培養(yǎng)基適用性驗證方案

1、培養(yǎng)基適用性驗證第 1 頁 共 7 頁培養(yǎng)基適用性驗證方案起草人： 日期： 年 月 日方案審核人： 日期： 年 月 日方案批準(zhǔn)人： 日期： 年 月 日目 錄1. 驗證目的32. 參照標(biāo)準(zhǔn)33. 驗證項目34. 驗證小組人員及職責(zé)3-45. 驗證可接受的標(biāo)準(zhǔn)46. 驗證材料4-57. 菌液制備58. 適用性檢查5-69. 控制菌檢查71. 驗證目的：需氧菌、霉菌及酵母菌計數(shù)用的培養(yǎng)基及控制菌培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗證的目的是確認(rèn)胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適合需氧菌、霉菌及酵母菌、大腸埃希菌的測定和控制菌適用性檢查。2. 參照標(biāo)準(zhǔn)：

2、2015版中國藥典微生物限度檢查法。3. 驗證項目：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基和沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基的適用性檢查4.驗證小組人員及職責(zé)：4.1驗證小組人員:小組人員職務(wù)姓 名所在部門職 務(wù)組 長劉秀質(zhì)量管理部經(jīng) 理組 員郝枝桃質(zhì)量管理部QC主任組 員王和霞質(zhì)量管理部檢驗員組 員蘭丹質(zhì)量管理部檢驗員4.2驗證人員職責(zé)及要求4.2.1按驗證方案及相關(guān)文件實施驗證。4.2.2認(rèn)真觀察并做好驗證原始記錄。4.2.3對實施驗證的結(jié)果負(fù)責(zé)。4.3驗證中各部門的職責(zé)4.3.1驗證領(lǐng)導(dǎo)組職責(zé)4.3.1.1制訂驗證總計劃，負(fù)責(zé)全公司驗證工作的管理。4.3.1.2確定驗證項目及驗證項

3、目負(fù)責(zé)人。4.3.1.3負(fù)責(zé)驗證方案的批準(zhǔn)工作。4.3.1.4負(fù)責(zé)驗證資料及結(jié)果的審核工作。4.3.1.5負(fù)責(zé)驗證報告的批準(zhǔn)工作。4.3.2驗證工作小組職責(zé)4.3.2.1負(fù)責(zé)驗證方案的起草工作。4.3.2.2參與驗證方案的討論、確認(rèn)工作。4.3.2.3負(fù)責(zé)驗證方案的實施。4.3.2.4負(fù)責(zé)驗證結(jié)果的分析、統(tǒng)計、報告工作。4.3.2.5參與驗證結(jié)果的評價工作。4.3.3質(zhì)量部職責(zé)4.3.3.1負(fù)責(zé)驗證方案的審核工作。4.3.3.2負(fù)責(zé)驗證過程中儀器、儀表、計量器具的校驗工作。4.3.3.3負(fù)責(zé)驗證中各項檢測工作，提供驗證的檢驗記錄、檢驗報告，對驗證過程中的各項檢驗工作負(fù)責(zé)。4.3.3.4負(fù)責(zé)驗證

4、資料和報告的審核工作。4.3.3.5負(fù)責(zé)驗證文件回收、歸檔管理工作。5. 合格標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致。6. 試驗材料：6.1. 被驗證培養(yǎng)基：沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基6.2. 儀器設(shè)備：6.2.1.YX280B手提式不銹鋼蒸鍋型電熱恒溫培養(yǎng)箱 6.2.3. 250B生化培養(yǎng)箱 6.2.4. 101型電熱恒溫培養(yǎng)箱6.3. 驗證用培養(yǎng)基 名稱生產(chǎn)廠家批號胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基麥康凱瓊脂培養(yǎng)基麥康凱液體培養(yǎng)基胰酪大豆胨瓊脂對照培養(yǎng)基沙氏葡萄糖

5、瓊脂對照培養(yǎng)基麥康凱瓊脂對照培養(yǎng)基麥康凱液體對照培養(yǎng)基6.4. 驗證用菌株：(第 代)試驗菌株培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時間（小時）白色念珠菌沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基20-2524-48h黑曲霉5-7天金黃色葡萄球菌胰酪大豆胨培養(yǎng)基303518-24h大腸埃希菌銅綠假單胞菌7. 菌液制備 7.1.取金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、白色念球菌的新鮮培養(yǎng)物。7.2.用0.9%的無菌氯化鈉溶液，制成適宜濃度的菌懸液。7.3.取黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物加入3-5ml濃度為0.9%的無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。7.4.采用適宜的方法吸出孢子懸液至無菌試管中。7.5.用0.9%的無菌氯化鈉溶液制成適宜濃度的孢子懸

6、液。7.6.注意事項：菌液制備后，如在室溫下放置，應(yīng)在2h內(nèi)使用；如保存在2-8，可在24h內(nèi)使用，黑曲霉孢子懸液可保存在2-8，在驗證過的儲存期內(nèi)使用。8、培養(yǎng)基適用性檢查：8.1分別接種不大于100cfu的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的菌液至胰酪大豆胨培養(yǎng)基。8.2每株試驗菌平行制備2個平板，混勻、凝固，置于30-35培養(yǎng)不超過3天計數(shù)。8.3分別接種不大于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉的菌液至沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。8.4每個試驗菌平行制備2個平板，混勻、凝固，置于20-25培養(yǎng)不超過5天計數(shù)。8.5用對應(yīng)的對照培養(yǎng)基代替被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述試驗。8.6結(jié)果判定：被檢培養(yǎng)基上的

7、菌落平均數(shù)對照培養(yǎng)基上菌落平均數(shù)的70%，且菌落形態(tài)大少與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，判定培養(yǎng)基的適用性試驗檢測符合規(guī)定。試驗時間 年 月 日 完成時間 年 月 日驗證菌株平皿號供試品組cfuml對照培養(yǎng)基組cfuml回收率%應(yīng)70%銅綠假單胞菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1-2-平均值金黃色葡萄球菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1-2-平均值大腸埃希菌(培養(yǎng)3天計數(shù))1-2-平均值白色念珠菌(培養(yǎng)5天開始計數(shù))1-2-平均值黑曲霉菌(培養(yǎng)5天開始計數(shù))1-2-平均值結(jié)論試驗人 復(fù)核人 9、控制菌檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查項目包括促生長能力、抑制能力及指示特性的檢查。常用培養(yǎng)基適用性檢測項目及所用菌株見下表。大腸埃

8、希菌麥康凱液體培養(yǎng)基促生長能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌麥康凱瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示特性大腸埃希菌9.1麥康凱液體培養(yǎng)基適用性檢查9.1.1促生長能力檢查9.1.1.1分別接種不大于100cfu的大腸埃希菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。9.1.1.2在35條件下培養(yǎng)24h，與對照培養(yǎng)基管比較。9.1.1.3檢查標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基管試驗菌應(yīng)生長良好。檢驗結(jié)果： 9.1.2抑制能力檢查9.1.2.1分別接種不少于100cfu的金黃色葡萄球菌于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中。9.1.2.2在35條件下培養(yǎng)24h，并將被檢培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基管比較。9.1.2.3檢查標(biāo)準(zhǔn)：被檢培養(yǎng)基管和對照培養(yǎng)基管試驗菌均不得生長檢驗結(jié)果： 9.2麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查：促生長能力+指示特性的檢查9.2.1.用涂布法分