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文檔簡介

1、實驗一實驗一 微生物學實驗常用儀器洗滌及干微生物學實驗常用儀器洗滌及干熱滅菌熱滅菌 目目 的的 要要 求求l 認識微生物實驗所需要的各種器皿,了解常認識微生物實驗所需要的各種器皿,了解常用工具和儀器的名稱、用途。用工具和儀器的名稱、用途。l 掌握對玻璃器皿的清洗、包扎方法與干熱滅掌握對玻璃器皿的清洗、包扎方法與干熱滅菌的操作過程。菌的操作過程。實驗原理實驗原理l 微生物學實驗要求較高的無菌狀態(tài)微生物學實驗要求較高的無菌狀態(tài),因此,實驗所用的器,因此,實驗所用的器皿,大多數(shù)要進行消毒、滅菌從而用以培養(yǎng)微生物,所以皿,大多數(shù)要進行消毒、滅菌從而用以培養(yǎng)微生物,所以對其質(zhì)量、規(guī)格、洗滌和包扎方法均有

2、一定要求。對其質(zhì)量、規(guī)格、洗滌和包扎方法均有一定要求。l干熱滅菌干熱滅菌是利用高溫使微生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而是利用高溫使微生物細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。達到滅菌的目的。 l與濕熱滅菌相比,干熱滅菌所需與濕熱滅菌相比,干熱滅菌所需溫度要高(溫度要高(160170),),時間要長(時間要長(12h),但干熱滅菌溫度不能超過,但干熱滅菌溫度不能超過180,否則,包器皿的紙或棉塞就會燒焦,甚至引起燃燒。否則,包器皿的紙或棉塞就會燒焦,甚至引起燃燒。實實 驗驗 材材 料料玻璃儀器:玻璃儀器: 每人數(shù):每人數(shù):培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿 3套;套; 大試管大試管 3只。只。 每組數(shù):每組數(shù):三角瓶三

3、角瓶 6只;只; 燒杯(燒杯(500ml)2只;只; 燒杯(燒杯(1000ml)1只;只; 小試管小試管 6只;只; 吸管(吸管( 0.2ml 2支,支, 0.5ml 2支,支,1ml 2支)共支)共6支支 每櫥數(shù):每櫥數(shù):量筒(量筒(500ml)1只;只;洗滌用品:洗滌用品: 去污粉、肥皂、清洗劑、毛刷等。去污粉、肥皂、清洗劑、毛刷等。包扎用品:包扎用品:棉花、扎繩、包扎紙等。棉花、扎繩、包扎紙等。l 由一底一蓋組成一套,常用的培養(yǎng)皿皿底直徑直徑90 mm,高,高15mm,皿底皿蓋均為玻璃制成。l 制成平板,可用于分離、純化、鑒定菌種、活菌計數(shù)分離、純化、鑒定菌種、活菌計數(shù)以及測定抗生素測定

4、抗生素、噬菌體的效價噬菌體的效價等。 實驗程序?qū)嶒灣绦颍▋x器的認識、清洗與包扎儀器的認識、清洗與包扎)(一)學習下列常用儀器的種類、規(guī)格和應用范圍:(一)學習下列常用儀器的種類、規(guī)格和應用范圍: 培培養(yǎng)養(yǎng)皿皿l 大試大試管管( (約約18mm18mm180mm) :180mm) : 可裝倒平板用的培養(yǎng)基可裝倒平板用的培養(yǎng)基; 可作制備斜面用可作制備斜面用; 裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩培養(yǎng)裝液體培養(yǎng)基用于微生物的振蕩培養(yǎng) (2)(2)中試管中試管(13(1315)mm15)mm(100(100150)mm: 150)mm: 裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌或做斜面用裝液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌或做斜面用; 用于細

5、菌、霉菌、病毒等的稀釋和血用于細菌、霉菌、病毒等的稀釋和血清學試驗清學試驗。l (3)(3)小試管小試管(10(1012)mm12)mm100mm:100mm: 一般用于糖發(fā)酵或血清學試驗,和其一般用于糖發(fā)酵或血清學試驗,和其它需要節(jié)省材料的試驗。它需要節(jié)省材料的試驗。試管試管l三角瓶三角瓶 用來裝無菌水、培養(yǎng)基和振蕩培無菌水、培養(yǎng)基和振蕩培養(yǎng)微生物養(yǎng)微生物等。l燒杯燒杯 用來配制培養(yǎng)基與各種溶液等。用來配制培養(yǎng)基與各種溶液等。l玻璃吸管玻璃吸管 (二)學習(二)學習玻璃器皿的洗滌方法玻璃器皿的洗滌方法1、新玻璃器皿的洗滌、新玻璃器皿的洗滌 在在2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時,用自來水沖洗干凈。的

6、鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時,用自來水沖洗干凈。2、舊玻璃器皿的洗滌、舊玻璃器皿的洗滌(1)試管、培養(yǎng)皿、三角瓶試管、培養(yǎng)皿、三角瓶:洗衣粉和去污粉洗刷,自來水洗衣粉和去污粉洗刷,自來水沖洗沖洗 A 裝有固體培養(yǎng)基裝有固體培養(yǎng)基:刮掉,洗滌刮掉,洗滌 B 帶菌的器皿帶菌的器皿:2%來蘇爾或來蘇爾或0.25%新潔爾滅消毒液中浸泡新潔爾滅消毒液中浸泡24小時或煮沸小時或煮沸0.5小時,然后洗滌小時,然后洗滌 C 帶病原菌培養(yǎng)物的器皿帶病原菌培養(yǎng)物的器皿:先高壓蒸汽滅菌,倒去培養(yǎng)物先高壓蒸汽滅菌,倒去培養(yǎng)物洗凈后的洗凈后的試管試管倒置于試管筐內(nèi),倒置于試管筐內(nèi),三角瓶三角瓶倒置于洗滌架上,倒置于洗滌架上,培

7、養(yǎng)皿培養(yǎng)皿的的皿底和皿蓋分開,依次壓著皿邊排列倒扣在桌上皿底和皿蓋分開,依次壓著皿邊排列倒扣在桌上,晾干晾干. (2)玻璃吸管玻璃吸管:吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接,反吸管尖端與裝在水龍頭上的橡皮管連接,反復沖洗復沖洗 a 吸過血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管吸過血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管:立立即投入盛有自來水的容器中浸泡,實驗后集中沖洗。即投入盛有自來水的容器中浸泡,實驗后集中沖洗。 b 塞有棉花的吸管塞有棉花的吸管:用水將棉花沖出,然后沖洗用水將棉花沖出,然后沖洗 c 吸過含有微生物培養(yǎng)物的吸管吸過含有微生物培養(yǎng)物的吸管:2%來蘇爾或來蘇爾或0.25%新潔新潔爾

8、滅消毒液中浸泡爾滅消毒液中浸泡24小時然后洗小時然后洗 d 吸管內(nèi)壁有油垢吸管內(nèi)壁有油垢:洗滌液中浸泡數(shù)小時,再沖洗洗滌液中浸泡數(shù)小時,再沖洗 洗滌后,若內(nèi)壁的水均勻分布成一洗滌后,若內(nèi)壁的水均勻分布成一薄層薄層,表示完全洗凈,表示完全洗凈,若還掛有水珠,則需用洗滌液浸泡數(shù)小時,然后再用自若還掛有水珠,則需用洗滌液浸泡數(shù)小時,然后再用自來水沖洗。來水沖洗。 l 培養(yǎng)皿的包扎培養(yǎng)皿的包扎:l 培養(yǎng)皿常用舊報紙緊培養(yǎng)皿常用舊報紙緊緊包裹,一包緊包裹,一包710套,包好后干熱或濕套,包好后干熱或濕熱滅菌。熱滅菌。l 也可用金屬筒包裝。也可用金屬筒包裝。(三)學習各種器皿的包扎(三)學習各種器皿的包扎

9、 吸管吸管的包扎的包扎:l 1 在上端約在上端約0.5cm處,塞入一小段處,塞入一小段1.5 cm長的棉花長的棉花(勿用脫脂棉),目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入管內(nèi),(勿用脫脂棉),目的是避免將外界或嘴中雜菌吹入管內(nèi),或不慎將菌液吸出管外?;虿簧鲗⒕何龉芡狻 2 45 cm寬的長紙條寬的長紙條.試管和三角瓶等的包扎:試管和三角瓶等的包扎: l 試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞;試管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅膠塞;l 用二層報紙包扎好(如有牛皮紙,效果更好),進行干熱用二層報紙包扎好(如有牛皮紙,效果更好),進行干熱或濕熱滅菌?;驖駸釡缇 試管較多時,一般試管較多時,一般7個或個或1

10、0個一組,再用雙層報紙包扎。個一組,再用雙層報紙包扎。 視頻:視頻:玻璃器皿玻璃器皿的包扎的包扎實驗程序?qū)嶒灣绦颍ǜ蔁釡缇牟僮鞣椒ǜ蔁釡缇牟僮鞣椒?)1裝入待滅菌物品裝入待滅菌物品 將包好的待滅菌物品放入電烘箱內(nèi),關好箱門。物品將包好的待滅菌物品放入電烘箱內(nèi),關好箱門。物品不要擺得不要擺得太擠,太擠,以免妨礙空氣流通;以免妨礙空氣流通;不要接觸電烘箱內(nèi)壁的鐵板不要接觸電烘箱內(nèi)壁的鐵板。2升溫升溫 接通電源,撥動開關,接通電源,撥動開關,打開電烘箱排氣孔打開電烘箱排氣孔,讓溫度逐漸上升。,讓溫度逐漸上升。當溫度升至當溫度升至100時,關閉排氣孔。時,關閉排氣孔。3恒溫恒溫 當溫度升達到當溫度升達到160170時,保持此溫度時,保持此溫度2h。4降溫降溫 切斷電源、自然降溫。切斷電源、自然降溫。5開箱取物開箱取物 待電烘箱內(nèi)溫度降到待電烘箱內(nèi)溫

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