蛋白質(zhì)分子近處C 端肽段各自形成兩性-螺旋,-螺旋的肽段每隔7個(gè)氨基酸殘基出現(xiàn)一個(gè)亮氨酸殘基,兩個(gè)-螺旋 的疏水面互相靠攏,兩排亮氨酸殘基疏水側(cè)鏈排列成拉鏈狀形成疏水鍵使蛋白質(zhì)結(jié)合成二聚體,-螺旋的上游富含堿性氨基酸(Arg 、Lys)肽段借Arg 、Lys 側(cè)鏈基團(tuán)與DNA的堿基互相結(jié)合而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與DNA的特異結(jié)合。12、級(jí)聯(lián)系統(tǒng):在連鎖代謝反應(yīng)中一個(gè)酶被激活后,連續(xù)地發(fā)生其它酶被激活,導(dǎo)致原始調(diào)節(jié)信號(hào)的逐級(jí)放大,這樣的連鎖代謝反應(yīng)系統(tǒng)稱(chēng)為級(jí)聯(lián)系統(tǒng)。13、 反饋抑制:在代謝反
16、應(yīng)中,反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)反應(yīng)過(guò)程中起作用的酶產(chǎn)生的抑制作用。選擇題答案1、A。2、B。3、C。4、B。5、A。6、D。7、A。8、D。9、D。10、C。問(wèn)答題答案1、答:此質(zhì)粒松弛狀態(tài)的連系數(shù)Lk0= 6000(bp)10.5(bp)=571(保留整數(shù))質(zhì)粒的超螺旋密度是-0.06故它的拓?fù)溥B系數(shù)應(yīng)是: (超螺旋密度)= (LkLk0) / Lk0則Lk=571(006×571)=537 在沒(méi)有DNA拓?fù)涿富钚缘那闆r下,DNA復(fù)制解螺旋并沒(méi)有改變質(zhì)粒的Lk值,而是靠復(fù)制叉前面增加超螺旋密度來(lái)補(bǔ)償。因此,設(shè)復(fù)制停止前被解開(kāi)的螺旋數(shù)為a,則復(fù)制叉前面部分的 Lk應(yīng)為 537,故:(571a)
17、215;(1十014)=537,a=100(螺旋)復(fù)制停止前被解開(kāi)的 DNA堿基對(duì)數(shù)=100×105=1050(bp)(即約有 1050個(gè)堿基對(duì)被解螺旋)。2、答:質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外的遺傳因子,通常為雙鏈環(huán)狀的DNA。質(zhì)粒能自主地進(jìn)行復(fù)制,這 樣它才能隨著細(xì)菌細(xì)胞的分裂而穩(wěn)定的遺傳。在天然條件下,一些質(zhì)??赏ㄟ^(guò)類(lèi)似于細(xì)菌接合的方式從一宿主轉(zhuǎn)移到另一宿主細(xì)胞,這類(lèi)質(zhì)粒稱(chēng)為游離體。但這類(lèi)質(zhì)粒不適合作載體,需經(jīng)改造使之不在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移,以使危險(xiǎn)基因不致被傳遞。通過(guò)“轉(zhuǎn)化”,質(zhì)粒進(jìn)入細(xì)胞后,使受體菌獲得新的遺傳特性。因?yàn)橘|(zhì)粒上往往攜帶一些特殊的基因,如有 些質(zhì)粒上有產(chǎn)生大腸桿菌素的基因,使大腸
18、桿菌可以分泌大腸桿菌素,以殺死外來(lái)的細(xì)菌。有些質(zhì)粒上有“鈍化”抗生素如四環(huán)素的基因,使大腸桿菌在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上仍能生長(zhǎng),此稱(chēng)為抗藥性。這些特性可用于篩選獲得重組子的克隆。3、答:由于許多真核生物基因是內(nèi)含子和外顯子的嵌合體,為了建立更專(zhuān)門(mén)更特異的文庫(kù)以克 隆那些在某個(gè)器官或組織的細(xì)胞中才能表達(dá)的基因,可從這些器官或組織的細(xì)胞中分離純化出mRNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化產(chǎn)生與之互補(bǔ)的DNA,即 cDNA,將這些cDNA插入載體進(jìn)行克隆,產(chǎn)生的克隆群體叫做cDNA文庫(kù)。 如胰島素原的制備,從胰腺組織細(xì)胞中分離出胰島素原的mRNA,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,產(chǎn)生胰島素原的cDNA;將胰島素原的 cDNA插入質(zhì)粒構(gòu)成一個(gè)重組質(zhì)粒,經(jīng)轉(zhuǎn)化,重組質(zhì)??蛇M(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞,胰島素原便可在細(xì)菌細(xì)胞中合成。4、答:1)這三種酶都是從5'一3'方向合成核酸; 2)都使用模板,并以3'一5'方向指導(dǎo)核酸的合成; 3)都是使用生長(zhǎng)鏈的末端3'一OH對(duì)核苷三磷酸的一磷酸基團(tuán)發(fā)動(dòng)親核進(jìn)攻,并釋放焦磷酸。 5、答:(a)其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA序列為: 5'CGACGGCGCGAAGUCAGGG
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