植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較..課件

1、植物組織培養(yǎng)和動物植物組織培養(yǎng)和動物(dngw)細胞培養(yǎng)的比較細胞培養(yǎng)的比較比較項目比較項目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理原理細胞的細胞的 細胞細胞培養(yǎng)基性質培養(yǎng)基性質 培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有培養(yǎng)基特有成分成分 、植物激素、植物激素 葡萄糖、葡萄糖、 培養(yǎng)結果培養(yǎng)結果植物體植物體培養(yǎng)目的培養(yǎng)目的快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株無病毒植株獲得獲得全能性全能性增殖增殖(zngzh)固體固體(gt)液體液體蔗糖蔗糖動物血動物血清清細胞株、細胞系細胞株、細胞系 細胞或細細胞或細胞分泌蛋白胞分泌蛋白第一頁，共二十三頁。溫故而知新溫故而知新植物體細胞雜交植物體細胞雜

2、交(zjio)（馬鈴薯番茄馬鈴薯番茄）融合融合(rngh)(rngh)的的原生質原生質體體ABAB再再生生(zishng)出出細細胞胞壁壁植物細胞的融合植物細胞的融合雜種雜種細胞細胞AB雜雜種種植植株株脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)原生質體原生質體B原生質體原生質體A去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導導植物細胞植物細胞A植物細胞植物細胞B第二頁，共二十三頁。帶著問題帶著問題(wnt)走進課堂？走進課堂？2.2 2.2 動物細胞工程動物細胞工程(gngchng)(gngchng)第三頁，共二十三頁。自主閱讀，自主閱讀，p52第第2自然段，自然段，思考下列思考下列

3、(xili)問題：問題：什么叫什么叫動物細胞融合動物細胞融合 ？（概念（概念(ginin)(ginin)要點）要點）兩個細胞正在融合兩個細胞正在融合 受精作用受精作用 兩個兩個(lin )或多個或多個動物細胞動物細胞 一個細胞一個細胞（雜交單（雜交單核細胞）核細胞）第四頁，共二十三頁。植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較. 動物動物(dngw)(dngw)細胞融合過程示細胞融合過程示意圖意圖不同DNA的兩個(lin )細胞 滅活的病毒(bngd)有絲分裂兩個完整的雜交細胞第五頁，共二十三頁。一、動物細胞(xbo)融合（細胞(xbo)雜交）1、概念(ginin)：指兩個(lin )或多個動物細胞結合

4、形成一個細胞的過程。2、結果： 形成單核的雜交細胞3、原理：細胞膜的流動性4、誘導方式物理法：離心、振動、電激化學法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒第六頁，共二十三頁。 因為滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白質分子和脂因為滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發(fā)生融合(rngh)，不，不滅滅活的話會感染細胞，而不能誘導細胞融合?；畹脑挄腥炯毎荒苷T導細胞融合。第七頁，共二十三頁。5、過程(guchng)：動物細胞A動物細胞B誘導(yudo)，融合2個完整(wnzhng)的雜交細胞AB有絲分裂（膜融合、質融合）（核融合

5、）注意：動物細胞的融合也需要把多個兩種細胞放在一起，讓它們隨機融合后，再從中篩選雜交細胞第八頁，共二十三頁。6、意義：突破了有性雜交方法(fngf)的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。7、應用：成為研究細胞(xbo)遺傳、細胞(xbo)免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用雜交瘤技術制造單克隆抗體第九頁，共二十三頁。植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較.思考題思考題1.植物體細胞雜交時首先應用什么(shn me)方法去掉細胞壁？ 酶解法(ji f)，如纖維素酶或果膠酶2.動物細胞融合時需要進行(jnxng)去壁處理嗎？為什么？無需，因為動物細胞無細胞壁3.植物體

6、細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有哪些？離心、電激等物理方法；PEG等化學方法4.動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法嗎？能 還可以利用滅活的病毒進行誘導5.植物體細胞雜交應先進行原生質體的融合再進行組織培養(yǎng)形 成完整的雜種個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？不能第十頁，共二十三頁。植物體細胞雜交植物體細胞雜交(zjio)和動物細胞融合的比較和動物細胞融合的比較比較項目比較項目植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞融合動物細胞融合細胞融合原理細胞融合原理細胞融合的方法細胞融合的方法誘導方法誘導方法用途用途獲得獲得(hud)雜種植株雜種植株細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞膜的流動

7、性細胞膜的流動性細胞細胞(xbo)的全能性的全能性去除細胞壁去除細胞壁后誘導原后誘導原生質體融合生質體融合使細胞分散后誘導細胞使細胞分散后誘導細胞融合融合物理（離心、振蕩、電物理（離心、振蕩、電刺激）刺激）化學（聚乙二醇）化學（聚乙二醇）物理、化學方法（同左）物理、化學方法（同左）滅活的病毒滅活的病毒主要用于制備主要用于制備單克隆抗體單克隆抗體第十一頁，共二十三頁。植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較.2.動物(dngw)細胞融合的概念 動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結合形成一個(y )細胞的過程，融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞稱為雜交細胞雜交細胞。第十二頁

8、，共二十三頁。1 1、抗體抗體1.1 1.1 概念：概念： 抗體是機體受抗原抗體是機體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結合該抗原發(fā)生特異性結合的具有免疫的具有免疫(miny)(miny)功能的功能的球蛋白球蛋白 。1.2 1.2 來源：來源： B B淋巴細胞。淋巴細胞。第十三頁，共二十三頁。 B B淋巴細胞與抗體淋巴細胞與抗體(kngt)(kngt)的關系：的關系：B B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生抗體。動物動物(dngw)(dngw)體內(nèi)的體內(nèi)的B B淋巴細胞可以產(chǎn)生百萬淋巴細胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原

9、具有特種以上的抗體，每種抗體對特定的抗原具有特異性免疫作用。異性免疫作用。每一個淋巴細胞只能產(chǎn)生一種抗體。每一個淋巴細胞只能產(chǎn)生一種抗體。自主閱讀自主閱讀P52：傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么？怎樣解決這個缺陷是什么？怎樣解決這個(zh ge)問題？問題？第十四頁，共二十三頁。2.1 、單克隆、單克隆 由一個細胞由一個細胞(xbo)經(jīng)過無性繁殖經(jīng)過無性繁殖(多次有絲分裂多次有絲分裂)形形成的一個細胞群，叫一個克隆，即單克隆。成的一個細胞群，叫一個克隆，即單克隆。2.2 、單克隆抗體、單克隆抗體 由一個效應由一個效應B淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖形成的淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖形成的一

10、個細胞群產(chǎn)生一個細胞群產(chǎn)生(chnshng)的化學性質單一，特異的化學性質單一，特異性強的抗體，即單克隆抗體。性強的抗體，即單克隆抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細胞，淋巴細胞，形成細胞群。形成細胞群。第十五頁，共二十三頁。3、原理：雜交瘤細胞具有兩個親本(qn bn)的特性，即能迅速大量增殖，又能足夠數(shù)量的單一抗體。4、過程(guchng)B淋巴細胞骨髓瘤細胞(xbo)誘導融合B-B細胞B-瘤細胞瘤-瘤細胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細胞（ B-瘤細胞）克隆化培養(yǎng)抗體檢測雜交瘤細胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體第十六頁，共二十三頁。6.單克隆抗體單

11、克隆抗體(kngt)的應用：的應用：特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量(chnling)(chnling)大大 作為診斷試劑：準確識別作為診斷試劑：準確識別(shbi)(shbi)各種抗原物質，并與各種抗原物質，并與特異性結合特異性結合 優(yōu)點：優(yōu)點：準確、高效、簡易、快速準確、高效、簡易、快速用于用于運載藥物：制成運載藥物：制成“生物導彈生物導彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療治療疾病：主要用于癌癥治療5、單克隆抗體的特點：單克隆抗體的特點：第十七頁，共二十三頁。思考思考(sko)問題問題：1 1、本過程、本過程(guchng)(guchng)利用了哪些原理？利用了哪些原理？免疫原理

12、免疫原理(yunl)(yunl)，細胞融合原理，細胞融合原理(yunl)(yunl)和動物細胞培和動物細胞培養(yǎng)原理養(yǎng)原理(yunl)(yunl)這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳這樣融合成的雜交瘤細胞，繼承了雙親細胞的遺傳物質，不僅具有物質，不僅具有B B細胞分泌抗體的能力，而且還有細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領，因而可以獲得大量單克隆抗體無限增殖的本領，因而可以獲得大量單克隆抗體2 2、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B B細胞融合？細胞融合？第十八頁，共二十三頁。植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較.知識結構兩個(lin )過程動物(dngw)細胞培

13、養(yǎng)過程單克隆抗體(kngt)制備過程三個“一”一個誘導細胞融合的新方法 滅活的病毒一個新細胞雜交瘤細胞一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性 強、靈敏度高的優(yōu)勢第十九頁，共二十三頁。1、動物細胞融合的目的中最重要的是動物細胞融合的目的中最重要的是 （ ） A.克服遠源雜交不親和克服遠源雜交不親和 B.制備單克隆抗體制備單克隆抗體 C.培育新物種培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細胞生產(chǎn)雜種細胞2、 動物細胞融合過程中所用動物細胞融合過程中所用(su yn)的誘導劑的誘導劑滅活的病毒，抗原性和感染力的有無是滅活的病毒，抗原性和感染力的有無是 （ ） A.失去抗原性，具有感染力失去抗原性，具有感染力 B.具有抗原性，也具

14、有感染力具有抗原性，也具有感染力 C.失去抗原性，也失去感染力失去抗原性，也失去感染力 D.具有抗原性，失去感染力具有抗原性，失去感染力BD 第二十頁，共二十三頁。3 3、“生物導彈生物導彈”是指是指 （ ） A.A.單克隆抗體單克隆抗體 B. B.雜交瘤細胞雜交瘤細胞 C. C.產(chǎn)生產(chǎn)生(chnshng)(chnshng)特定抗體的特定抗體的B B淋巴細胞淋巴細胞 D.D.在單克隆抗體上連接抗癌藥物在單克隆抗體上連接抗癌藥物 D4、科學家們用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜科學家們用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交瘤細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量克隆交瘤細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量克隆(k ln

15、)抗體，與骨髓瘤抗體，與骨髓瘤細胞融合的是細胞融合的是 （ ） A.經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的T淋巴細胞淋巴細胞 B.未經(jīng)過免疫的未經(jīng)過免疫的T淋巴細胞淋巴細胞 C.經(jīng)過免疫的經(jīng)過免疫的B淋巴細胞淋巴細胞 D.未經(jīng)過免疫的未經(jīng)過免疫的B淋巴細胞淋巴細胞 C第二十一頁，共二十三頁。植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較.5. 單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合(rngh)后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是 （ ）淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞 B淋巴細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 雜交瘤細胞A. B.C. D. C6.動物細胞融合(rngh)和植物原生質融合(rngh)決定于 ( )A.細胞膜的流動性 B細胞膜的選擇透過性C.細胞質的流動性D細胞質酶的活性 A第二十二頁，共二十三頁。植物組織培養(yǎng)