植物氮素測(cè)定指標(biāo)以及方法

1、、測(cè)定與計(jì)算指標(biāo)1、測(cè)定單株分英數(shù)、單株有效穗數(shù)、株高、穗長(zhǎng)、小穗數(shù)、穗粒數(shù)、小穗粒數(shù)、千粒重、單穗穗粒重；再按莖葉、籽粒等器官分開，分別測(cè)定莖葉與籽粒的干物重與含N量；2、通過測(cè)定的指標(biāo)計(jì)算：穗粒重（穗粒數(shù)奸粒重/1000）、植株吸氮量（不同部位干物重與其含氮量（%）之積的總和）、植株含氮量（%）（植株吸氮量占整株干物質(zhì)量的百分比）、氮素干物質(zhì)生產(chǎn)效率（單位氮素生產(chǎn)的干物質(zhì)量）、氮素籽粒生產(chǎn)效率（成熟期植株單位氮素生產(chǎn)的籽粒產(chǎn)量）、氮素收獲指數(shù)（籽粒氮積累總量/植株氮素積累總量）、植株N利用效率（籽粒產(chǎn)量/地上部N素積累量）；二、總的指標(biāo)分類匯總（一株小麥實(shí)際上指的是由一粒種子長(zhǎng)出的一叢）（

2、一）與產(chǎn)量相關(guān)的形狀指標(biāo)（田間進(jìn)行）1、單株分英數(shù)：?jiǎn)沃昕偳o數(shù)；地面以下或接近地面處所發(fā)生的分枝（田間進(jìn)行，每行選擇3個(gè)處理也就是3叢，分別測(cè)出再求平均）。2、單株有效穗數(shù)：?jiǎn)沃暧行С伤氲膫€(gè)數(shù)；其中有效穗表示每穗實(shí)粒數(shù)多于5粒者為有效穗（白穗算有效穗）。（田間進(jìn)行，每行選擇3個(gè)處理也就是3叢，同上）。3、株高：（小麥根部至頂部之間的距離，不包括芒長(zhǎng)，其中芒長(zhǎng)是指穗上面尖尖的芒刺），用卷尺測(cè)量。（田間進(jìn)行，測(cè)選定的4株外加1株求平均）。（在材料收回來之后，先選擇我們所需的4株另外再加1株，共5株，將穗長(zhǎng)與小穗數(shù)測(cè)定了，再用自來水將材料（主要是莖葉部分）沖洗三遍，再用去離子水沖洗三遍；然后用吸水紙

3、吸取殘留水分，然后將材料然后放2天，等材料稍微干燥后，將之前的5株進(jìn)行人工脫粒，測(cè)定每穗的穗粒數(shù)，根據(jù)它和小穗數(shù)計(jì)算出小穗粒數(shù)，在此步驟之后便可將我們所需的4株植株分為莖葉與籽粒部分，進(jìn)行殺青烘干測(cè)定干物重與含N量了。其余的材料再放置幾天，脫粒之后測(cè)定千粒重）4、穗長(zhǎng)：每行取5穗進(jìn)行穗長(zhǎng)的測(cè)定，平均值為該株系的穗長(zhǎng)。5、小穗數(shù)：每穗上面長(zhǎng)得對(duì)稱的就是小穗數(shù)；6、穗粒數(shù)：平均每穗粒數(shù)，一般的小麥在30粒左右。7、小穗粒數(shù)：每個(gè)小穗數(shù)里面所含有的籽粒的數(shù)量，一般在1-5之間；（實(shí)際上可以二穗粒數(shù)/小穗數(shù)）8、千粒重：收獲材料晾曬干燥后（含水量約為13%以下），隨機(jī)數(shù)取1000粒稱重的平均值計(jì)算千粒

4、重；（一般在23-58g）。9、單穗穗粒重：平均每穗穗粒重，（穗粒數(shù)奸粒重/1000）。（二）與氮素利用率相關(guān)的指標(biāo)6、干物重：收獲前從每行中選取4棵植株，貼地面部分將根部剪去，整株放入大紗網(wǎng)袋。先用自來水將材料（主要是莖葉部分）沖洗三遍，再用去離子水沖洗三遍；然后用吸水紙吸取殘留水分，晾曬干燥。并將植株分為莖葉與籽粒部分，為確保脫粒過程樣品損失的減少，人工脫粒，回收穎殼、芒、莖葉和籽粒，在105c下殺青30min后，至于75c烘箱烘至包重，并測(cè)定莖葉、籽粒干重；7、含N量：樣品粉碎后過60目篩測(cè)定總N含量，采用半微量是凱氏定氮法，也就是H2SO4-H2O2消煮-半微量凱氏定氮法。具體操作步驟

5、如下：植株全氮的測(cè)定1主題內(nèi)容與適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了植株全氮測(cè)定的硫酸-過氧化氫消煮、堿化后蒸儲(chǔ)定氮的方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于禾本科植株全氮含量的測(cè)定。2引用標(biāo)準(zhǔn)GB/T603化學(xué)試劑試驗(yàn)方法中所用制劑及制品的制備GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法NY/T297-1995有機(jī)肥料全氮的測(cè)定3方法原理植株樣品用濃硫酸加雙氧水消煮，使有機(jī)氮轉(zhuǎn)化為錢鹽?？←}經(jīng)堿化后形成氨，經(jīng)蒸儲(chǔ)將氨吸收到硼酸溶液中。以甲基紅一澳甲酚綠為指示劑，用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，測(cè)定植株中的全氮含量（不包括全部硝態(tài)氮）。4試齊1J所有試劑除注明者外，均為分析純。分析用水應(yīng)符合GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法三級(jí)水的規(guī)格。

6、4.1 硫酸（GB/T625,也就是濃度為98%的濃硫酸）。4.2 30%過氧化氫（GB6684）。4.3 氫氧化鈉：40%,（m/V）溶液稱取40gM氧化鈉（GB629分析純）溶于100mL水中，溶解之后至于帶橡膠塞或軟木塞的試劑瓶中。4.4 硼酸：2%（v/m）溶液稱取20g硼酸（GB628）溶于1L約60c去離子水中，冷卻后再用稀堿（0.1mol/L）調(diào)節(jié)溶液pH至4.5,顏色大概為紅紫色。使用前每升硼酸溶液中加入甲基紅-澳甲酚綠混合指示劑20mL,并用稀酸或稀堿調(diào)節(jié)至微紅色，此時(shí)該溶液的PH值為4.5。4.5 甲基紅-澳甲酚綠混合指示劑稱取0.5魏甲酚綠（HG3-1220）和0.1g甲

7、基紅（HG3-958）于研缽中，加少量95%乙醇研磨至指示劑全溶為止，最后加95%的乙醇至100mL。4.6 硫酸標(biāo)準(zhǔn)液c（1/2H2SO4）=0.02mol/L（GB601）。配制：準(zhǔn)確量取分析純硫酸0.6ml,緩緩注入1000ml蒸儲(chǔ)水中，搖勻，冷卻。標(biāo)定：首先將硼砂配置成硼砂標(biāo)準(zhǔn)溶液。取一個(gè)潔凈且干燥的表面皿，在分析大平上準(zhǔn)確稱取0.4000g純凈硼砂（準(zhǔn)至0.0001g）,放入潔凈且?guī)РＡО舻臒校蒙倭空魞?chǔ)水沖洗表面皿，洗液一并轉(zhuǎn)入燒杯中，再加入蒸儲(chǔ)水至約40ml,加熱溶解，冷卻至室溫。將溶液定量轉(zhuǎn)移到潔凈的100ml容量瓶中，用少量蒸儲(chǔ)水洗滌燒杯3次（每次約10ml水），洗液全部

8、轉(zhuǎn)入容量瓶中，加蒸儲(chǔ)水定容至刻度線，搖勻。所得溶液即為硼砂標(biāo)準(zhǔn)溶液。取潔7的20ml移液管，用少量的硼砂溶液潤(rùn)洗3次，準(zhǔn)確移取硼砂標(biāo)準(zhǔn)溶液20.00ml于錐形瓶中，加甲基紅指示劑2d,用滴管內(nèi)盛放未確定濃度的H2SO4來滴定。滴至硼砂溶液呈微紅色時(shí)即為終點(diǎn)，記下所用H2SO4溶液的體積，平行滴定3次。計(jì)算出H2SO4溶液的準(zhǔn)確濃度（保留四位有效數(shù)字）。H2SQ計(jì)算:標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度按下式計(jì)算.C（硼砂尸m（硼砂）*1000/M（硼砂）*100C（H2SO4）=C（硼砂）*20/V（H2SO4）5儀器通常實(shí)驗(yàn)室儀器5.1 消煮管：50mL或100mL。5.2 消煮爐或可調(diào)電爐：1000W。5.3 彎

9、頸小漏斗：。2cm05.4 凱氏定氮儀：全自動(dòng)或半自動(dòng)。5.5 分析分析:感量為0.0001g。5.6 移液管：5,10,20mL05.7 表面皿、燒杯5.8 100ml容量瓶5.9 20ml錐形瓶6檢試樣的制備取風(fēng)干的實(shí)驗(yàn)室待測(cè)樣品充分混勻后，按四分法縮減至100g,粉碎，籽粒全部通過0.25mm（秸稈通過0.5mm）孔徑篩，裝入樣品瓶備用。7分析步驟7.1 試樣溶液制備稱取試樣0.3,精確至0.0001g,置于250ml三角瓶（5.1）中（勿將樣品粘附在瓶頸上）。先滴入少些水（2ml）濕潤(rùn)樣品，10min后力口5mLH2SO4（4.1）,輕輕搖勻并最好放置過夜。在管口放一彎頸小漏斗（5.3

10、）,在消煮爐上先250C消煮（溫度穩(wěn)定后計(jì)時(shí)，時(shí)間約30min）,待H2SO4分解冒出大量白煙后再升高溫度至400C,當(dāng)溶液呈均勻的棕黑色時(shí)取下。（時(shí)間約3h）,稍冷后加10滴H2O2（注1）,搖勻，并不斷搖動(dòng)凱氏瓶，以利于反應(yīng)充分進(jìn)行。冉加熱至微沸（注2）,消煮約10-20min,取下稍冷后，重復(fù)加H2O25-10滴，冉消煮。如此重復(fù)2-3次，每次添加的H2O2的量應(yīng)逐次減少，消煮到溶液呈無色或清亮后（應(yīng)該為水的顏色），再加熱約5-10min,以除盡剩余的H2O2。將消煮管取下，冷卻。并用少量水沖洗彎頸漏斗，洗液流入消煮管。將消煮液無損的洗入100mL容量瓶中，用水定容，搖勻。過濾或放置澄清

11、后供氮的測(cè)定，同時(shí)做空白試驗(yàn)以校正實(shí)際誤差。7.2 空白試驗(yàn)除不加試樣外，試劑用量和操作與測(cè)定試樣時(shí)相同。7.3 測(cè)定7.31 蒸儲(chǔ)前將配制好的氫氧化鈉（4.3）,硫酸標(biāo)準(zhǔn)液（4.6）,混合指示劑（4.5）,對(duì)定氮儀進(jìn)行充分預(yù)熱，進(jìn)行空蒸儲(chǔ)清洗管道，直至讀數(shù)穩(wěn)定。7.32 吸取上述待測(cè)液10.00mL(含NH4NZJ1mg),注入凱氏定氮儀蒸儲(chǔ)管中，參數(shù)設(shè)置后，對(duì)待測(cè)液進(jìn)行測(cè)定，其中加堿時(shí)間應(yīng)設(shè)為3S。8分析結(jié)果的表述全氮(N)含量以g/kg表示，按下式計(jì)算：全氮(N)=c(V-V0)0.014DX1000/m;c酸標(biāo)準(zhǔn)溶?的濃度，mol/L;V滴定試樣所用的酸標(biāo)準(zhǔn)液體積，ml;Vo滴定空白所用的酸標(biāo)準(zhǔn)液體積，ml;0.014N的摩爾質(zhì)量，kg/mol;m稱樣量，g;D分取倍數(shù)，定容體積/分取體積，100/10;所得結(jié)果應(yīng)保留小數(shù)點(diǎn)后三位9注意事項(xiàng)9.1 加H2O2時(shí)，要直接滴入瓶底溶液中，如果滴在瓶頸壁上，H2O2很快分解，失去氧化能力；也不要滴在小漏斗上，以免遺留的H2O2影響氮的比色測(cè)定。9.2 H2O2不宜加入過早，每次用量不可過多，加入后的消煮溫度不要過高，只要保持消煮液微沸即可。9.3 定氮儀參數(shù)設(shè)置中