微生物風(fēng)險評估報告-2017年版本.

1、 病原微生物風(fēng)險評估報告 文件編號： 第 1 版 編制：陳志雄 審核：林峰 批準(zhǔn)：黃棉汝 生效日期： 2017 年 7 月 1 日 目 錄 序號 主題內(nèi)容 代 號 頁 號 1 風(fēng)疹病毒實驗活動風(fēng)險評估報告 4-29 2 麻疹病毒實驗活動風(fēng)險評估報告 30-57 3 梅毒螺旋體實驗活動風(fēng)險評估報告 58-83 4 副溶血性弧菌實驗活動風(fēng)險評估報告 84-116 5 志賀氏菌實驗活動風(fēng)險評估報告 117-151 6 腸致瀉性大腸埃希氏菌實驗活動風(fēng)險評估報告 152-184 7 艾滋病實驗活動風(fēng)險評估報告 185-217 8 乙型肝炎病毒實驗活動風(fēng)險評估報告 218-247 9 禽流感病毒 H5N1

2、 實驗活動風(fēng)險評估報告 248-267 10 禽流感病毒 H7N9 實驗活動風(fēng)險評估報告 268-284 11 艾滋病毒（ I 型型）病毒實驗活動風(fēng)險評估報告 285-301 12 金黃色葡萄球菌實驗活動風(fēng)險評估報告 302-314 13 霍亂弧菌實驗活動風(fēng)險評估報告 315-328 14 沙門氏菌實驗活動風(fēng)險評估報告 329-342 修 訂 頁 序號 文件編號 頁碼 需更改的內(nèi)容 更改內(nèi)容 批準(zhǔn)人 批準(zhǔn)日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 風(fēng)疹病毒實驗活動風(fēng)險評估報告 一、生物學(xué)特性 （一）種類和病毒分型 風(fēng)疹病毒（ Ru

3、bella virus ，RV）為披膜病毒科風(fēng)疹病毒屬的唯一 成員，是風(fēng)疹的病原體。風(fēng)疹病毒為單正鏈 RNA 病毒，直徑約 60nm， 有包膜， 核衣殼為二十面體立體對稱， 基因組全長 9.7kb ，含 2 個 ORF。 酶切后形成三種結(jié)構(gòu)蛋白，即衣殼蛋白 C、包膜蛋白（ E1 和 E2）。風(fēng)疹 病毒只有一個血清型， 但有多個基因型。 截至目前，世界衛(wèi)生組織 （ WHO） 將全球曾經(jīng)或正在流行傳播的風(fēng)疹病毒劃分為兩個進(jìn)化枝（ Cladel 和 Clade2 ）, 共 13 個基因型，包括 9 個已經(jīng)確定的基因型（ 1B、1C、1D、 1E、 1F、1G、 2A、2B 和 2C）和 4 個暫定基

4、因型（ la 、lh 、 li 和 lj ）。 而我國的風(fēng)疹分子流行病學(xué)研究顯示，有 4 種基因型（2B）曾在我國流行，其中 1F 基因型目前只在中國發(fā)現(xiàn)。 1E、 1F、2A 和 （二）來源 風(fēng)疹又名德國麻疹，由風(fēng)疹病毒所引起。之所以常被稱為德國麻疹，是因為此疾病最先于十八世紀(jì)中期，由德國醫(yī)生確診。風(fēng)疹病毒能在細(xì)胞內(nèi)增殖， 1962 年首次被分離成功。 （三）傳染源 人是風(fēng)疹病毒的唯一自然宿主，因此，病人是唯一的傳染源。 （四）傳播途徑 呼吸道傳播為其主要傳播途徑，而垂直傳播的危害是最嚴(yán)重的。 （五）易感性 未主動或被動免疫過，體內(nèi)無風(fēng)疹病毒抗體的人均極為易感。 （六）潛伏期 風(fēng)疹病毒潛伏期

5、一般情況下為 10? 20d。 （七）劑量 - 效應(yīng)關(guān)系 目前尚未見有風(fēng)疹病毒對人準(zhǔn)確感染劑量的報導(dǎo)，風(fēng)疹病毒的感染主要與暴露途徑和感染方式密切相關(guān)。 （八）致病性 風(fēng)疹是病毒性傳染病，感染后全身癥狀輕微，并發(fā)癥少見。從接 觸感染到癥狀出現(xiàn)， 要經(jīng)過 14? 21d。病初 1? 2d 的癥狀很輕， 可有低 熱或中度發(fā)熱，輕微咳嗽、乏力、胃口不好、咽痛和眼發(fā)紅等輕度上 呼吸道癥狀。病人口腔黏膜光滑，無充血及黏膜斑，耳后、枕部淋巴 結(jié)腫大，伴輕度壓痛。通常于發(fā)熱 1? 2d 后出現(xiàn)皮疹，皮疹先從面頸 部開始， 24h 蔓延到全身。 皮疹初為稀疏的紅色斑丘疹， 之后面部及四肢皮疹可以融合，類似風(fēng)疹。

6、出疹第二天開始，面部及四肢皮疹可變 成針尖樣紅點，如猩紅熱樣皮疹。皮疹一般在 3d 內(nèi)迅速消退，留下較 淺的色素沉著。在出疹期，體溫不再上升，病兒常無疾病感覺，飲食、嬉戲如常。但對于孕婦來說，風(fēng)疹病毒的侵入會導(dǎo)致胎兒畸形、早產(chǎn)或胎兒死亡，應(yīng)引起重視。孕婦感染風(fēng)疹病毒后，一部分人的癥狀較 輕微，但也有一些孕婦會出現(xiàn)典型癥狀。懷孕 3 個月以內(nèi)的孕婦感染 風(fēng)疹病毒后，風(fēng)疹病毒可通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，引起胎兒畸形。孕婦感染風(fēng)疹病毒的時間越早，致畸的可能性越大。血清學(xué)研究表明，感染過風(fēng)疹病毒的育齡婦女即使再被感染，懷孕后也不會對胎兒造成 危害。但是， 約有 10%的育齡婦女屬于風(fēng)疹易感者， 如果她們在

7、懷孕的 頭 3 個月內(nèi)是初次感染風(fēng)疹病毒， 那么胎兒致畸率高達(dá) 80%以上。這是因為 3 個月以內(nèi)的胎兒尚不具備合成干擾素的能力，難以抵制風(fēng)疹病 毒的感染，以致風(fēng)疹病毒大量繁殖，阻滯細(xì)胞分裂，妨礙組織的分化，從而形成畸形，如兔唇、腭裂、小頭、白內(nèi)障、先天性聾啞、骨發(fā)育障礙等。 （九）變異性 風(fēng)疹病毒只有一個血清型，較穩(wěn)定。曾在我國流行的基因型有 4 種（ 1E、1F、 2A 和 2B）。周淑潔、朱貞等曾對 19992011 年安徽省 境內(nèi)分離到的 72 株 E1 基因型風(fēng)疹病毒流行株進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其 739 個核苷酸高度保守，除 8 株在個別重要位點發(fā)生變異外，其余毒株的 重要位點均未發(fā)生改變

8、。 （十）環(huán)境中的穩(wěn)定性 風(fēng)疹病毒在環(huán)境中的穩(wěn)定性很差，對干燥、日光、高溫都沒有抵抗力。 （十一）藥物敏感性 目前，尚無針對風(fēng)疹病毒的特效藥物。 （十二）消毒劑敏感性 風(fēng)疹病毒抵抗力弱，對過氧乙酸、乙醇、碘伏等一般消毒劑均敏 感。 （十三）物理滅活 風(fēng)疹病毒不耐熱， 5630mim或 37 1.5h 均可將其滅活。 （十四）在宿主體外存活 風(fēng)疹病毒在體外的生存力很弱，離開宿主后很容易死亡。 4保存不穩(wěn)定，在 -70 60可保持活力 3 個月，干燥冰凍下可保存 9 個月。 （十五）與其他生物和環(huán)境的交互作用 在高溫干燥的環(huán)境中及紫外線照射下，風(fēng)疹病毒均很容易死亡。 （十六）預(yù)防和治療方案 1.

9、預(yù)防措施 關(guān)鍵是主動免疫，接種風(fēng)疹減毒活疫苗是預(yù)防風(fēng)疹 的最有效措施，通常以麻疹一風(fēng)疹一腮腺炎三聯(lián)疫苗形式聯(lián)合使用。 此外，應(yīng)減少與風(fēng)疹病人面對面的接觸，不要與風(fēng)疹病人面對面地談 話。孕婦應(yīng)盡量避免去公共場所。如果孕婦接觸了風(fēng)疹患者， 5d 內(nèi)應(yīng) 注射大劑量的胎盤球蛋白，進(jìn)行被動免疫。如果孕婦在妊娠頭 3 個月 內(nèi)確診患了風(fēng)疹，則需要考慮進(jìn)行人工流產(chǎn)。風(fēng)疹初愈的育齡婦女 6 個月內(nèi)最好不要懷孕。 2. 治療措施 風(fēng)疹無特效治療，在發(fā)熱期間，要注意臥床休息， 可服用溫?zé)峤舛镜闹兴?，給予流質(zhì)或半流質(zhì)飲食。有并發(fā)癥者，可按并發(fā)癥處理。 二、實驗室相關(guān)活動風(fēng)險評估與控制 （一）實驗室感染性因子的種類、

10、來源和危害 1. 感染性因子種類 本實驗室可能的感染因子的為風(fēng)疹病毒本 身。 感染性因子的的來源 ?用于風(fēng)疹病毒抗體檢測的血液樣本。 ?樣本采集與檢測過程涉及的所有實驗場所。 ?實驗室操作中可能產(chǎn)生的含病毒的氣溶膠。 感染性因子可能造成的危害 ?被污染的實驗器材、器皿等對實驗室環(huán)境造成污染。 ?實驗室廢棄物對環(huán)境造成污染。 ?實驗人員暴露后感染。 ?實驗室含病毒的氣溶膠對實驗室環(huán)境造成污染。 （二）實驗室常規(guī)活動過程中的風(fēng)險評估與控制 實驗方法 ?風(fēng)險點識別 若采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之外的其他未經(jīng)確認(rèn) 的實驗方法，或在使用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之前未進(jìn)行技術(shù)確認(rèn)，操 作時可能存在安全風(fēng)險。 ?風(fēng)險

11、控制措施 盡量采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或經(jīng)過充分驗證 的實驗方法；在使用新的或變更過的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)之前，必須 經(jīng)過嚴(yán)格的技術(shù)確認(rèn)。 樣本采集 ?所用器材 一次性采血針、真空采血管、消毒棉簽及一次性利 器盒。 ?風(fēng)險點識別 采血過程中，工作人員與患者近距離接觸，患者咳嗽、打噴嚏 時，病毒隨飛沫排出，很容易通過口、咽、鼻部及眼結(jié)合膜入侵工作 人員，此時，風(fēng)險最大。 若采樣操作不規(guī)范，則會發(fā)生樣本滴灑或濺出的情況，產(chǎn)生的 氣溶膠存在感染操作者的風(fēng)險。 若被風(fēng)疹患者的血液污染了破損皮膚、黏膜，或被含有風(fēng)疹病 毒的血液污染了的針頭刺破皮膚，這種情況也不能完全排除被感染的 可能。 血液標(biāo)本濺灑出來，對

12、環(huán)境造成污染。 ?風(fēng)險控制措施 采血前做好個人防護(hù)，穿戴防護(hù)服、手套、口 罩、護(hù)目鏡和帽子，最好讓患者本人也戴上口罩；用過的針頭直接放 入利器盒內(nèi)，禁止用手直接接觸使用后的針頭或?qū)⑹褂煤蟮尼橆^重新 套上針頭套；采血管用真空抗凝管，采好血后直立于試管架中，防止 倒翻；消毒棉簽等污染物放入醫(yī)療廢棄物專用袋中，統(tǒng)一消毒處理。 樣本的包裝和運輸 ?所用器材 真空采血管、 95 千帕樣品運輸罐、 B 類標(biāo)本運輸箱 （ UN3373 冷藏箱）、運送車輛。 ?風(fēng)險點識別 若使用不合格包裝進(jìn)行運輸，容器密封不嚴(yán)，將 不能安全有效地防止運輸過程中包裝容器意外破損，從而產(chǎn)生污染擴(kuò) 散的可能。 ?風(fēng)險控制措施 嚴(yán)格

13、按照生物安全的要求， 采用三層容器包裝： 第一層采用真空采血管裝樣本，應(yīng)密閉防滲漏；第二層采用 95 千帕樣 品運輸罐，可容納并保護(hù)第一層容器，密封不易破碎、耐壓力、防滲 漏且易消毒；第三層采用 B 類標(biāo)本運輸箱，要容納并保護(hù)、固定第二 層容器，且易于消毒。樣本應(yīng)由中心專車運回實驗室。 樣本接收 ?風(fēng)險點識別 若運輸途中出現(xiàn)樣本管破裂、血液溢漏的情況， 則可能對樣本接收人員造成污染。 ?風(fēng)險控制措施 樣本直接送至實驗室，由專業(yè)檢驗人員接收， 接收樣本前做好個人防護(hù)，穿戴防護(hù)服、手套、口罩和帽子。若發(fā)生 樣本管破裂，應(yīng)立即在生物安全柜內(nèi)將尚存留的樣本移出，廢棄物放 入帶蓋的防刺破的塑料罐中，被污

14、染的容器用 0.5%過氧乙酸等消毒液 浸泡后再清洗。 樣品檢測 ?所用器材 離心機(jī)、生物安全柜、移液器、洗板機(jī)及酶標(biāo)儀等 設(shè)備。 ?風(fēng)險點識別 離心過程中離心管破裂產(chǎn)生大量氣溶膠，并造成離心機(jī)污染。 實驗操作過程中血液樣本揮灑產(chǎn)生氣溶膠，并造成人員污染或 臺面、地面等環(huán)境污染。 洗板、讀板時液體濺出污染設(shè)備表面或工作臺面。 ?風(fēng)險控制措施 所有檢測操作均在 BSL-2 實驗室中進(jìn)行，檢測 人員在實驗前按照二級生物安全防護(hù)要求做好個人防護(hù)；加樣移液操作在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，動作輕緩；判讀結(jié)果時，酶標(biāo)板應(yīng)輕拿輕放，避免液體濺出；待實驗完畢，先消毒手部，再脫去手套并立即洗手。 陽性樣本的保存 ?所用器

15、材 生物安全柜、移液器、帶螺旋蓋的塑料管及可密封 的塑料凍存盒。 ?風(fēng)險點識別 風(fēng)疹 IgM 抗體陽性樣本若保存不當(dāng)，易造成人員 或環(huán)境污染。 ?風(fēng)險控制措施 按照二級生物安全防護(hù)要求做好個人防護(hù)；樣 本的保留在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，動作要輕緩；所有樣本的血清或血漿 都保留在帶螺旋蓋的塑料管內(nèi)，再裝入可密封的塑料凍存盒中，置 20以下冰箱內(nèi)保存，雙人雙鎖管理。 陽性復(fù)核樣本的上送 ?所用器材 帶螺旋蓋的塑料管、 95 千帕樣品運輸罐、 B 類標(biāo)本 運輸箱（ UN3373 冷藏箱）、運送車輛。 ?風(fēng)險點識別 若包裝不符合相應(yīng)生物安全等級的要求，或運輸 工具無安全保障，則易造成污染擴(kuò)散，甚至樣本丟失。

16、 ?風(fēng)險控制措施 陽性樣本上送應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)范“ UN3373 3 層包 裝”（同樣品采集） ，攜帶“可感染人類的高致病性病原微生物菌 （毒） 種或樣本運輸許可證”，并由專車運送，專業(yè)人員全程護(hù)送。 實驗室的清潔和消毒 ?風(fēng)險點識別 工作完畢后，若不及時對工作臺面、生物安全柜 等進(jìn)行消毒，則有可能會造成實驗室環(huán)境污染或人員感染。 ?風(fēng)險控制措施 工作完畢后，及時對檢測所涉及的工作臺面、 地面和生物安全柜進(jìn)行消毒，使用 100 倍稀釋的 84 消毒液擦拭，用消 毒液清潔后要干燥 20min 以上。生物安全柜用 70%75%的酒精進(jìn)行擦 拭消毒。待實驗和消毒完畢，先脫去手套，再脫去防護(hù)服，并正確使

17、用肥皂和流水洗手。 廢棄物處置 ?所用器材 醫(yī)療廢棄物專用袋、 硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶、 高壓滅菌器。 ?風(fēng)險點識別 剩余的陽性樣本管是很大的污染源，采血過的針 頭若處理不當(dāng)，則易產(chǎn)生人員刺傷風(fēng)險。 ?風(fēng)險控制措施 實驗過程中產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要 的樣本、酶標(biāo)反應(yīng)板，及其他物品，均視為感染性廢棄物，需置于裝 有醫(yī)療廢棄物專用袋的硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶中， 于 121高壓 滅菌 15 20min 后再運出實驗室。針頭、破碎玻璃等損傷性廢棄物必 須放入利器盒，利器盒嚴(yán)禁再次打開，裝滿針頭等利器的一次性利器 盒嚴(yán)禁再次打開，須密封好后，同上述垃圾一起處理。所有處理完畢 的廢棄物集中

18、存放，由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理單位上門收集、集中 處置。同時，做好交接記錄，所有相關(guān)記錄定期整理歸檔。 （三）實驗室常規(guī)活動中其他風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施 電力 ?風(fēng)險點識別 若實驗室沒有布置雙路供電， 或電力供應(yīng)不穩(wěn)定， 則有可能導(dǎo)致實驗活動突然中斷、實驗設(shè)備停止工作等意外情況的發(fā) 生，從而帶來相關(guān)安全風(fēng)險。 ?預(yù)防控制措施 實驗室應(yīng)盡量布置雙路供電，沒有布置雙路供 電的應(yīng)配置備用電源，以確保高壓滅菌器、生物安全柜等重要設(shè)備的 安全運行。 電氣操作 ?風(fēng)險點識別 實驗室活動涉及的電氣操作，包括實驗室工作區(qū) 內(nèi)電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉、安裝和維修 ; 設(shè)備層內(nèi) UPS、空調(diào)機(jī)組等電 氣設(shè)備的啟動、關(guān)

19、閉和維修等。這些電氣操作的過程可能產(chǎn)生觸電、 電擊、電氣故障等風(fēng)險。 ?預(yù)防控制措施 電氣設(shè)備的設(shè)計及制造應(yīng)符合相關(guān)安全標(biāo)準(zhǔn)的要求。實驗室工 作區(qū)域內(nèi)若有 380V 的電源插座，需明確標(biāo)識，并由有資質(zhì)的專業(yè)人員 進(jìn)行操作。 新的、改裝過的或修理過的電氣設(shè)備在未經(jīng)專業(yè)人員（如有資 質(zhì)的電工）完成電氣安全測試和設(shè)備符合安全使用要求之前，不允許 使用。 電氣設(shè)備使用人員應(yīng)接受正確操作的培訓(xùn)，操作方式不降低電 氣安全性。電氣設(shè)備使用人員要定期檢查設(shè)備可能引起電氣故障的破 損。只有專業(yè)人員才可從事電氣設(shè)備和電路工作。禁止未經(jīng)授權(quán)的工 作。 采取措施對設(shè)備去污染，以降低維護(hù)人員感染的風(fēng)險。 實驗室給排水設(shè)

20、施設(shè)備 ?風(fēng)險點識別 實驗室含有給排水的設(shè)施設(shè)備，包括位于工作區(qū) 和洗消區(qū)的高壓滅菌器和洗滌池。管道意外破裂、排水管道阻塞均可 能導(dǎo)致感染性材料溢出，有污染實驗人員和環(huán)境的風(fēng)險。 ?預(yù)防控制措施 實驗室產(chǎn)生的所有染菌物及器具，必須先經(jīng)高 壓滅菌或含氯消毒劑浸泡消毒后洗滌，產(chǎn)生的污水集中排入中心污水 池進(jìn)行消毒處理，嚴(yán)禁直接排放。至少每月監(jiān)測糞大腸菌群，定期檢 查實驗室給排水管道各界面的密封性，及時發(fā)現(xiàn)安全隱患。 實驗室設(shè)施設(shè)備管道 ?風(fēng)險點識別 實驗室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位可能存 在密封不嚴(yán)的情況。當(dāng)感染性材料溢出時，有污染環(huán)境的風(fēng)險。 ?預(yù)防控制措施 所有管道穿越維護(hù)結(jié)構(gòu)的部位應(yīng)嚴(yán)格

21、密封，并 定期進(jìn)行檢查，避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境。 主要檢測儀器設(shè)備 ?離心機(jī) 風(fēng)險點識別 在分離血清的過程中，若沒有做好平衡，可能存 在離心管破裂、離心管蓋脫落、離心轉(zhuǎn)子和離心腔被污染的風(fēng)險。 預(yù)防控制措施 離心時配備耐離心壓力的且?guī)菪苌w的離心 管，離心前做好平衡，選擇正確的離心速度和離心力；規(guī)范正確操作， 定期維護(hù)，確保離心機(jī)性能正常；每次使用后做好清潔消毒和使用記 錄，并定期進(jìn)行功能檢查。 ?酶標(biāo)儀和洗板機(jī) 風(fēng)險點識別 在使用酶標(biāo)儀和洗板機(jī)的過程中，可能存在陽性 對照或在測樣品污染設(shè)備表面和工作臺面的風(fēng)險。 預(yù)防控制措施 酶標(biāo)儀每年強(qiáng)檢一次， 中途再做一次期間核查； 洗板機(jī)每年

22、進(jìn)行一次功能檢查；在洗板、讀板時，要做到動作輕緩， 小心操作；倘若有液體濺出，應(yīng)立即進(jìn)行消毒處理。 生物安全設(shè)施設(shè)備 ?生物安全柜 風(fēng)險點識別 若不按照安全柜操作規(guī)程進(jìn)行操作、 維護(hù)與檢測， 其防護(hù)屏障效果會明顯降低，甚至消失，失去安全防護(hù)效果；若長時 間使用或未及時更換 HEPA 過濾膜，會使其功能喪失，造成工作窗口氣 流速度降低或流向紊亂；使用后若不徹底消毒處理，對于清潔、維護(hù) 人員將會產(chǎn)生污染。 預(yù)防控制措施 正確選配生物安全柜，操作人員應(yīng)接受相關(guān)的 操作、維護(hù)培訓(xùn)，日常操作和維護(hù)應(yīng)嚴(yán)格按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說 明書進(jìn)行；每年請有檢測資質(zhì)的服務(wù)機(jī)構(gòu)對生物安全柜進(jìn)行風(fēng)速、氣 流、塵埃粒子、

23、紫外線強(qiáng)度等關(guān)鍵要素的檢測，確保其性能正常；一 旦造成污染，應(yīng)及時進(jìn)行消毒處理。 ?高壓滅菌器 風(fēng)險點識別 若不按照高壓滅菌器操作規(guī)程進(jìn)行操作、維護(hù)， 其效果會明顯降低，甚至失效，失去去污染與無害化的作用；若長時 間使用又不定期檢測滅菌效果，對其滅菌效果無從考證，可能導(dǎo)致功 能缺損，存在滅菌不徹底從而引起污染的隱患；在長期關(guān)停期間，若 內(nèi)部水分不及時排干，將會導(dǎo)致內(nèi)部器件老化從而失去正常功能。 預(yù)防控制措施 采用下排式高壓滅菌器，防止氣溶膠污染；規(guī) 范操作，定期維護(hù)，確保高壓滅菌器性能正常；定期檢定、核查，做 好使用記錄，操作人員持證上崗；日常進(jìn)行滅菌效果監(jiān)測，以保證滅 菌質(zhì)量。 ?個人防護(hù)用

24、品 風(fēng)險點識別 個人防護(hù)用品若穿戴不規(guī)范、大小不合適或使用 過期的防護(hù)用品等，則將會導(dǎo)致防護(hù)效果降低，甚至失效。 預(yù)防控制措施 進(jìn)行與風(fēng)疹病毒血清學(xué)相關(guān)操作時要按二級生 物安全防護(hù)水平進(jìn)行個人防護(hù)，必須選擇大小合適、有效的防護(hù)用品， 穿戴時相互檢查確認(rèn)，避免使用有破損、缺陷和過期的防護(hù)用品。 ?應(yīng)急救治設(shè)施和用品 風(fēng)險點識別 實驗室若沒有配備洗眼器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng) 急設(shè)施和物品，或配備的急救用品種類不全、不合適或過期，則會導(dǎo) 致急用時無法發(fā)揮作用。 預(yù)防控制措施 在實驗室內(nèi)正確配備洗眼器， 確保其功能正常。 配備的 75%乙醇、碘伏或其他消毒劑、 創(chuàng)可貼等急救物品與實驗活動相 適應(yīng)，并在有

25、效期內(nèi)使用，專人負(fù)責(zé)管理，定期維護(hù)、清理和更新。 ?消毒滅菌劑 風(fēng)險點識別 消毒產(chǎn)品無生產(chǎn)許可證、過期、配制方法或濃度不正確、種類選擇不合理，都將會導(dǎo)致消毒效果降低、生物滅活能力降低、或?qū)ξ锲犯g性增加、對皮膚造成刺激等問題。 預(yù)防控制措施 選擇符合國家標(biāo)準(zhǔn)的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，選擇合適的消毒劑，按照規(guī)定的消毒方法、消毒時間和消毒濃度（劑量）進(jìn)行消毒，避免使用過期產(chǎn)品；消毒過程中，消毒人員應(yīng)做好必要的個人防護(hù)，防止發(fā)生意外。風(fēng)疹病毒抵抗力弱，對一般消毒劑均敏感。 本實驗室選用 84 消毒液（主要成分為次氯酸鈉）、碘伏、 75%酒精、漂白粉等，就作為常用消毒劑。 管理體系的風(fēng)險 ?風(fēng)險點識別 管

26、理體系（包括應(yīng)急預(yù)案）、程序文件、作業(yè)指 導(dǎo)書和操作規(guī)程都是確保生物安全的主要因素。 如果組織結(jié)構(gòu)不健全、 設(shè)置不合理，體系檔與實際工作不匹配，以及部門職責(zé)不清或銜接不 當(dāng)?shù)?，就都可能帶來安全風(fēng)險。 ?預(yù)防控制措施 定期開展對管理體系的評審，發(fā)現(xiàn)問題及時修 訂、完善，以確保生物安全管理體系持續(xù)有效地運行。 （四）工作人員的風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施 風(fēng)險點識別 ?人員數(shù)量 人員過少會因缺少相互提示或因工作量增大而導(dǎo)致 操作過程中工作失誤增加，風(fēng)險增加。 ?人員結(jié)構(gòu)及資質(zhì) 新進(jìn)人員若沒有高資歷人員帶教操作，則不 能很好地處理意外事件，風(fēng)險會增加。實驗人員不熟悉實驗檢測方法 及操作規(guī)范，在進(jìn)行實驗前未

27、進(jìn)行相關(guān)的專業(yè)知識培訓(xùn)，無法保證工 作質(zhì)量和安全。 ?職業(yè)操守 責(zé)任心不強(qiáng)的人員參與該項工作，則產(chǎn)生生物危害 而危及人員安全、環(huán)境安全與社會安定的可能性較大。 ?健康管理 健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。當(dāng) 身體出現(xiàn)呼吸道癥狀、腹瀉等胃腸道癥狀、手部皮膚有開放性損傷或 其他不適合工作的情況，職業(yè)暴露風(fēng)險會增加。 ?生物安全培訓(xùn)及應(yīng)急事件處理能力 工作人員上崗前沒有接受 嚴(yán)格的生物安全和相關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn)，易導(dǎo)致生物安 全事故的發(fā)生。上崗后，沒有接受實驗室突發(fā)事件處理的培訓(xùn)，一旦 發(fā)生意外事件，就不能有效地進(jìn)行早期處理和控制生物安全事件。 預(yù)防控制措施 ?人員數(shù)量 盡量有

28、2 名工作人員同時進(jìn)行采樣、檢測或有質(zhì)量 監(jiān)督員對關(guān)鍵步驟進(jìn)行監(jiān)督。 ?人員結(jié)構(gòu)及資質(zhì) 實驗室檢測人員的年齡和資歷結(jié)構(gòu)應(yīng)配備合 理，新進(jìn)人員應(yīng)由高資歷人員帶教或監(jiān)督操作。檢測技術(shù)人員需經(jīng)過 上崗培訓(xùn)和在崗持續(xù)培訓(xùn)。要求掌握相關(guān)專業(yè)知識和技能，能獨立熟 練地操作，并經(jīng)考核合格，持證上崗。 ?職業(yè)操守 加強(qiáng)職業(yè)道德教育，培養(yǎng)工作責(zé)任心。 ?健康管理 健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。當(dāng) 身體出現(xiàn)呼吸道癥狀或其他不適合工作的情況， 職業(yè)暴露風(fēng)險會增加。 ?生物安全培訓(xùn)及應(yīng)急事件處理能力 檢測人員必須接受上崗前 培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，每年參加本中心組織的生物安全知識或生物安全操作技 術(shù)培訓(xùn)、考核。實驗室

29、工作人員必須嚴(yán)格按照實驗室意外事故和職 業(yè)性疾病報告制度和病原微生物生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案中 規(guī)定的要求進(jìn)行應(yīng)急事件的處置，強(qiáng)化職業(yè)暴露的應(yīng)急處理能力，規(guī) 范工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場急救處理辦法。 （五）實驗室非常規(guī)活動中的風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施 實驗室主要的非常規(guī)活動 ?檢測外專業(yè)人員對實驗室設(shè)施設(shè)備的維護(hù)、 維修、檢測驗證 （如 主要設(shè)施設(shè)備的檢測驗證）和更換（如高效過濾器等的更換）。 ?實驗室后勤保障人員對實驗室及公共環(huán)境進(jìn)行保潔，對實驗器 材進(jìn)行洗刷消毒。 ?外部人員來實驗室參觀及上級部門對實驗室進(jìn)行檢查。 ?任何其他人員需要進(jìn)入實驗室從事實驗活動以外的行為。 風(fēng)險點識別 ?進(jìn)入實驗室可

30、能存在實驗室感染的風(fēng)險，特別是在不慎打翻、 打破血管或損壞儀器部件情況下。 ?實驗室運行過程中某些人員需要進(jìn)入實驗室參觀，存在影響實 驗室正常運行的風(fēng)險。 預(yù)防控制措施 ?實行人員準(zhǔn)入、登記制度。外部人員來進(jìn)行參觀或檢查前，應(yīng) 對實驗室作徹底毒； 任何外來人員進(jìn)入實驗室時應(yīng)有實驗室人員陪同。 ?進(jìn)入人員絕對不能私自動用實驗室內(nèi)有標(biāo)識的危險品，絕不能 將未經(jīng)消毒處理的物品拿出實驗區(qū)。 ?在實驗室進(jìn)行設(shè)施、設(shè)備維護(hù)維修過程中，若發(fā)生意外事件， 應(yīng)立即報告實驗室負(fù)責(zé)人，進(jìn)行風(fēng)險評估，并采取應(yīng)對措施。 ?對實驗室的設(shè)施、設(shè)備進(jìn)行維護(hù)維修工作時應(yīng)動作輕柔，避免 產(chǎn)生氣溶膠。檢測維修后、離開實驗室前，必須

31、洗手。 （六）被誤用和惡意使用的風(fēng)險與預(yù)防控制措施 1. 風(fēng)險點識別 若陽性標(biāo)本未明確標(biāo)識并未實施雙人雙鎖管理， 實驗活動結(jié)束后不及時對操作場所進(jìn)行消毒，其他工作人員在不知情 的情況下可能會誤用標(biāo)本、實驗材料和設(shè)施設(shè)備等，從而導(dǎo)致人員感 染和實驗室環(huán)境污染等。 預(yù)防控制措施 ?實行嚴(yán)格的人員準(zhǔn)入和持證上崗制度。 ?所有獲得批準(zhǔn)進(jìn)入實驗室工作的人員，必須嚴(yán)格按規(guī)程操作實 驗材料和設(shè)施設(shè)備。 ?發(fā)生事故時必須及時報告并作必要的處理和記錄。 ?實驗所用材料和試劑等必須有明確的標(biāo)識。 ?陽性標(biāo)本嚴(yán)格實施雙人雙鎖管理。 （七）相關(guān)實驗室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示 目前，因風(fēng)疹病毒檢測明確引起實驗室

32、人員感染的相關(guān)報導(dǎo)很少， 但任何一種病原微生物都有可能導(dǎo)致實驗室感染的風(fēng)險。因此，工作 人員應(yīng)嚴(yán)格遵守實驗室相關(guān)規(guī)定，做好個人防護(hù)和規(guī)范操作，降低和 規(guī)避職業(yè)暴露風(fēng)險。 三、實驗室理化因素風(fēng)險評估及安全防護(hù)措施 （）紫外線 1. 風(fēng)險點識別 生物安全柜及 BSL-2 實驗室均使用紫外線燈進(jìn)行 物體表面消毒。紫外線波長為 250 280nm，主要影響眼睛和皮膚，可 引起急性角膜炎和結(jié)膜炎、慢性白內(nèi)障等眼部疾病，還可誘發(fā)皮膚癌。 紫外線燈開啟時，若人員在不知情的情況下進(jìn)入，則可能會受到傷害。 2. 安全防護(hù)措施 在實驗室工作應(yīng)避免紫外線直接照射人體，特 別是眼部。生物安全柜表面應(yīng)貼有紫外線危害的標(biāo)

33、識。在進(jìn)行紫外線 消毒時，實驗人員盡量遠(yuǎn)離消毒區(qū)域，基本可以規(guī)避紫外線對人體的 危害。 （二）建設(shè) 1. 風(fēng)險點識別 實驗室籌建選址時未對周圍輻射源進(jìn)行排查，使 用含輻射的儀器時未進(jìn)行嚴(yán)格管理，存在輻射源或輻射事故間接導(dǎo)致病原微生物屏障系統(tǒng)破壞的隱患。 2. 預(yù)防控制措施 實驗室籌建選址時，嚴(yán)格排查周邊建筑群的輻 射源。 （三） 84 消毒劑 風(fēng)險點識別 84 消毒液屬于含氯消毒劑，有效氯的含量為 4.55% 5.55%，次氯酸鈉為主要殺菌因子。含氯的消毒液會殘留在空 氣中不揮發(fā)，長期使用會使人感到頭疼、惡心。對于有過敏體質(zhì)的人， 還容易引發(fā)過敏、哮喘等疾病。高濃度的含氯消毒劑對人的呼吸道黏

34、膜和皮膚有明顯的刺激作用，可使人流淚、咳嗽，并刺激皮膚和黏膜， 嚴(yán)重者可發(fā)生氯氣中毒。急性中毒者會出現(xiàn)躁動、惡心、嘔吐、呼吸 困難等癥狀，甚至因窒息而死。 2. 安全防護(hù)措施 按照使用說明，根據(jù)消毒對象不同而配制不同 的濃度，避免使用不必要的高濃度的消毒液，稀釋和使用時戴好手套， 消毒后及時開窗通風(fēng)，基本可規(guī)避消毒液對人體的危害。 （四）其他 1. 風(fēng)險點識別 實驗室內(nèi)的照明和聲音（生物安全柜等）有可能 因強(qiáng)光和噪聲而對人員造成損害。 2. 安全防護(hù)措施 對實驗室的照明和聲音等參數(shù)進(jìn)行檢測，確保 合格，避免強(qiáng)光和噪聲對人員造成損害。 四、實驗室火災(zāi)風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施 風(fēng)險點識別 ?超負(fù)荷用

35、電，電線過長。 ?電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良，如電纜的絕緣層破舊或損壞。 ?用火不當(dāng)?shù)纫l(fā)火災(zāi)。 ?儀器設(shè)備在不使用時未關(guān)閉電源。 ?使用的儀器設(shè)備不是專為實驗室環(huán)境設(shè)計。 ?易燃、易爆品處理、保存不當(dāng)。 ?不兼容化學(xué)品沒有正確隔離。 ?在易燃物品和蒸汽附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。 ?通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充分。 預(yù)防控制措施 ?定期檢查電器插座、電線絕緣層是否完好，保證用電負(fù)荷，對 易燃、易爆等危險品進(jìn)行有效區(qū)域隔離。 ?實驗室配備滅火器。放置在易取的地點，擺放部位張貼滅火器 標(biāo)識。該滅火器用于撲滅可控制的火災(zāi)，幫助人員撤離火場；對滅火 器進(jìn)行定期檢查和維護(hù)，確保其有效使用。 ?實驗室需裝設(shè)應(yīng)急燈，

36、 所有出口都有黑暗中可見的“緊急出口” 標(biāo)識。當(dāng)出現(xiàn)緊急狀況時，實驗室所有出口的鎖必須處于開啟狀態(tài)， 出口的設(shè)計應(yīng)確保不經(jīng)過高危險區(qū)域就能逃脫，所有出口都能通向一 個開放空間。 ?走廊、流通區(qū)域不放置障礙物，確保人員流動和滅火設(shè)備移動 不受影響。 ?在實驗室工作區(qū)顯著位置張貼火警電話標(biāo)識。實驗室每年對工 作人員進(jìn)行消防知識培訓(xùn)，包括消防器材的使用、火災(zāi)發(fā)生時的應(yīng)急 行動等。 五、自然災(zāi)害風(fēng)險評估與安全防護(hù)措施 自然災(zāi)害可能導(dǎo)致的實驗室緊急狀況主要包括水災(zāi)和地震等。 （一）水災(zāi) 1. 風(fēng)險點識別 水災(zāi)可能導(dǎo)致實驗室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，實驗 室內(nèi)感染性材料隨水外溢。 安全防護(hù)措施 ?在安全手冊中制

37、訂實驗室緊急事件應(yīng)急預(yù)案，并對所有實 驗室人員進(jìn)行培訓(xùn)。 ?實驗室一旦發(fā)生水災(zāi)報警時，應(yīng)立刻停止工作。首先，考慮實 驗室內(nèi)感染性物質(zhì)和人員的轉(zhuǎn)移。實驗室負(fù)責(zé)人、中心主任根據(jù)條件 及時采取對策，第一時間聯(lián)系相關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護(hù)措施， 并在受過訓(xùn)練的實驗室工作人員陪同下，進(jìn)入實驗室完成感染性物質(zhì) 和人員的安全轉(zhuǎn)移。 （二）地震 1. 風(fēng)險點識別 發(fā)生地震等自然災(zāi)害會導(dǎo)致實驗室維護(hù)結(jié)構(gòu)和設(shè) 施損壞，導(dǎo)致人員傷害和實驗室感染性材料外溢。 2. 風(fēng)險控制措施 實驗室應(yīng)采取措施降低自然災(zāi)害帶來的風(fēng)險， 保證災(zāi)害發(fā)生后能夠安全撤離實驗室，減少對人員和環(huán)境的影響。發(fā) 生地震后，首先設(shè)立距實驗室維護(hù)結(jié)

38、構(gòu) 20m 范圍內(nèi)的封鎖區(qū)。其次， 對封鎖區(qū)進(jìn)行消毒，然后由專業(yè)人員在做好個人防護(hù)的前提下對實驗 內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理。如果保藏樣品的容器沒有被破壞，可把它安 全轉(zhuǎn)移到其他安全的實驗室存放。如果保藏樣品的容器巳被破壞、發(fā) 生外溢，則應(yīng)立即用可靠方法進(jìn)行徹底消毒滅菌。 六、生物安全及其他緊急事件（事故）處理預(yù)案 （一）實驗室生物安全事件（事故）處理措施 1. 安全柜持續(xù)正壓 當(dāng)生物安全柜出現(xiàn)持續(xù)正壓時，應(yīng)立即停止 操作，通知運行保障人員采取措施恢復(fù)負(fù)壓。如果不能及時恢復(fù)和保 持負(fù)壓，應(yīng)停止實驗。發(fā)生此類事故或發(fā)生意外停電，造成具有傳染 性物質(zhì)暴露潛在危險的事故和污染時， 工作人員除了采取緊急措施

39、外， 還應(yīng)立即報告實驗室安全負(fù)責(zé)人，組織對實驗室進(jìn)行終末消毒。 2. 離心管破裂 在離心過程中離心管破裂時，應(yīng)馬上關(guān)閉電源， 讓離心機(jī)停止工作， 并靜止 30min。然后緩慢打開離心機(jī)蓋， 將離心杯 平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏，則用 1%的次氯酸鈉消毒液 灌入離心杯腔體中消毒 30min ，然后棄去消毒液和離心管碎片， 將離心 杯清洗后擦干。 3. 污染物潑濺或溢出 發(fā)生污染物潑賤或溢出時，應(yīng)立即用清潔 布或吸水紙覆蓋污染處，并倒上 10 25 倍稀釋的 84 消毒液，作用至 少 30min，方可清理全部污染物， 用消毒劑擦拭污染區(qū)域時。 所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。若發(fā)生大范圍污

40、染物擴(kuò)散事故時，應(yīng)立即通 知實驗室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負(fù)責(zé)人到達(dá)事故現(xiàn)場。待其查清情況，確定消毒方案，組織對實驗室進(jìn)行終末消毒。 發(fā)生空氣污染 發(fā)生空氣污染時，可采用低溫蒸汽甲醛氣體進(jìn)行消毒。甲醛有致 癌作用，故不宜用于生物安全柜和實驗室的常規(guī)空氣消毒。 針頭刺傷或血液標(biāo)本濺灑 若發(fā)生針頭刺傷或血液標(biāo)本濺灑，人員、器具或環(huán)境受到污染及 其他意外時，應(yīng)及時采取有效的消毒處理措施。 ?被采血針頭刺傷 應(yīng)立即用肥皂和大量流水沖洗，盡可能擠出 損傷處的血液，并用碘伏等有效消毒劑對傷口進(jìn)行消毒處理。 ?皮膚或黏膜污染 對于皮膚受污染部位可用肥皂和大量流水沖 洗，并用 75%酒精或碘伏等有效消毒劑進(jìn)行消毒處理；

41、 對于黏膜受污染 則用大量流水或生理鹽水沖洗污染部位。 ?物品或環(huán)境污染 沸的物品可用 1%漂白粉或 耐煮沸的物品煮沸 20min 后清洗，對不能煮 0.5%過氧乙被等消毒劑浸泡 2h 后再用清水 洗滌；地面、墻面等環(huán)境受到污染時可用 3%漂白粉、 2%過氧乙酸等消 毒液噴霧進(jìn)行消毒或擦洗 2 次。 ?患者猛烈咳嗽、打噴嚏或樣本濺灑產(chǎn)生大量氣溶膠 工作人員 在采樣結(jié)束時，應(yīng)盡可能對手套、口罩、護(hù)目鏡等個人防護(hù)用品進(jìn)行 噴灑消毒后再摘除，然后對手部及面部進(jìn)行徹底清洗。 （二）其他緊急事件（事故）處理措施 在制訂的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他緊急救助人員。應(yīng)事 先告知他們哪些實驗室有潛在的感染性

42、物質(zhì)，讓他們熟悉實驗室的布 局和設(shè)備。所有實驗室人員須了解緊急撤離的行動計劃、撤離路線和 集合地點。每年至少參加一次緊急撤離演習(xí)，包括急救設(shè)備的使用和 采取相應(yīng)急救措施。 （三）生物安全及其他緊急事件（事故）報告和記錄 ?發(fā)生生物安全及其他緊急事件時，在緊急處理的同時必須向中 心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會報告。 ?對于生物安全事件必須進(jìn)行登記，記錄發(fā)生的時間、地點及詳 細(xì)經(jīng)過、處理方法等。 七、生物安全和生物安全保障風(fēng)險管理 （一）生物安全風(fēng)險評估依據(jù) 風(fēng)險評估所依據(jù)的數(shù)據(jù)及擬采取的風(fēng)險控制措施、安全操作規(guī)程 等均應(yīng)以國家衛(wèi)生和計劃生育委員會、世界衛(wèi)生組織、國際標(biāo)準(zhǔn)化組 織等機(jī)構(gòu)或行業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)發(fā)

43、布的指南、標(biāo)準(zhǔn)等為依據(jù)。 （二）危險發(fā)生的概率評估（見表 4-1 ） 表 4-1 風(fēng)疹病毒危險發(fā)生的概率評估 序 潛在危險因素 危害 發(fā)生概率 固有 措施 殘留 風(fēng)險可控 號 程度 風(fēng)險 合理性 風(fēng)險 程度 采血過程中患者咳嗽或打噴嚏導(dǎo) 1 致其飛沫入侵采血人員口、鼻或眼 高度 可能 高度 合理 低風(fēng)險 可控 結(jié)合膜 2 樣本運輸過程中容器意外側(cè)翻、 破 可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 裂導(dǎo)致樣本泄漏 中度 3 樣本接收、 開啟及加樣等常規(guī)實驗 中度 較大可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 活動中產(chǎn)生氣溶膠 4 離心過程中樣本管破裂產(chǎn)生大量 中度 可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 氣溶膠 5 檢測未

44、經(jīng)滅活的樣本對儀器與環(huán) 中度 較大可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 境造成污染 6 樣本、 實驗材料及設(shè)施設(shè)備等被誤 中度 較小可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 用 7 陽性樣本被惡意使用 中度 較小可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 8 廢棄物處理不當(dāng)造成病原微生物 中度 可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 的擴(kuò)散 檢測人員及工勤人員破損的皮膚、 9 黏膜接觸到血液樣本或被銳器刺 中度 可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 傷等造成職業(yè)暴露 10 檢測人員個人防護(hù)不當(dāng)造成病原 中度 可能 中度 合理 低風(fēng)險 可控 微生物的擴(kuò)散 非檢測人員、進(jìn)修實習(xí)等外來人員 11 進(jìn)入實驗室的不當(dāng)操作造成病原 中度 可能 中

45、度 合理 低風(fēng)險 可控 微生物的擴(kuò)散 12 水、電、火災(zāi)或自然災(zāi)害造成病原 中度 較小可能 中度 合理 低風(fēng)險 不可控 微生物的擴(kuò)散 （三）風(fēng)險評估人員 由中心主任組織檢驗科、質(zhì)量管理科及其他熟悉風(fēng)疹病毒檢驗相 關(guān)風(fēng)險的專業(yè)人員進(jìn)行風(fēng)險評估并形成風(fēng)險評估報告。形成的風(fēng)險評 估報告經(jīng)中心生物安全委員會審核， 請省市熟悉相關(guān)病原微生物特征、 實驗設(shè)施設(shè)備、操作規(guī)程及個體防護(hù)設(shè)備的不同領(lǐng)域的專家進(jìn)行評估 和討論，不斷修訂完善。 （四）風(fēng)險評估報告 風(fēng)險評估報告應(yīng)是實驗室采取風(fēng)險控制措施、建立安全管理體系 和制訂安全操作規(guī)程的依據(jù)。在記錄風(fēng)險評估的過程中，風(fēng)險評估報 告應(yīng)注明評估時間、編審人員和所依據(jù)

46、的法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、研究報告、權(quán) 威數(shù)據(jù)及數(shù)據(jù)等。定期進(jìn)行風(fēng)險評估或風(fēng)險評估報告復(fù)審，評估的周 期應(yīng)根據(jù)實驗活動和風(fēng)險特征而確定。 （五）需重新進(jìn)行風(fēng)險評估的情況 ?二級生物安全實驗室改造前（或新建造前）和正式啟用前。 ?當(dāng)收集到的數(shù)據(jù)表明風(fēng)疹病毒的致病性或傳染方式發(fā)生變化 時，應(yīng)對其背景數(shù)據(jù)進(jìn)行及時變更，并對其實驗操作的安全性進(jìn)行重 新評估。 ?開展新的實驗活動（增加新的項目），應(yīng)對該項目的實驗活動 進(jìn)行再評估。 ?生物安全實驗室操作人員在進(jìn)行實驗活動中，發(fā)現(xiàn)有原評估報 告中未涉及的隱患存在，或者在檢查過程中發(fā)現(xiàn)存在生物安全問題， 應(yīng)進(jìn)行再評估。 ?在實驗活動中發(fā)生陽性標(biāo)本泄露或人員感染等意外事件

47、或事故 時，應(yīng)立即進(jìn)行再評估。 ?當(dāng)評估過的實驗活動（包括相關(guān)的設(shè)施、設(shè)備、人員、活動范 圍、管理等）發(fā)生改變或者操作超出常規(guī)量，以及從事某些特殊活動 時，應(yīng)該事先或重新進(jìn)行風(fēng)險評估。 ?相關(guān)政策、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等發(fā)生變化時需要風(fēng)險再評估。 （六）對風(fēng)險、需求、資源、可行性、適用性等的綜合評估 中心已對生物安全二級實驗室所涉及的所有活動內(nèi)容進(jìn)行了全面的風(fēng)險評估，并根據(jù)風(fēng)險的內(nèi)容巳逐項制訂了可行的、適用的防控措施。評估報告不僅適用于實驗室設(shè)施設(shè)備的常規(guī)運行，而且適用于實驗室設(shè)施設(shè)備進(jìn)行清潔、維護(hù)及關(guān)停期間。 生物安全二級實驗室實驗活動中未涉及化學(xué)、物理、輻射等相關(guān)檢測和研究內(nèi)容，因此，不存在相應(yīng)的風(fēng)

48、險。實驗室所在的地理位置海拔較高，建筑材料可抗六級地震，能夠抵抗水災(zāi)、地震等災(zāi)害。 八、評估結(jié)論 （一）危害等級 中華人民共和國傳染病防治法規(guī)定，風(fēng)疹屬丙類傳染病，原 衛(wèi)生部人間傳染的病原微生物名錄、 WHO實驗室生物安全手冊規(guī)定，風(fēng)疹病毒危害程度為第三類、危險度等級為級。 （二）實驗活動及生物安全防護(hù)水平 原衛(wèi)生部人間傳染的病原微生物名錄規(guī)定動物感染實驗在 ABSL-2 實驗室進(jìn)行，病毒培養(yǎng)、未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作在 BSL-2 進(jìn)行。本實驗室主要進(jìn)行風(fēng)疹病毒血清學(xué)檢測，從事未經(jīng)培養(yǎng)的感染 性材料操作，實驗活動均在二級生物安全實驗室中進(jìn)行，采取了二級 生物安全防護(hù)水平。實驗室配備的生物安全

49、柜、高壓滅菌器等設(shè)備符 合管理和檢測的要求，并嚴(yán)格按照規(guī)定的操作程序進(jìn)行操作。 本實驗室風(fēng)疹病毒血清學(xué)檢測所依據(jù)的方法為 WS2972008風(fēng)疹 診斷標(biāo)準(zhǔn)。該方法是原衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)，在項目開展時已經(jīng)過技術(shù)確認(rèn)， 實驗方法風(fēng)險很小。 （三）人員健康及素質(zhì) 實驗人員及相關(guān)輔助人員在上崗前均經(jīng)過充分的生物安全、專業(yè)知識及操作技能的培訓(xùn)，考核合格后持證上崗，新上崗人員和進(jìn)修人員經(jīng)過培訓(xùn)，并在指導(dǎo)老師指導(dǎo)下從事檢測工作。 （四）防治原則 目前，接種風(fēng)疹減毒活疫苗是預(yù)防風(fēng)疹的有效措施，通常以麻疹風(fēng)疹腮腺炎三聯(lián)疫苗形式聯(lián)合使用，未接種的工作人員最好及時補(bǔ)種。臨床上，針對風(fēng)疹以對癥支持療法為主，無特效藥物。 因呼

50、吸道傳播為其主要傳播途徑，實驗室工作人員在實驗活動過程中，尤其是面對面給患者采集血液樣本時，應(yīng)加強(qiáng)個人防護(hù)，規(guī)范操作，避免與患者面對面談話，對所涉及的器械實施嚴(yán)格消毒；安全處置廢棄物；嚴(yán)格洗手和對手進(jìn)行消毒。 （五）管理體系和應(yīng)急預(yù)案 相關(guān)管理體系文件如生物安全柜操作規(guī)程 MLS-3750 高壓滅菌器操作規(guī)程 離心機(jī)操作規(guī)程 ELX800 型洗板機(jī)操作規(guī)程 微生物實驗室廢棄物及容器的處理操作規(guī)程樣品管理程序等經(jīng)過 技術(shù)委員會的評審證明是有效和安全的。實驗室對制訂的實驗室意外事故和職業(yè)性疾病報告制度和病原微生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案，經(jīng)過培訓(xùn)和反復(fù)演練，能確保一旦發(fā)生意外感染事件時能有效應(yīng)時，把危

51、害控制在最小范圍和最低限度。 綜上所述，本實驗室在人員素質(zhì)、設(shè)施設(shè)備、實驗器材及實驗方法、管理體系、廢棄物處置等方面均能滿足開展風(fēng)疹病毒血清學(xué)檢測相關(guān)實驗活動的安全管理要求，實驗過程中的風(fēng)險是可控的，實驗人員的健康與安全是有保障的，不會對周圍環(huán)境產(chǎn)生危害。 麻疹病毒實驗活動風(fēng)險評估報告 一、生物學(xué)特性 （一）種類和病毒分型 麻疹病毒（ Measlesvirus ）是麻疹的病原體，分類上屬于副粘病 毒科麻疹病毒屬。 電鏡下麻疹病毒呈球狀或絲狀， 直徑約 120 250nm， 有包膜，核衣殼呈螺旋對稱，核心為單負(fù)鏈 RNA，不分節(jié)段，基因組全 長約 16kb，包括 N、 P、 M、F、 H、 L6

52、 個基因，分別編碼 6 個結(jié)構(gòu)和功 能蛋白。麻疹病毒的抗原性較穩(wěn)定，只有一個血清理，但近年來的研 究證明，麻疹病毒抗原體也有小的變異。根據(jù)麻疹病毒核蛋白基因 C 末端高變區(qū)或全長血凝素基因特點， 可以將野生型麻疹病毒分為 A H8 個基因群，包括 23 個基因型。 （二）來源 早在東漢時期，我國張仲景在金匱要略中就有關(guān)于麻疹的描 述，并認(rèn)為麻疹是一種傳染性很強(qiáng)的疾病。國外在公元 10 世紀(jì)，波斯 醫(yī)生拉茲才開始描述該病， 直到 1675 年才認(rèn)為麻疹是一種獨立的疾病。 1864 年，貝納肯定了麻疹是通過呼吸道播散的， 是由人傳給人的疾病， 潛伏期為 14d，可獲終生免疫。 1911 年，哥特貝

53、格等用急性期患者的 血液及咽拭子感染了猴子，證實了麻疹病原是一種濾過性病毒。 1930 年，勃來茲應(yīng)用雞胚培養(yǎng)麻疹病毒獲得成功。 1954 年，恩多等用人胚 腎及人羊膜細(xì)胞培養(yǎng)病毒取得成功，為深入研究麻疹奠定了實驗室基 礎(chǔ)。 1963 年，美國成功地應(yīng)用了經(jīng)雞胚羊膜腔適應(yīng)和雞胚單層細(xì)胞傳 代的減毒株制備了疫苗。 我國也于 1965 年自行研制了減毒活疫苗并開 始普種，從此，麻疹的發(fā)病率和死亡率大幅度降低。 （三）傳染源 人是麻疹病毒的唯一宿主，因此，病人是唯一的傳染源。急性期患者為最重要的傳染源，無癥狀帶病毒者和隱性感染者較少，傳染性 也較低。在患者出疹前 6d 至出疹后 3d 內(nèi)均具有傳染性

54、，前驅(qū)期傳染性最強(qiáng)，出疹后逐漸減低，疹消退時已無傳染性。傳染期患者口、鼻、咽、眼結(jié)合膜分泌物均含有病毒，恢復(fù)期不帶病毒。 （四）傳播途徑 主要經(jīng)呼吸道飛沫傳播。病人咳嗽、打噴嚏時，病毒隨排出的飛沫經(jīng)口、咽、鼻部或眼結(jié)合膜侵入易感者。密切接觸者亦可經(jīng)污染病毒的手傳播，通過第三者或衣物間接傳播較為少見。 （五）易感性 人群普遍易感， 易感者接觸患者后 90%以上會發(fā)病， 病后可獲持久免疫力。 6 個月內(nèi)的嬰兒因從母體獲得抗體，因此，很少患病，該病主 要在 6 個月至 5 歲小兒間流行。目前，成人麻疹病例的報導(dǎo)越來越多，甚至在局部地區(qū)有小的流行。其主要原因為幼時接種過麻疹疫苗，以后未再復(fù)種，導(dǎo)致體內(nèi)

55、抗體的水平降低而使其成為易感者。 （六）潛伏期 潛伏期為 6 21d，平均為 10d 左右，接種過麻疹疫苗者可延長至34 周。 （七）劑量效應(yīng)關(guān)系 目前，尚未見有麻疹病毒對人準(zhǔn)確感染劑量的報導(dǎo)，麻疹病毒的感染主要與暴露途徑和感染方式相關(guān)。 （八）致病性 因為 CD46 是麻疹病毒受體，所以，具有 CD46 的大多數(shù)組織細(xì)胞均可為麻疹病毒感染的靶細(xì)胞。經(jīng)呼吸道進(jìn)入的病毒首先與呼吸道上 皮細(xì)胞受體結(jié)合并在其中增殖，再侵入淋巴結(jié)增殖，然后入血（在白 細(xì)胞內(nèi)增殖良好），形成第一次病毒血癥。病毒到達(dá)全身淋巴組織后 進(jìn)行大量增殖，再次入血，形成第二次病毒血癥。此時，開始發(fā)熱， 以及由于病毒在結(jié)膜、鼻咽黏膜

56、和呼吸道黏膜等處增殖而出現(xiàn)的上呼 吸道卡他癥狀。病毒還可在真皮層內(nèi)增殖，口腔兩頰內(nèi)側(cè)黏膜出現(xiàn)中 心灰白、周圍紅色的 Koplik 斑。發(fā)病 3d 后，患者可出現(xiàn)米糠樣皮疹， 皮疹形成的原因主要是局部產(chǎn)生超敏反應(yīng)。 一般患兒皮疹出現(xiàn) 24h 后， 體溫開始下降，呼吸道癥狀一周左右消退，皮疹變暗，有色素沉著。 有些年幼體弱的患兒，易并發(fā)細(xì)菌性感染，如繼發(fā)性支氣管炎、中耳 炎，尤其是易患細(xì)菌性肺炎，這是麻疹患兒死亡的主要原因。 麻疹病毒感染后，大約有 0.1%的患者會發(fā)生腦脊髓炎，它是一種 遲發(fā)型超敏反應(yīng)性疾病，常于病愈 1 周后發(fā)生，呈典型的脫髓鞘病理 學(xué)改變及明顯的淋巴細(xì)胞浸潤，常留有永久性后遺

57、癥，病死率為 15%。 免 - 疫缺陷兒童感染麻疹病毒，常無皮疹，但可發(fā)生嚴(yán)重致死性麻疹巨細(xì)胞肺炎。另外，約百萬分之一的麻疹兒童患者在其恢復(fù)后若干年， 多在學(xué)齡期前出現(xiàn)亞急性硬化性全腦炎 （ Subacutesclerosingpanencephalitis ，SSPE）。SSPE 屬急性感染的 1 2 現(xiàn)，患者血清及腦脊液中雖有高效價的 IgG 或 IgM 抗麻疹病毒抗體， 但是用這些抗體很難分離出麻疹病毒。現(xiàn)認(rèn)為，腦組織中的病毒為麻 疹缺陷病毒，由于在腦細(xì)胞內(nèi)病毒 M 基因變異而缺乏合成麻疹病毒 M 蛋白的能力，從而影響病毒的裝配、出芽及釋放。因此，將 SSPE 腦組 織細(xì)胞與對麻疹病毒敏

58、感細(xì)胞（如 HeLa、 Ver0 等）共同培養(yǎng)，可分離 出麻疹病毒。 （九）變異性 長期以來，麻疹病毒一直被認(rèn)為是穩(wěn)定遺傳的病毒，只有一個血 清型。但近年來的研究表明，麻疹病毒抗原也存在小幅度的變異。 20 世紀(jì) 80 年代以來， 中國流行的麻疹野病毒與 20 世紀(jì) 50 60 年代的分離株以及目前廣泛使用的疫苗株之間存在不同特性，如無血凝活性、 只能被多克隆抗體中和、 不能在 Vero 細(xì)胞上復(fù)制等。 1998 年，許文波 等人在我國首次發(fā)現(xiàn)一個新的基因型別 H1 基因型，也是近年來中 國優(yōu)勢流行株，還未見其他國家有 H1 基因型流行的報導(dǎo)。 （十）環(huán)境中的穩(wěn)定性 麻疹病毒在外界環(huán)境中穩(wěn)定性

59、較差，對熱、紫外線及一般消毒劑敏感，但對寒冷及干燥環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗力。 （十一）藥物敏感性 目前 , 對麻疹病毒尚無特效抗病毒藥物。 （十二）消毒劑敏感性 麻疹病毒對一般消毒劑都沒有抵抗力，對過氧乙酸、 75%乙醇、含 氯消毒劑等均敏感。 （十三）物理滅活 高溫、干燥、日曬均很容易將麻疹病毒滅活，置于 56或空氣流 （十四）在宿主體外存活 麻疹病毒在體外抵抗力較弱，室溫下可存活數(shù)天， -70 時可存活數(shù)年。 （十五）與其他生物和環(huán)境的交互作用 高溫環(huán)境及紫外線照射下，麻疹病毒均不易存活，而在寒冷及干燥的環(huán)境中抵抗力較強(qiáng)。 （十六）預(yù)防和治療方案 1. 預(yù)防措施 關(guān)鍵是對易感者接種麻疹疫苗，提高

60、其免疫力。 ?管理傳染源 對麻疹患者應(yīng)做到早診斷、早報告、早隔離、早 治療，患者隔離至出疹后 5d，伴呼吸道并發(fā)癥者應(yīng)延長到出疹后 10d。 易感的接觸者檢疫 3 周，并使用被動免疫制劑。流行期間，兒童機(jī)構(gòu) 應(yīng)加強(qiáng)檢查，及時發(fā)現(xiàn)患者。 ?切斷傳播途徑 流行期間應(yīng)避免去公共場所或人多擁擠處，出 入應(yīng)戴口罩；無并發(fā)癥的患兒在家中隔離，以降低傳播和繼發(fā)醫(yī)院感 染的風(fēng)險。 ?保護(hù)易感人群 關(guān)鍵是主動免疫，主要對象為嬰幼兒，但未患 過麻疹的兒童和成人均可接種麻疹減毒活疫苗。其次是被動免疫，體 弱、妊娠婦女及年幼的易感者接觸麻疹病人后，應(yīng)立即采用被動免疫。 在接觸病人 5d 內(nèi)注射人血丙種球蛋白 3mL