莨菪烷類抗膽堿藥物的分析

1、LoadingLoading 第十三章第十三章 莨菪烷類抗膽堿藥物的分析莨菪烷類抗膽堿藥物的分析80k藥物分析班第一節(jié)第一節(jié) 莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)第二節(jié)第二節(jié) 鑒別實驗鑒別實驗第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查特殊雜質(zhì)與檢查第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定第一第一節(jié)節(jié) 莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)1 第一節(jié)第一節(jié) 莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)一、典型藥物 莨菪烷生物堿是從茄科植物，如顛茄、莨菪和白曼陀羅等中提取的具有對M受體阻斷作用的生物堿。這類生物堿都是由莨菪醇與不同有機酸所成的酯。NH3COH含氮的醇含氮的醇( (莨菪醇莨菪醇)

2、)第一第一節(jié)節(jié) 莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)H2SO4NH3CH22H2OOHOOH硫酸莨菪堿H2SO4OOHOHNH3CH2H2O硫酸阿托品l酯的結(jié)構(gòu)，易水解l五元脂環(huán)上有叔胺氮原子l手性Cl酯的結(jié)構(gòu)，易水解l五元脂環(huán)上有叔胺氮原子l消旋體，無旋光性第一第一節(jié)節(jié) 莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)莨菪烷類藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)1.水解性（酯水解生成醇和酸）OHOOHNCH3OHHNCH3+HOOCOH阿托品 莨菪醇 莨菪酸2.堿性：阿托品和東莨菪堿結(jié)構(gòu)中，五元脂環(huán)含有叔胺氮原子， 較強的堿性，易于酸成鹽，如阿托品pKb1為4.353.旋光性：可用于鑒別阿托品和東莨菪堿第二第二節(jié)節(jié) 鑒別實

3、驗鑒別實驗第二第二節(jié)節(jié) 鑒別實驗鑒別實驗一、托烷生物堿一般鑒別試驗一、托烷生物堿一般鑒別試驗(Vitaili反應反應)HOOCOH+3HNO3HOOCOHNO2O2NNO2+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOOCOHNO2O2NNOKOChP檢查法：取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘渣，放冷，加乙醇23滴，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。莨菪酸硝基化脫羧化共軛結(jié)構(gòu)深紫第二第二節(jié)節(jié) 鑒別實驗鑒別實驗二二、與與硫酸硫酸- -重鉻酸鉀的重鉻酸鉀的反應反應（氧化反應）氧化反應）HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2

4、H2O藥物水解后生成莨菪酸，可與硫酸-重鉻酸鉀在加熱的條件下，發(fā)生氧化反應，生成苯甲醛而逸出苦杏仁的臭味。反應式如下：第二第二節(jié)節(jié) 鑒別實驗鑒別實驗三、與生物堿顯色劑或沉淀劑的反應生物堿在酸性溶液中與重金屬鹽或大分子酸生成難溶性鹽、復鹽或配合物沉淀。生物堿沉淀試劑生物堿沉淀試劑反應條件與結(jié)果反應條件與結(jié)果碘化鉍鉀試液碘化鉍鉀試液橙色或棕紅色沉淀橙色或棕紅色沉淀碘化鉀碘試液碘化鉀碘試液棕色或棕褐色沉淀棕色或棕褐色沉淀碘化汞鉀試液碘化汞鉀試液白色或淡黃色沉淀白色或淡黃色沉淀三硝基苯酚試液三硝基苯酚試液結(jié)晶性沉淀并有特定熔點結(jié)晶性沉淀并有特定熔點硅烏酸試液硅烏酸試液白色或淡黃色或黃棕色沉淀白色或淡黃

5、色或黃棕色沉淀磷烏酸試液磷烏酸試液淡黃色沉淀淡黃色沉淀第二第二節(jié)節(jié) 鑒別實驗鑒別實驗四、光譜鑒別法紫外光譜法一般通過比較一般通過比較 maxmax、minmin或吸收光譜的一致性來進行或吸收光譜的一致性來進行鑒別以及吸光系數(shù)。鑒別以及吸光系數(shù)。紅外光譜法CHPCHP收載的原料藥一般都采用紅外光譜法進行鑒別收載的原料藥一般都采用紅外光譜法進行鑒別第二第二節(jié)節(jié) 鑒別實驗鑒別實驗五、色譜鑒別法色譜法一般用于已知生物堿的鑒別，主要有TLC、HPLC、GC、PC等第二第二節(jié)節(jié) 鑒別實驗鑒別實驗六、硫酸鹽和溴化物的反應 藥物大都以硫酸鹽或溴化物的形式存在，它們的水溶液則分別顯硫酸鹽或溴化物的鑒別反應。Ch

6、P氫溴酸東莨菪堿的鑒別：取供試品溶液，加稀硝酸使成酸性，滴加硝酸銀試液，即生成淡黃色凝乳狀沉淀，分離，沉淀能在氨試液中微溶，但在硝酸中幾乎不溶。取供試品溶液，滴加氯試液，溴即游離，加三氯甲烷振搖，三氯甲烷層顯黃色或紅棕色。第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查特殊雜質(zhì)與檢查第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查特殊雜質(zhì)與檢查氫溴酸東莨菪堿制備工藝洋金花粗粉乙醇/滲漉滲漉液減壓蒸餾浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3, CHCl3/提取總生物堿Na2CO3, CHCl3/分離東莨菪堿HBr/成鹽氫溴酸東莨菪堿（粗品）75% C2H5OH/精制成品根據(jù)其制備工藝，本品可通過酸度、其它生物堿、和易氧化物質(zhì)檢查進行

7、控制一、氫溴酸東莨菪堿中有關(guān)物質(zhì)的檢查一、氫溴酸東莨菪堿中有關(guān)物質(zhì)的檢查第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查特殊雜質(zhì)與檢查1. 酸度酸度如氫溴酸東莨菪堿為弱酸弱堿鹽、通過其5%的水溶液pH為4.05.5可控制酸性雜質(zhì)2. 易氧化物易氧化物可能雜質(zhì)為阿撲東莨菪堿、及其它含有不飽和雙鍵的有機物，他們的紫外吸收波長會紅移、可使高錳酸鉀溶液褪色NH3CHOOCH2(雜質(zhì))NH3CHOOOCH2(雜質(zhì))第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查特殊雜質(zhì)與檢查3. 3. 其它生物堿其它生物堿本品水溶液加入氨水試液不得發(fā)生混濁。當有其它生物堿存在時，則易產(chǎn)生混濁。ChP氫溴酸東莨菪堿其他生物堿的檢查：取本品0.10g，加水2ml

8、溶解后，分成兩等份；一份中加氨試液23d，不得發(fā)生渾濁；另一份中加氫氧化鉀試液數(shù)滴，只許發(fā)生瞬即消失的類白色渾濁。 其他生物堿還常用TLC和HPL C法檢查。其雜質(zhì)限量判斷主要有標準品對照法、自身稀釋對照法等方法。第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)與檢查特殊雜質(zhì)與檢查二、硫酸阿托品中有關(guān)物質(zhì)的檢查二、硫酸阿托品中有關(guān)物質(zhì)的檢查硫酸阿托品為消旋體，無旋光性，而莨菪堿為左旋體，可以利用旋光性對莨菪堿雜質(zhì)進行檢查。ChP用HPLC法檢查其中有關(guān)物質(zhì)，通過峰面積的比值及保留時間來控制雜質(zhì)限度第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定莨菪烷類抗膽堿藥物藥理活性較強、臨床使用劑量較少，因此測定方法要

9、專屬、靈敏酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色譜法一、酸性染料比色法一、酸性染料比色法在一定的pH條件下，某些生物堿藥物可與某些酸性染料結(jié)合而呈色，進而可用分光光度法進行測量。第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定基本原理基本原理酸性染料如磺酸酞類指示劑等，如溴甲酚綠、溴麝香草酚藍、溴甲酚紫、溴酚藍等其與酸性離子定量結(jié)合、生成具有吸收光譜明顯紅移的有色離子對，且可以被有機溶劑定量萃取，通過測定有機相中有色離子對的特征波長處的吸光度，即可進行含量測定。其反應示意圖如下：其反應示意圖如下： 也可將呈色的有機相堿化，使與有機堿結(jié)合的酸性染料釋放出來，測定其吸光度，再計算出堿性藥物的含量第四節(jié)第四節(jié) 含量測

10、定含量測定第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定影響因素1. 水性最佳pH值：使得BH+和In-最多 pH過低抑制酸性染料的解離、使酸性陰離子濃度過低影響離子對的形成； pH過高，有機藥物呈游離態(tài)，也抑制離子對的形成，因此須有一個最佳pH值存在，使離子對生成最有利。 其選擇方法一般根據(jù)藥物與染料的pK值及水相與有機相的分配系數(shù)而定2. 酸性染料及其濃度： 定量結(jié)合，產(chǎn)物溶解性好；可稍過量。 一般認為對測定結(jié)果影響不大，只要量足夠大就可以； 但濃度過高的話就會形成嚴重的乳化層，且不易于除去，往往影響測定結(jié)果。第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定4. 水分的影響： 影響結(jié)果，脫水劑或濾紙除去水分5. 酸性染料里

11、面的有色雜質(zhì) 影響結(jié)果，先用萃取溶劑萃取除去3.有機溶劑的選擇：u提取效率高，氯仿最理想；u一般應選擇對有機堿藥物與酸性染料形成離子對萃取效率高、能與離子對形成氫鍵、不與或極少與水混溶的有機溶劑作為萃取溶劑。第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定二、二、 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 非水溶液滴定法是在非水溶劑中進行的酸堿滴定測定法。主要用來測定有機堿及其氫鹵酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽以及有機酸堿金屬鹽類的含量。 硫酸是二元酸，在水溶液中可以發(fā)生二級解離，生成SO42-。但是冰醋酸非水介質(zhì)中，只能發(fā)生一級解離，生成HSO4-,即只提供一個H+。所以硫酸鹽類藥物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氫鹽，可用高氯酸滴定液直接滴定。 (BH+)2 SO42- + HClO4 (BH+)ClO4 + (BH+) HSO42- 硫酸阿托品與高氯酸反應的化學計量摩爾比為1:1.第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定三三. .高效液相色譜法高效液相色譜法 莨菪烷類藥物HPLC分析測定時，常采用烷基磺酸鹽作為離子對試劑，流動相一般呈酸性，以利于堿性藥物的質(zhì)子化。 ChP2010中采用HPLC測定氫溴酸東莨菪堿及其片劑和注射液