微生物檢驗13

1、123456二、二、 微生物特性微生物特性 炭疽芽胞桿菌 亞甲基藍(lán)染色 1000 革蘭染色 100078培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，生長條件不嚴(yán)格，最適溫 度3035普通培養(yǎng)基扁平、粗糙、不透明、灰白色、 無光澤，邊緣不整齊的菌落，低倍鏡下菌落邊 緣呈卷發(fā)狀9炭疽桿菌在血瓊脂平板中菌落炭疽桿菌在血瓊脂平板中菌落 10111213莢膜多肽抗原： -與毒力有關(guān)，有抗吞噬作用，有利于細(xì) 菌生長和擴散 -莢膜腫脹試驗，對本菌鑒定有意義芽胞抗原： 有免疫原性和血清學(xué)診斷價值141516-芽胞對化學(xué)消毒劑抵抗力不一，對碘和氧化 劑較敏感，常用以下方法殺菌： 1：2500碘 10min、 3%H2O2 1h、

2、 4%高錳酸鉀 15min、 0.5%過氧乙酸 10min -對磺胺、青霉素、鏈霉素、四環(huán)素、紅霉素、 氯酶素均敏感17三、微生物學(xué)檢驗三、微生物學(xué)檢驗1819無雜菌污染標(biāo)本：直接接種肉湯增菌或固體培養(yǎng)基污染雜菌固體標(biāo)本：加10倍量生理鹽水充分浸泡，振 蕩1015min 、靜置10min，取懸液65水浴30min或 855min殺死雜菌，保留芽胞活性，再增菌和培養(yǎng)污染雜菌液體標(biāo)本：離心 ，棄上清液后，加0.5%洗滌 劑振蕩1015min ，離心取沉淀物增菌和分離培養(yǎng) 20生化反應(yīng)噬菌體裂解青霉素抑制毒力試驗檢驗程序皮毛、腐敗臟器等血液Ascoli試驗以NG制成懸液經(jīng)加溫或飽和尿素處理肉湯增菌培

3、養(yǎng)BAP或戊烷脒平板2%兔血清肉湯4-8hG染色鏡檢菌落特征動力觀察串珠試驗確定報告莢膜腫脹試驗21痰、嘔吐物、CSF及炎癥分泌物2%兔血清肉湯快速增菌374h莢膜腫脹試驗直接涂片莢膜染色 G染色初步報告0.2ml注射小白鼠腹腔，8h后解剖涂片G染色、莢膜染色初步報告222324青霉素抑制試驗：接種于含青霉素5、10、100U/ml瓊脂平板，3724h 生長 受抑制不生長 串珠和青霉素抑制聯(lián)合試驗：兔血瓊脂平板抑菌環(huán)青霉素紙片25 噬菌體裂解試驗：AP631炭疽噬菌體 NaHCO3毒力試驗： 接種于含0.5%NaHCO3和10%馬血清的平板， 10%CO2、37、2448h 有毒株形成莢膜黏液

4、型菌落 無毒株不形成莢膜粗糙型菌落 動物試驗： 小鼠、家兔或豚鼠皮下接種26植物凝集素試驗：Ascoli熱沉淀試驗：可作追溯性診斷2728293031培養(yǎng)特性：培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧營養(yǎng)要求不高最適溫度3035普通瓊脂平板：菌落較大， 灰白色，表面粗糙似毛玻璃狀或融蠟狀，有 蠟樣光澤3233生化反應(yīng)：能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、水楊素、糊 精，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣能胨化牛乳，液化明膠，VP（+）、卵磷脂 酶（+） 多次傳代后生化特性?？筛淖?34抵抗力：耐熱，肉湯中細(xì)菌需10020min才能殺死，食物中毒菌株的游離芽胞耐受10030min、干熱12060min才能殺死對氯霉素、紅霉素、慶大霉素敏感，對

5、青霉素、磺胺、呋喃類耐藥353637檢驗程序嘔吐物、殘留食物等活菌計數(shù) 接種 普通瓊脂平板、BAP 、卵黃平板3718-24h純培養(yǎng)動物試驗（腸毒素測定）生化反應(yīng)血清凝集（分型）報告結(jié)果直接涂片染色鏡檢38檢驗方法：直接鏡檢分離培養(yǎng)與活菌計數(shù) 普通瓊脂平板、BAP、卵黃平板鑒定與分型： 根據(jù)菌落特點、形態(tài)染色、生化反應(yīng)等初步鑒定 生化分型、血清分型、噬菌體分型，腸毒素檢測394041424344孕婦李斯特菌病新生兒李斯特菌病成人李斯特菌病局部感染4546 2025形成周鞭毛，有動力；37時鞭毛 很少或無 細(xì)菌接種半固體培養(yǎng)基，置室溫，由于動力 強，細(xì)菌自穿刺線向四周彌漫生長，在離瓊 脂表面數(shù)毫

6、米處出現(xiàn)一個倒傘形的生長，是 本菌特征之一47484950515253鑒定：形態(tài)特征、菌落特點、動力及生化反應(yīng)作出 鑒定 可疑菌落用已知李斯特菌1型、4型或多價抗 血清做玻片凝集試驗進行鑒定與其他G+菌鑒別54 觸酶 動力 馬尿酸鹽水解產(chǎn)單核李斯 + + -B群鏈球菌 - - +本菌有耐堿耐鹽的特點，可用觸酶試驗與 腸球菌鑒別55本菌隸屬于丹毒絲菌屬565758紅斑丹毒絲菌紅斑丹毒絲菌 革蘭染色革蘭染色 100059培養(yǎng)特性:厭氧或微需氧、初次分離需在厭氧環(huán)境，傳代后有氧環(huán)境也能生長，最適溫度30-35。在含葡萄糖或血清培養(yǎng)基生長旺盛 60BAP：3524h可形成兩種菌落光滑型：菌落細(xì)小、透明

7、突起、發(fā)亮、邊緣整 齊、質(zhì)軟易于懸于液體中，毒力較強粗糙型：菌落較大，顆粒狀、扁平、邊緣不齊 可呈卷發(fā)狀，無毒力BAP上新分離的菌株有輕微的溶血，培養(yǎng)時間延長溶血現(xiàn)象明顯，傳代后溶血特性常消失61 在半固體表層下數(shù)mm處發(fā)育最好，常呈帶狀 含碲鹽的培養(yǎng)基黑色菌落 62 葡萄糖肉湯：培養(yǎng)24h后，呈輕微混 濁，不 形成菌膜，室溫靜置23天后，管底有少量 灰色沉淀；粗糙型沉淀較多。 S-R變異同時毒力、抗原性也發(fā)生變異，但 遺傳學(xué)上不穩(wěn)定，常出現(xiàn)互變。 6364鑒定依據(jù)： G+、H2S +、無動力、觸酶 -、吲哚 -、VP -與產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌鑒別（表11-2）新霉素敏感試驗：紅斑丹毒絲菌R 產(chǎn)

8、單核李斯特菌S 動物毒力試驗：對小鼠、大鼠、兔、鴿均有致病性，0.2ml的24天培養(yǎng)物注入小鼠腹腔，4-5天后，敗血癥而死，心血培養(yǎng)（+）65屬于加特納菌屬此菌屬只有本菌一個種66676869生化反應(yīng)：氧化酶 -、觸酶 -、尿素酶 -發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、蔗糖等產(chǎn)酸不產(chǎn)氣水解馬尿酸鈉和淀粉，吲哚 -、明膠液化 -、甘露醇分解 -抵抗力：對氨芐青霉素、羥氨芐青霉素、苯唑青霉素、青霉素、萬古霉素、甲硝噠唑敏感，對萘啶酸、新霉素、多粘菌素和磺胺嘧啶耐藥。7071涂片染色鏡檢：觀察線索細(xì)胞，了解陰道菌群狀況，常見大量小的G-和染色不定的桿菌和球桿菌，而無大的G+桿菌（乳酸桿菌）pH測定：pH4.5，提示細(xì)菌性陰道病胺試驗：滴加10%KOH即發(fā)出魚腥嗅為“+”72分離培養(yǎng)： 5%人血瓊脂平板、35、5