第四章微生物生長繁殖與其控制

1、第四章微生物生長繁殖與其控制一個微生物細(xì)胞一個微生物細(xì)胞合適的外界條件，吸收營養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)行代謝。合適的外界條件，吸收營養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)行代謝。如果同化作用的速度超過了異化作用如果同化作用的速度超過了異化作用個體的生長個體的生長原生質(zhì)的總量（重量、體積、大小）就不斷增加原生質(zhì)的總量（重量、體積、大?。┚筒粩嘣黾尤绻骷?xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L時，則達(dá)到一定程度后就如果各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L時，則達(dá)到一定程度后就會發(fā)生繁殖，引起個體數(shù)目的增加。會發(fā)生繁殖，引起個體數(shù)目的增加。群體內(nèi)各個個體的進(jìn)一步生長群體內(nèi)各個個體的進(jìn)一步生長群體的生長群體的生長群體生長群體生長 = = 個體生長個體生長 + +

2、個體繁殖個體繁殖個體生長個體生長 個體繁殖個體繁殖 群體生長群體生長在一定時間和條件下細(xì)胞數(shù)量的增加（微生物群體生長）在一定時間和條件下細(xì)胞數(shù)量的增加（微生物群體生長）微生物生長微生物生長: :在微生物學(xué)中提到的在微生物學(xué)中提到的“生長生長”，一般均指群體生長，這一點(diǎn)與，一般均指群體生長，這一點(diǎn)與研究大生物時有所不同。研究大生物時有所不同。5.1 5.1 微生物純培養(yǎng)分離及生長測定方法微生物純培養(yǎng)分離及生長測定方法獲得純培養(yǎng)的方法獲得純培養(yǎng)的方法純培養(yǎng)純培養(yǎng)(pure culture)(pure culture)微生物學(xué)中把從一個細(xì)胞或一微生物學(xué)中把從一個細(xì)胞或一群相同的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)繁殖而得到

3、的后代群相同的細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)繁殖而得到的后代, ,稱純培養(yǎng)稱純培養(yǎng). .首先將待分離的樣品進(jìn)行連續(xù)稀釋首先將待分離的樣品進(jìn)行連續(xù)稀釋, ,目的是得到高度稀目的是得到高度稀釋的效果釋的效果, ,使一支試管中分配不到一個微生物使一支試管中分配不到一個微生物. .如果經(jīng)過如果經(jīng)過稀釋后的大多數(shù)試管中沒有微生物生長稀釋后的大多數(shù)試管中沒有微生物生長, ,那么有微生物那么有微生物生長的試管得到的培養(yǎng)物可能就是由一個微生物個體繁生長的試管得到的培養(yǎng)物可能就是由一個微生物個體繁殖而來的純培養(yǎng)物殖而來的純培養(yǎng)物. .這種方法適合于細(xì)胞較大的微生物這種方法適合于細(xì)胞較大的微生物. .液體稀釋法液體稀釋法平板劃線分

4、離法（平板劃線分離法（Streak Plate）特點(diǎn)：快速、方便。特點(diǎn)：快速、方便。 分區(qū)劃線（適用于濃度較大的樣品）分區(qū)劃線（適用于濃度較大的樣品） 連續(xù)劃線（適用于濃度較小的樣品）連續(xù)劃線（適用于濃度較小的樣品）傾注平板法（傾注平板法（Pour Plate）Organisms are serially diluted, then a small amount is added to an empty sterile petri dish, to which melted agar at 50 C is added. Then mix to distribute the organisms.

5、 1ml1ml1ml1ml1ml1ml9ml9ml9ml9ml平板涂布分離法（平板涂布分離法（Spread Plate）簡單易行，但易造成機(jī)械損傷簡單易行，但易造成機(jī)械損傷Liquid specimen is spread on the surface of solid agar with a sterile bent glass rod. 選擇性培養(yǎng)分離法選擇性培養(yǎng)分離法為了從混雜的微生物群體中分離出某種微生物，可為了從混雜的微生物群體中分離出某種微生物，可以根據(jù)該微生物的特點(diǎn)，包括營養(yǎng)、生理、生長條以根據(jù)該微生物的特點(diǎn)，包括營養(yǎng)、生理、生長條件等，采用選擇培養(yǎng)的方法進(jìn)行分離。件等，采用選擇

6、培養(yǎng)的方法進(jìn)行分離。利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行直接分離利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行直接分離富集培養(yǎng)富集培養(yǎng)單細(xì)胞（單孢子）分離法單細(xì)胞（單孢子）分離法采用顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細(xì)胞或單個個體采用顯微分離法從混雜群體中直接分離單個細(xì)胞或單個個體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)的方法。該方法要在顯微鏡下進(jìn)行。進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)的方法。該方法要在顯微鏡下進(jìn)行。毛細(xì)管法：用毛細(xì)管提取微生物個體，適合于較大微生物。毛細(xì)管法：用毛細(xì)管提取微生物個體，適合于較大微生物。顯微操作儀：用顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個細(xì)胞或孢子以獲顯微操作儀：用顯微針、鉤、環(huán)等挑取單個細(xì)胞或孢子以獲得純培養(yǎng)。得純培養(yǎng)。小液滴法：將經(jīng)過適當(dāng)稀釋后的樣品

7、制成小液滴，在顯微鏡小液滴法：將經(jīng)過適當(dāng)稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含一個細(xì)胞的液滴來進(jìn)行純培養(yǎng)物的分離。下選取只含一個細(xì)胞的液滴來進(jìn)行純培養(yǎng)物的分離。膜過濾法膜過濾法When there is a small number of organisms in a large amount of liquid, the liquid is filtered through a membrane and then the membrane is placed on agar in a petri dish.單位時間里微生物數(shù)量或生物量（Biomass）的變化微生物生長：微生物生長的測定：

8、個體計(jì)數(shù)群體重量測定群體生理指標(biāo)測定評價培養(yǎng)條件、營養(yǎng)物質(zhì)等對微生物生長的影響；評價不同的抗菌物質(zhì)對微生物產(chǎn)生抑制(或殺死)作用的效果；客觀地反映微生物生長的規(guī)律；5.1.2 5.1.2 微生物生長的測定方法微生物生長的測定方法5.1.2.1 以數(shù)量變化對微生物生長情況進(jìn)行測定通常用來測定細(xì)菌、酵母菌等單細(xì)胞微生物的生長情況或樣品中所含微生物個體的數(shù)量（細(xì)菌、孢子、酵母菌）(1)、培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法采用培養(yǎng)平板計(jì)數(shù)法要求操作熟練、準(zhǔn)確，否則難以得到正確的結(jié)果：樣品充分混勻；每支移液管及涂布棒只能接觸一個稀釋度的菌液；同一稀釋度三個以上重復(fù),取平均值；每個平板上的菌落數(shù)目合適，便于準(zhǔn)確計(jì)數(shù)；一個菌落

9、可能是多個細(xì)胞一起形成，所以在科研中一般用菌落形成單位（colony forming units， CFU）來表示，而不是直接表示為細(xì)胞數(shù)。(2)膜過濾培養(yǎng)法當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時，可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時，可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過膜過濾器，然后將將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，對形品通過膜過濾器，然后將將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，對形成的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。成的菌落進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。微生物在過濾膜表面情況微生物在過濾膜表面情況(3) The most probable number method(3) The most probable number m

10、ethod（液體稀釋法）（液體稀釋法）主要適用于只能進(jìn)行液體培養(yǎng)的微生主要適用于只能進(jìn)行液體培養(yǎng)的微生物，或采用液體鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行直接物，或采用液體鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行直接鑒定并計(jì)數(shù)的微生物。鑒定并計(jì)數(shù)的微生物。對未知樣品進(jìn)行十倍稀釋，然后根據(jù)估算取三個連續(xù)的稀釋度對未知樣品進(jìn)行十倍稀釋，然后根據(jù)估算取三個連續(xù)的稀釋度平行接種多支試管，對這些平行試管的微生物生長情況進(jìn)行統(tǒng)平行接種多支試管，對這些平行試管的微生物生長情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，長菌的為陽性，未長菌的為陰性，然后根據(jù)數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)計(jì)算計(jì)，長菌的為陽性，未長菌的為陰性，然后根據(jù)數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)計(jì)算出樣品中的微生物數(shù)目。出樣品中的微生物數(shù)目。(4)(4)顯微鏡直接計(jì)數(shù)

11、法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法1 1）常規(guī)方法：）常規(guī)方法：采用細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下對微生物數(shù)量進(jìn)行直接采用細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血球計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下對微生物數(shù)量進(jìn)行直接計(jì)數(shù)（計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量）。計(jì)數(shù)（計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量）。缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌；不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對運(yùn)動細(xì)菌的計(jì)數(shù)；不適于對運(yùn)動細(xì)菌的計(jì)數(shù)；需要相對高的細(xì)菌濃度；需要相對高的細(xì)菌濃度；個體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察；個體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察；2 2）其它方法：）其它方法：將已知顆粒濃度的樣品（例如血液）與待測細(xì)胞細(xì)胞濃度的樣品混勻?qū)⒁阎w粒濃度的樣品（例如血液）與待測細(xì)胞細(xì)胞濃度的樣

12、品混勻后在顯微鏡下根據(jù)二者之間的比例直接推算待測微生物細(xì)胞濃度。后在顯微鏡下根據(jù)二者之間的比例直接推算待測微生物細(xì)胞濃度。比例計(jì)數(shù)：比例計(jì)數(shù)：過濾計(jì)數(shù)：過濾計(jì)數(shù)：當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時，可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時，可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過膜過濾器。然后將濾膜干燥、染色，并經(jīng)處理使膜透明，再在顯通過膜過濾器。然后將濾膜干燥、染色，并經(jīng)處理使膜透明，再在顯微鏡下計(jì)算膜上微鏡下計(jì)算膜上( (或一定面積中或一定面積中) )的細(xì)菌數(shù)；的細(xì)菌數(shù)；活菌計(jì)數(shù)：活菌計(jì)數(shù)：采用特定的染色技術(shù)也可分別對活菌和死菌進(jìn)行分別計(jì)數(shù)采用特定的染色技術(shù)也可分別對活菌和死菌進(jìn)行分

13、別計(jì)數(shù)5.1.2.2 5.1.2.2 以生物量為指標(biāo)測定微生物的生長以生物量為指標(biāo)測定微生物的生長(1)(1)比濁法比濁法在一定波長下，測定菌懸液的光密在一定波長下，測定菌懸液的光密度，以光密度度，以光密度(optical density, (optical density, 即即OD)OD)表示菌量。表示菌量。實(shí)驗(yàn)測量時應(yīng)控制在菌濃度與光密度實(shí)驗(yàn)測量時應(yīng)控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內(nèi)，否則不準(zhǔn)確。成正比的線性范圍內(nèi)，否則不準(zhǔn)確。比濁法比濁法原理是在一定范圍內(nèi)，菌懸液中的細(xì)胞濃度與混濁度成原理是在一定范圍內(nèi)，菌懸液中的細(xì)胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌數(shù)越多，光密度越大。因正

14、比，即與光密度成正比，菌數(shù)越多，光密度越大。因此，借助于分光光度計(jì)，在一定波長下測定菌懸液的光此，借助于分光光度計(jì)，在一定波長下測定菌懸液的光密度，就可反應(yīng)出菌液的濃度。密度，就可反應(yīng)出菌液的濃度。特點(diǎn)：快速、簡便；但易受干擾。特點(diǎn)：快速、簡便；但易受干擾。(2)重量法以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量；通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測定間接推算微生物群體的生物量；測定多細(xì)胞及絲狀真菌生長情況的有效方法干重法干重法將一定量的菌液中的菌體通過離心或過濾分離將一定量的菌液中的菌體通過離心或過濾分離出來出來, ,然后烘干然后烘干( (干燥溫度可采用干燥溫度可采用105105、100100或或80)

15、80)、稱重。一般干重為濕重的、稱重。一般干重為濕重的10%10%20%20%，而一個細(xì)菌細(xì)胞一般重約而一個細(xì)菌細(xì)胞一般重約1010-12-121010-13-13g g。該法適合菌濃較高的樣品。該法適合菌濃較高的樣品。舉例：大腸桿菌一個細(xì)胞一般重約10121013g，液體培養(yǎng)物中細(xì)胞濃度達(dá)到2109個/ml時，100ml培養(yǎng)物可得1090mg干重的細(xì)胞。3 3、 生理指標(biāo)法生理指標(biāo)法微生物的生理指標(biāo)，如呼吸強(qiáng)度，耗氧量、酶活性、微生物的生理指標(biāo)，如呼吸強(qiáng)度，耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。樣品中微生物數(shù)量多或生長旺盛，這些指標(biāo)愈明顯，樣品中微生

16、物數(shù)量多或生長旺盛，這些指標(biāo)愈明顯，因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱計(jì)等設(shè)備來測定相應(yīng)的指標(biāo)。熱計(jì)等設(shè)備來測定相應(yīng)的指標(biāo)。常用于對微生物的快速鑒定與檢測常用于對微生物的快速鑒定與檢測生理指標(biāo)法生理指標(biāo)法測含氮量測含氮量蛋白質(zhì)是細(xì)胞的主要物質(zhì)，含量穩(wěn)定，而氮是蛋白質(zhì)的主蛋白質(zhì)是細(xì)胞的主要物質(zhì)，含量穩(wěn)定，而氮是蛋白質(zhì)的主要成分，通過測含氮量就可推知微生物的濃度。要成分，通過測含氮量就可推知微生物的濃度。一般細(xì)菌含氮量為干重的一般細(xì)菌含氮量為干重的12.5%12.5%，酵母菌為，酵母菌為7.5%7.5%，霉菌為，霉菌為6.0%6.0%，根據(jù)一

17、定體積培養(yǎng)液中的含氮量再乘以，根據(jù)一定體積培養(yǎng)液中的含氮量再乘以6.256.25，就可，就可測得粗蛋白的含量。測得粗蛋白的含量。其他方法其他方法含碳、磷、含碳、磷、DNADNA、RNARNA、耗氧量、消耗底物量、產(chǎn)二氧化碳、耗氧量、消耗底物量、產(chǎn)二氧化碳、產(chǎn)酸、產(chǎn)熱、粘度等，都可用于生長量的測定。產(chǎn)酸、產(chǎn)熱、粘度等，都可用于生長量的測定。無分支單細(xì)胞微生物主要包括細(xì)菌和酵母菌，無分支單細(xì)胞微生物主要包括細(xì)菌和酵母菌，其群體生長是以群體中細(xì)胞數(shù)量的增加來表示的，其群體生長是以群體中細(xì)胞數(shù)量的增加來表示的， 由一個細(xì)胞分裂成為兩個細(xì)胞的時間間隔稱為世代，由一個細(xì)胞分裂成為兩個細(xì)胞的時間間隔稱為世代

18、，一個世代所需的時間就是代時（一個世代所需的時間就是代時（eneration time, eneration time, G G ），代時也就是群體細(xì)胞數(shù)目擴(kuò)大一倍所需），代時也就是群體細(xì)胞數(shù)目擴(kuò)大一倍所需 時間，時間，有時也稱為倍增時間。有時也稱為倍增時間。右圖表示的是一個細(xì)胞經(jīng)過若干代分裂右圖表示的是一個細(xì)胞經(jīng)過若干代分裂后的情況。右圖可見，每經(jīng)過一個代時，后的情況。右圖可見，每經(jīng)過一個代時，細(xì)胞數(shù)目就增加一倍，呈指數(shù)增加，因而細(xì)胞數(shù)目就增加一倍，呈指數(shù)增加，因而被稱為被稱為指數(shù)生長指數(shù)生長，這，這就是單細(xì)胞群體生長就是單細(xì)胞群體生長的特征。的特征。無分支單細(xì)胞微生物的群體生長特征無分支單

19、細(xì)胞微生物的群體生長特征5.2 5.2 微生物的群體生長微生物的群體生長指數(shù)生長可以用下式表示：指數(shù)生長可以用下式表示： b = B2nB, b 和和 t 可由試驗(yàn)獲得，可由試驗(yàn)獲得， n 可通過上式計(jì)算得出，可通過上式計(jì)算得出，將等式兩側(cè)取對數(shù)重排后得：將等式兩側(cè)取對數(shù)重排后得： lgb = lgB + nlg2 lgb - lgB lgb - lgB lg2 0.301 式中：式中：B 為起始時細(xì)胞數(shù)目，為起始時細(xì)胞數(shù)目， b 為指數(shù)生長某個時刻為指數(shù)生長某個時刻 t 時的細(xì)胞數(shù)目，時的細(xì)胞數(shù)目， n 為世代數(shù)為世代數(shù)n =指數(shù)生長指數(shù)生長例如：一培養(yǎng)液中微生物數(shù)目由開始的例如：一培養(yǎng)液中

20、微生物數(shù)目由開始的12，000（ B ），經(jīng)），經(jīng)4h （ t ）后增加到）后增加到49，000，000（ b ），），這樣，這樣， n (lg4.9107lg1.2104）12借助于借助于 n 和和 t ，還可以計(jì)算出不同培養(yǎng)條件下的代時，還可以計(jì)算出不同培養(yǎng)條件下的代時G， G t / n在本例中，在本例中， G 460 / 12 20min該種微生物的代時為該種微生物的代時為20分鐘。在分鐘。在4小時內(nèi)共繁殖了小時內(nèi)共繁殖了12代。代。代時能夠反應(yīng)細(xì)菌的生長速率，代時短，生長速代時能夠反應(yīng)細(xì)菌的生長速率，代時短，生長速率快，代時長，生長速率慢。率快，代時長，生長速率慢。在很多微生物學(xué)研究

21、在很多微生物學(xué)研究中常常要了解微生物的代時。中常常要了解微生物的代時。代時在不同種微生物中的變化很大，多數(shù)微生物代時在不同種微生物中的變化很大，多數(shù)微生物的代時為的代時為13h,然而有些快速生長的微生物的代時還然而有些快速生長的微生物的代時還不到不到10min,而另一些微生物的代時卻可長達(dá)幾小時而另一些微生物的代時卻可長達(dá)幾小時或幾天；或幾天；另外，同一種微生物，在不同的生長條件另外，同一種微生物，在不同的生長條件下其代時的長短也不同；但是，在一定條件下，每下其代時的長短也不同；但是，在一定條件下，每一種微生物的代時是恒定的，因此它是微生物菌種一種微生物的代時是恒定的，因此它是微生物菌種的一個

22、重要特征。的一個重要特征。一些細(xì)菌的代時一些細(xì)菌的代時菌名菌名培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)溫度 代時代時E. coli（大腸桿菌）（大腸桿菌） 肉湯肉湯 3717minE. coli 牛奶牛奶 3712.5Enterobacter aerogenes（產(chǎn)氣腸細(xì)菌）（產(chǎn)氣腸細(xì)菌）肉湯或牛奶肉湯或牛奶 371618E. aerogenes 組合組合 372944B. Cereus（蠟狀芽孢桿菌）（蠟狀芽孢桿菌）肉湯肉湯3018B. thermophilus（嗜熱芽孢桿菌）（嗜熱芽孢桿菌）肉湯肉湯Lactobacillus acidophilus（嗜酸乳桿菌）（嗜酸乳桿菌） 牛奶牛奶376687Stre

23、ptococcus lactis（乳酸鏈球菌）（乳酸鏈球菌）牛奶牛奶3726S. lactis乳糖肉湯乳糖肉湯3748Salmonella typhi（傷寒沙門氏菌）（傷寒沙門氏菌）肉湯肉湯Azotobacter chroococcum（褐球固氮菌）（褐球固氮菌） 葡萄糖葡萄糖2534446Mycobacterium tuberculosis（結(jié)核分枝桿菌）組合（結(jié)核分枝桿菌）組合3779293Nitrobacter agilis（活躍硝化桿菌）（活躍硝化桿菌）組合組合271200不同溫度下的代時不同溫度下的代時溫度對微生物的代時有明顯影響：溫度對微生物的代時有明顯影響： E. Coli 在不

24、同溫度下的代時在不同溫度下的代時溫度（溫度（）代時（分）代時（分）溫度（溫度（）代時（分）代時（分）10860352215120371725404520302947.5775.2.2 5.2.2 無分支單細(xì)胞微生物的群體生長曲線無分支單細(xì)胞微生物的群體生長曲線以細(xì)菌為例介紹無分支單細(xì)胞微生物群體生長規(guī)律，其以細(xì)菌為例介紹無分支單細(xì)胞微生物群體生長規(guī)律，其結(jié)論也基本適用于酵母菌。結(jié)論也基本適用于酵母菌。生長曲線代表了細(xì)菌在新的環(huán)境中從開始生長、分裂直生長曲線代表了細(xì)菌在新的環(huán)境中從開始生長、分裂直至死亡的整個動態(tài)變化過程。至死亡的整個動態(tài)變化過程。每種細(xì)菌都有各自的典型生長曲線，但它們的生長過程

25、每種細(xì)菌都有各自的典型生長曲線，但它們的生長過程卻有著共同的規(guī)律性。一般可以將生長曲線劃分為四個時卻有著共同的規(guī)律性。一般可以將生長曲線劃分為四個時期。期。生長曲線生長曲線(Growth Curve)(Growth Curve)： 細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中，定時取樣測定細(xì)胞數(shù)量，細(xì)菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中，定時取樣測定細(xì)胞數(shù)量，以培養(yǎng)時間為橫座標(biāo)，以菌數(shù)為縱座標(biāo)作圖，得到的一條反映細(xì)以培養(yǎng)時間為橫座標(biāo)，以菌數(shù)為縱座標(biāo)作圖，得到的一條反映細(xì)菌在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。菌在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。細(xì)菌的生長曲線一般用菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo)作圖一條典型的生長曲線至少可以分為 遲緩期

26、，對數(shù)期，穩(wěn)定期和衰亡期等四個生長時期1、2為延遲期；3、4為對數(shù)生長期；5.為穩(wěn)定期；6.為衰亡期典型的生長曲線典型的生長曲線 （Growth curve）延延滯滯期期對對數(shù)數(shù)期期穩(wěn)定期穩(wěn)定期衰亡期衰亡期時期的劃分：按照生長速率常數(shù)（時期的劃分：按照生長速率常數(shù)（growth race constant）不同）不同遲緩期(Lag phase)：將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不立即增加，或增加很少，生長速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。遲緩期的特點(diǎn)遲緩期的特點(diǎn)：分裂遲緩、代謝活躍分裂遲緩、代謝活躍t 細(xì)胞形態(tài)變大或增長，例如巨大芽孢桿菌，在遲緩期末，細(xì)胞形態(tài)變大或增長，例如巨

27、大芽孢桿菌，在遲緩期末，細(xì)胞的平均長度比剛接種時長細(xì)胞的平均長度比剛接種時長6 6倍。一般來說處于遲緩期的細(xì)菌倍。一般來說處于遲緩期的細(xì)菌細(xì)胞體積最大細(xì)胞體積最大t 細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)RNARNA，尤其是，尤其是rRNArRNA含量增高，合成代謝活躍，核糖體、含量增高，合成代謝活躍，核糖體、酶類和酶類和ATPATP的合成加快，易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。的合成加快，易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。t 對外界不良條件反應(yīng)敏感。對外界不良條件反應(yīng)敏感。細(xì)胞處于活躍生長中，只是分裂遲緩細(xì)胞處于活躍生長中，只是分裂遲緩在此階段后期，少數(shù)細(xì)胞開始分裂，曲線略有上升。在此階段后期，少數(shù)細(xì)胞開始分裂，曲線略有上升。遲緩期出現(xiàn)的原因遲緩期出現(xiàn)的原

28、因：微生物接種到一個新的環(huán)境，暫時缺乏分解和催化有關(guān)底物的酶，微生物接種到一個新的環(huán)境，暫時缺乏分解和催化有關(guān)底物的酶，或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成中間代謝或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成中間代謝產(chǎn)物，就需要一段適應(yīng)期。產(chǎn)物，就需要一段適應(yīng)期。調(diào)整代謝調(diào)整代謝遲緩期的長短與菌種的遺傳性、菌齡以及移種前后所處的環(huán)境遲緩期的長短與菌種的遺傳性、菌齡以及移種前后所處的環(huán)境條件等因素有關(guān)，短的只需要幾分鐘，長的需數(shù)小時。條件等因素有關(guān)，短的只需要幾分鐘，長的需數(shù)小時。在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短遲緩期的常用手段：在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短遲緩期的常用手段：(1)(1)通過遺傳學(xué)方法改變種

29、的遺傳特性使遲緩期縮短；通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；(2)(2)利用對數(shù)生長期的細(xì)胞作為種子；利用對數(shù)生長期的細(xì)胞作為種子；(3)(3)盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；(4)(4)適當(dāng)擴(kuò)大接種量適當(dāng)擴(kuò)大接種量對數(shù)生長期對數(shù)生長期(Log phase)(Log phase)：又稱指數(shù)生長期又稱指數(shù)生長期(Exponential phase)(Exponential phase)以最大的速率生長和分裂，細(xì)菌數(shù)量呈對數(shù)增加，以最大的速率生長和分裂，細(xì)菌數(shù)量呈對數(shù)增加，細(xì)菌內(nèi)各成分按比例有規(guī)律地增加，表現(xiàn)為平衡生長。細(xì)菌內(nèi)各成

30、分按比例有規(guī)律地增加，表現(xiàn)為平衡生長。對數(shù)生長期的細(xì)菌個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致，代謝旺盛、生長對數(shù)生長期的細(xì)菌個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致，代謝旺盛、生長迅速、代時穩(wěn)定，所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產(chǎn)上用作迅速、代時穩(wěn)定，所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產(chǎn)上用作種子，使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短，提高經(jīng)濟(jì)效益。種子，使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短，提高經(jīng)濟(jì)效益。其他名稱：指數(shù)期其他名稱：指數(shù)期 現(xiàn)象：現(xiàn)象：細(xì)胞數(shù)目以幾何級數(shù)增加，其對數(shù)與時間呈直線關(guān)系。細(xì)胞數(shù)目以幾何級數(shù)增加，其對數(shù)與時間呈直線關(guān)系。 特點(diǎn)：特點(diǎn)：生長速率常數(shù)最大，即代時最短生長速

31、率常數(shù)最大，即代時最短細(xì)胞進(jìn)行平衡生長，細(xì)胞進(jìn)行平衡生長，菌體大小、形態(tài)、生理特征等比較一致菌體大小、形態(tài)、生理特征等比較一致代謝最旺盛代謝最旺盛細(xì)胞對理化因素較敏感細(xì)胞對理化因素較敏感影響因素：影響因素：菌種菌種營養(yǎng)成分營養(yǎng)成分營養(yǎng)物濃度營養(yǎng)物濃度培養(yǎng)溫度培養(yǎng)溫度應(yīng)用意義：應(yīng)用意義：由于此時期的菌種比較健壯，增殖噬菌體的最適菌齡；由于此時期的菌種比較健壯，增殖噬菌體的最適菌齡；生產(chǎn)上用作接種的最佳菌齡；生產(chǎn)上用作接種的最佳菌齡；發(fā)酵工業(yè)上盡量延長該期，以達(dá)到較高的菌體密度發(fā)酵工業(yè)上盡量延長該期，以達(dá)到較高的菌體密度食品工業(yè)上盡量使有害微生物不能進(jìn)入此期食品工業(yè)上盡量使有害微生物不能進(jìn)入此期是

32、生理代謝及是生理代謝及遺傳研究或進(jìn)行染色、形態(tài)觀察等遺傳研究或進(jìn)行染色、形態(tài)觀察等的良好的良好材料材料。營養(yǎng)物濃度與對數(shù)期生長速率和產(chǎn)量營養(yǎng)物濃度與對數(shù)期生長速率和產(chǎn)量作用方式：影響作用方式：影響微生物的生長微生物的生長速率和總生長速率和總生長量量：凡是處于較低凡是處于較低濃度范圍內(nèi)，濃度范圍內(nèi)，可影響生長速可影響生長速率和菌體產(chǎn)量率和菌體產(chǎn)量的營養(yǎng)物就稱的營養(yǎng)物就稱生長限制因子生長限制因子8.0mg/ml6.0mg/ml4.0mg/ml2.0mg/ml1.0mg/ml0.5mg/ml0.2mg/ml0.1mg/ml只最大收只最大收獲量受影響獲量受影響生長速度和最大生長速度和最大收獲量受影響收

33、獲量受影響時間時間細(xì)胞數(shù)或菌體量細(xì)胞數(shù)或菌體量穩(wěn)定生長期穩(wěn)定生長期(Stationary phase)(Stationary phase)：由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗，代謝產(chǎn)物積累和由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗，代謝產(chǎn)物積累和pHpH等環(huán)境變化，逐步不適宜等環(huán)境變化，逐步不適宜于細(xì)菌生長，導(dǎo)致生長速率降低直至零于細(xì)菌生長，導(dǎo)致生長速率降低直至零( (即細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等即細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)于細(xì)菌死亡數(shù)) )。穩(wěn)定生長期又稱恒定期或最高生長期，此時培養(yǎng)液中活細(xì)菌數(shù)穩(wěn)定生長期又稱恒定期或最高生長期，此時培養(yǎng)液中活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定。最高并維持穩(wěn)定。細(xì)胞重要的分化調(diào)節(jié)階段；細(xì)胞重要的分化調(diào)節(jié)階段；儲存糖

34、原等細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物，芽孢桿菌在此階段形成芽孢或建立自然儲存糖原等細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含物，芽孢桿菌在此階段形成芽孢或建立自然感受態(tài)等。也是發(fā)酵過程積累代謝產(chǎn)物的重要階段，某些放線菌抗感受態(tài)等。也是發(fā)酵過程積累代謝產(chǎn)物的重要階段，某些放線菌抗生素的大量形成也在此時期。生素的大量形成也在此時期。生產(chǎn)上常通過補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)（補(bǔ)料）或取走代謝產(chǎn)物、調(diào)節(jié)生產(chǎn)上常通過補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)（補(bǔ)料）或取走代謝產(chǎn)物、調(diào)節(jié)pHpH、調(diào)節(jié)溫度、對好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩等措施延長穩(wěn)定生長調(diào)節(jié)溫度、對好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩等措施延長穩(wěn)定生長期，以獲得更多的菌體物質(zhì)或積累更多的代謝產(chǎn)物。期，以獲得更多的菌體物質(zhì)或積累更多的代謝產(chǎn)物。應(yīng)用

35、意義：應(yīng)用意義：1 1）發(fā)酵生產(chǎn)形成的重要時期（抗生素、氨基酸等），生產(chǎn)上）發(fā)酵生產(chǎn)形成的重要時期（抗生素、氨基酸等），生產(chǎn)上應(yīng)盡量延長此期，提高產(chǎn)量，措施如下：應(yīng)盡量延長此期，提高產(chǎn)量，措施如下： 補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)（補(bǔ)料）補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)（補(bǔ)料） 調(diào)調(diào)pH pH 調(diào)整溫度調(diào)整溫度 2）穩(wěn)定期細(xì)胞數(shù)目及產(chǎn)物積累達(dá)到最高。）穩(wěn)定期細(xì)胞數(shù)目及產(chǎn)物積累達(dá)到最高。生長產(chǎn)量常數(shù)（生長產(chǎn)量常數(shù)（Y，或生長得率，或生長得率，growth yield）：）：概念：表示微生物對基質(zhì)利用效率的高低概念：表示微生物對基質(zhì)利用效率的高低 Y=菌體干重菌體干重/ 消耗營養(yǎng)物質(zhì)的濃度消耗營養(yǎng)物質(zhì)的濃度 根據(jù)產(chǎn)量常數(shù)可確定微生物對

36、營養(yǎng)物質(zhì)的需要量根據(jù)產(chǎn)量常數(shù)可確定微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要量 如：，表示要得到如：，表示要得到5g5g菌體，需某營養(yǎng)物（葡萄菌體，需某營養(yǎng)物（葡萄 糖）糖）10g10g。Y=x x0C0 C=x x0C0衰亡期衰亡期(Decline(Decline或或Death phase)Death phase)：營養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累，細(xì)菌死亡速率超過新生營養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累，細(xì)菌死亡速率超過新生速率，整個群體呈現(xiàn)出負(fù)增長。速率，整個群體呈現(xiàn)出負(fù)增長。該時期死亡的細(xì)菌以對數(shù)方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分該時期死亡的細(xì)菌以對數(shù)方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分細(xì)菌產(chǎn)生抗性

37、也會使細(xì)菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。細(xì)菌產(chǎn)生抗性也會使細(xì)菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。細(xì)菌代謝活性降低，細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶，產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物，細(xì)菌代謝活性降低，細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶，產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物，如氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等。如氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等。細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)，有時產(chǎn)生畸細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)，有時產(chǎn)生畸形，細(xì)胞大小懸殊，有些革蘭氏染色反應(yīng)陽性菌變成陰性反應(yīng)等。形，細(xì)胞大小懸殊，有些革蘭氏染色反應(yīng)陽性菌變成陰性反應(yīng)等。不同的微生物或同一種微生物對不同物質(zhì)的利用能力是不同的。不同的微生物或同一種微生物對不同物質(zhì)的利用能力是不同的。有的物質(zhì)可直接被利用有的

38、物質(zhì)可直接被利用( (例如葡萄糖或例如葡萄糖或NHNH+4+4等等) )；有的需要經(jīng)過一；有的需要經(jīng)過一定的適應(yīng)期后才能獲得利用能力（例如乳糖或定的適應(yīng)期后才能獲得利用能力（例如乳糖或NONO3 3- -等）。前者通等）。前者通常稱為速效碳源（或氮源），后者稱為遲效碳源（或氮源）。當(dāng)常稱為速效碳源（或氮源），后者稱為遲效碳源（或氮源）。當(dāng)培養(yǎng)基中同時含有這兩類碳源（或氮源）時，微生物在生長過程培養(yǎng)基中同時含有這兩類碳源（或氮源）時，微生物在生長過程中會形成二次生長現(xiàn)象。中會形成二次生長現(xiàn)象。由于采用活菌計(jì)數(shù)比較麻煩，并要求嚴(yán)格進(jìn)行操作，否則不易得到準(zhǔn)確的結(jié)果，重復(fù)性也差，因此在實(shí)際工作中多采用

39、分光光度計(jì)測定OD值的方法繪制細(xì)菌的生長曲線。微生物生長動力學(xué)微生物生長動力學(xué)( (補(bǔ)充）補(bǔ)充）研究微生物生長與環(huán)境因素之間變化的規(guī)律。研究微生物生長與環(huán)境因素之間變化的規(guī)律。微生物生長速度微生物生長速度底物的消耗速度底物的消耗速度產(chǎn)物的生成速度產(chǎn)物的生成速度 以比生長速率以比生長速率 對限制性營養(yǎng)物的濃度對限制性營養(yǎng)物的濃度SS作圖，作圖，往往符合往往符合MonodMonod公式：公式： = = maxmaxS/S/（KS + SKS + S） 核心核心式中max為最大比生長速率；S是培養(yǎng)基中限制性營養(yǎng)物質(zhì)的濃度； KS為飽和常數(shù)KS為微生物以最大速度的一半的速度生長時，所要求的營養(yǎng)物質(zhì)濃度

40、，即 = max/2時，KS = S。Monod公式只適用于單個限制性營養(yǎng)物質(zhì)的情況。常見的營養(yǎng)物質(zhì)的KS值很小，當(dāng) S10 KS時， 接近于 max ，比生長速率不再明顯受營養(yǎng)物質(zhì)濃度變化的影響 lg 細(xì)胞數(shù)或產(chǎn)物細(xì)胞數(shù)或產(chǎn)物濃度濃度時間時間細(xì)胞細(xì)胞 產(chǎn)產(chǎn)物物I型型II型型微生物生長與代謝產(chǎn)物形成的關(guān)系微生物生長與代謝產(chǎn)物形成的關(guān)系微生物發(fā)酵形成產(chǎn)物的過程與微生物細(xì)胞生長的過程并不總是一微生物發(fā)酵形成產(chǎn)物的過程與微生物細(xì)胞生長的過程并不總是一致的。一般認(rèn)為：致的。一般認(rèn)為：初級代謝是給予生物能量和生成中間產(chǎn)物的過程，初級代謝產(chǎn)物初級代謝是給予生物能量和生成中間產(chǎn)物的過程，初級代謝產(chǎn)物的形成往

41、往與微生物細(xì)胞的形成過程同步，微生物生長的穩(wěn)定期的形成往往與微生物細(xì)胞的形成過程同步，微生物生長的穩(wěn)定期是這些產(chǎn)物的最佳收獲時機(jī)；是這些產(chǎn)物的最佳收獲時機(jī)；次級代謝產(chǎn)物與微生物的次級代謝產(chǎn)物與微生物的生存、生長和繁殖無關(guān)。生存、生長和繁殖無關(guān)。次級代謝產(chǎn)物的形成往往次級代謝產(chǎn)物的形成往往與微生物細(xì)胞的形成過程與微生物細(xì)胞的形成過程不同步。在分批培養(yǎng)中，不同步。在分批培養(yǎng)中，它們的形成高峰往往在微它們的形成高峰往往在微生物生長穩(wěn)定期的后期或生物生長穩(wěn)定期的后期或衰亡期。衰亡期。絲狀微生物的群體生長絲狀微生物的群體生長絲狀微生物的純培養(yǎng)采用孢絲狀微生物的純培養(yǎng)采用孢子接種，在液體培養(yǎng)基中震子接種，

42、在液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)或深層通氣加攪拌培蕩培養(yǎng)或深層通氣加攪拌培養(yǎng)，菌絲體通過斷裂繁殖不養(yǎng)，菌絲體通過斷裂繁殖不形成產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)?？梢杂镁z形成產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)?？梢杂镁z干重作為衡量生長的指標(biāo)，干重作為衡量生長的指標(biāo)，即以時間為橫坐標(biāo)，以菌絲即以時間為橫坐標(biāo)，以菌絲干重為縱坐標(biāo)，繪制生長曲干重為縱坐標(biāo)，繪制生長曲線。線?？煞譃槿齻€階段：可分為三個階段：1、生長停滯期、生長停滯期2、迅速生長期、迅速生長期3、衰退期、衰退期1、生長停滯期、生長停滯期: 造成生長停滯的原因一是孢子萌發(fā)前真正的造成生長停滯的原因一是孢子萌發(fā)前真正的停滯狀態(tài)，另一種是生長已經(jīng)開始，但還無法測定。停滯狀態(tài)，另一種是生長已經(jīng)開始，但

43、還無法測定。2、迅速生長期、迅速生長期:菌絲體干重迅速增加，其立方根與時間呈直菌絲體干重迅速增加，其立方根與時間呈直線關(guān)系，菌絲干重不以幾何級數(shù)增加，沒有對數(shù)生長期。生線關(guān)系，菌絲干重不以幾何級數(shù)增加，沒有對數(shù)生長期。生長主要表現(xiàn)在菌絲尖端的伸長和出現(xiàn)分支、斷裂等，此時期長主要表現(xiàn)在菌絲尖端的伸長和出現(xiàn)分支、斷裂等，此時期的菌體呼吸強(qiáng)度達(dá)到高峰，有的開始積累代謝產(chǎn)物。的菌體呼吸強(qiáng)度達(dá)到高峰，有的開始積累代謝產(chǎn)物。3、衰退期、衰退期:菌絲體干重下降，到一定時期不再變化。大多數(shù)菌絲體干重下降，到一定時期不再變化。大多數(shù)次級代謝產(chǎn)物在此期合成，大多數(shù)細(xì)胞都出現(xiàn)大的空泡。有次級代謝產(chǎn)物在此期合成，大多

44、數(shù)細(xì)胞都出現(xiàn)大的空泡。有些菌絲體還會發(fā)生自溶菌絲體，這與菌種和培養(yǎng)條件有關(guān)。些菌絲體還會發(fā)生自溶菌絲體，這與菌種和培養(yǎng)條件有關(guān)。絲狀微生物的群體生長絲狀微生物的群體生長5.3 5.3 同步培養(yǎng)同步培養(yǎng)同步培養(yǎng)同步培養(yǎng)(Synchronous culture)(Synchronous culture)：使群體中的細(xì)胞處于比較一致的，生長發(fā)育均處于同一階使群體中的細(xì)胞處于比較一致的，生長發(fā)育均處于同一階段上，即大多數(shù)細(xì)胞能同時進(jìn)行生長或分裂的培養(yǎng)方法。段上，即大多數(shù)細(xì)胞能同時進(jìn)行生長或分裂的培養(yǎng)方法。以同步培養(yǎng)方法使群體細(xì)胞能處于同一生長階段，并同時以同步培養(yǎng)方法使群體細(xì)胞能處于同一生長階段，并同

45、時進(jìn)行分裂的生長。進(jìn)行分裂的生長。同步生長：同步生長：通過同步培養(yǎng)方法獲得的細(xì)胞被稱為同步細(xì)胞或同步培養(yǎng)物通過同步培養(yǎng)方法獲得的細(xì)胞被稱為同步細(xì)胞或同步培養(yǎng)物同步培養(yǎng)物常被用來研究在單個細(xì)胞上難以研究的生理與遺傳特性和作為工業(yè)發(fā)酵的種子，它是一種理想的材料。機(jī)械方法離心方法過濾分離法硝酸纖維素濾膜法環(huán)境條件控制技術(shù)溫度培養(yǎng)基成份控制其他（如光照和黑暗交替培養(yǎng)）第二節(jié) 細(xì)菌的群體生長繁殖硝酸纖維素濾膜法是最經(jīng)典的獲得同步生長的方法硝酸纖維素濾膜法是最經(jīng)典的獲得同步生長的方法由于細(xì)胞的個體差異，同步生長往往只能維持由于細(xì)胞的個體差異，同步生長往往只能維持2-32-3個世代，個世代，隨后又逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>

46、隨機(jī)生長。隨后又逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)殡S機(jī)生長。5.4 5.4 連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中，經(jīng)過培養(yǎng)生長，最后一次收獲。將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中，經(jīng)過培養(yǎng)生長，最后一次收獲。分批培養(yǎng)（分批培養(yǎng)（batch culturebatch culture）oror封閉培養(yǎng)（封閉培養(yǎng)（closed cultureclosed culture）培養(yǎng)基一次加入，不予補(bǔ)充，不再更換。培養(yǎng)基一次加入，不予補(bǔ)充，不再更換。連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)(Continous culture (Continous culture ）在微生物的整個培養(yǎng)期間，通過一定的方式使微生物能以恒定在微生物的整個培養(yǎng)期間，通過一定

47、的方式使微生物能以恒定的比生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。的比生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。培養(yǎng)過程中不斷的補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物是培養(yǎng)過程中不斷的補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物是實(shí)現(xiàn)微生物連續(xù)培養(yǎng)的基本原則。實(shí)現(xiàn)微生物連續(xù)培養(yǎng)的基本原則。控制連續(xù)培養(yǎng)的方法控制連續(xù)培養(yǎng)的方法恒濁連續(xù)培養(yǎng)恒濁連續(xù)培養(yǎng)不斷調(diào)節(jié)流速而使細(xì)菌培養(yǎng)液濁度保持恒定不斷調(diào)節(jié)流速而使細(xì)菌培養(yǎng)液濁度保持恒定恒化連續(xù)培養(yǎng)恒化連續(xù)培養(yǎng)保持恒定的流速保持恒定的流速連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)理論基礎(chǔ)：由于對典型生長曲線中穩(wěn)定理論基礎(chǔ)：由于對典型生長曲線中穩(wěn)定期到來原因的認(rèn)識，采取相應(yīng)有效措施推遲其來期到來原因的認(rèn)識，采取相應(yīng)有效措施推遲其來臨，從而發(fā)展出現(xiàn)在的連續(xù)培養(yǎng)技術(shù)。臨，從而發(fā)展出現(xiàn)在的連續(xù)培養(yǎng)技術(shù)。原理：當(dāng)微生物在單批培養(yǎng)方式下