中國藥科大學藥物毒理學期末總結(jié)

1、藥物毒理學 學習要點一.名詞解釋促長劑：Growth promoting agent，本身并無致癌性，但可使化學物誘發(fā)突變細胞的克隆擴增，與致癌物共同作用或在致癌物作用之后，這類物質(zhì)反復作用于細胞，具有促進癌的發(fā)生或加速癌細胞發(fā)展成為癌瘤的間接致癌作用。常見的促癌物有佛波酯（TPA），巴豆油，煤焦油中的酚類、鹵代烴，煙草中的某些成分等。完全致癌物：complete carcinogen，指同時具有引發(fā)、促長和惡性進展作用的化學致癌物。致畸指數(shù)：teratogenic index，指藥物對母體的LD50與最小致畸劑量之比。指數(shù)<10者判為不致畸，10100為致畸，>100為強致畸。交

2、叉依賴性：cross dependence，有的藥物可以抑制另一種藥物戒斷后出現(xiàn)的戒斷癥狀，并有替代或維持后者所產(chǎn)生的身體依賴狀態(tài)的能力，這種現(xiàn)象稱之為交叉依賴性。這種相互替代可以是全部的，也可以是部分的。例如中樞抑制劑之間，阿片類藥物之間具有交叉依賴性，鎮(zhèn)靜催眠藥與酒精之間具有部分交叉依賴性。催促戒斷試驗：precipitation or withdrawal test，在較短時間里藥物以較大劑量、多次遞增方式對動物給藥，然后以阿片類拮抗劑，催促其產(chǎn)生戒斷反應，若出現(xiàn)嗎啡樣階段癥狀，說明其與嗎啡屬同類型藥物。催促試驗戒斷癥狀發(fā)作快，癥狀重且典型，持續(xù)時間短，便于觀察比較。此法只適用于有競爭性

3、受體拮抗劑的阿片類藥物。常用的受體拮抗劑有納洛酮，亦可用環(huán)丙羥丙嗎啡。生殖毒理學：reproductive toxicology，主要研究外源化學物對生殖細胞發(fā)生、卵細胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺乳過程的損害作用及其評定-生殖毒性試驗。發(fā)育毒理學：Developmental toxicology，主要研究外源化學物對胚胎發(fā)育、胎仔發(fā)育以及出生幼仔發(fā)育的影響及其評定-發(fā)育毒性試驗，其中主要為致畸試驗。胚胎毒性：embryotoxicity，指藥物對胚胎的選擇毒性作用。在一定劑量時，僅對胚胎有毒性作用而對母體無毒性作用。通?？杀憩F(xiàn)為所有對胚胎生長不利的毒性作用，如胚胎死亡，胚胎生長遲緩，畸形以

4、及出生后功能不全。具有這些作用的物質(zhì)稱為胚胎毒物。外源化學物：xenobiotic，是在人類生活的外界環(huán)境中存在可能與機體接觸并進入機體在體內(nèi)呈現(xiàn)一定生物學作用的化學物質(zhì)，又稱為“外源生物活性物質(zhì)”，包括藥物、農(nóng)藥、食品添加劑、化工產(chǎn)品及環(huán)境化合物等。 蓄積毒性：Cumulative toxicity，當較長時間連續(xù)反復給藥，或者說給藥的時間間隔和劑量超過機體消除藥物的能力時，出現(xiàn)藥物進入機體的速度或總量超過排出的速度或總量的現(xiàn)象。這時，藥物就有可能在體內(nèi)逐漸增加并貯存起來產(chǎn)生毒性。選擇毒性: Selective toxicity，指一種化學物質(zhì)只對某種生物產(chǎn)生損害作用，而對其他生物無害，或只

5、對機體內(nèi)某一器官發(fā)揮毒性，而對其他組織器官不具毒作用。代償能力：當體內(nèi)組織或器官局部發(fā)生病變時，病變處功能降低，此時非病變處組織通過自身功能的加強來彌補病變處功能不足的能力。最大無作用劑量：Maximum non-effect dose or concentration,即ED0或EC0，指藥物在一定時間內(nèi)，按一定方式或途徑與機體接觸，用目前最靈敏的檢測方法或觀察指標，不能觀察到對機體有任何損害作用的最高劑量，亦稱為“不能觀察到的效應水平”（No observed effect level, NOEL）中毒閾劑量:Toxic threshold dose or concentration,指在

6、一群試驗動物中，只有少數(shù)個別動物的某項生理、生化或其他觀察指標出現(xiàn)輕微變化的最小劑量或濃度，又稱最小中毒量(Minimal toxic dose)，一般略高于最大無作用劑量或濃度。急性毒作用帶:Acute toxic effect zone , Zac，半數(shù)致死量與急性閾劑量之比值，其公式為：Zac=LD50/Limac，式中LD50代表毒性作用的上限，Limac為急性閾劑量，代表毒性作用的下限。其比值的大小反映了急性閾劑量值距離LD50的寬窄，比值越大從急性閾劑量到引起死亡的劑量距離越寬，化合物引起死亡的危險性就越小，反之亦然。慢性毒作用帶：Chronic toxic effect zone

7、, Zch，急性閾劑量與慢性閾劑量之比值，其公式為：Zch=Limac/limch，其比值越大，表明從慢性閾劑量至急性閾劑量之間的距離越寬，即引起慢性中毒或亞慢性中毒的劑量范圍越寬，發(fā)生慢性中毒的機會就越多，反之亦然。QAU：Qaulity Assurance Unit，質(zhì)量保證部門，指負責保證安全性研究機構(gòu)的各項研究工作符合本規(guī)定要求的機構(gòu)。在GLP的組織結(jié)構(gòu)中，QAU占有比較重要的位置，它是獨立于課題組之外而直接向總管理者負責的一個常設(shè)機構(gòu)。QAU人員應當是熟悉業(yè)務的內(nèi)行，并且要了解所檢查課題的任務和計劃，QAU要為每一課題指定一名檢查負責人。SOP：Standard Operating

8、Procedures，標準操作規(guī)程：為了得到準確的實驗數(shù)據(jù)，必須要求正確而且統(tǒng)一的操作，因此對所有實驗操作應全部用SOP加以具體規(guī)定。SOP是研究室的技術(shù)法規(guī)，是GLP最重要的工作軟件，它體現(xiàn)研究室日常建設(shè)的成果，也反映研究室的技術(shù)水平。急性毒性：acute toxicity 是指機體（人或試驗動物）一次接觸或24小時內(nèi)多次接觸藥物后在短期（最長到14天）內(nèi)所發(fā)生的毒性效應，包括一般行為、外觀改變、大體形態(tài)變化以及死亡效應。質(zhì)反應：quantal response，用于表示化學物質(zhì)在群體中引起的某種毒效應的發(fā)生比例。屬于計數(shù)資料，沒有強度的差別，不能以具體的數(shù)值表示，而只能以“陰性或陽性”、“

9、有或無”來表示，如死亡或存活、患病或未患病等，稱為質(zhì)反應。近似致死量:approximate lethal dose, ALD，是介于最小致死量（minimum lethal dose, MLD）與最大非致死量（maximum non-lethal dose, MNLD）之間的劑量，其中MLD是指藥物在最低劑量組的一群實驗動物中僅引起個別動物死亡的劑量，在急性毒性試驗中可表示為LD10或LD5；MNLD實際上是急性毒性試驗中以死亡為毒效應時的一種最大耐受量，指藥物不引起實驗動物死亡的最大劑量，可以表示為LD0.SPF動物:specificpathogen-free animal, SPF，是指

10、無特定病原體動物，指機體內(nèi)無特殊的微生物和寄生蟲存在的實驗動物。悉生動物：Gnotobiotic animal，對無菌動物人工投以某些已知微生物(一般為埃希大腸桿菌、葡萄球菌及乳酸桿菌等)而獲得。根據(jù)投入已知菌的種類，分別稱為單菌、雙菌、三菌或多菌動物。蓄積系數(shù)：accumulation coefficient，是多次給藥使半數(shù)動物出現(xiàn)死亡的蓄積劑量（LD50(n)）與一次給藥使半數(shù)動物出現(xiàn)死亡的劑量（LD50(l)）的比值，即：K= LD50(n)/ LD50(l)。臟器系數(shù)：The organ coefficient，器官重量在進行統(tǒng)計學處理時常表示為單位體重的重量，即器官系數(shù)。毒代動力學

11、：Toxicokinetics, TK，是一門新興的涉及藥物代謝動力學和毒理學研究的邊緣學科，是在毒性劑量條件下進行的研究，用于解釋毒性試驗，為藥物的安全性提供評價依據(jù)，而不是描述藥物的基本藥物動力學參數(shù)的特征。突變作用：mutagenesis，生物體遺傳物質(zhì)發(fā)生急劇的遺傳學變化，導致可遺傳的表型變異，其表型變異為不可逆的，這種現(xiàn)象稱為突變作用。突變作用可視為DNA結(jié)構(gòu)在任一水平上受到破壞，并由此造成了體細胞或生殖細胞中的遺傳信息的改變。廣義地包括基因突變和染色體畸變。移碼突變：frameshift mutation，指DNA多核苷酸鏈上堿基序列中丟失一個或幾個堿基，或插入一個或幾個化合物分子

12、，結(jié)果使突變位點以下的堿基序列發(fā)生變更，以致使三聯(lián)密碼轉(zhuǎn)錄和翻譯時，發(fā)生較多遺傳信息的改變。多環(huán)芳香烴類、芳香胺類、嘧啶類化合物和黃曲霉素B1等都能引起插入型移碼突變。轉(zhuǎn)換型突變：transition，指DNA多核苷酸鏈上的堿基中，嘌呤互相取代（鳥嘌呤置換腺嘌呤或相反）或嘧啶互相取代（胞嘧啶取代胸腺嘧啶或相反）所引起的突變。DNA轉(zhuǎn)錄時可引起一個RNA密碼子的改變，在翻譯時可使多肽鏈中的一個氨基酸發(fā)生變更，如亞硝酸可引起這種突變。染色體畸變：chromosome aberration，藥物或化合物對遺傳物質(zhì)的影響涉及到整個染色體，表現(xiàn)為染色體結(jié)構(gòu)與數(shù)目的變化稱為染色體畸變，用光學顯微鏡可以直接

13、進行觀察。堿基作用物：如烷基硫酸酯、N-亞硝基化合物、環(huán)狀化合物及鹵代亞硝基脲，其共同特性是具有較強的反應活性，易使DNA分子中的堿基發(fā)生烷化作用，形成共價結(jié)合的加成物。多倍體：polyploid，正常的生殖細胞染色體為單倍體，體細胞為雙倍體，在突變細胞中，染色體呈整倍的發(fā)生變化，以致形成三倍體、四倍體二倍體以上統(tǒng)稱為多倍體。間接致突變物：indirect-acting mutagen，有的藥物，本身不引起突變，必須在體內(nèi)經(jīng)過代謝活化后才具有致突變作用，則稱為間接致突變物。間接致突變物屬于藥物致突變物的一種。堿基類似物：有些藥物的化學結(jié)構(gòu)與DNA鏈上四種天然堿基非常相似，稱為堿基類似物，如5-

14、溴脫氧尿苷嘧啶核苷與胸腺嘧啶相似，2-氨基嘌呤與鳥嘌呤相似。如這些堿基類似物在DNA合成期中存在，能與天然堿基競爭，取代其位置，從而摻入DNA分子中。微核：micronucleus，骨髓細胞經(jīng)致突變物作用，其染色體可發(fā)生畸變以致斷裂。其斷裂的碎片在分裂間期留在子代細胞內(nèi)形成規(guī)則的一個或幾個圓形或橢圓形結(jié)構(gòu)的小塊物質(zhì)，由于它比普通細胞核要小，故稱之微核。觀察骨髓細胞中的微核率，有助于檢驗藥物是否具有致突變作用。但由于骨髓細胞中缺乏代謝活化酶系，對間接誘變物反應較差。程序外DNA合成：unschedule DNA synthesis UDS，正常細胞在有絲分裂過程中，僅在S期進行DNA復制合成，當

15、DNA受損后，DNA的修復合成可發(fā)生在S期以外的時期，這種合成稱為程序外DNA合成?；痉椒ㄊ菧y定S期以外3H-胸苷摻入胞核的量，這一摻入量可反映DNA損傷后修復合成的量。一般使用人淋巴細胞或嚙齒動物肝細胞等不處于正在增殖的細胞較為方便，否則就需要人為地將細胞阻斷于G1期，使增殖同步化。二.解答題1.化學致癌物的分類有多種分類方法，例如：按致癌物的化學性質(zhì)分類：有機化學致癌物，無機化學致癌物按致癌作用機制分類：遺傳毒性致癌物，非遺傳毒性致癌物國際癌癥研究所( Intenational Agency for Research on Cancer，IARC )將化學物按對人致癌的證據(jù)強度將致癌物分

16、為四大類：1.第一類是對人肯定的致癌物，有足夠的流行病學證據(jù)支持接觸因素與癌癥發(fā)生的因果關(guān)系。2.第二類分為AB兩組：A組包括對人很可能（probably）是致癌的物質(zhì)，此類物質(zhì)有一定的流行病學證據(jù)表明其可能致癌。B組包括對人可能（possible）是致癌的物質(zhì)，此類物質(zhì)的流行病學資料不夠充分或者缺乏。第三類是指對人的致癌性尚不能確定的化學物，此類物質(zhì)缺乏人類致癌的資料。第四類指對對人類很可能不致癌的物質(zhì)，此類物質(zhì)對人及動物的致癌性證據(jù)不充分。2.化學致癌三階段理論引發(fā)階段、促長階段和惡性進展階段。1.引發(fā)階段：致癌物直接作用于DNA的初級序列，引起基因突變，使單個細胞或少量細胞發(fā)生永久性的、

17、不可逆的遺傳性改變，誘發(fā)細胞突變的因素稱為引發(fā)劑。2.促癌階段：細胞經(jīng)第一階段變成引發(fā)細胞后，在某些因素作用下，以相對于周圍正常細胞的選擇優(yōu)勢進行克隆擴增，形成鏡下才能觀察到的或有時肉眼可見的細胞群，即良性腫瘤，如乳頭狀瘤或腺瘤。3.惡性進展階段：隨著惡性度的增加，腫瘤細胞開始獲得一些新的性質(zhì)，如高度侵襲性、轉(zhuǎn)移生長性、無規(guī)律性以及快速生長和特有的對激素的反應性等。這些細胞可溶解和穿透組織的基底膜，可以在血流中生存并對免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗性，能耐受許多治療藥物的毒作用，刺激血管的新生，產(chǎn)生新的血管使腫瘤細胞能從血液中獲得營養(yǎng)物和氧分，最終不管宿主如何試圖破壞它，腫瘤都能存活下來并不斷地惡性進展。 3

18、.何謂惡性轉(zhuǎn)化試驗？轉(zhuǎn)化后的細胞表型有哪些改變？ 培養(yǎng)細胞惡性轉(zhuǎn)化試驗是指對培養(yǎng)細胞誘發(fā)與腫瘤形成有關(guān)的表型改變。常用敘利亞地鼠（SHE）胚胎細胞，或其他哺乳動物細胞。此種表型改變是因致癌物所致核型改變的結(jié)果，其改變包括細胞形態(tài)、細胞生長能力、生化表型等變化，以及移植于動物體內(nèi)形成腫瘤的能力。4.致畸作用的毒理學特點及其評價方法特點：1.器官發(fā)生期的胚胎對致畸物最為敏感，一般稱為危險期或關(guān)鍵期，在這期間給予具有致畸作用的藥物，可能造成形態(tài)結(jié)構(gòu)異常。2.劑量與效應關(guān)系較為復雜：在器官形成期與具有發(fā)育毒性的藥物接觸，可以出現(xiàn)畸形，但也可引起胚胎致死。當劑量增加時，毒性作用增強，往往胚胎致死作用增強

19、更明顯。胚胎死亡增加，畸胎數(shù)卻因而減少。某種致畸物可以引起一定的畸形，但在同一條件下，給予更高的劑量，并不出現(xiàn)同一類型的畸形?？赡苡捎谳^高劑量往往造成較為嚴重的畸形，較低劑量一般引起輕度畸形，而嚴重畸形有時可掩蓋輕度畸形。致畸作用的劑量反應曲線較為陡峭：最大無作用劑量與100致畸劑量之間距離較小，一般相差1倍，曲線斜率也較大。往往100致畸劑量即可出現(xiàn)胚胎死亡，劑量再增加，即引起母體死亡。3.物種差異以及個體差異在致畸作用中較為明顯：同一致畸物在不同動物并不一定都具有致畸作用，引起畸形的類型也不一致。評價方法：致畸敏感期毒性試驗：確定藥物是否具有胚胎毒性或致畸性。在這一階段，藥物對生殖過程的影

20、響不是作用于生殖細胞的結(jié)果，而是胚胎直接受到藥物影響的結(jié)果，致畸性藥物制藥能穿透子宮或胎盤到達一定濃度，就可對胚胎發(fā)育產(chǎn)生影響，出現(xiàn)致畸作用或胚胎毒性。因此，致畸作用研究的階段主要限于胚胎細胞分化至器官形成階段。每組孕大、小鼠20只，孕兔10只，劑量為高中低三個劑量，限度劑量為1g/kg，高劑量應有母體毒性反應，低劑量應為無母體和胚胎毒性反應，一般為臨床擬用劑量的某些主量，給藥途徑原則上與臨床用藥途徑相同，不宜采用腹腔注射。在胚胎器官形成期連續(xù)給藥，大鼠孕后6-15天，小鼠6-15天，家兔6-18天。同時設(shè)溶媒對照和陽性對照。自然分娩前1-2日（大鼠受孕后19-20天，小鼠18-19天，家兔第

21、29天）處死動物，剖腹取出子宮及胎仔，記錄黃體數(shù)、活胎數(shù)、活胎重、死胎數(shù)（吸收胎、早期死亡胚胎和晚期死亡胚胎的總和）等。交配前交配妊娠未給藥雌性動物未給藥雄性動物雌性動物在6-15天給藥（大小鼠），在第20天處死幼仔和胎兒圍產(chǎn)期毒性試驗：檢測受試藥物可能對胚胎發(fā)育后期、母體妊娠、分娩過程、哺乳和幼仔在新生期間存活和生長發(fā)育的影響。給藥時間是圍繞分娩前后及泌乳期。交配前交配妊娠授乳未給藥雌性動物未給藥雄性動物雌性動物大鼠、小鼠于妊娠第15天開始給藥，至分娩后21天（小鼠）和28天（大鼠），家兔于妊娠第22天開始給藥，至分娩后31天。雌性動物給藥至斷奶后處死幼仔和胎兒5.何謂非遺傳毒性致癌物？試述

22、其分類和各類的主要致癌特點指沒有直接與DNA共價結(jié)合的能力，不改變DNA的初級序列，即對遺傳物質(zhì)沒有影響的一類致癌物。致癌作用機制主要是促進細胞的過度增殖。1.促長劑：本身并無致癌性，但可使化學物誘發(fā)突變細胞的克隆擴增，與致癌物共同作用或在致癌物作用之后，這類物質(zhì)反復作用于細胞，具有促進癌的發(fā)生或加速癌細胞發(fā)展成為癌瘤的間接致癌作用。2.細胞毒物：能導致細胞死亡的物質(zhì)可引起代償性增生，以至發(fā)生腫瘤。3.激素：雌性激素和干擾內(nèi)分泌器官功能的物質(zhì)可引起動物腫瘤或使這些器官的腫瘤形成增多。4.免疫抑制劑：如巰唑嘌呤等免疫抑制劑或免疫血清均能使動物和人發(fā)生白血病或淋巴瘤，但很少發(fā)生實體腫瘤。5.固態(tài)物

23、質(zhì)：動物皮下包埋塑料后，經(jīng)過較長的潛伏期，可導致肉瘤形成，6.過氧化物酶體增生劑：能使嚙齒類動物肝臟中的過氧化物酶體增生的各類物質(zhì)都可誘發(fā)肝腫瘤。如降血脂藥安妥明、降脂異丙酯等。6.藥物依賴性分為哪兩種？分別敘述其評價方法及其原理身體依賴性（physical dependence），又稱生理依賴性（physiological dependence），是由于反復用藥所造成的一種適應狀態(tài)，當中斷用藥后產(chǎn)生一種強烈的身體方面的損害，即戒斷癥狀（abstinence syndrome），變現(xiàn)為精神和身體方面一系列特有的癥狀。精神依賴性（psychic dependence）：又稱心理依賴性（psych

24、ological dependence），是指用藥后使人產(chǎn)生愉快、滿足或欣快感，并在精神上驅(qū)使該用藥者形成一種周期性地或連續(xù)用藥的欲望，產(chǎn)生強迫用藥行為，以獲得滿足或避免不適感。精神依賴者斷藥后不出現(xiàn)生理戒斷癥狀。評價方法及其原理：身體依賴性評價方法：自然戒斷試驗、催促戒斷試驗、替代試驗。自然戒斷試驗原理是連續(xù)給于動物一段時間的受試藥后突然停藥，觀察動物出現(xiàn)的戒斷癥狀，與同類代表藥物相比較，按照戒斷癥狀的嚴重程度判斷受試藥的依賴性潛力。替代試驗原理是給予實驗動物各類代表性藥物（嗎啡、苯巴比妥或巴比妥鈉）使之產(chǎn)生身體依賴性后，停止給予這些代表藥，替之以受試藥，觀察記錄動物是否發(fā)生戒斷癥狀及其發(fā)作

25、程度，以判斷受試藥是否具有類似代表藥的依賴性潛力。催促戒斷試驗原理是短期內(nèi)給與動物大劑量受試藥物，然后注射一劑受體拮抗劑，觀察和記錄給予受體拮抗劑后動物出現(xiàn)的戒斷癥狀及其程度，此法只適用于有競爭性受體拮抗劑的阿片類藥物。精神依賴性評價方法：自身給藥試驗、藥物辨別試驗、條件性位置偏愛試驗、行為敏化試驗。自身給藥試驗原理：具有精神依賴性的藥物對覓藥行為和用藥行為都有強化效應，這一效應可通過自身給藥實驗來判斷，是當前國際上通用的評價藥物依賴性潛力的試驗方法。藥物辨別試驗：依賴性藥物使人產(chǎn)生的情緒效應如欣快、滿足感等，屬于主觀性效應。具有主觀性效應的藥物可以控制動物的行為反應，使之產(chǎn)生辨別行為效應。本

26、試驗可準確判斷受試物是否屬于阿片類藥物，以及產(chǎn)生精神依賴性潛力大小。條件性位置偏愛試驗：根據(jù)巴甫洛夫的條件反射學說，如果把獎賞刺激與某個特定的非獎賞性條件刺激如某特定環(huán)境反復練習之后，后者便可獲得獎賞特性。反復幾次將動物給藥后放在一個特定的環(huán)境中，如藥物具有獎賞效應，則特定環(huán)境就會具有了獎賞效應的特性，動物在不給藥的情況下依然有對此特定環(huán)境的偏愛。7.較常用的評價肝毒性的血清酶學指標有哪些？ ALT(GPT)谷丙轉(zhuǎn)氨酶：存在于細胞質(zhì)可溶部分，肝組織中含量為血清中的10倍，當肝細胞發(fā)生炎癥或壞死時，肝細胞內(nèi)的GPT可進入血液導致血中含量增高，血清中GPT含量增加與肝細胞的病變程度大致平行，故對判

27、斷肝臟損害有較重要的意義?？偰懠t素：膽紅素由紅細胞裂解而轉(zhuǎn)化釋出，血中大部分膽紅素與白蛋白相結(jié)合，稱為游離膽紅素，膽紅素在肝臟中與葡萄糖醛酸結(jié)合成水溶性的結(jié)合物，稱為結(jié)合膽紅素，通過膽小管進入到膽汁中，兩者合稱為總膽紅素。在肝膽管堵塞或肝細胞損傷的情況下，膽紅素反流入血液出現(xiàn)高膽紅素血癥而使組織黃染。堿性磷酸酶：存在于骨、肝和腎臟中，也存在同工酶。成骨細胞活性增強、肝功能損傷、膽汁淤積時該酶的活性升高，而營養(yǎng)缺乏時，該酶的活力下降。白蛋白：血清中白蛋白全部由肝細胞制造，具有維持膠體滲透壓的功能，當降低至3g時，一般均會出現(xiàn)全身性水腫，常見于蛋白質(zhì)攝入不足、合成功能不全（如肝臟實質(zhì)性病變）、消耗

28、或丟失過多等情況。ALT，AST，ALP，GGLP，5ND，SDH，OCT谷丙轉(zhuǎn)氨酶，谷草轉(zhuǎn)氨酶，堿性磷酸激酶，r-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶，5-核苷酸酶山梨醇脫氫酶，鳥氨酸氨甲基轉(zhuǎn)移酶8.結(jié)合實例論述藥物對腎臟的毒性作用機制1.直接腎毒性作用：指腎臟毒物通過干擾生化過程而直接影響腎臟實質(zhì)組織細胞的代謝。如汞劑中的汞離子與線粒體膜上含巰基的蛋白質(zhì)結(jié)合而破壞線粒體，所致病理改變主要為近曲小管上皮細胞混濁、腫脹和壞死，嚴重時累及整個腎小管和腎小球，間質(zhì)也出現(xiàn)水腫和炎癥細胞浸潤。2.免疫反應：某些腎臟毒物進入體內(nèi)，作為一種全抗原（如抗血清），可與機體產(chǎn)生的抗體結(jié)合成為抗原-抗體復合物，作用于腎小球基膜而引起病變

29、；另一些毒物則作為半抗原，如先與血漿中蛋白質(zhì)或直接與腎小球基膜的蛋白質(zhì)結(jié)合，可能需要在補體的參與下，對腎小球基膜發(fā)生免疫反應。如三甲雙酮等通過免疫介導引起腎小球腎炎。3.腎小管管腔阻塞：腎小管機械性阻塞，可導致其功能喪失，使腎小管變性、壞死。如噻嗪類利尿藥可引起尿酸結(jié)石。4.血流動力學改變：血流動力學的改變與腎臟功能和病理變化有密切關(guān)系。如長期過量使用水楊酸鹽類鎮(zhèn)痛劑，如水楊酸類、保泰松、吲哚美辛、非那西汀等，可導致慢性間質(zhì)性腎炎。9.影響化學物毒性作用的因素有哪些？劑量：毒性反應毒物的劑量與機體反應之間的關(guān)系，因此引起機體某種有害反應的劑量是衡量毒物毒性的指標。毒性較高的物質(zhì)，只需要相對較小

30、的劑量或濃度即可對機體造成一定的損害；而毒性較低的物質(zhì)，則需要較高的劑量或濃度才能呈現(xiàn)毒性作用。接觸途徑：多數(shù)情況下，外源化學物需要進入血液并隨血流到達作用部位才能發(fā)揮其毒性，而同一種外源化學物經(jīng)由不同途徑（口，皮，呼吸道）與機體接觸時，其吸收系數(shù)（即入血量與接觸量之比）是不同的。1.藥物的理化性質(zhì)，包括：結(jié)構(gòu)功能團、基團的電荷性、光學異構(gòu)、脂水分配系數(shù)、電離度、溶解度這6個理化性質(zhì)方面與毒性作用的關(guān)系 2.受試動物的種屬及個體差異，包括實驗動物的種屬和品系與毒性反應、實驗動物個體因素與毒性效應、動物疾病因素與毒性效應3.藥物賦形劑，添加劑 4.給藥途徑 5.環(huán)境因素10.損害作用具有哪些特點

31、？1.機體的形態(tài)正常、生長發(fā)育過程受到嚴重影響，壽命亦將縮短。2.功能容量降低。3.對外界不利因素的易感性增強，對應激狀態(tài)的代償能力下降4.機體維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)能力下降且為不可逆5.從藥物在機體內(nèi)代謝過程和生化變化的角度來看，損害作用還應具有以下特點：隨著藥物與機體接觸劑量的增加，機體對該物質(zhì)的代謝轉(zhuǎn)化速率降低或該物質(zhì)由體內(nèi)消除速度變慢；機體各種物質(zhì)代謝過程中具有關(guān)鍵意義的酶被抑制，或某些酶系統(tǒng)的相對活力發(fā)生改變。由于某些沒被抑制，與其有關(guān)的天然底物在體內(nèi)濃度增高，或/及在負荷試驗中對專一性底物的代謝能力降低，如膽堿酯酶。11.試述毒性作用的分類1.局部作用和全身作用局部作用是指藥物對與機體最初

32、接觸的部位所造成的直接損害作用。全身作用是指經(jīng)吸收、分布至機體的其它部位后才產(chǎn)生的損害作用。2.可逆作用和不可逆作用可逆作用指停藥后可自行消失的毒性作用。不可逆作用是指停藥后仍繼續(xù)存在甚至進一步發(fā)展的毒性作用，例如某些實質(zhì)性損害。3.速發(fā)作用和遲發(fā)作用速發(fā)作用指在一次接觸后段時間內(nèi)即引起的損害作用。遲發(fā)作用則在一定的時間間隔后才發(fā)生，甚至停藥后才發(fā)生。4.變態(tài)反應和特異質(zhì)反應變態(tài)反應是機體對外源化學物產(chǎn)生的一種病理性免疫反應，由于既往已被該類藥物致敏所致。特點：1.過去有接觸史。2.不呈典型的S型劑量反應曲線。特異質(zhì)反應：指機體對藥物的一種遺傳性異常反應。12.試述毒性作用的常用參數(shù)毒性上限指

33、標：引起實驗動物急性中毒死亡的劑量（或濃度），是評價藥物毒性和危險性的一類重要參數(shù)。包括絕對致死量（濃度）：LD100或LC100，指藥物引起一群實驗動物全部死亡的最低劑量或濃度。半數(shù)致死量：LD50或LC50，指藥物能引起一群實驗動物50%死亡所需的劑量或濃度。 最小致死量（MLD）或濃度(MLC)，LD10或LC10指藥物在最低劑量組的一群實驗動物中僅引起個別動物死亡的劑量或濃度。 最大耐受量（MTD）或最大耐受濃度(LD0或LC0)，指藥物在實驗動物中不引起實驗動物死亡的最大劑量或最大濃度。致死劑量或致死濃度（LD 或LC），指籠統(tǒng)的表示藥物對實驗動物引起死亡的劑量或濃度。毒性下限指標：

34、有害作用閾劑量及最大未觀察到有害作用的劑量。包括急性閾劑量或閾濃度（Limac），指一次接觸藥物所得的閾劑量或閾濃度 慢性閾劑量或閾濃度(Limch)：指長期連續(xù)接觸藥物所得的閾劑量或閾濃度 最大無作用劑量或濃度（ED0或EC0），指藥物在一定時間內(nèi)，按一定方式與機體接觸，按目前最靈敏的檢測方法或觀察指標，不能觀察到任何損害作用的最高劑量。最小有作用劑量，亦稱中毒閾劑量，是指能使機體在某項觀察指標發(fā)生異常變化所需的最小劑量，即能使機體開始出現(xiàn)毒性反應的最低劑量。毒作用帶：表示一種藥物的毒性。一般用藥物的半數(shù)致死量與急性毒性或長期毒性最小有作用劑量（閾劑量）的比值來表示。包括急性毒作用帶（=LD

35、50/Limac），和長期毒性作用帶=(Limac/limch)。13.A型損害性反應與B型損害性反應有何異同？1.A型是一種過性的，在常用劑量下出現(xiàn)的藥理作用的延伸。2.B型為完全異常的反應。A型B型可預測性+劑量相關(guān)性+發(fā)生率高低死亡率低高治療調(diào)整劑量停藥14.試述LD50測定的意義1.LD50是藥物重要特征性參數(shù)之一，常被用來判斷藥物對機體的毒性程度，其數(shù)值越大，說明該藥物越安全。2.有助于計算其他相關(guān)的毒性參數(shù)：急性毒作用帶（Zac）=LD50/Limac；治療指數(shù)（TI）=LD50/ED503.為藥物急性毒性分級依據(jù)。4.為長期毒性試驗、特殊毒性試驗和臨床藥理評價提供指標及劑量設(shè)計依

36、據(jù)。5.為毒效應靶器官確定和機制分析提供線索。6.作為藥物生產(chǎn)過程中的質(zhì)量監(jiān)控的檢測措施。15.試述實驗動物按微生物控制標準的分級實驗動物按微生物控制分類法，可分為普通級動物CV、清潔動物CL、無特定病原體動物SPF、無菌動物GF和悉生動物五級。16.試述長期毒性試驗中主要的血液生化學指標及其意義1.氨基轉(zhuǎn)移酶：ALT，其含量與肝細胞病變程度大致平行，對于判斷肝損傷有重要意義；AST，在心肌中含量較高，可用于輔助診斷心肌炎、心肌梗塞等疾病。2.總膽紅素：當肝膽管阻塞或肝細胞受損的情況下，膽紅素會返流入血液出現(xiàn)高膽紅素血癥而使組織黃染。3.堿性磷酸酶：成骨細胞活性增強、肝功能損傷、膽汁淤積時該酶

37、活性升高，而營養(yǎng)缺乏時下降。4.尿素氮：指示腎功能損傷、痛風和肌肉損傷等。5.乳酸脫氫酶：根據(jù)同工酶譜分析可判斷什么組織損或器官出現(xiàn)損傷6.血糖：相關(guān)激素水平和腺體功能。7.蛋白：包括白蛋白，球蛋白，血紅蛋白，測定具體蛋白質(zhì)有時更顯得有指導意義，血清中白蛋白全部由肝細胞制造，白/球比例為11.5，比例倒置會在肝臟晚期病變。8.電解質(zhì)：鈉，鉀，鈣，氯，磷酸根離子等9.肌酸磷酸激酶：肌肉異常、心肌梗塞和肺循環(huán)異常時改酶增高10.R-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶：肝膽疾病指標17.基因突變有哪些常見的類型？包括：點突變：轉(zhuǎn)換型突變和顛換型突變；移碼突變轉(zhuǎn)換型突變：指DNA多核苷酸鏈上的堿基中，嘌呤互相取代或嘧啶互相

38、取代，DNA轉(zhuǎn)錄時可引起一個RNA密碼子的改變。顛換型突變：DNA多核苷酸鏈上的堿基，嘌呤取代嘧啶或嘧啶取代嘌呤，結(jié)果也是多肽鏈中一個氨基酸的變更。移碼突變：指DNA多核苷酸鏈上堿基序列中丟失一個或幾個堿基，或插入一個或幾個化合物分子，結(jié)果使突變位點以下的堿基序列發(fā)生變更，以致使三聯(lián)密碼轉(zhuǎn)錄和翻譯時，發(fā)生較多遺傳信息的改變。18.Ames試驗原理及方法評價原理：利用組氨酸缺陷型的鼠傷寒沙門氏菌突變株為測試指示菌，觀察其在某受試物作用下回復突變?yōu)橐吧偷囊环N測試方法。組氨酸缺陷型的鼠傷寒沙門氏菌在缺乏組氨酸的培養(yǎng)基上不能生長，但在加有突變原的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，則可使突變型產(chǎn)生回復突變成野生型，即恢復

39、合成組氨酸的能力，于是就能在缺乏組氨酸的培養(yǎng)基上生長成菌落，通過計數(shù)菌落出現(xiàn)數(shù)目就可以估算藥物誘變性得強弱。優(yōu)點：可用來作為誘變指示物的微生物有噬菌體、細菌和真菌等；微生物具有繁殖快、個體數(shù)量多、容易觀察檢出等特點，而且方法較為敏感、檢出率較高、試驗周期短、費用也較低。缺點：微生物是單細胞生物，與哺乳動物及人類有較大的差別；有些受試物，在體外并不直接具有致突變性，而在體內(nèi)形成的代謝產(chǎn)物卻具有致突變作用，就會得出“假陰性”的結(jié)論。反之則可能得出“假陽性”結(jié)論。19.Ames試驗菌株鑒定及試驗方法1.組氨酸營養(yǎng)缺陷鑒定：培養(yǎng)基分兩組，一組加入組氨酸和生物素，另一組只加入生物素。在無組氨酸的培養(yǎng)基中

40、無法生存的即為組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株。2.深粗糙型（rfa）鑒定（結(jié)晶紫抑菌試驗）方法：于瓊脂平皿上滴加0.1%結(jié)晶紫溶液，豎起平皿，讓結(jié)晶紫溶液順平皿流下。在與結(jié)晶紫溶液流下的方向垂直劃線接種試驗菌株。培養(yǎng)2448小時，觀察生長情況。在結(jié)晶紫溶液滲透區(qū)出現(xiàn)抑菌，證明試驗菌株有rfa突變存在，意味結(jié)晶紫大分子進入菌體并殺死細菌。3.uvrB缺失的鑒定（紫外線敏感試驗）方法：將受試菌液在瓊脂平皿上劃線，用黑紙覆蓋培養(yǎng)皿的一半，然后在紫外燈下照射，培養(yǎng)24小時。如果經(jīng)紫外線照射部分無細菌生長，則說明對紫外線敏感，亦即此菌株具有uvrB缺失的特性。4.R因子測定（氨芐青霉素耐藥試驗）方法：在瓊脂平皿上

41、滴加氨芐青霉素溶液，不含R因子的菌株在氨芐青霉素周圍有一生長抑制區(qū)，含R因子的菌株因具有抗氨芐青霉素的作用，故無抑制區(qū)。5.自發(fā)回變數(shù)測定方法：取受試菌株新鮮培養(yǎng)液加到頂層瓊脂中，搖勻，迅速傾入底層葡萄糖平皿上，培養(yǎng)48小時，計數(shù)自發(fā)回變菌落數(shù)。菌株組氨酸需要rfa突變unrB缺失R因子自發(fā)回變菌落數(shù)TA97+90-180TA98+15-60TA100+75-200TA102+240-360野生型20.微核試驗的原理及方法原理：骨髓細胞經(jīng)致突變物作用，染色體發(fā)生畸變斷裂，其斷裂碎片在分裂間期留在子代細胞內(nèi)形成微核，所以觀察骨髓細胞中的微核率，有助于檢驗藥物是否具有致突變作用。方法：一般選擇NIH小鼠，每組10只雌雄各半的性成熟動物，分高（1/2LD50）、中、低三個劑量給藥，給藥途徑盡量與臨床擬用途徑相同，以溶媒為陰性對照，已知能誘發(fā)微核率升高的藥物（常用環(huán)磷酰胺）作為陽性對照，進行試驗，骨髓采樣，骨髓直接涂片法涂片，固定，染色，鏡檢。21.果蠅伴性隱性致死試驗的原理及結(jié)果判定原理：是利用隱性基因在伴性遺傳中的交叉