病理學技術(shù)第一次課1

1、病理學技術(shù)概況齊曉薇 副主任醫(yī)師江南大學附屬醫(yī)院病理學教研室病理學的定義lPathology 是病痛（是病痛（ pathos）的研究的研究(logos) l聯(lián)系基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床醫(yī)學的橋梁聯(lián)系基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床醫(yī)學的橋梁 l研究疾病狀態(tài)下細胞、組織和器官結(jié)構(gòu)和功能的研究疾病狀態(tài)下細胞、組織和器官結(jié)構(gòu)和功能的改變改變l通過各種手段解釋疾病，為臨床診斷，治療和疾通過各種手段解釋疾病，為臨床診斷，治療和疾病的預防提供依據(jù)病的預防提供依據(jù)2022-4-292病理學技術(shù) 病理學包括病理學理論和病理學技術(shù)。病理學技術(shù)是病理學包括病理學理論和病理學技術(shù)。病理學技術(shù)是“病理學之母病理學之母”。病理學的理論和技術(shù)被視為

2、一輛車的兩。病理學的理論和技術(shù)被視為一輛車的兩個輪子，缺一不可，互為依存，互相促進，兩者的結(jié)合決個輪子，缺一不可，互為依存，互相促進，兩者的結(jié)合決定著病理學的發(fā)展。定著病理學的發(fā)展。 病理學技術(shù)包括尸體解剖、大體標本的制作、制片（石病理學技術(shù)包括尸體解剖、大體標本的制作、制片（石臘切片、冰凍切片、半薄切片、超薄切片等）、組織化學臘切片、冰凍切片、半薄切片、超薄切片等）、組織化學方法，免疫組化技術(shù)、原位雜交、分子病理技術(shù)、電鏡技方法，免疫組化技術(shù)、原位雜交、分子病理技術(shù)、電鏡技術(shù)、圖像分析等。術(shù)、圖像分析等。 病理技術(shù)的發(fā)展促進了病理學理論的進步。病理技術(shù)的發(fā)展促進了病理學理論的進步。2022-

3、4-293病理學的發(fā)展器官病理學時代：lGiovanni Battista Morgagni （1682 ,1 1771,11） l意大利解剖學家l現(xiàn)代解剖病理學之父l編寫疾病的位置與原因，包含646例解剖記錄 l奠定了病理學發(fā)展的基礎(chǔ)l遺憾：沒有將病理與臨床聯(lián)系2022-4-294病理學的發(fā)展組織病理學時代組織病理學時代lRudolf Virchow （1821,10-1902,12) 德國醫(yī)生l現(xiàn)代病理學之父l編著細胞病理學l開創(chuàng)了細胞病理學時代2022-4-295病理學的發(fā)展現(xiàn)代病理學時代現(xiàn)代病理學時代(近400年歷史）l電子顯微鏡：細胞超微結(jié)構(gòu)的觀察l免疫病理學：免疫組化技術(shù)的應(yīng)用l分

4、子病理學：疾病遺傳和基因的研究l數(shù)字病理學：2022-4-296病理學技術(shù)l傳統(tǒng)病理學技術(shù)傳統(tǒng)病理學技術(shù) HE染色技術(shù) 組織化學染色 細胞病理學技術(shù) l現(xiàn)代病理學技術(shù)現(xiàn)代病理學技術(shù)2022-4-297傳統(tǒng)病理學技術(shù)l病理學技術(shù)的基礎(chǔ)和根本，是臨床和科研最常用的技術(shù)l全手工操作發(fā)展為自動化的機器：脫水機，包埋機，封片機，染色機，包埋盒和切片打號機，液基細胞制片技術(shù)l材料的優(yōu)化：塑料包埋盒，一次性切片刀l試劑的該進：試劑的商業(yè)化，非污染環(huán)保試劑l低溫恒冷切片機替代二氧化碳制冷機等l（前三次課主要講述傳統(tǒng)病理學技術(shù)，包括組織切片技術(shù)、生物染料和蘇木精-伊紅染色方法染色技術(shù)和原理、常用的特殊染色方法）

5、2022-4-298現(xiàn)代病理學技術(shù)l 免疫組織化學技術(shù)：發(fā)展快，應(yīng)用廣，已成為臨床診斷，靶向藥物的免疫組織化學技術(shù)：發(fā)展快，應(yīng)用廣，已成為臨床診斷，靶向藥物的篩選以及科研的重要手段；盡管存在問題。篩選以及科研的重要手段；盡管存在問題。l 電鏡技術(shù)：包括透射電鏡，掃描電鏡，免疫電鏡等，用于腫瘤的分型，電鏡技術(shù)：包括透射電鏡，掃描電鏡，免疫電鏡等，用于腫瘤的分型，腎臟病的診斷，肌肉疾病的診斷等；科研。腎臟病的診斷，肌肉疾病的診斷等；科研。l 分子病理技術(shù)：近分子病理技術(shù)：近20年來發(fā)展最快，分子生物學技術(shù)與病理形態(tài)結(jié)合，年來發(fā)展最快，分子生物學技術(shù)與病理形態(tài)結(jié)合，用于疾病診斷和分類，靶向藥物的篩選

6、，病原體的檢測，遺傳學研究用于疾病診斷和分類，靶向藥物的篩選，病原體的檢測，遺傳學研究等。等。l 數(shù)字化病理：病理切片數(shù)字化病理：病理切片掃描技術(shù)，遠程會診，圖像分析系統(tǒng)，檔案的數(shù)字化管理。 病理技術(shù)的進步促使人類的認識從大體、細胞、超微病理技術(shù)的進步促使人類的認識從大體、細胞、超微結(jié)構(gòu)、分子基因水平逐步深入。結(jié)構(gòu)、分子基因水平逐步深入。2022-4-2992022-4-2910免疫組化(pubmed檢索） 應(yīng)用免疫學（抗原抗應(yīng)用免疫學（抗原抗體反應(yīng)）和組織化學（化體反應(yīng)）和組織化學（化學反應(yīng)）的原理，對組織學反應(yīng)）的原理，對組織切片或細胞標本中的某些切片或細胞標本中的某些成份進行原位定性、定

7、位成份進行原位定性、定位甚至定量研究的技術(shù)。甚至定量研究的技術(shù)。 現(xiàn)代病理學技術(shù)免疫組織化學技術(shù)的應(yīng)用：免疫組織化學技術(shù)的應(yīng)用：l臨床診斷和鑒別診斷臨床診斷和鑒別診斷l(xiāng)腫瘤的分型腫瘤的分型l腫瘤起源的判斷腫瘤起源的判斷l(xiāng)靶向藥物的篩選靶向藥物的篩選l腫瘤生物學行為的判斷腫瘤生物學行為的判斷l(xiāng)病原體的檢測病原體的檢測l2022-4-29112022-4-2912分子病理分子病理(pubmed檢索）檢索）現(xiàn)代病理學技術(shù)分子病理學技術(shù)：分子病理學技術(shù)：lFISHlPCRl原位雜交原位雜交l基因測序基因測序分子病理學技術(shù)的應(yīng)用分子病理學技術(shù)的應(yīng)用l診斷與鑒別診斷診斷與鑒別診斷l(xiāng)腫瘤預后判斷腫瘤預后判斷

8、l藥物的篩選藥物的篩選l.2022-4-2913分子病理在臨床中的應(yīng)用l 肺非小細胞癌肺非小細胞癌EGFR突變的檢測：突變的檢測：EGFR突變陽性者應(yīng)用絡(luò)氨酸激突變陽性者應(yīng)用絡(luò)氨酸激酶藥物（易瑞沙）有效，否則效果不佳酶藥物（易瑞沙）有效，否則效果不佳l 大腸癌大腸癌k-ras基因檢測：基因檢測：ras基因突變患者對西妥昔單抗（愛必妥）基因突變患者對西妥昔單抗（愛必妥）治療無效，患者預后差治療無效，患者預后差l 乳腺癌乳腺癌her-2基因檢測：基因檢測： her-2基因擴增患者對曲妥珠單抗（赫賽基因擴增患者對曲妥珠單抗（赫賽汀）有效，否則效果不佳汀）有效，否則效果不佳l 非小細胞肺癌非小細胞肺癌

9、ALK基因檢測：基因檢測：ALK基因發(fā)生重排患者對克唑替尼基因發(fā)生重排患者對克唑替尼有效，否則效果不佳有效，否則效果不佳l C-kit突變的檢測：突變的檢測：C-kit突變可用于選擇是否使用藥物突變可用于選擇是否使用藥物”格列衛(wèi)格列衛(wèi)l 血尿的診斷：檢測血尿的診斷：檢測9號，號，3號，號，17號，號，7號染色體可以輔助膀胱癌號染色體可以輔助膀胱癌的診斷和預測術(shù)后復發(fā)的可能的診斷和預測術(shù)后復發(fā)的可能l 淋巴瘤的分型：應(yīng)用淋巴瘤的分型：應(yīng)用FISH檢測可輔助淋巴瘤的分型，為臨床治檢測可輔助淋巴瘤的分型，為臨床治療提供依據(jù)。療提供依據(jù)。l .2022-4-2914電子顯微鏡技術(shù) 電子顯微鏡，包括透射

10、電鏡和掃描電鏡電子顯微鏡，包括透射電鏡和掃描電鏡 電鏡技術(shù)包括負染色技術(shù)、冷凍蝕刻技術(shù)、電鏡細胞化學電鏡技術(shù)包括負染色技術(shù)、冷凍蝕刻技術(shù)、電鏡細胞化學技術(shù)、電鏡技術(shù)、電鏡X射線顯微分析技術(shù)、電鏡放射自顯影技術(shù)等射線顯微分析技術(shù)、電鏡放射自顯影技術(shù)等 主要用于腎小球腎炎的分型主要用于腎小球腎炎的分型 確定腫瘤細胞的組織發(fā)生、類型和分化程度確定腫瘤細胞的組織發(fā)生、類型和分化程度 掃描電鏡能夠直接觀察樣品的表面的結(jié)構(gòu)，血管腔面改變掃描電鏡能夠直接觀察樣品的表面的結(jié)構(gòu)，血管腔面改變2022-4-2915共聚焦激光掃描顯微鏡 （confocal laser scanning microscopy） 利用

11、計算機及圖像處理系統(tǒng)對組織，細胞及亞細利用計算機及圖像處理系統(tǒng)對組織，細胞及亞細胞結(jié)構(gòu)進行斷層掃描，再現(xiàn)三維立體空間結(jié)構(gòu)，胞結(jié)構(gòu)進行斷層掃描，再現(xiàn)三維立體空間結(jié)構(gòu)，將形態(tài)學研究從平面圖像水平提高到三維立體水將形態(tài)學研究從平面圖像水平提高到三維立體水平；在觀察培養(yǎng)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的同時，直接顯示平；在觀察培養(yǎng)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的同時，直接顯示培養(yǎng)活體細胞內(nèi)的代謝變化。培養(yǎng)活體細胞內(nèi)的代謝變化。2022-4-2916生物芯片技術(shù) 基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、細胞芯片、組織芯片、以及元件基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、細胞芯片、組織芯片、以及元件型微陣列芯片、通道型微陣列芯片、生物傳感芯片等新型型微陣列芯片、通道型微陣列芯片、生物傳感芯片等新型生物芯片?？蓪ι镄酒？蓪NA、RNA、多肽、蛋白質(zhì)、細胞、組織、多肽、蛋白質(zhì)、細胞、組織以及其它生物成分進行高效快捷的測試和分析。以及其它生物成分進行高效快捷的測試和分析。 2022-4-2917組織芯片 組織芯片又稱組織微列陣（組織芯片又稱組織微列