幾種類型的小鼠缺氧實驗

1、缺缺 氧氧幾種類型的小鼠缺氧實驗實驗目的和要求通過在動物身上復制乏氧性、血通過在動物身上復制乏氧性、血液性和組織中毒性等缺氧模型，觀察液性和組織中毒性等缺氧模型，觀察缺氧時動物的活動、呼吸、血液和粘缺氧時動物的活動、呼吸、血液和粘膜顏色等指標的改變以及動物的存活膜顏色等指標的改變以及動物的存活時間，加深理解各類缺氧的發(fā)病原因時間，加深理解各類缺氧的發(fā)病原因和機制。和機制。 實驗動物n每組取成年小鼠每組取成年小鼠7 7只，新生小鼠只，新生小鼠1 1只。只。n成年鼠稱重、編號。成年鼠稱重、編號。n選出兩對體重相等或最相近（誤差在選出兩對體重相等或最相近（誤差在1g1g以以內）的成年小鼠備用。內）的

2、成年小鼠備用。實驗一：乏氧性缺氧n取體重相等或相近的小鼠取體重相等或相近的小鼠2 2只，同時密只，同時密閉并計時；閉并計時；n觀察小鼠的活動、呼吸和皮膚粘膜顏觀察小鼠的活動、呼吸和皮膚粘膜顏色的改變，死亡時記錄存活時間。色的改變，死亡時記錄存活時間。n測死亡時瓶內氧濃度（同時測尚存活測死亡時瓶內氧濃度（同時測尚存活鼠的瓶內氧濃度）。鼠的瓶內氧濃度）。n死后立即開胸取心血，觀察血液顏色。死后立即開胸取心血，觀察血液顏色。實驗二：一氧化碳中毒性缺氧n取小鼠取小鼠1 1只，放入指定裝置，調只，放入指定裝置，調節(jié)煤氣流量（節(jié)煤氣流量（6060個左右氣泡個左右氣泡/min/min）吸入吸入COCO。n觀

3、察指標、方法同實驗一的觀察指標、方法同實驗一的2 2、4 4項。項。實驗三：亞硝酸鈉中毒性缺氧n取體重相等或相近的小鼠取體重相等或相近的小鼠2 2只；只；n腹腔注射給藥腹腔注射給藥： 體重體重n觀察指標與方法同實驗一的觀察指標與方法同實驗一的2 2、4 4項。項。鼠鼠1 1鼠鼠2 25 5亞硝酸鈉溶液亞硝酸鈉溶液1 1美藍溶液美藍溶液生理鹽水生理鹽水實驗四：氰化鉀中毒n取健康小鼠取健康小鼠1 1只，稱重；只，稱重；n腹腔注射氰化鉀（按腹腔注射氰化鉀（按10g10g體重體重注射）；注射）；n觀察指標同實驗觀察指標同實驗一的一的2 2、4 4項。項。實驗五：年齡因素的影響n取成年鼠和新生幼鼠各取成

4、年鼠和新生幼鼠各1 1只；只；n新生鼠置入青霉素小瓶中，瓶口蓋新生鼠置入青霉素小瓶中，瓶口蓋棉花；與成年鼠共同置入廣口瓶并棉花；與成年鼠共同置入廣口瓶并密閉。密閉。n觀察活動、呼吸情況和存活時間。觀察活動、呼吸情況和存活時間。 注意事項 n所用廣口瓶須密閉不漏氣，且各瓶容量應一致。所用廣口瓶須密閉不漏氣，且各瓶容量應一致。n動物死亡后要立即取血，血液要充分與抗凝劑混合，動物死亡后要立即取血，血液要充分與抗凝劑混合，量要準（即液滴大小相同），各管血滴數(shù)要一致，量要準（即液滴大小相同），各管血滴數(shù)要一致，否則對比性差。試管應事先編號，以免搞錯。否則對比性差。試管應事先編號，以免搞錯。n記錄時間要準

5、確，以一只表為準。記錄時間要準確，以一只表為準。n氰化鉀有劇毒，勿沾染皮膚、粘膜，尤其是破損處。氰化鉀有劇毒，勿沾染皮膚、粘膜，尤其是破損處。n要認真仔細觀察小鼠活動情況，呼吸深度和尾、耳、要認真仔細觀察小鼠活動情況，呼吸深度和尾、耳、口顏色的變化?？陬伾淖兓?。 實驗結果幾種類型缺氧指標的改變乏氧性乏氧性血液性血液性組織組織年齡年齡玻璃珠玻璃珠 鈉石灰鈉石灰CONaNO2+NSNaNO2+美藍美藍KCN成年成年新生新生存活時間存活時間（minmin）血液顏色血液顏色呼吸變化呼吸變化FiOFiO2 2( () )分組討論題n各組缺氧存活時間不同及死亡的原因和機各組缺氧存活時間不同及死亡的原因和

6、機制是什么？制是什么？n各組血液顏色生成的原因；美藍的作用是各組血液顏色生成的原因；美藍的作用是什么？什么？n各組的呼吸變化有何不同，為什么？各組的呼吸變化有何不同，為什么？n實驗一實驗一FiOFiO2 2變化的原因、機制是什么？變化的原因、機制是什么？（完）（完）分組討論題n各組缺氧存活時間不同及死亡的原因和機制是各組缺氧存活時間不同及死亡的原因和機制是什么？什么？n各組血液顏色生成的原因；美藍的作用是什么？各組血液顏色生成的原因；美藍的作用是什么？n各組的呼吸變化有何不同，為什么？各組的呼吸變化有何不同，為什么？n年齡差異對缺氧耐受有何不同，為什么？年齡差異對缺氧耐受有何不同，為什么？n實

7、驗一缺氧裝置的原理是什么？其中實驗一缺氧裝置的原理是什么？其中FiOFiO2 2變化變化的原因、機制是什么？的原因、機制是什么？（完）（完）分組討論題n存活時間，死存活時間，死亡原因和機制亡原因和機制n血液顏色血液顏色n呼吸變化呼吸變化nFiOFiO2 2變化變化年齡差異年齡差異美藍的作用美藍的作用實驗一裝置的實驗一裝置的原理原理（完）（完）CO中毒死因結合速率= = 解離速率= = 親和力= =吸入氣鐘中CO達，血中HBCO可達50 HBCO使氧曲線左移，血液向組織釋放氧減少抑制RBC糖酵解，2,3-DPG減少，氧離曲線左移22HBOOHBHBCOCOHB10122OHBHBOCOHBHBC

8、O22HBOOHBHBCOCOHB210011300200亞硝酸鈉中毒高鐵血紅蛋白血癥（methemoglobinemia) nHB-Fe2+ NaNO2 HB-Fe3+ NaNOn正常人MHB含量占HB總量的0.070.38%，相當于0.03g%左右nNaNO2中毒時MHB含量占HB總量的10%以上，相當于1.5g%以上nHB-Fe3+ 美藍 HB-Fe2+氧化還原2KCN中毒 Cyt aa3-Fe3+ CN Cyt aa3-Fe3+-CN幼鼠耐受缺氧的原因： n中樞方面：中樞方面：n神經系統(tǒng)發(fā)育不完善，對氧需求量少；神經系統(tǒng)發(fā)育不完善，對氧需求量少； n腦無氧酵解能力強；腦無氧酵解能力強；nATPATP利用率為成年的利用率為成年的1/101/10；n心臟方面：心肌糖元含量高，新生心臟方面：心肌糖