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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)七 果蠅的雜交試驗(yàn) 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?了解伴性遺傳和常染色體遺傳的區(qū)別; 進(jìn)一步理解和驗(yàn)證伴性遺傳和分離、連鎖交換定律; 學(xué)習(xí)并掌握基因定位的方法。 二、實(shí)驗(yàn)原理 紅眼與白眼是一對相對性狀,控制該對性狀的基因(W)位于X染色體上,且紅眼(W)對白眼(w)為完全顯性。當(dāng)紅眼雌蠅與白眼雄蠅雜交時(shí),無論雌雄均為紅眼,F(xiàn)2中紅眼:白眼=3:1,但雌蠅全為紅眼,雄蠅中紅眼:白眼=1:1;反交時(shí)F1中雌蠅為紅眼,雄蠅為白眼,F(xiàn)2中紅眼:白眼=1:1,雌蠅和雄蠅中的紅眼與白眼的比例均為1:1。正常翅(Sn3)對小翅(sn3)為顯性,正常剛毛(M)對焦剛毛(m)為顯性,與紅眼(W)和白眼(w)一樣,均位于(X
2、)染色體上。利用三點(diǎn)測交的方法只需通過一次雜交和一次測交就能同時(shí)確定三個(gè)基因在染色體上的位置順序和基因的相對距離,繪出連鎖圖。讓白眼小翅焦剛毛蠅與野生型蠅雜交,F(xiàn)1雌蠅是三雜合體:表型為野生型。F1蠅是白眼焦剛毛小翅。F1代的雌雄蠅互交實(shí)際上相當(dāng)于三雜合體雌蠅與三隱性雄蠅的測交。通過對互交后代中各種表型比例的分析,就可進(jìn)行w、sn3和m等基因的定位。三、實(shí)驗(yàn)材料 野生型雄蠅、雌蠅、白眼焦剛毛小翅雌雄蠅。 四、實(shí)驗(yàn)器具和藥品 1.器具:放大鏡、顯微鏡、麻醉瓶、白瓷板、毛筆、記錄本。 2.藥品:乙醚、酒精棉球、培養(yǎng)基。 五、實(shí)驗(yàn)步驟 1.選處女蠅 選白眼焦剛毛小翅處女蠅510只,同時(shí)選野生型處女蠅
3、510只。 方法:將野生型和白眼焦剛毛小翅果蠅培養(yǎng)瓶內(nèi)的成蠅全部趕去,12小時(shí)內(nèi)將重新孵化出的雌雄果蠅分開,即可得所需處女蠅和雄蠅。 2.雜交 將白眼焦剛毛小翅處女蠅麻醉,并挑取野生型蠅510只麻醉后放入培養(yǎng)瓶,此雜交組合可用作伴性遺傳和基因定位的觀察統(tǒng)計(jì)。 將野生型處女蠅510只麻醉,同時(shí)將同樣數(shù)量的白眼焦剛毛小翅雄蠅麻醉,放入培養(yǎng)瓶,此組合用于分離定律和伴性遺傳實(shí)驗(yàn)的反交。 貼好標(biāo)簽。注明雜交組合和日期,學(xué)生姓名。接種一天后檢查成活情況,死亡應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充。 3. 25條件下培養(yǎng) 78天后,趕去親本蠅。 4.觀察F1 1113天后,F(xiàn)1代羽化,用放大鏡對正交組合的F1進(jìn)行觀察,看F1雌蠅是否為
4、野生型,雄蠅是否全為三隱性,若不是,表明處女蠅是非處女蠅,實(shí)驗(yàn)失敗。 5.F1互交 正、反交各選510對F1雌雄蠅麻醉,轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)瓶,貼好標(biāo)簽。6.放飛F1 78天后趕去F1。 7.觀察F2 1113天后,F(xiàn)2羽化,將其麻醉后于白瓷板上用放大鏡觀察,或用解剖鏡、顯微鏡觀察各種表型的果蠅并統(tǒng)計(jì)數(shù)目,每隔2天觀察一次,連續(xù)34次,統(tǒng)計(jì)總數(shù)約200300只。統(tǒng)計(jì)后的果蠅倒入死蠅盛留器中。六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1.分離定律:只觀察一對相對性狀的遺傳情況,并對觀察結(jié)果進(jìn)行遺傳分析。 2.伴性遺傳:只觀察一對相對性狀(如紅眼和白眼)伴隨性別的遺傳情況,并填表。 基因定位:同時(shí)觀察三對相對性狀,但只用正交組合的F2代數(shù)據(jù),并將觀察結(jié)果填表。 七、作業(yè)及思考題 1.分析和解釋分離規(guī)律的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 2.分析和解釋伴性遺傳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 3
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