重油微生物降解產(chǎn)物雌激素活性研究

1、重油微生物降解產(chǎn)物的重油微生物降解產(chǎn)物的雌激素活性研究雌激素活性研究匯報(bào)時(shí)間匯報(bào)時(shí)間: : 匯報(bào)人匯報(bào)人: : 課程教師課程教師: : 選題介紹選題介紹第 2 / 25 頁目錄1.引言引言2.材料及材料及方法方法3.實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果4.結(jié)論結(jié)論重油微生物重油微生物降解產(chǎn)物的降解產(chǎn)物的雌激素活性雌激素活性研究研究第 3 / 25 頁引言1第 4 / 25 頁引言研究的思路與方法石油污染 微生物修復(fù)微生物修復(fù)具有成本費(fèi)用低、效果好、對(duì)環(huán)境污染小、無二次污染，不破壞環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)，受到越來越多研究者的青睞。問題的提出第 5 / 25 頁研究的思路與方法問題的提出降解產(chǎn)物對(duì)生物和環(huán)境造成的影響雌激素活性降

2、解產(chǎn)物引言對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的影響對(duì)環(huán)境的威脅第 6 / 25 頁研究的思路與方法研究思路寡核苷酸DNA微陣列細(xì)胞增殖降解產(chǎn)物的雌激素活性研究方法引言問題的提出第 7 / 25 頁2材料及方法第 8 / 25 頁乳腺癌MCF-7細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)C-重油的降解及監(jiān)測方法C-重油成分分析細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)DNA微陣列分析材料及方法含含 FBS 10 的的 RPMI 1640 培養(yǎng)基培養(yǎng)基（Life Technologies，Grand Island，NY）37C、CO2 5%的濕潤空氣的濕潤空氣第 9 / 25 頁C-重油的降解及監(jiān)測方法C-重油成分分析細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)DNA微陣列分析細(xì)胞培養(yǎng)單一菌株 Cyclocla

3、sticus sp.菌株，HP-7；2003.8 取樣于東京灣的平成海口采集的表層海水，于含聯(lián)苯的NSW培養(yǎng)基中培養(yǎng)分離得到；復(fù)雜微生物群，TK09W；1.2.3.降解菌的選育降解過程的監(jiān)測BioDoc-It/GDS-7900 （UVP, Upland, CA） 采用未加微生物培養(yǎng)的石油作為計(jì)算標(biāo)準(zhǔn) 降解過程圖像監(jiān)測量化計(jì)算2009.1 取樣于東京灣中央的表層海水，于含重油（取自中石油）、NH4NO3（0.1%）、NaH2PO4（0.002%）、FeC6H5O7（0.002%）的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；4.材料及方法第 10 / 25 頁細(xì)胞培養(yǎng)C-重油的降解及監(jiān)測方法C-重油成分分析細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)DNA

4、微陣列分析薄層色譜法和幀電離檢測（TLC-FID）聯(lián)合技術(shù)測定C重油初始組成11月月10月月項(xiàng)目212月月 項(xiàng)目1材料及方法第 11 / 25 頁培養(yǎng) 乳腺癌 MCF-7 細(xì)胞于含 DCC-FBS10 cm 厚的培養(yǎng)皿中；在密度為 3103 的 96 孔板對(duì)細(xì)胞進(jìn)行接種；再在含 DCC-FBS 培養(yǎng)基中至少培養(yǎng) 1 天；將 E2 溶解于 DMSO 用于制備 10 mM 的 E2 原液；接著用 10 nM E2 處理細(xì)胞；再用 10% DMSO 處理培養(yǎng)皿中的控制細(xì)胞；細(xì)胞增殖檢驗(yàn)。材料及方法細(xì)胞培養(yǎng)C-重油的降解及監(jiān)測方法C-重油成分分析細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)DNA微陣列分析第 12 / 25 頁寡核苷

5、酸DNA微陣列（寡聚-DNA）：指通過機(jī)械作用在載玻片上制作203個(gè)基因的寡聚-DNA位點(diǎn)（包括一組含172個(gè)雌激素反應(yīng)性基因）材料及方法細(xì)胞培養(yǎng)C-重油的降解及監(jiān)測方法C-重油成分分析DNA微陣列分析細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)第 13 / 25 頁3實(shí)驗(yàn)結(jié)果第 14 / 25 頁1使用C-重油評(píng)價(jià)微生物降解活性第 15 / 25 頁圖1.A C-重油成分分析圖23%57%9%11%圖1.B C-重油微生物降解反射光圖像圖1.C C-重油量化反射光線圖像圖1.B C-重油微生物降解反射光圖像2石 油 降 解 產(chǎn) 物對(duì)細(xì)胞增殖的影響第 16 / 25 頁圖2 石油微生物降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞增殖影響圖TK09W 28dTK09W 73dTK09W 101dHP-7 73dwithout microbes73d3.1DNA微陣列技術(shù)用于基 因 表 達(dá) 分 析第 17 / 25 頁DNA微陣列技術(shù)用于基 因 表 達(dá) 分 析第 18 / 25 頁3.2DNA微陣列技術(shù)用于基 因 表 達(dá) 分 析第 19 / 25 頁3.3DNA微陣列技術(shù)用于基 因 表 達(dá) 分 析第 20 / 25 頁3.44結(jié)論第 21 / 25 頁原油、澄清油漿中未發(fā)現(xiàn)雌激素活性PAHs、重油特征組分被檢測出是雌激素增殖實(shí)驗(yàn)檢測到抗雌激素活性與受體結(jié)合方式不同雌激素活性被掩蔽重油特征組分的影響第 2