第五章農(nóng)藥登記殘留試驗

1、第第 五五 章章農(nóng)農(nóng) 藥藥 登登 記記 殘殘 留留 試試 驗驗 生產(chǎn)（包括原藥生產(chǎn)、制劑加工和分裝）農(nóng)藥和進口農(nóng)藥，生產(chǎn)（包括原藥生產(chǎn)、制劑加工和分裝）農(nóng)藥和進口農(nóng)藥，必須進行登記必須進行登記 。 按農(nóng)藥登記的主管部門分類，目前世界上農(nóng)藥管理模式主按農(nóng)藥登記的主管部門分類，目前世界上農(nóng)藥管理模式主要分為三種：要分為三種： 第一種是以美國為代表的環(huán)保部門主管模式；第一種是以美國為代表的環(huán)保部門主管模式； 第二種是以日本、德國等為代表的農(nóng)業(yè)部門主管模式；第二種是以日本、德國等為代表的農(nóng)業(yè)部門主管模式； 第三種是以加拿大為代表的衛(wèi)生部門主管模式。第三種是以加拿大為代表的衛(wèi)生部門主管模式。 。農(nóng)藥殘留

2、田間試驗農(nóng)藥殘留田間試驗是為農(nóng)藥登記和制定農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥最大殘是為農(nóng)藥登記和制定農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥最大殘留限量標準或制定農(nóng)藥合理使用準則，提供殘留留限量標準或制定農(nóng)藥合理使用準則，提供殘留資料而設(shè)計進行的室外（田間或模擬）試驗。資料而設(shè)計進行的室外（田間或模擬）試驗。 目的：根據(jù)供試農(nóng)藥的實際使用情況，按照殘留根據(jù)供試農(nóng)藥的實際使用情況，按照殘留試驗要求設(shè)計試驗，得到農(nóng)藥在農(nóng)作物、土壤、試驗要求設(shè)計試驗，得到農(nóng)藥在農(nóng)作物、土壤、水中的消解動態(tài)和作物收獲時的最終殘留狀況。水中的消解動態(tài)和作物收獲時的最終殘留狀況。農(nóng)藥殘留動態(tài)農(nóng)藥殘留動態(tài) 是指施藥后殘留農(nóng)藥逐步降解和消失的過程。是指施藥后殘留農(nóng)藥逐步降解

3、和消失的過程。 以殘留動態(tài)曲線來表征：以殘留動態(tài)曲線來表征： 為了考察作物和土壤中的農(nóng)藥，隨著施藥后天數(shù)為了考察作物和土壤中的農(nóng)藥，隨著施藥后天數(shù)的增加而不斷降解直至消失的過程，在施藥后不的增加而不斷降解直至消失的過程，在施藥后不同時間采樣測定其殘留量，以農(nóng)藥殘留量為縱坐同時間采樣測定其殘留量，以農(nóng)藥殘留量為縱坐標，施藥后的天數(shù)為橫坐標作圖，得到農(nóng)藥殘留標，施藥后的天數(shù)為橫坐標作圖，得到農(nóng)藥殘留動態(tài)曲線。動態(tài)曲線。 從曲線可以看出，一般農(nóng)藥消解有兩種情況：從曲線可以看出，一般農(nóng)藥消解有兩種情況：（1）迅速消解）迅速消解大多數(shù)易揮發(fā)、淋溶、光解的農(nóng)藥消解快，如辛硫大多數(shù)易揮發(fā)、淋溶、光解的農(nóng)藥消

4、解快，如辛硫磷，殺螟硫磷。磷，殺螟硫磷。（2）緩慢消解階段）緩慢消解階段不易揮發(fā)、降解，有一定脂溶性或內(nèi)吸滲透性的，不易揮發(fā)、降解，有一定脂溶性或內(nèi)吸滲透性的，消解緩慢，如殺蟲脒，消解緩慢，如殺蟲脒，DDT等。等。是評價農(nóng)藥對環(huán)境污染的指標之一。是評價農(nóng)藥對環(huán)境污染的指標之一。農(nóng)藥在漬水土壤和非漬水土壤中的半衰期相差很農(nóng)藥在漬水土壤和非漬水土壤中的半衰期相差很大。大。半衰期的長短，不僅直接影響土壤中動植物和微半衰期的長短，不僅直接影響土壤中動植物和微生物的生長，還影響其從土壤中對大氣、水源及生物的生長，還影響其從土壤中對大氣、水源及作物的污染，對后茬作物的藥害。作物的污染，對后茬作物的藥害。是

5、農(nóng)藥在作物上殘效期和殘留期長短的指標。是農(nóng)藥在作物上殘效期和殘留期長短的指標。太短，會影響藥效，太長，會造成最終殘留。太短，會影響藥效，太長，會造成最終殘留。各種農(nóng)藥的持久性是有區(qū)別的，以有機磷為例：各種農(nóng)藥的持久性是有區(qū)別的，以有機磷為例：辛硫磷，辛硫磷，DDV-低殘留農(nóng)藥，低殘留農(nóng)藥，對硫磷對硫磷-殘留期較長，毒性大，殘留期較長，毒性大，樂果樂果-中等殘留中等殘留內(nèi)吸磷內(nèi)吸磷-內(nèi)吸，劇毒（或慢性毒性），殘留期內(nèi)吸，劇毒（或慢性毒性），殘留期長，已在茶葉中禁用。長，已在茶葉中禁用。 指在良好農(nóng)業(yè)生產(chǎn)規(guī)范指在良好農(nóng)業(yè)生產(chǎn)規(guī)范(GAP)(GAP)和良好實驗室規(guī)范和良好實驗室規(guī)范(GLP)(GLP

6、)或相似條件下，為獲取推薦使用的農(nóng)藥在可或相似條件下，為獲取推薦使用的農(nóng)藥在可食用食用( (或飼用或飼用) )初級農(nóng)產(chǎn)品和土壤中可能的最高殘初級農(nóng)產(chǎn)品和土壤中可能的最高殘留量，以及這些農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品、土壤留量，以及這些農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品、土壤( (或水或水) )中的中的消解動態(tài)而進行的試驗。消解動態(tài)而進行的試驗。殘留試驗數(shù)據(jù)殘留試驗數(shù)據(jù)是按照風險分析原理制定是按照風險分析原理制定農(nóng)藥殘留最大農(nóng)藥殘留最大殘留限量殘留限量(MRL)的三個基本依據(jù)之一的三個基本依據(jù)之一(其余兩個分別是其余兩個分別是毒理毒理學數(shù)據(jù)學數(shù)據(jù)危害認定和危害特征描述危害認定和危害特征描述和和膳食攝入數(shù)據(jù)膳食攝入數(shù)據(jù)膳食膳食暴露評估參

7、數(shù)之一暴露評估參數(shù)之一)。 因此對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全和食品安全意義重大，因為多數(shù)因此對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全和食品安全意義重大，因為多數(shù)發(fā)達國家要求農(nóng)藥登記的同時制定相應(yīng)農(nóng)產(chǎn)品（食品）中發(fā)達國家要求農(nóng)藥登記的同時制定相應(yīng)農(nóng)產(chǎn)品（食品）中最大殘留限量，因此殘留試驗數(shù)據(jù)也是農(nóng)藥登記必不可少最大殘留限量，因此殘留試驗數(shù)據(jù)也是農(nóng)藥登記必不可少的數(shù)據(jù)之一。的數(shù)據(jù)之一。 我國在上世紀我國在上世紀7070年代末、年代末、8080年代初，根據(jù)當時年代初，根據(jù)當時FAOFAO 推薦的規(guī)范殘留試驗要求，制定了我國的推薦的規(guī)范殘留試驗要求，制定了我國的農(nóng)藥殘農(nóng)藥殘留試驗準則留試驗準則，又在，又在20042004年以部頒標準（年

8、以部頒標準（NY/T 788-NY/T 788-20042004）的形式根據(jù)國際規(guī)范農(nóng)藥殘留試驗要求對）的形式根據(jù)國際規(guī)范農(nóng)藥殘留試驗要求對原有試驗準則進行了修改，使我國的殘留試驗要原有試驗準則進行了修改，使我國的殘留試驗要求達到或接近國際及發(fā)達國家要求，為下一步按求達到或接近國際及發(fā)達國家要求，為下一步按照照GLPGLP要求進行殘留試驗，打下了基礎(chǔ)。要求進行殘留試驗，打下了基礎(chǔ)。4.3.1 田間試驗設(shè)計 殘留試驗背景資料調(diào)查殘留試驗背景資料調(diào)查 試驗地點試驗地點 選擇具有代表性的、能覆蓋主要種植區(qū)、種植方式、土壤選擇具有代表性的、能覆蓋主要種植區(qū)、種植方式、土壤和氣候條件的試驗地點，進行和氣

9、候條件的試驗地點，進行兩年兩年重復(fù)試驗。重復(fù)試驗。 不同作物的農(nóng)藥殘留試驗地點數(shù)要求不同。不同作物的農(nóng)藥殘留試驗地點數(shù)要求不同。 需要作三地試驗的有需要作三地試驗的有：水稻、小麥、甘藍、黃瓜、番茄：水稻、小麥、甘藍、黃瓜、番茄（辣椒）、柑桔、梨（蘋果）、大豆、茶、花生。（辣椒）、柑桔、梨（蘋果）、大豆、茶、花生。 作一地試驗的作一地試驗的：榴蓮、亞麻籽、可可、咖啡、調(diào)味品類、：榴蓮、亞麻籽、可可、咖啡、調(diào)味品類、香草類等。香草類等。 其它作物一般需要作兩地試驗其它作物一般需要作兩地試驗。 試驗地點試驗地點的多少取決于登記農(nóng)藥的應(yīng)用范圍、作物布局以的多少取決于登記農(nóng)藥的應(yīng)用范圍、作物布局以及耕作

10、方式的一致性，不一定在每一類生態(tài)和氣候種植區(qū)及耕作方式的一致性，不一定在每一類生態(tài)和氣候種植區(qū)設(shè)點試驗，但是，應(yīng)該注意試驗取得的數(shù)據(jù)有足夠的代表設(shè)點試驗，但是，應(yīng)該注意試驗取得的數(shù)據(jù)有足夠的代表性和避免未設(shè)試驗點區(qū)域可能出現(xiàn)更高的殘留量。性和避免未設(shè)試驗點區(qū)域可能出現(xiàn)更高的殘留量。不能少不能少于兩個生態(tài)和氣候不同的種植區(qū)。于兩個生態(tài)和氣候不同的種植區(qū)。供試農(nóng)藥供試農(nóng)藥供試作物供試作物試驗小區(qū)試驗小區(qū) 田間試驗設(shè)計示意圖4.3.2 最終殘留量試驗施藥量或施藥濃度施藥量或施藥濃度 施藥次數(shù)施藥次數(shù) 采收間隔期 4.3.3 消解動態(tài)試驗消解動態(tài)試驗消解動態(tài)試驗 土壤、作物的消解動態(tài)土壤、作物的消解動

11、態(tài) 消解動態(tài)消解動態(tài) 以最終殘留量試驗的高劑量作為消解動態(tài)試以最終殘留量試驗的高劑量作為消解動態(tài)試驗的施藥量。第一次采樣殘留量很低驗的施藥量。第一次采樣殘留量很低( (低于最低檢測濃度低于最低檢測濃度的的l0l0倍倍) )時，根據(jù)分析方法的最低檢出濃度加大施藥量。時，根據(jù)分析方法的最低檢出濃度加大施藥量。 4.3.4 殘留試驗的樣品采集和運輸、貯藏 科學、規(guī)范化的采樣是獲得有代表性樣本的關(guān)鍵，樣本代科學、規(guī)范化的采樣是獲得有代表性樣本的關(guān)鍵，樣本代表性將直接影響檢測結(jié)果的規(guī)律性，采樣方法和采樣量是表性將直接影響檢測結(jié)果的規(guī)律性，采樣方法和采樣量是影響試驗結(jié)果誤差的重要因素之一。影響試驗結(jié)果誤差

12、的重要因素之一。 采樣方法采樣方法 根據(jù)試驗?zāi)康暮蜆颖痉N類實際情況確定采樣方法，通常有根據(jù)試驗?zāi)康暮蜆颖痉N類實際情況確定采樣方法，通常有 應(yīng)避免采有病、過小或未成熟的樣本。采果樹樣本時，需應(yīng)避免采有病、過小或未成熟的樣本。采果樹樣本時，需在植株各部位（上、下、內(nèi)、外、向陽和背陰面）采樣。在植株各部位（上、下、內(nèi)、外、向陽和背陰面）采樣。采土壤樣本時，一定要保持每次采樣操作規(guī)范及深度一致，采土壤樣本時，一定要保持每次采樣操作規(guī)范及深度一致，一般要求采一般要求采0 015 cm15 cm（耕作層）土樣。應(yīng)同時采空白樣本（耕作層）土樣。應(yīng)同時采空白樣本。 樣品采集-方法（1） 隨機法 五點法 對角線

13、法 Z型法樣品采集-方法（2） S型法 棋盤式法 交叉法 采樣注意事項采樣注意事項1 1. 在所選的采樣點上有選擇地采樣，應(yīng)避免采有病、過小在所選的采樣點上有選擇地采樣，應(yīng)避免采有病、過小或未成熟的樣品。采果樹樣品時，需在植株各部位或未成熟的樣品。采果樹樣品時，需在植株各部位( (上、上、下、內(nèi)、外、向陽和背陰面下、內(nèi)、外、向陽和背陰面) )采樣，果實密集的部位相對采樣，果實密集的部位相對多采。多采。2.2.避免在地頭或邊沿采樣（留避免在地頭或邊沿采樣（留0.5m0.5m邊緣），按規(guī)定采集所有邊緣），按規(guī)定采集所有可食用部分，注意盡可能符合農(nóng)產(chǎn)品采收實際要求?？墒秤貌糠?，注意盡可能符合農(nóng)產(chǎn)品采

14、收實際要求。3.3.先采對照區(qū)的樣品，再按劑量從低到高的順序采集其它小先采對照區(qū)的樣品，再按劑量從低到高的順序采集其它小區(qū)樣品。每個小區(qū)采集一個代表性樣品。區(qū)樣品。每個小區(qū)采集一個代表性樣品。4.4.應(yīng)戴一次性手套，每采集一個處理的樣品后，應(yīng)更換一次應(yīng)戴一次性手套，每采集一個處理的樣品后，應(yīng)更換一次手套，防止樣品間污染和對操作人員的危害。手套，防止樣品間污染和對操作人員的危害。 作物分類作物分類 采樣量采樣量(1) (NY/T 788-2004) 采樣量采樣量(2) 采樣量采樣量(3) 采樣量采樣量(4)采樣量采樣量 （匯總）（匯總） 樣本包裝和儲運樣本包裝和儲運 采集的樣本應(yīng)該用特制的惰性包

15、采集的樣本應(yīng)該用特制的惰性包裝袋（盒）裝好，寫好標簽（裝袋（盒）裝好，寫好標簽（ 包括內(nèi)外各一個）包括內(nèi)外各一個）和編號（伴隨樣本各個階段，直至報告結(jié)果）。和編號（伴隨樣本各個階段，直至報告結(jié)果）。 樣本（冷凍條件下）及有關(guān)樣本資料（樣本名稱、樣本（冷凍條件下）及有關(guān)樣本資料（樣本名稱、采樣時間、地點及注意事項等）應(yīng)盡快運送到實采樣時間、地點及注意事項等）應(yīng)盡快運送到實驗室（一般在驗室（一般在242436 h36 h以內(nèi)），并不得使樣本變以內(nèi)），并不得使樣本變質(zhì)、受損、污染或使殘留量和水分損失。質(zhì)、受損、污染或使殘留量和水分損失。 運到實驗室的樣本應(yīng)在運到實驗室的樣本應(yīng)在1 155溫度（最佳溫

16、度（最佳為為3 355）下貯存并應(yīng)盡快檢測（幾天之）下貯存并應(yīng)盡快檢測（幾天之內(nèi)），如需貯存較長時間，則樣本必須在內(nèi)），如需貯存較長時間，則樣本必須在2020條件下貯存，解凍后應(yīng)立即測定，條件下貯存，解凍后應(yīng)立即測定， 有些農(nóng)藥在貯存時可能會發(fā)生降解，需要有些農(nóng)藥在貯存時可能會發(fā)生降解，需要在相同條件下做添加回收率試驗進行驗證在相同條件下做添加回收率試驗進行驗證。 取冷凍樣本進行檢測時，應(yīng)不使水和冰晶取冷凍樣本進行檢測時，應(yīng)不使水和冰晶與樣本分離，必要時應(yīng)重新勻漿。檢測后與樣本分離，必要時應(yīng)重新勻漿。檢測后的樣本需保存一的樣本需保存一段時間，以供復(fù)檢。段時間，以供復(fù)檢。 農(nóng)藥殘留樣本儲存與穩(wěn)定

17、性關(guān)系農(nóng)藥殘留樣本儲存與穩(wěn)定性關(guān)系 農(nóng)藥殘留樣本儲存是農(nóng)藥殘留分析過程中農(nóng)藥殘留樣本儲存是農(nóng)藥殘留分析過程中的一個重要環(huán)節(jié)，農(nóng)藥殘留在各種儲存過的一個重要環(huán)節(jié)，農(nóng)藥殘留在各種儲存過程中是否穩(wěn)定直接關(guān)系到實驗數(shù)據(jù)的真實程中是否穩(wěn)定直接關(guān)系到實驗數(shù)據(jù)的真實性和可靠性。性和可靠性。 隨著儲存時間的延長，有些農(nóng)藥可能由于隨著儲存時間的延長，有些農(nóng)藥可能由于種種原因發(fā)生降解，導(dǎo)致分析結(jié)果出現(xiàn)偏種種原因發(fā)生降解，導(dǎo)致分析結(jié)果出現(xiàn)偏差，影響實驗結(jié)果。差，影響實驗結(jié)果。 以以30種不同結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的農(nóng)藥、種不同結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的農(nóng)藥、5種具有代種具有代表性的作物樣本表性的作物樣本(生菜、橙子、黃瓜、甘藍生菜、橙子、黃瓜、甘藍和糙米和糙米)為研究對象，對搗碎樣本中農(nóng)藥殘為研究對象，對搗碎樣本中農(nóng)藥殘留在留在4和和-20條件下儲存條件下儲存6個月的穩(wěn)定性個月的穩(wěn)定性進行比較研究：進行比較研究： -20條件下條件下進行樣本儲存比進行樣本儲存比4要穩(wěn)定的多，但仍有少數(shù)要穩(wěn)定的多，但仍有少數(shù)農(nóng)藥農(nóng)藥(甲基硫菌靈在甲基硫菌靈在5種作物中；敵敵畏在生菜、黃瓜、橙種作物中；敵敵畏在生菜、黃瓜、橙子和甘藍；馬拉硫磷在黃瓜；倍硫磷在黃瓜和生菜；殺撲子和甘藍；馬拉硫磷在黃瓜；倍硫磷在黃瓜和生菜；殺撲磷在橙子磷在橙子)在一些作物樣本儲存中發(fā)生降解，其它穩(wěn)定性好在一些作物樣本儲存中發(fā)生降解，其它穩(wěn)定性好的農(nóng)藥在的